小鼠超数排卵与早期胚胎体外培养效果研究

《动物胚胎工程实验教程》王子玉自编南京农业大学动科院2005年8月实验一小鼠卵母细胞的体外成熟实验一、实验目的熟悉雌鼠的生殖器官的结构特点；掌握小鼠的超数排卵方案；掌握从卵巢上扎取未成熟卵母细胞的方法、卵母细胞的分类方法、体外成熟培养方法及核成熟情况和卵丘扩展程度的观察。

二、实验器材和材料1. 器材及药品体视显微镜，手术器械（眼科剪，眼科镊），1mL注射器，胶头滴管，口吸管，CO2培养箱，水浴锅，移液器，枪头，塑料培养皿，记号笔。

操作液（M2），成熟培养液（M－199），激素（PMSG和HCG），石蜡油。

2．实验动物：3-4周龄昆明系雌性小白鼠，自由采食饮水。

三、实验内容1.小鼠的超数排卵注射剂量皮下或腹腔注射PMSG 10 IU/只小鼠。

注射方法皮下注射：用手指捏住小鼠的头及尾部固定（图1-1），以酒精棉球消毒其背部，提起皮肤，将注射针头平插刺入皮下，将针头微向上挑起不露出针尖时，再注入药物。

随着药物的推入，在皮下可看到鼓起一个小泡，即证实药物确已注入皮下部位。

皮下注射时防止药液从针孔处逸出。

腹腔注射：针头刚进入腹腔后向上挑，防止损伤小鼠腹腔内器官。

注射针头宜选用小号细针头。

注射药物后的小鼠自由饮水、采饲，自然光照。

2.卵巢的采集方法在注射PMSG后46h利用颈椎脱臼法处死小鼠（将供体鼠置于饲养笼上，鼠爪自然抓紧笼上铁支架，此时一只手拉紧鼠尾，另一只手食指与拇指压紧鼠颈部，或用镊子压紧颈部即可致死，此为引颈法。

用75%酒精喷湿鼠全身以消毒并防止毛发飞扬）。

将小鼠头部固定，用力牵拉鼠尾，可感到颈椎部位脱臼的振动；也可用食指和拇指直接掐断颈椎致死。

然后用图钉将小鼠呈仰卧姿势固定于小木板上或鼠解剖台上。

图1－1 小鼠的固定将处死并固定好的小鼠，在下腹部中间剪开1个小口，一只手抓住鼠尾，另一只手抓住切开的皮肤向头部牵拉直至充分暴露腹部（图1-2）。

剪开腹膜，向前方揭去肠胃内脏，即暴露出生殖器官，可在肾脏后方看到两侧呈乳白色的卵巢及与输尿管相平行的两子宫角（图1-3）。

2024-2025学年第一学期六校11月联合调研高三生物一、单项选择题：本题包括15小题，每小题2分，共30分。

每小题只有一个选项最符合题意。

1．下列有关“骨架”的叙述正确的是A．DNA分子中的核糖和磷酸交替连接，排列在外侧构成基本骨架B．生物大分子和单体都以碳链为基本骨架，所以碳是生命的核心元素C．磷脂双分子层构成了细胞膜的基本骨架，其他生物膜不一定有此结构D．真核细胞中有纤维素组成的细胞骨架，与物质运输、能量转化等密切相关2．研究发现，在酵母细胞的细胞核和液泡交界处有一个“垃圾场”，细胞内错误折叠的蛋白质会被囊泡转移到“垃圾场”，进而被转移到液泡内部进行降解。

下列叙述错误的是A．错误折叠的蛋白质能与双缩脲发生紫色反应B．酵母细胞内蛋白质合成都从游离的核糖体开始C．液泡内部含水解酶，因而能降解错误折叠的蛋白质D．错误折叠的蛋白质被降解后的产物可能会被细胞重新利用3．下列有关酶的实验叙述，正确的是A．可用淀粉溶液、淀粉酶、碘液等来探究pH对淀粉酶活性的影响B．在“探究温度对酶活性的影响”实验中，先将淀粉液与淀粉酶液混合后，再分别置于不同温度条件下相同且适宜时间C．在“探究淀粉酶对淀粉和蔗糖的作用”实验中，可通过检测是否产生还原糖来证明酶的作用具有专一性D．在“比较过氧化氢在不同条件下的分解”实验中，加热、Fe3+和过氧化氢酶促使过氧化氢分解的原因都是降低了过氧化氢分解反应的活化能4．科学家发现了存在于高等生物细胞中的nuc-1基因，该基因编码的蛋白质能使DNA降解，所以nuc-1基因又被称为细胞“死亡基因”。

下列叙述错误的是A．癌变细胞中nuc-1基因的表达可能会受阻B．在胚胎发育过程中，细胞中的nuc-1基因也在表达C．该基因编码的蛋白质需要内质网和高尔基体的加工、运输D．靶细胞在细胞毒性T细胞的作用下死亡可能与nuc-1基因被激活有关5．图中①和②表示某精原细胞中的一段DNA分子，分别位于一对同源染色体的两条非姐妹染色单体的相同位置上。

小鼠早期胚胎发育的研究（实验方案）基础生物学课程设计所在学院生物科学与工程学院专业班级生物科学学生姓名学生学号指导教师XXXX年XX月XX日小鼠早期胚胎发育的研究一、引言胚胎发育一词通常是指从受精卵起到胚胎出离卵膜的一段过程。

而无脊椎动物胚胎学家则常把其概念扩展到胎后发育直到性成熟，甚至整个生活史。

动物胚胎的发育过程虽然动物的种类繁多，但是胚胎的发育依然拥有相似的过程，能够分成受精、卵裂、桑葚胚、囊胚、原肠胚与器官形成等阶段。

此外脊椎动物的胚胎发育过程中，各种动物共同拥有的特征会首先出现(如皮肤)，之后才逐渐发展出特化的构造(如鱼鳞)，而且较复杂的物种与较原始的物种之间一开始相当类似，之后才随着发育的时间而慢慢增加变异。

受精:卵子和精子融合为一个合子的过程。

它是有性生殖的基本特征，普遍存在于动植物界，卵裂:精子与卵子结合之后会形成受精卵，由于卵黄的分布具有不对称的特性，因此受精卵可以分为动物极(会发展成外胚层)和植物极(会发展成中胚层与内胚层)。

在卵裂时期，卵子会先分裂成两个细胞，之后细胞通常会逐次倍增，但是对哺乳类而言，有时候会有不同时分裂并造成只有奇数个细胞的现象。

在这个阶段，胚胎的总体积大致不变。

不同的物种具有不同的卵裂方式，可以分为完全卵裂(holoblastic cleavege)和不完全卵裂(meroblastic cleavage)，分别又可以细分成许多不同方式。

如无脊椎动物的辐射卵裂与螺旋卵裂、哺乳动物的旋转式分裂等。

原肠胚:当细胞分裂成为囊胚之后，会经过一段称为原肠形成的型态发生过程，之后形成原肠胚。

原肠形成过程有许多不同方式，能够大致分成5种:内陷式(Invagination)、衰退式(Involution)、进入式(Ingression)、脱层式(Delamination)、包覆式(Epiboly)，动物的胚胎利用这5种方式形成了外胚层、中胚层与内胚层的组合，而这三种胚层在之后会形成各种细胞。

小鼠超数排卵相关问题的探讨刘维俊;高珊;唐菲;张一云;刘牧;薛孝先【期刊名称】《黑龙江动物繁殖》【年(卷),期】2011(019)001【摘要】应用回顾性研究方法,对国内近年小鼠超排中遇到的若干相关问题进行研究和总结.研究探讨了小鼠超排的各个影响方面,包括:环境因素、供体雌鼠个体和遗传差异以及试剂等因素.比较了国内外不同试验室使用不同产品孕马血清(PMSG)、人绒毛膜促性腺激素(hCG)对小鼠超排效果的影响.利用纯度不同的PMSG、hCG 进行小鼠超排试验,结果差异较大.延长超排后采集卵母细胞时间,可用成熟卵母细胞数量相对减少,且不利于体外受精.【总页数】9页(P1-9)【作者】刘维俊;高珊;唐菲;张一云;刘牧;薛孝先【作者单位】海南省药物研究所/海南省实验动物中心,海口市,570216;中国医学科学院,医学实验动物研究所,北京,100021;海南省药物研究所/海南省实验动物中心,海口市,570216;海南省药物研究所/海南省实验动物中心,海口市,570216;中国医学科学院,医学实验动物研究所,北京,100021;中国疾病预防控制中心,北京,100050;内蒙古大学,生命科学院,呼和浩特,010021【正文语种】中文【中图分类】S814.3【相关文献】1.周龄·初始注射时间对小鼠超数排卵的影响 [J], 巩雪洁;臧敦安;许文豪2.中国兔子超数排卵相关问题的研究(一) [J], 刘牧;高珊;孙井江;张建军;刘云波3.中国兔子超数排卵相关问题的研究(二) [J], 刘牧;高珊;孙井江;张建军;刘云波4.小鼠超数排卵和小鼠胚胎体外培养的研究 [J], 张春兰;侯健5.动物科学专业《小鼠超数排卵实验》开放式实验教学课程设计与实践 [J], 倪萌萌;赵佳福;陈祥;龚婷;李辉因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

家畜繁殖学实验指导《家畜繁殖学》实验实习指导娜仁花李英张家新余凤玲内蒙古农业大学自编教材第一部分实验指导实验一公畜母畜生殖器官观察一、目的要求认识各种公畜母畜生殖器官的位置、形态、大小及解剖结构特点，为更好地应用繁殖技术奠定解剖学基础。

二、材料和方法(一)材料牛、羊、猪生殖器官各4套(二)器械大搪瓷盘，解剖刀，剪刀，镊子，金属探针三、内容和步骤(一)公畜生殖器官的观察公畜生殖器官包括:睾丸(及阴囊和精索)、附睾、输精管、尿生殖道、副性腺及阴茎。

1(睾丸家畜睾丸成对，分别位于阴囊的两个腔内，其形状均为长卵圆形。

一侧有附睾附着，叫附睾缘，另一侧为游离缘。

随畜种不同大小有差别。

牛、羊、猪的睾丸相对比较大，以羊的睾丸为最大。

马(驴)阴囊位于两股之间的腹股沟区，睾丸长轴与地面平行，附睾位于睾丸的背外缘，附睾头在前、尾在后。

牛、羊阴囊较马阴囊稍靠前，位于前腹股沟区，睾丸长轴与地面垂直，附睾位于睾丸的后侧，附睾头在上尾在下。

猪的阴囊位于股部之后，睾丸长轴倾斜，前低后高，附睾位于睾丸的前上缘，附睾头在前下方尾在后上方。

2(附睾位于睾丸的附着缘，分头、体、尾三部分。

头膨大，由睾丸输出管相连结，睾丸输出管汇合成一条较粗而长的附睾管盘曲成附睾体和附睾尾，最后过渡为输精管。

3(精索、输精管输精管由附睾管延续而来，而后进入由睾丸系膜、血管、淋巴管、神经、睾内体提肌共同组成的精索(成锐三角形)。

沿腹股沟管进入腹腔，此后即和精索内的其它部分分开，单独向后上方进入骨盆腔至膀胱背面，两侧输精管都进入尿生殖皱襞内，在此处输精管变粗，形成输精管壶腹。

马(尤其是驴)的输精管壶腹发达;猪的输精管壶腹不明显;牛、羊的输精管壶腹比较明显，粗细介于马和猪之间。

输精管壶腹部的实质为分支管状腺体组织，有分泌物排出。

4(副性腺(1)精囊腺成对位于膀胱颈背面的两旁，输精管末端的两侧。

与同侧的输精管形成射精管共同开口于尿生殖起始部的精阜上。

马的精囊腺呈梨形囊状，向后缩小成输出管。

小鼠胚胎体外培养研究【摘要】本文所选用的实验材料为小鼠原核胚，主要研究几种不同溶液、溶液所含不同生长因素、不同培养气象等所对小鼠原核胚发展产生的影响，主要目的是最终找到一种适于小鼠胚胎成长的培养环境以及溶液成分，进而不断优化小鼠胚胎体外培养的体系结构。

并且为其它哺乳类动物的胚胎体外培养提供一些参考。

【关键词】小鼠；胚胎；体外培养0.前言在迈入新世纪以后，我国的科学技术发展十分迅猛，尤其是我国的生物科技得到了广泛的推广与使用，从而加快了人类社会的发展。

胚胎工程是指主要针对胚胎哺乳类动物的胚胎所进行的工程技术操作，之后再将胚胎继续发育，从而使人们获得所需的成体动物的一种全新技术。

当前，胚胎工程在蓄牧种繁殖预遗传资源保护、利用方面得到了广泛推广和使用，并且在人类疾病真毒、药物研发等研究方面蕴含巨大应用价值，因此，受到人们高度的关注。

1.材料预方法1.1实验所需的材料实验所需的动物：清洁过的雌性预雄性小鼠，所选用的雌性小鼠年龄约在28—35日的日龄范围内，共约250只，而选用的雄性小鼠日龄在56天以上，共有32只。

选用的实际预药品主要有，丙酮酸钠、青霉素钠、链霉素、探索氢钠、氯化镁、牛磺酸等。

而所选用的仪器主要有倒置显微镜与实体显微镜，离心机、PH仪、显微图像管理系统等。

小鼠胚胎培养液主要有三种，即HTF、CZB、KSOM 溶液。

在配制每一种溶液时都要进行过滤，以便除菌，并且还要放在4摄氏度的环境下进行保存。

1.2小鼠超数排卵从中选用体重超过25g雌性小鼠，要在小鼠腹腔中注射PMSG20IU，待48小时之后再在腹腔中注射Hcg10IU。

雄性小鼠要选用体重超过30g的，严格按照雌性鼠预雄性鼠比例为2：1的比例放在同一个笼中混合养殖，在第二天早晨要检查小鼠的阴道栓，将具有阴道栓的雌性小鼠在20—23小时范围内提取卵母细胞预卵丘细胞的复合体。

1.3采集小鼠的原核胚在注射hCG后的22小时后，采用颈椎脱臼方法将小鼠处死，在用酒精消毒之后，剪开腹腔，在沿着小鼠卵巢端剪取输卵管，将输卵管放在生理盐水的35mm 培养器皿中，然后将培养器皿放进实验室，将小鼠的输卵管放入到洗卵液培养器皿中浸泡一段时间。

小鼠促排卵-体外受精动物模型的建立冯清;史鸿志;林燕;雷承泳【期刊名称】《实验与检验医学》【年(卷),期】2015(000)006【摘要】目的：建立小鼠促排卵-体外受精动物模型。

方法腹腔注射不同剂量促排卵药物促使昆明小鼠排卵，分析各组剂量下获取的卵-冠-丘复合物和MⅡ卵子数以确定较佳剂量组合。

再用微滴法受精+微滴法培养、四孔板法授精+四孔板法培养、四孔板法授精+微滴法培养3种方法实施小鼠体外受精技术。

比较各组的受精率、卵裂率、囊胚率确定较佳受精、培养方法。

结果⑴6~8周龄昆明小鼠采用尿促性腺激素（HMG）8U+绒促性腺激素(HCG)8U剂量组合获得卵子数目最多，成熟度最好(P<0.05)；⑵四孔板法授精+四孔板法培养受精率最高，但卵裂率、囊胚率与其它两组无显著性差异。

四孔板法授精+微滴法培养既能方便受精操作也有利于胚胎单个追踪观察。

结论6~8周龄昆明小鼠采用HMG8U+HCG8U剂量组合能最有效获取卵子；四孔板法授精+微滴法培养是体外受精技术的较佳方法。

【总页数】3页(P714-716)【作者】冯清;史鸿志;林燕;雷承泳【作者单位】赣州市人民医院生殖医学科，江西赣州 341000;秦皇岛市妇幼保健院生殖医学科，河北秦皇岛 066000;赣州市人民医院生殖医学科，江西赣州341000;赣州市人民医院生殖医学科，江西赣州 341000【正文语种】中文【中图分类】R-332【相关文献】1.超促排卵后不同取卵时间对昆明小鼠卵子质量、体内成熟率和体外受精率的影响[J], 彭礼繁;张小建;廖梅旭;李晓洁;余鲲2.过敏性疾病小鼠动物模型建立及表型变化的研究进展 [J], 白梦天; 胡竹林3.替莫唑胺诱导的小鼠胶质瘤耐药动物模型的建立 [J], 施林勇;李宏;辜俊伟;宋憧;李俊杰;陈磊;周强;漆松涛;陆云涛4.一种Parkin基因敲除小鼠肾虚证动物模型的建立 [J], 王玲;陈佳;陈客宏;汪晓月;王梨名;何娅妮5.昆明小鼠卵子的体外受精及其新培养系统的建立 [J], 庞也非;李冬;旭日干因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

doi:10.3969/j.issn.1674-5817.2020.06.004•论著.小鼠胚胎移植影响因素的初步探索［摘要］目的分析小鼠品系、胚胎移植方式和移植数量对胚胎移植结果的影响，以进一步优化并提高胚胎移植效率。

方法通过超数排卵及体外受精获得277个基因修饰小鼠品系的胚胎，将不同数量的胚胎移植至假孕雌鼠的单侧或双侧输卵管中，分析比较不同体外受精率品系、不同移植胚胎数及不同移植方法对窝产仔数和产仔率的影响。

结果体外受精率在0%~39%的品系组窝产仔数（4.61土 1.92）和产仔率［（19.21土9.70）%］均明显低于其他各组（均P<0.01）,体外受精率60%~69%组比90%~100%组的窝产仔率明显升高（P<0.05）。

移植胚胎数较少时（5枚），受体雌鼠能够妊娠，但窝产仔数较少，易发生食仔现象。

移植胚胎数在10枚以上时，各组窝产仔数和产仔率均较高。

其中，胚胎移植数量在15枚左右时产仔率最高，达到（46.67士11.56）%，明显高于其他各组（均P<0.01）,表明此时胚胎利用率最大；移植数量达到25枚时，平均窝产仔数（9.67士 1.53）最多，明显高于其他各组（均P<0.01）;移植胚胎数增加到30枚后，窝产仔数（8.33士0.58）和产仔率［（27.33土2.31）%］均有所下降，表明此时已超过小鼠子宫能承受的最大负荷。

单侧移植和双侧移植的窝产仔数和产仔率均未见明显差异（P〉0.05）。

结论体外受精率低于40%的小鼠品系的平均窝产仔数及产仔率均较低。

移植胚胎数在15枚左右时，胚胎利用率最大；移植胚胎数在25枚左右时，窝产仔数最多。

单双侧移植的窝产仔数和产仔率均无明显差异。

［关键词］胚胎移植；体外受精；影响因素；小鼠［中图分类号］Q95-33［文献标志码］A［文章编号］1674-5817（2020）06-0483-06目前，转基因小鼠品系已被广泛应用，但染［2-3］,同时也可以实现快速扩增繁殖，获得大在病原微生物控制、冷冻保种、品系复苏和快速量子代小鼠。

【小鼠超数排卵试验】小鼠超数排卵小鼠是一种使用最为广泛的实验动物，在发育生物学和生殖生物学研究方面，利用小鼠进行有关研究及探索许多理论和实践问题有许多便利之处。

小鼠对超数排卵反应，受体况、年龄、季节、营养状况、激素的种类、剂量等因素的影响。

由于影响因素很多，于是要对每只受体鼠处理后都得到预期的效果是比较困难的。

其影响的关键因素在于个体对药物的反应（敏感性）及年龄等。

我们采用四种方法对小鼠进行超排处理，目的是比较所用的超排效果，为研究山羊、奶牛的超数排卵，胚胎移植提供材料。

一、材料和方法1.实验材料1.1药品FSH（宁波第二激素厂），PMSG（宁波第二激素厂），LH （宁波第二激素厂），HCG（杭州动物药品厂）等。

1.2 实验动物雌性昆明白系性成熟小鼠20只（购自安医动物房）。

2.超排方案将20只母分成4组，每组5只。

2.1方案一给每只小鼠腹腔注射10IU的PMSG，间隔48小时后，再腹腔注射10IU的HCG。

2.2 方案二给每只小鼠腹腔注射5IU的PMSG，间隔48小时后，再腹腔注射5IU的HCG。

2.3 方案三给每只小鼠注射FSH剂量为2IU、2IU、2IU、2IU、1IU、1IU、每次注射间隔12小时，在最后一次注射FSH后12小时，再腹腔注射10IU的LH。

2.4 方案四每次给小鼠注射FSH剂量为2IU、2IU、、1IU，每次注射时间间隔12小时，在最后一次注射FSH后12小时，再腹腔注射5IU的LH。

2.5 采卵最后一次注射激素后4-6个小时，处死小白鼠，剪开皮肤，用眼科镊拉出小白鼠左右两侧子宫和卵巢，把输卵管与子宫、卵巢分离，找出输卵管的膨大部，将孵卵管移到培养皿中。

2.6 显微观察与卵母细胞计数在体视显微镜下，将沉浸在生理盐水中的输卵管的膨大部找出，用胚胎操作针将卵分离出来，再加入透明质算酶（HE液），过2~3分钟进行观察记数。

二、结果1.各组超数结果1.1按方案一超排的5只小白鼠，共回收卵母细胞189枚，平均每只回收卵37.8枚（见表1）1.2 按方案二超排的5只小白鼠，共回收卵母细胞229枚，平均每只回收卵45.8枚（见表2）1.3按方案三超排的5只小白鼠，共回收卵母细胞186枚，平均每只回收卵37.2枚（见表3）表1 方案一超排小鼠的排卵数表2 方案二超排小鼠的排卵数表3 方案三超排小鼠的排卵数1.4按方案四超排的5只小白鼠，共回收卵母细胞178枚，平均每只回收卵35.6枚（见表4）表4 方案四超排小鼠的排卵数2.左右两侧卵巢排卵数差异显著性检验由表5可见|t|0.05（t0.05（8）=2.306，t0.05（8）=3.355），说明采用四种不同的超排方案左右侧卵巢排卵数没有显著差异。

小鼠超排后的取卵时间对体外受精率的影响唐一岷;刘丽均;徐平【期刊名称】《上海交通大学学报（农业科学版）》【年(卷),期】2003(021)003【摘要】为了提高小鼠的体外受精率,对 ICR和 C57BL/6J小鼠进行超数排卵,并观察超排后 12～ 18 h内每间隔 1 h所取卵的态及其体外受精( IVF)率.结果显示,注射 hCG后 13 h、 14 h所取卵的体外受精率最高;其中超排后 14 h取卵的异常卵比例最低.实验表明, ICR和 C57BL/6J小鼠 IVF的最佳取卵时间为超数排卵后 14 h.在这之前或之后,体外受精率均有不同程度的下降.因此,准确掌握超数排卵后的取卵时间是提高体外受精率的关键之一.【总页数】4页(P185-188)【作者】唐一岷;刘丽均;徐平【作者单位】国家啮齿类实验动物种子中心,上海分中心,上海,201615;国家啮齿类实验动物种子中心,上海分中心,上海,201615;国家啮齿类实验动物种子中心,上海分中心,上海,201615【正文语种】中文【中图分类】Q954.4【相关文献】1.不同遗传背景小鼠的超排与体外受精率的比较研究 [J], 赵丹凤;刘丽均;赵立虎;张春燕;狄敏;郁丽丽;张守纯;徐平2.取卵后卵冠丘复合物体外孵育时间对IVF-ET受精和胚胎质量的影响 [J], 辛才林;朱元;黄志辉;唐亮;丁涛;余敏3.超促排卵后不同取卵时间对昆明小鼠卵子质量、体内成熟率和体外受精率的影响[J], 彭礼繁;张小建;廖梅旭;李晓洁;余鲲4.小鼠卵子不同获取时间和处理对体外受精率和受孕率的影响 [J], 吴红;谢夏阳;孙强;阎志峰;李厚达5.山羊同步发情和超排后取卵时间的研究 [J], 穆宗尧;邹贤刚因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

新教参中宜介绍“假减数分裂” 什么叫“假减数分裂”呢?以下就以雄蜂产生精子的过程为例给大家介绍一下。

蜜蜂群体由蜂王、雄蜂和工蜂组成,其中蜂王和工蜂是由受精卵发育而来的,雄蜂是由未受精卵发育而来的。

蜂王和工蜂是二倍体(2n =32),雄蜂是单倍体(n =16)。

雄蜂的假减数分裂过程 雄蜂在产生精子的过程中,它的精母细胞进行的是1种特殊形式的减数分裂。

在减数第1次分裂中,染色体数目并没有变化,只是细胞质分成大小不等的两部分。

大的那部分含有完整的细胞核,小的那部分只是一团细胞质,一段时间后将退化消失。

减数第2次分裂,则是1次普通的有丝分裂,在含有细胞核的那团细胞质中,成对的染色单体相互分开,而细胞质则进行不均等的分裂,含细胞质多的那部分(内含16个染色体)进一步发育成精子,含细胞质少的那部分(也含16个染色体)则逐步退化。

雄蜂的1个精母细胞,通过这种减数分裂,只产生1个精子,精母细胞和精子都是单倍体细胞。

这种特殊的减数分裂称为“假减数分裂”。

陈　维(连云港市东方中学江苏连云港222042)　(BH )　小鼠超数排卵的实验方法 随着基因工程、发育生物学的发展,超数排卵技术应用于生物学的研究和生产养殖中,如何让这些应用性的实验充实教学内容、培养学生的实验动手能力,是值得探讨的问题。

小鼠繁殖快、不受季节影响,是现代生物学中最好的实验材料,现将实验方法简述如下:1　实验材料　材料:5～6周龄的♀鼠。

器具:解剖镜、解剖针、培养皿、剪刀、镊子和注射器。

药品:孕马激素、HCG (人用绒毛膜促性腺激素)、生理盐水。

2　实验方法　选取5～6周龄的健康♀鼠,在下午4～5点时,每只小鼠注射1mL 孕马激素(5单位 mL ),48h 后每只小鼠再注射HCG 1mL (5单位 mL ),然后放入 鼠与之交配,雌雄比例♀2∶ 1。

在15～18h 后取卵,断颈处死小鼠,剪开腹腔,掀开内脏,暴露出子宫,剪取宫颈和卵巢之间的输卵管后,放在盛有生理盐水的培养皿中,在解剖镜下剥去脂肪,用生理盐水清洗3次,找到盘曲状的输卵管上面的透明膨大部分,用解剖针挑破透明膨大部分,游离出多个受精卵细胞。

小鼠发育生物学实验内容实验一：小鼠卵母细胞和精子的形态观察一、实验目的：掌握胚胎体外操作工具的制备、小鼠超数排卵方法以及小鼠精子和不同发育阶段观卵母细胞的收集方法，观察精子结构和运动状态，评估精子活力，观察卵母细胞结构，了解体外授精操作过程。

二、操作过程：1 胚胎体外操作工具制备在酒精喷灯上将玻璃管拉成直径1mm的细管，连上乳胶管即可。

2 小鼠的抓去与保定3 收集精子断颈处死公鼠，打开腹腔，找到睾丸和附睾，剪取附睾尾，剪碎，置1.5ml离心管底部，加0.5ml 生理盐水，置37度水浴锅20分钟，用吸管从离心管上部取50微升液体，置细胞计数板，观察精子结构、密度和活力。

精子活力计算公式：精子活力＝视野中直线运动的精子数/视野中总精子数4 收集卵母细胞成熟卵母细胞的收集：母鼠腹腔注射孕马血清促性腺激素PMSG（每只10单位），48小时后再注射人类绒毛膜促性腺HCG（每只10单位），18小时后断颈处死母鼠，打开腹腔，剪下输卵管，用镊子刺破输卵管壶腹部，释放卵母细胞，用透明质酸酶溶液（10毫克/毫升生理盐水）处理卵母细胞以除去颗粒细胞，在实体显微镜下观察卵母细胞的结构。

未成熟卵母细胞的收集：断颈处死性成熟前母鼠，打开腹腔，剪取卵巢，加入1毫升盐水，用刀片或镊子捣碎卵巢，寻找生发泡状态的卵母细胞，观察卵母细胞结构。

5 体外授精将卵母细胞与精子共培养（微滴培养法）（演示）三、实验结果各种精子和卵子的形态绘图；精子活力；精子密度四、实验收获与体会，存在问题和改进意见。

实验二：小鼠早期不同发育阶段胚胎的收集、观察以及胚胎移植一、实验目的：掌握小鼠附植前胚胎收集方法，观察不同发育阶段小鼠胚胎的结构，认识小鼠早期胚胎形态学，并了解体内发育阶段与所处生殖器官位置的关系，了解小鼠胚胎移植的基本原理和操作过程。

二、操作过程：1 小鼠超数排卵程序中午12时腹腔注射PMSG，48小时后腹腔注射HCG并与公鼠合笼交配，次日清晨检查阴道栓，如果发现阴道栓则妊娠0.5天。