下载文档原格式
1．2 基因工程的基本操作程序目标导航 1.结合教材图1－6，整体把握并说出基因工程的基本操作程序。
2.理解获取目的基因的途径及基因表达载体的构建。
3.理解目的基因导入受体细胞的方法、检测与鉴定目的基因的方法。
一、目的基因的获取(阅读P 8－11) 1．基因工程的基本操作程序 (1)目的基因的获取。
(2)基因表达载体的构建。
(3)将目的基因导入受体细胞。
(4)目的基因的检测与鉴定。
2．目的基因的获取 (1)目的基因主要是指编码蛋白质的基因，也可以是一些具有调控作用的因子。
(2)常见方法①从基因文库中获取基因文库的种类⎩⎪⎨⎪⎧基因组文库部分基因文库如cDNA 文库②利用PCR 技术扩增目的基因 a ．原理：DNA 双链复制。
b ．条件：引物、DNA 模板、Taq 酶、四种脱氧核苷酸。
c ．过程：目的基因DNA 受热变性后解链为单链，引物与单链相应互补序列结合，然后在DNA 聚合酶作用下进行延伸，如此重复循环多次。
d ．结果：每一次循环后，目的基因的量可以增加一倍，即成指数形式扩增(约为2n ，n 为扩增循环的次数)。
③人工合成法：如果基因比较小，核苷酸序列又已知，可借助DNA合成仪用化学方法直接人工合成。
二、基因表达载体的构建(阅读P11)1．基因表达载体的功能使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传给下一代，使目的基因能够表达和发挥作用。
2．基因表达载体的构成3．基因表达载体的构建过程一般用同一种限制酶分别切割载体和目的基因，再用DNA连接酶把两者连接。
三、将目的基因导入受体细胞(阅读P11－13)1．转化的概念目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程。
2．转化的方法(1)导入植物细胞①农杆菌转化法：将目的基因导入双子叶植物和祼子植物。
②基因枪法：将目的基因导入单子叶植物常用的方法。
③花粉管通道法：我国科学家独创的一种方法。
(2)导入动物细胞①方法：显微注射技术。
高中生物 1.2基因工程的基本操作程序学案新人教版选修31、2基因工程的基本操作程序学案新人教版选修3例1、正确表示基因操作“四步曲”的是（）A、提取目的基因→目的基因导入受体细胞→目的基因与运载体结合→目的基因的检测和表达B、目的基因的检测和表达→提取目的基因→目的基因与运载体结合→目的基因导入受体细胞C、提取目的基因→目的基因与运载体结合→目的基因导入受体细胞→目的基因的检测和表达D、目的基因与运载体结合→提取目的基因→目的基因导入受体细胞→目的基因的检测和表达一、目的基因的获得1、目的基因主要是指＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。
2、获取目的基因的方法（1）从基因文库中获取目的基因基因组文库：含有一种生物的＿＿＿＿＿ｃDNA文库：含有一种生物的＿＿＿＿＿种类基因文库：将含有某种生物不同基因的许多＿＿＿＿＿＿＿，导入受体菌的群体中＿＿＿＿，各个受体菌分别含有这种生物的＿＿＿＿＿＿＿＿。
目的基因的获取：根据基因的有关信息：如基因的＿＿＿＿序列、基因的＿＿＿＿、基因在＿＿＿＿＿的位置、基因的＿＿＿＿＿产物ｍRNA、基因＿＿＿＿＿产物蛋白质等获取目的基因。
（2）利用PCR技术扩增目的基因PCR：是一项在生物体外＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿技术。
原理：利用双链DNA分子＿＿＿的原理。
条件（前提）：已知目的基因的＿＿＿＿＿＿序列。
过程：目的基因受热变性后成为＿＿＿＿＿，与＿＿＿＿结合，在＿＿＿＿＿＿＿＿的作用下延伸形成DNA，如此重复循环多次。
方式：＿＿＿＿＿＿扩增，约为＿＿＿＿＿。
（3）人工合成法：基因＿＿＿＿，＿＿＿＿＿＿＿＿＿已知。
例2、苏云金芽孢杆菌是一种对昆虫有致病作用的细菌，某杀虫性物质主要是一类伴孢晶体蛋白，共有126个氨基酸。
若想通过基因工程技术，将控制该蛋白质合成抗虫基因提取出来，需要下列哪类酶（）A、DNA聚合酶B、DNA连接酶C、限制性内切酶D、伴孢晶体蛋白酶二、基因表达载体的构建1、构建基因表达载体的目的是：使目的基因在受体细胞中＿＿＿＿＿＿，并且可以＿＿＿＿＿＿＿＿，使目的基因能够＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。
1.2 基因工程的基本操作程序讲授新课步骤讲解〖对话〗﹙先解决为什么要分四个步骤的问题，然后解决每一步骤的技术方法问题。
﹚1．为什么要有“目的基因的获取”这一步？〖学生思考讨论回答，师提示〗引导学生看本专题题图中基因工程的概念：“基因工程是指按照人们的愿望，进行严格的设计，通过体外DNA重组和转基因等技术，赋予生物以新的遗传特性，创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。
”可以说这既是概念，也是原理。
这里所说的“更符合人们需要”，就是目的，那么更符合人们需要的那个基因就是目的基因了。
有了目的基因，我们才能赋予一种生物以另一种生物的遗传特性。
2．为什么要有“表达载体的构建”这一步？〖学生思考讨论回答，师提示〗单独的DNA片段──目的基因是不能稳定遗传的。
课文中谈到构建表达载体的目的是为了使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传给下一代，同时使目的基因能表达和发挥作用。
3.为什么要有“目的基因导入受体细胞”这一步？〖学生思考讨论回答，师提示〗教材指出含有目的基因的表达载体只有进入受体细胞，并且维持稳定和表达，才能实现一种生物的基因在另一种生物中的转化。
4.为什么要有“目的基因的检测与鉴定”这一步？〖学生思考讨论回答，师提示〗这是因为目的基因是否真正插入受体细胞的DNA中，是否能够在受体细胞中稳定遗传和正确表达，只有通过检测、鉴定才能得知。
〖转折〗每一程序的有什么技术和方法的学习？一、目的基因的获取〖问题引入〗“目的基因的获取”有什么方法呢？〖求异思维〗你能推测出由mRNA反转录形成cDNA的过程大致分为哪些步骤吗？〖生思考讨论回答，师提示〗1970年，特明（H.M. Temin）和巴尔的摩（D. Baltimore）证实了RNA病毒中含有一种能将RNA转录成DNA的酶，这种酶被称为依赖RNA的DNA聚合酶，由于与中心法则中的从DNA到RNA的转录是反向的，所以称为反转录酶（reverse transcriptase）。
1．2 基因工程的基本操作程序目标导航 1.结合教材图1－6，整体把握并说出基因工程的基本操作程序。
2.理解获取目的基因的途径及基因表达载体的构建。
3.理解目的基因导入受体细胞的方法、检测与鉴定目的基因的方法。
一、目的基因的获取(阅读P 8－11) 1．基因工程的基本操作程序 (1)目的基因的获取。
(2)基因表达载体的构建。
(3)将目的基因导入受体细胞。
(4)目的基因的检测与鉴定。
2．目的基因的获取 (1)目的基因主要是指编码蛋白质的基因，也可以是一些具有调控作用的因子。
(2)常见方法①从基因文库中获取基因文库的种类⎩⎪⎨⎪⎧基因组文库部分基因文库如cDNA 文库②利用PCR 技术扩增目的基因 a ．原理：DNA 双链复制。
b ．条件：引物、DNA 模板、Taq 酶、四种脱氧核苷酸。
c ．过程：目的基因DNA 受热变性后解链为单链，引物与单链相应互补序列结合，然后在DNA 聚合酶作用下进行延伸，如此重复循环多次。
d ．结果：每一次循环后，目的基因的量可以增加一倍，即成指数形式扩增(约为2n ，n 为扩增循环的次数)。
③人工合成法：如果基因比较小，核苷酸序列又已知，可借助DNA 合成仪用化学方法直接人工合成。
二、基因表达载体的构建(阅读P 11) 1．基因表达载体的功能使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传给下一代，使目的基因能够表达和发挥作用。
2．基因表达载体的构成3．基因表达载体的构建过程一般用同一种限制酶分别切割载体和目的基因，再用DNA连接酶把两者连接。
三、将目的基因导入受体细胞(阅读P11－13)1．转化的概念目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程。
2．转化的方法(1)导入植物细胞①农杆菌转化法：将目的基因导入双子叶植物和祼子植物。
②基因枪法：将目的基因导入单子叶植物常用的方法。
③花粉管通道法：我国科学家独创的一种方法。
(2)导入动物细胞①方法：显微注射技术。
1．2 基因工程的基本操作程序目标导航 结合教材图 － ，整体把握并说出基因工程的基本操作程序。
理解获取目的基因的途径及基因表达载体的构建。
理解目的基因导入受体细胞的方法、检测与鉴定目的基因的方法。
一、目的基因的获取☎阅读 － ✆ ．基因工程的基本操作程序 ☎✆目的基因的获取。
☎✆基因表达载体的构建。
☎✆将目的基因导入受体细胞。
☎✆目的基因的检测与鉴定。
．目的基因的获取 ☎✆目的基因主要是指编码蛋白质的基因，也可以是一些具有调控作用的因子。
☎✆常见方法 ♊从基因文库中获取基因文库的种类⎩⎪⎨⎪⎧基因组文库部分基因文库☎②♍☠✌文库✆♋利用 技术扩增目的基因 ♋．原理： ☠✌双链复制。
♌．条件：引物、 ☠✌模板、❆♋❑酶、四种脱氧核苷酸。
♍．过程：目的基因 ☠✌受热变性后解链为单链，引物与单链相应互补序列结合，然后在 ☠✌聚合酶作用下进行延伸，如此重复循环多次。
♎．结果：每一次循环后，目的基因的量可以增加一倍，即成指数形式扩增☎约为 ⏹，⏹为扩增循环的次数✆。
♌人工合成法：如果基因比较小，核苷酸序列又已知，可借助 ☠✌合成仪用化学方法直接人工合成。
二、基因表达载体的构建☎阅读 ✆ ．基因表达载体的功能使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传给下一代，使目的基因能够表达和发挥作用。
．基因表达载体的构成．基因表达载体的构建过程一般用同一种限制酶分别切割载体和目的基因，再用 ☠✌连接酶把两者连接。
三、将目的基因导入受体细胞☎阅读 － ✆．转化的概念目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程。
．转化的方法☎✆导入植物细胞♊农杆菌转化法：将目的基因导入双子叶植物和祼子植物。
♋基因枪法：将目的基因导入单子叶植物常用的方法。
♌花粉管通道法：我国科学家独创的一种方法。
☎✆导入动物细胞♊方法：显微注射技术。
♋常用受体细胞：受精卵。
☎✆导入微生物细胞第一步：首先用 ♋ ＋处理细胞，使细胞处于一种能吸收周围环境中 ☠✌分子的生理状态，这种细胞称为感受态细胞。
1。
2 基因工程的基本操作程序【导学目标】1。
简述基因工程原理及基本操作程序。
2.尝试设计某一转基因生物的研制过程.【自主学习】基因工程的基本操作程序1。
的获取。
2．的构建.3．将目的基因导入。
4．目的基因的与鉴定.一、目的基因的获取1。
目的基因：主要是指编码蛋白质的，也可以是一些具有。
2．基因文库(1）基因文库的含义：将含有某种生物不同基因的许多，导入的群体中储存，各个受体菌分别含有这种生物的不同的基因，称为基因文库。
（2）基因文库的种类①基因组文库：含有一种生物的基因。
②部分基因文库：含有一种生物的基因。
3．获取目的基因的方法(1)从基因文库中获取目的基因（2)利用PCR技术扩增目的基因①PCR的含义：是一项在生物体外特定DNA片段的核酸合成技术.②过程：目的基因受热形成，与引物结合,在的作用下延伸形成DNA.③方式：指数扩增＝2n(n为扩增循环的次数).(3）人工合成法:若较小，序列已知,可以人工合成。
二、基因表达载体的构建1。
基因表达载体的组成2．基因表达载体的功能（1)使目的基因在受体细胞中稳定存在,并且可以给下一代。
(2）使目的基因和发挥作用。
三、将目的基因导入受体细胞1.转化：进入受体细胞内，并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程。
2．导入植物细胞（1）方法：、基因枪法、花粉管通道法等。
（2）农杆菌的特点①易感染和裸子植物。
②Ti质粒上的可转移至受体细胞，并且整合到受体细胞上。
3．导入动物细胞（1)常用方法: 技术. （2）常用受体细胞: .4．导入微生物细胞（1）原核生物特点:繁殖快、多为、遗传物质相对等。
（2)对受体细胞的常用处理方法：用处理细胞,使细胞处于一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态（这种细胞称为）。
四、目的基因的检测与鉴定1。
检测方法(1) 技术:①检测转基因生物的上的目的基因；②检测目的基因是否转录出 .（2）抗原—抗体杂交技术:用于检测目的基因是否翻译成 .2．鉴定：鉴定、抗性鉴定等.思考交流1．利用PCR技术扩增目的基因时，需要提供哪些物质和条件?2．一般情况下，基因工程操作获得成功的标志是什么？正误判断1．基因工程操作程序中的核心步骤是基因表达载体的构建。
1.2 基因工程的基本操作程序学习目标：①写出基因工程的四个操作步骤。
②解释基因文库、基因组文库、部分基因文库的区别与联系。
③分析基因工程四个步骤的原理、工具及具体的操作程序。
学习重难点基因工程基本操作程序的四个步骤。
学习难点从基因文库中获取目的基因；利用PCR技术扩增目的基因。
学习过程：基因工程的基本操作程序：基因工程的基本操作程序主要包括四个步骤：、、、。
(一) 目的基因的获取获取目的基因的方法：(1)从中获取目的基因：①基因文库：将含有某种生物的许多DNA片段，导入受体菌的中储存，各个受体菌分别含有这种生物的，称为基因文库。
基因文库可大可小，如果它包含了一种生物所有的基因，就叫；如果它只包含一种生物的一部分基因，就叫，如。
②具体方法：可根据基因的序列、基因的、基因在上的位置、基因的转录产物以及基因翻译产物等特性来获取目的基因。
(2)利用扩增目的基因：原理：前提：过程：(二)基因表达载体的构建（基因工程的核心）(1)目的：(2)组成：①启动子：是一段有特殊结构的，位于基因的，是识别和结合的部位，能驱动基因，最终获得所需的。
②终止子：也是一段有特殊结构的，位于基因的。
③标记基因的作用：；常用的标记基因是。
(三)将目的基因导入受体细胞(1)转化的概念：(2)常用的转化方法：①将目的基因导入植物细胞：采用最多的方法是，其次还有和等。
②将目的基因导入动物细胞：最常用的方法是。
此方法的受体细胞是。
③将目的基因导入微生物细胞：原核生物作为受体细胞的原因是，最常用的原核细胞是，其转化方法是：先用处理细胞，使其成为，再将溶于缓冲液中与感受态细胞混合，在一定的温度下促进感受态细胞吸收DNA分子，完成转化过程。
(四)目的基因的检测与鉴定(1)首先要检测，方法是采用。
(2)其次还要检测，方法是采用。
(3)最后检测，方法是从转基因生物中提取，用相应的进行杂交。
(4)有时还需进行的鉴定。
如一个抗虫或抗病的目的基因导入植物细胞后，是否赋予了植物抗虫或抗病特性，需要做实验。
1.2 基因工程的基本操作程序【导学目标】1.简述基因工程原理及基本操作程序。
2.尝试设计某一转基因生物的研制过程。
【自主学习】基因工程的基本操作程序1. 的获取。
2．的构建。
3．将目的基因导入。
4．目的基因的与鉴定。
一、目的基因的获取1.目的基因：主要是指编码蛋白质的，也可以是一些具有。
2．基因文库(1)基因文库的含义：将含有某种生物不同基因的许多，导入的群体中储存，各个受体菌分别含有这种生物的不同的基因，称为基因文库。
(2)基因文库的种类①基因组文库：含有一种生物的基因。
②部分基因文库：含有一种生物的基因。
3．获取目的基因的方法(1)从基因文库中获取目的基因(2)利用PCR技术扩增目的基因①PCR的含义：是一项在生物体外特定DNA片段的核酸合成技术。
②过程：目的基因受热形成，与引物结合，在的作用下延伸形成DNA。
③方式：指数扩增＝2n(n为扩增循环的次数)。
(3)人工合成法：若较小，序列已知，可以人工合成。
二、基因表达载体的构建1.基因表达载体的组成2．基因表达载体的功能(1)使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以给下一代。
(2)使目的基因和发挥作用。
三、将目的基因导入受体细胞1.转化：进入受体细胞内，并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程。
2．导入植物细胞(1)方法：、基因枪法、花粉管通道法等。
(2)农杆菌的特点①易感染和裸子植物。
②Ti质粒上的可转移至受体细胞，并且整合到受体细胞上。
3．导入动物细胞(1)常用方法：技术。
(2)常用受体细胞：。
4．导入微生物细胞(1)原核生物特点：繁殖快、多为、遗传物质相对等。
(2)对受体细胞的常用处理方法：用处理细胞，使细胞处于一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态(这种细胞称为)。
四、目的基因的检测与鉴定1.检测方法(1) 技术：①检测转基因生物的上的目的基因；②检测目的基因是否转录出。
(2)抗原—抗体杂交技术：用于检测目的基因是否翻译成。
2．鉴定：鉴定、抗性鉴定等。
《基因工程的基本操作程序》教学设计
教学目标
1.简述基因工程原理及基本操作程序。
2.尝试设计某一转基因生物的研制过程。
3.培养学生探索科学的严谨态度
教学重难点
【教学重点】
基因工程基本操作程序的四个步骤。
【教学难点】
（1）从基因文库中获取目的基因。
（2）利用PCR技术扩增目的基因。
教学工具
多媒体
教学过程
复习提问：
1.DNA重组技术的基本工具有那些，各自的作用和特点是什么？
2.我们所学过的育种方法有那些？其中基因工程育种有那些优点？
导入：通过基因工程的概念我们可知,我们能够应用DNA重组技术和转基因技术
赋予生物以新的遗传特征，但是无论是DNA重组技术还是转基因技术都需要找到
对我们有利的目的基因，我们该如何去寻找目的基因哪，目的基因又将如何连接
到载体上哪，以及如何将载体导入受体？这些都是我们所要共同探究的问题!现
在让我们共同学习一下1.2基因工程的基本操作。
思考1.我们在前面提到的苏云芽孢杆菌中的抗虫基因、胰岛素基因、干扰素基
因等都可以作目
的基因。可是要在浩瀚的“基因海洋”中，找到特定的目的基因可以用什么样的
方法和途径呢？
2、基因工程的基本操作程序主要包括： 、
、
新课教学：
基因工程的基本操作步骤主要包括：目的基因的获取；基因表达载体的构建；将
目的基因导入受体细胞；目的基因的检测与鉴定。
一．目的基因的获取
1．目的基因：主要是指编码蛋白质的结构基因。
2．目的基因的获取方法：
（1）从基因文库中获取
基因文库：将含有某种生物不同基因的许多DNA片段，导入受体菌的群体储存，
各个受体菌分别含有这种生物的不同的基因。
构建基因文库的目的：为了在不知目的基因序列的情况下，便于获得所需的目的
基因。
基因组文库：含有一种生物的所有基因。
部分基因文库（如cDNA文库）：含部分基因，可由mRNA反转录而来。
（2）利用PCR技术扩增目的基因
PCR：是一项在生物体外复制特定DNA片段的核酸合成技术。
原理：DNA双链复制
原料：模板DNA；RNA引物；四种脱氧核苷酸；热稳定DNA聚合酶（Taq酶）；
离子
方法：DNA受热变性解旋为单链、冷却后RNA引物与单链相应互补序列结合、DNA
聚合酶作用下延伸合成互补链。
特点：指数形式扩增
二．基因表达载体的构建
1．目的：使目的基因在受体细胞中稳定存在；可以遗传给下一代；使目的基因
能够表达和发挥作用。
目的基因：
2．基因表达 启动子：位于基因首端，RNA聚合酶识别和结合的部位，
驱动转录基因
载体的组成 终止子：位于基因尾端，使转录在所需要的地方停下来
标记基因：鉴别受体细胞中是否含有目的基因
3．方法：同种限制酶分别切割载体和目的基因，再用DNA连接酶把两者连接。
目的基因与运载体结合（以质粒为运载体）
4．条件：同种限制酶、DNA连接酶、ATP（目的基因、启动子、终止子、标记基
因）
三．将目的基因导入受体细胞
转化：目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程。
① 导入植物细胞：农杆菌转化法（表达载体导入农杆菌，再让农杆菌感染植
物细胞）
将目的基因导入受体细胞
②导入动物细胞：显微注射法（将基因表达载体提纯，用显微仪注射到受精卵中）
③导入微生物细胞：Ca2＋处理受体细胞成为感受态细胞，再进行混合。
提示：农杆菌转化法的原理是利用农杆菌（胞内寄生菌）对植物的感染而把目的
基因导入受体细胞。
四．目的基因的检测和鉴定
①检测是否插入目的基因，利用DNA分子杂交技术，目的基因DNA一条
链（作探针）与受体细胞中提取的DNA杂交，看是否有杂交带。
②检测是否转录出了mRNA，利用DNA分子杂交技术，目的基因DNA一条链（作
探针）与受体细胞中提取的mRNA杂交，看是否有杂交带。
③检测目的基因是否翻译成蛋白质。抗体与蛋白质进行抗原－抗体杂交，看是否
有杂交带。
④还可以进行个体水平的鉴定，根据其性状。
提示：①DNA分子杂交技术首先提取受体细胞中的DNA，然后高温解成单链，再
与同位素标记的DNA探针杂交；②抗原－抗体杂交所用到的抗体是用表达出的蛋
白质注射动物进行免疫，产生相应的抗体，并提取出而来的。将目的基因导入受
体细胞
课后小结
本节学习的基因工程的基本操作程序和方法是对转基因植物、动物、微生物的概
括。如果在本课将要结束时，做个练习，带领学生结合设计某一转基因生物的具
体过程，可将基因工程操作程序有机地串起来，从而加深对这一程序的认识。例
如，烟草是人类健康的“杀手”。如果让它生产出人类需要的药物蛋白，应如何
操作？通过这一实例引导学生结合目的基因从何而来，表达载体如何构建，如何
导入烟草，如何检测药物蛋白产生与否等问题加以设计。可加深学生对基因工程
原理的理解。不同学生会有不同的方法，让学生通过相互比较，相互借鉴，达到
相互学习的目的。学生在课下还可查阅《科学》杂志等参考读物，了解科学家成
功的做法。
课后习题
1．基因工程的正确操作步骤是( )
①使目的基因与载体相结合
②将目的基因导入受体细胞
③验证目的基因的表达是否符合特定性状要求
④提取目的基因
A．③②④① B．②④①③
C．④①②③ D．③④①②
解析：选C。在基因工程操作中，首先要提取目的基因，然后使目的基因与载体
结合，再将目的基因导入受体细胞，最后是目的基因的检测与表达。
2．下列获取目的基因的方法中需要模板的是( )
①从基因文库中获取目的基因 ②利用PCR技术扩增目的基因 ③反转录法
④通过DNA合成仪利用化学方法人工合成DNA
A．①②③④ B．①②③
C．②③④ D．②③
解析：选D。PCR技术利用的是DNA双链复制原理。即将DNA双链之间的氢键打
开，变成单链DNA，作为聚合反应的模板。反转录法是以目的基因转录成的信使
RNA为模板，在逆转录酶的作用下，先反转录形成互补的单链DNA，再合成双链
DNA。①④则均不需要模板。
3．聚合酶链式反应(PCR)是一种体外迅速扩增DNA片段的技术。PCR过程一般经
历下述30多次循环：95℃下使模板DNA变性、解链→55 ℃下复性(引物与DNA
模板链结合)→72℃下引物链延伸(形成新的脱氧核苷酸链)。下列有关PCR过程
的叙述中不正确的是( )
A．变性过程中破坏的是DNA分子内碱基对之间的氢键，也可利用解旋酶实现
B．复性过程中引物与DNA模板链的结合是依靠碱基互补配对原则完成
C．延伸过程中需要DNA聚合酶、ATP、四种核糖核苷酸
D．PCR与细胞内DNA复制相比所需酶的最适温度较高
解析：选C。本题考查PCR扩增过程。解题的关键是要全面理解PCR扩增过程。
DNA分子被破坏是指DNA分子被解旋成两条长链，破坏的部位是连接两条长链之
间的氢键，方法有多种，用解旋酶、高温等都可使DNA解旋。B项中引物有两种，
分别与模板DNA链3′端的互补序列互补配对。C项中的原料不正确，合成DNA
的原料是四种脱氧核苷酸。PCR技术中DNA合成过程中的温度在70～75℃。
板书
1.2 基因工程的基本操作程序
一、 目的基因的获取
二、基因表达载体的构建
（基因工程的核心）
三、将目的基因导入受体细胞
四、目的基因的检测和鉴定
