黑龙江省部分地区马铃薯Y病毒株系检测
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马铃薯病毒种类及主要病毒检测方法作者:罗燕娜,刘江娜,王航来源:《新疆农垦科技》 2015年第3期罗燕娜,刘江娜,王航(兵团第六师农业科学研究所,新疆五家渠831300)收稿日期:2015—01—20摘要:本文对北疆地区马铃薯主要病毒的特性和致病症状进行了描述,并简要介绍了马铃薯主要病毒的检测技术。
关键词:马铃薯;病毒;检测方法马铃薯在我国广泛种植,已成为仅次于水稻、小麦、玉米的第四大粮食作物。
由于光照强、昼夜温差大、气候冷凉等优势,新疆北疆沿天山一带的昌吉州、乌鲁木齐、昭苏、新源等地都非常适宜种植马铃薯,现种植面积已达2310hm2[1]。
然而在当前的马铃薯生产中,病毒病发生普遍而严重,成为制约马铃薯产业发展的主要障碍,是生产上亟待解决的突出问题[2]。
目前,已报道的马铃薯病毒种类超过25种、类病毒1种,其中,侵染乌鲁木齐地区马铃薯的主要病原病毒有PVX、PVY、PVA、PLRV,类病毒为PSTVd。
主要检测的马铃薯病毒有马铃薯X病毒(PVX)、马铃薯Y病毒(PVY)、马铃薯S病毒(PVS)、马铃薯M病毒(PVM)、马铃薯卷叶病毒(PLRV)及马铃薯纺锤块茎类病毒(PSTVd)[1]。
1马铃薯主要病毒种类及致病症状1.1马铃薯X病毒(PVX)X病毒又称普通花叶病毒,病毒粒子为长杆状,大小为515nm×13nm,基因组全长6.4kb[3]。
该病毒可通过叶片汁液摩擦传播,也可通过蚜虫以非持久性方式传播,还可通过种薯传播[1]。
感病植株症状多种多样,因栽培品种的敏感性不同和病毒株系的不同而存在差异,多数表现为轻花叶或潜隐症状,症状严重的则表现为严重的花叶或皱缩,产量损失可达50%。
1.2马铃薯Y病毒(PVY)Y病毒又称为重花叶病毒,病毒粒子形状为弯曲的线形,大小为750nm×11nm,多数通过桃蚜和大戟长管蚜传播。
PVY包括3个株系组:马铃薯Y病毒普通株系组(PVYO)、马铃薯点条斑株系(PVYC)和马铃薯Y病毒褐脉株系(PVYN)。
马铃薯Y病毒的株系种类、分子特征及鉴定方法研究进展吴兴泉;李月;孙强;李萌萌;王梦科【摘要】There are many strains of potato virus Y ( PVY ) identified in the last few decades. As molecular technology and immunity technology were applied in the identification of the PVY strains, a series of strain identification methods were developed. Here the types of the strains and substrains, molecular characters and the identification methods of PVY are reviewed.%马铃薯Y病毒( PVY)株系分化现象明显,具有多个株系类型。
随着分子生物学技术和免疫学技术逐渐被引入PVY的株系鉴定中,产生了一系列的株系鉴定方法。
为此,对PVY的主要株系、亚株系的种类及分类依据、分子特征以及近年来应用于PVY株系鉴定的传统生物学方法、分子生物学方法、免疫学方法等进行了综述。
【期刊名称】《河南农业科学》【年(卷),期】2015(000)003【总页数】4页(P5-8)【关键词】马铃薯Y病毒;株系;分子特征;鉴定【作者】吴兴泉;李月;孙强;李萌萌;王梦科【作者单位】河南工业大学生物工程学院,河南郑州450001;河南工业大学生物工程学院,河南郑州450001;黑龙江北大荒农业股份有限公司八五四分公司,黑龙江虎林158403;河南工业大学生物工程学院,河南郑州450001;河南工业大学生物工程学院,河南郑州450001【正文语种】中文【中图分类】S435.32马铃薯Y病毒(potato virus Y, PVY)是马铃薯上危害最严重的病毒之一,可造成马铃薯严重减产。
马铃薯晚疫病测报调查方法马铃薯晚疫病Phytophthora infestans(Mont)de Bary是我省马铃薯生产上的一个重要病害,在我省马铃薯产区普遍发生,严重影响了我省马铃薯产业发展。
1、影响马铃薯晚疫病发生的主要因素1.1 气候因素晚疫病为一种典型的流行病。
气候条件与发病流行有极为密切的关系。
当条件适于发病时,病害可迅速爆发,从开始发病到全田枯死,最快不到半个月。
晚疫病发生要求高湿、凉爽的气候,在多雨年份的夏秋季以及南部地区的冬春季,最易流行成灾。
因此,雨水或湿度则是影响流行的关键因素。
在阴雨连绵或多雾、多露条件下,最利于晚疫病大发生和流行。
1.2 寄主抗病性不同品种对晚疫病抗病性有很大差异。
病害能否流行及流行程度,与品种抗病性的强弱有极大的关系。
病害在感病品种上发展快、病菌产生孢子囊数量大、传播快,容易流行成灾。
2、调查项目与方法2.1 中心病株调查选择低洼潮湿、生长旺盛、成熟较早的感病品种田3-5块,从植株开始现蕾期时起,进行调查。
每2天踏查1次,或根据“标蒙”气候标准(见3.1)预测中心病株出现以后,每块地踏查1000-2000株,掌握中心病株出现日期以初始发病指数。
结果记入表1。
表 1 马铃薯晚疫病中心病株及病情调查表单位:年度:调查人:日期(月/日)地点品种生育期中心病株出现日期(月/日)调查面积(㎡)发病面积(hm2)调查株数(株)发病株数(株)病株率(%)各级发病株数病情指数备注级1级2级3级4级2.2 发病初期普查在发现中心病株后和病害扩展初期,及时组织病情普查,以掌握面上情况,指导防治。
普查面积一般不低于栽培面积的5%。
每块田取5-10个点,每点隔双株查10-20株,调查发病情况。
根据病情分级标准,计算出不同发生程度的面积。
结果记入表2。
表2 马铃薯晚疫病发病情况普查表单位:年度:调查人:日期(月/日)地点品种生育期调查田块数发病田块数病田率(%)共查株数(株)发病株数(株)病株率(%)各级发病株数备注轻中重3、预报方法3.1发病始期预测利用“标蒙”气候标准,结合田间中心病株调查预测田间发病始期。
马铃薯六种主要病毒通用RT-PCR检测体系的建立张威;白艳菊;景芝;范国权;高艳玲;申宇;张抒;孟宪欣;王军【摘要】马铃薯X病毒(PVX)、马铃薯Y病毒(PVY)、马铃薯S病毒(PVS)、马铃薯卷叶病毒(PLRV)、马铃薯M病毒(PVM)和马铃薯A病毒(PVA)是马铃薯生产田中发生率较高、危害较严重的病毒,因此,建立特异性强、灵敏度高、检测速度快的RT-PCR分子检测体系对保障马铃薯种薯质量具有非常重要的意义。
试验筛选了6种病毒的特异引物、优化了PCR部分的试剂以及确定了退火温度。
结果表明,当Mg2+浓度为2.6 mmol/L、dNTPs浓度为0.1mmol/L、Taq DNA聚合酶浓度为0.03 U/μL,以及退火温度为55.5℃时反应体系最稳定。
最终,建立了一套通用RT-PCR检测体系,只需要变换每种病毒的引物,就可以实现对PVX、PVY、PVS、PLRV、PVM和PVA病毒的RT-PCR检测。
每种病毒检测灵敏度均能达到pg以上。
%The higher incidence and more serious viruses in potato fields are potato virus X (PVX), potato virus Y (PVY), potato virus S (PVS), potato leafroll virus (PLRV), potato virus M (PVM), and potato virus A (PVA), so it is very important to guarantee the quality of seed potato by establishment of RT-PCR molecular detection system with specificity, high sensitivity and fast detection speed for these viruses. In this research, the primer for each virus was screened, PCR reagents were optimized, and annealing temperature was determined. The results indicated that when the concentration of Mg2 + was 2.6 mmol/L, dNTPs was 0.1 mmol/L, Taq DNA polymerase was 0.03 U/μL, and annealing temperature was 55.5℃, the reaction system was the most stable. Finally, a universal RT-PCR detection system was established, which only need tochange primer for each virus when the RT-PCR detection for PVX, PVY, PVS, PLRV, PVM and PVA was needed. The detection sensitivity of each virus could reach the level of pg.【期刊名称】《中国马铃薯》【年(卷),期】2015(000)004【总页数】6页(P222-227)【关键词】马铃薯;PVX;PVY;PVS;PLRV;PVM;PVA【作者】张威;白艳菊;景芝;范国权;高艳玲;申宇;张抒;孟宪欣;王军【作者单位】黑龙江省农业科学院植物脱毒苗木研究所,黑龙江哈尔滨 150086;黑龙江省农业科学院植物脱毒苗木研究所,黑龙江哈尔滨 150086;东北农业大学农学院,黑龙江哈尔滨 150030;黑龙江省农业科学院植物脱毒苗木研究所,黑龙江哈尔滨 150086;黑龙江省农业科学院植物脱毒苗木研究所,黑龙江哈尔滨150086;黑龙江省农业科学院植物脱毒苗木研究所,黑龙江哈尔滨 150086;黑龙江省农业科学院植物脱毒苗木研究所,黑龙江哈尔滨 150086;黑龙江省农业科学院作物育种研究所,黑龙江哈尔滨 150086;北大荒垦丰种业股份有限公司,黑龙江哈尔滨 150090【正文语种】中文【中图分类】S532马铃薯是世界上最重要的粮食作物之一,具有分布范围广、适应性强、产量高、用途广等特点。
贵州黔南烟草马铃薯Y病毒(PVY)株系的血清学鉴定罗红香;李余湘;刘会忠;徐明勇;王林玉;赵中汇;何玉安;李章海;江彤【摘要】2010年从贵州省黔南州烟草产区共采集201个表现明显马铃薯Y病毒病症状的烟草样本.采用Tas-ELISA检测PVY的3个株系PVYN、PVYO和PVYC.结果显示,201个样本中共检测出171个样本受到PVY侵染,其中PVYN 37个,占21.6%;PVYO 133个,占77.8%;PVYC 0个,PVYN和PVYO复合侵染1个,占0.6%.PVY株系分布具有一定规律,侵染黔南州烟草的PVY以PVYO为主要株系,PVYN侵染相对较少,为次要株系,所有样本均没有检测到PVYC侵染,复合侵染零星发生.%10.3969/j.issn.1007-5119.2012.05.011【期刊名称】《中国烟草科学》【年(卷),期】2012(000)005【总页数】3页(P60-62)【关键词】贵州;烟草;马铃薯Y病毒;ELISA;株系鉴定【作者】罗红香;李余湘;刘会忠;徐明勇;王林玉;赵中汇;何玉安;李章海;江彤【作者单位】贵州省黔南州烟草公司,贵州都匀 558000;贵州省黔南州烟草公司,贵州都匀 558000;贵州省黔南州烟草公司,贵州都匀 558000;贵州省黔南州烟草公司,贵州都匀 558000;贵州省黔南州烟草公司,贵州都匀 558000;贵州省黔南州烟草公司,贵州都匀 558000;贵州省黔南州烟草公司,贵州都匀 558000;中国科学技术大学烟草研究中心,合肥 230051;安徽农业大学植保学院,合肥 230036【正文语种】中文【中图分类】S572.08马铃薯Y病毒(Potato virus Y,PVY)是马铃薯Y病毒属(Potyvirus)的典型成员,能侵染烟草、马铃薯、番茄和辣椒等多种茄科作物[1]。
根据PVY的鉴别寄主症状反应和血清学反应类型,进一步将其划分为多个株系,常见的有PVYO、PVYN和PVYC等株系。
河北省马铃薯Y病毒株系分子鉴定及其RT-PCR检测吴志明;时星;谢晓亮;温春秀;张庆良【期刊名称】《河北农业大学学报》【年(卷),期】2005(28)3【摘要】根据马铃薯Y病毒(Potato virus Y,PVY)的外壳蛋白基因序列,设计合成了一对寡核苷酸引物,从感染PVY的马铃薯田间病叶组织中提取出病毒的RNA, 进行cDNA合成及PCR扩增,得到一条长度约800 bp的特异PCR扩增产物,与理论设计的基因片段大小一致,本试验建立了快速、灵敏、简便的PVY检测的方法.将RT-PCR扩增产物克隆到质粒pGEM-T上,并进行了序列分析.结果表明,克隆的cDNA片段由801个核苷酸组成,编码267个氨基酸组成的理论分子量为29 kD 蛋白,与PVY外壳蛋白的大小一致,与基因库登记的代表性株系相比,它们之间的核苷酸序列同源性为89.6%~98.8%,氨基酸序列的同源性为93.3%~98.5%,说明PVY CP基因具有高度的保守性(记为PVY-HBEI),与国内报道的PVY-CHU、PVY-ZHJ和PVY-ZHOU株系的氨基酸序列同源性分别为96.6%、98.5%和97.8%,与PVYN和PVYO株系的氨基酸序列同源性分别为93.6%和97.8%,从分子水平上确定PVY-HBEI归属于普通株系(PVYO株系).【总页数】6页(P54-59)【作者】吴志明;时星;谢晓亮;温春秀;张庆良【作者单位】河北省农林科学院,经济作物研究所,河北,石家庄,050051;河北省高碑店农业局,河北,保定,074000;河北省农林科学院,经济作物研究所,河北,石家庄,050051;河北省农林科学院,经济作物研究所,河北,石家庄,050051;河北科润农业技术有限公司,河北,石家庄,050051【正文语种】中文【中图分类】S432【相关文献】1.河北省马铃薯S病毒株系的分子鉴定研究 [J], 周巧梅;谢晓亮;温春秀;马恢;尹江;吴志明2.马铃薯Y病毒的株系种类、分子特征及鉴定方法研究进展 [J], 吴兴泉;李月;孙强;李萌萌;王梦科3.黑龙江烟区烟草马铃薯Y病毒株系的分子鉴定 [J], 万秀清;乔婵;赵淑娟;李若;李丽杰;郭振楠4.黔南烟草马铃薯Y病毒(PVY)株系的分子鉴定 [J], 陆新莉;钱凤英;黄刚;苛正贵;陈威霖;王林玉;黎明江;刘书凯;朱显灵5.全基因组序列的系统发育与重组分析鉴定我国马铃薯Y病毒株系 [J], 蔡伟;杨宏凯;沈建国;邹文超;高芳銮因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
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一、选择题:本题共15小题,每小题2分,共30分。
在每小题给出的四个选项中,只有一项符合题目要求。
1.钙调蛋白是广泛存在于真核细胞的Ca2+感受器。
小鼠钙调蛋白两端有近似对称的球形结构,每个球形结构可结合2个Ca2+。
下列叙述错误的是()A.钙调蛋白的合成场所是核糖体B.Ca2+是钙调蛋白的基本组成单位C.钙调蛋白球形结构的形成与氢键有关D.钙调蛋白结合Ca2+后,空间结构可能发生变化2.手术切除大鼠部分肝脏后,残留肝细胞可重新进入细胞周期进行增殖;肝脏中的卵圆细胞发生分化也可形成新的肝细胞,使肝脏恢复到原来体积。
下列叙述错误的是()A.肝细胞增殖过程中,需要进行DNA复制B.肝细胞的自然更新伴随着细胞凋亡的过程C.卵圆细胞分化过程中会出现基因的选择性表达D.卵圆细胞能形成新的肝细胞,证明其具有全能性3.下列关于森林群落演替的叙述,正确的是()A.土壤的理化性质不会影响森林群落演替B.植物种群数量的改变不会影响森林群落演替C.森林由乔木林变为灌木林属于群落演替D.砍伐树木对森林群落演替的影响总是负面的4.关于人类活动对生态环境的影响,下列叙述错误的是()A.清洁能源的使用能够降低碳足迹B.在近海中网箱养鱼不会影响海洋生态系统C.全球性的生态环境问题往往与人类活动有关D.水泥生产不是导致温室效应加剧的唯一原因5.弗兰克氏菌能够与沙棘等非豆科木本植物形成根瘤,进行高效的共生固氮,促进植物根系生长,增强其对旱、寒等逆境的适应性。
马铃薯三种主要病毒的ELISA和RT-PCR检测技术的研究马铃薯是世界上重要的食物作物之一,也是我国主要的经济作物之一。
然而,马铃薯生产中常常受到病毒的威胁。
病毒感染会导致马铃薯产量下降、品质降低甚至全面减产。
因此,准确快速地检测病毒感染对于指导马铃薯的种植和防控病害具有重要意义,可以提供科学依据、减少经济损失和保证农作物的质量安全。
马铃薯主要受到三种病毒的感染,分别是马铃薯病毒Y (Potato Virus Y, PVY)、马铃薯块茎坏死病毒 (PotatoVirus X, PVX)和马铃薯花叶病毒 (Potato Leafroll Virus, PLRV)。
传统的病毒检测方法包括生物学观察法、传统PCR等。
然而,这些方法存在耗时、复杂、低灵敏度等问题。
因此,研究人员对使用ELISA和RT-PCR等技术进行马铃薯病毒检测进行了深入研究。
ELISA法是一种高效的酶联免疫吸附法,利用抗原与特异抗体结合,通过比色反应检测样品中是否存在目标病毒。
ELISA方法具有高度敏感性和特异性,且结果易于观察和分析。
针对马铃薯病毒检测,研究人员首先制备了目标病毒的抗原,并将其与马铃薯样品中的病毒结合,然后添加酶标记的二抗,形成抗原-抗体-酶标记-底物复合物。
最后,通过添加酶底物,观察是否有颜色反应产生。
ELISA法不仅操作简便、检测速度快,而且可以批量检测多个样品。
但是,ELISA法的敏感性对样品前处理和样品质量要求较高。
与ELISA法相比,RT-PCR法可以在基因水平上对目标病毒进行检测。
RT-PCR法首先需要提取马铃薯样品中的总RNA,然后通过反转录将RNA转化为cDNA,再进行聚合酶链反应扩增。
PCR反应中使用特异引物,使得目标病毒的RNA序列扩增得到特异性产物,经过电泳分析可以确定是否存在目标病毒。
RT-PCR法具有快速、准确、高灵敏度和高特异性等优点,可以在较短的时间内对多个样品进行检测。
但是,RT-PCR法技术门槛较高,操作复杂,需要专业的实验室和设备。
马铃薯Y病毒属病毒的致病机理及植物抗性机制研究进展作者:张莉娟林垠孚吴凤李今朝农耀京来源:《农业研究与应用》2021年第01期摘要:马铃薯Y病毒属病毒是世界范围内影响范围广、危害严重并造成重大经济损失的病毒属之一,侵染的物种主要有茄科、豆科、藜科等农作物和经济作物。
本研究综述了近年来关于马铃薯Y病毒属病毒的致病机理和植物对抗此类病毒的抗性机制,为更好的理解和防控马铃薯Y病毒属病毒提供理论参考。
关键词:马铃薯Y病毒属致病机理植物抗性中图分类号:Q93 文獻标识码:AResearch Progress on Pathogenesis of Potyvirus and Plant Resistance MechanismZHANG Lijuan1, LIN Yinfu2, WU Feng1, LI Jinzhao1, NONG Yaojing1(1Guangxi Subtropical Crops Research Institute, Nanning, Guangxi 530001, China;2College of Life Science and Technology,Guangxi University,Nanning,Guangxi 530005, China)Abstract: Potyvirus is one of the most widely distributed viruses in the world, causing serious damage and huge economic losses. The main species infected by Potyvirus are Solanaceae,Leguminosae and Chenopodiacea. This article reviews the pathogenesis of Potyvirus and the plant resistance mechanism to Potyvirus in recent years, so as to provide theoretical reference for better understanding, prevention and control of Potyvirus.Key words: Potyvirus; pathogenesis; plant resistance马铃薯Y病毒属是迄今为止最大的植物RNA病毒属,国际植物病毒分类委员会(ICTV)在2017年公布的数据显示,共发现160个马铃薯Y病毒属种类病毒。
马铃薯病毒的常用检测方法刘玲玲;韩黎明;张尚智;禹娟红【期刊名称】《中国马铃薯》【年(卷),期】2013(27)4【摘要】目前常用马铃薯病毒检测的方法,主要包括寄主生物学检测法、抗血清检测法、电子显微镜检测法、酶联免疫检测法和分子生物学检测法。
重点讨论了分子生物学方法中的各种RT-PCR方法。
同时对各种方法的优缺点进行了比较,并总结出将传统生物学检测技术、免疫学检测技术和分子生物学检测技术相结合必将成为检测植物病毒最经济有效的手段。
%The common test methods for potato virus detection were reviewed, including host biology detection, antiserological detection assay, electron microscopy, enzyme-linked immunosorbent assay and molecular biological detection assay, with emphasis on the various RT-PCR methods of molecular biology methods. At the same time, the merit and demerit were compared with different methods, concluding that the combination of traditional biological detection, immunological detection and molecular biology detection technology would be the most cost-effective means for detection of plant viruses.【总页数】4页(P239-242)【作者】刘玲玲;韩黎明;张尚智;禹娟红【作者单位】定西师范高等专科学校生化系,甘肃定西,743000;定西师范高等专科学校生化系,甘肃定西,743000;定西师范高等专科学校生化系,甘肃定西,743000;定西师范高等专科学校生化系,甘肃定西,743000【正文语种】中文【中图分类】S532【相关文献】1.马铃薯病毒种类及主要病毒检测方法 [J], 罗燕娜;刘江娜;王航2.烟草马铃薯X病毒(Potatoes Virus X, PVX)快速检测方法及抗性诱导物质抑制效果研究 [J], 匡传富;孙现超;陈德鑫3.马铃薯Y病毒衣壳蛋白抗原表位分析及其快速ELISA检测方法的建立 [J], 梁雨欣;吴建祥;李小宇;张春雨;侯吉超;周雪平;王永志4.马铃薯卷叶病毒RT-LAMP检测方法的建立研究 [J], 康明蛟5.马铃薯卷叶病毒RT-LAMP检测方法的建立 [J], 高彦萍;吕和平;张武;王国祥;吴雁斌;梁宏杰因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
马铃薯病毒PVY,PVS和PLRV多重RT-PCR检测黄丹;余琨;陈建斌;蔡红;朱有勇【摘要】病毒是马铃薯生产过程中危害较大的一类病原,为快速检测出云南省马铃薯主要病毒种类,依据病毒外壳蛋白基因序列设计合成了马铃薯Y病毒(PVY)、马铃薯S病毒(PVS)、马铃薯卷叶病毒(PLRV)的特异性引物,从退火温度、最低检测浓度、热反应循环条件、病毒间的模板及引物间的最佳组合浓度进行优化,建立了三重RT-PCR反应体系.结果表明:该优化体系可同步扩增出上述3种病毒,分别得到480 bp (PVY)、187 bp (PVS)、336 bp (PLRV)大小的扩增片段.优化的三重RT-PCR反应体系可快速、灵敏、简便的检测到单一或复合侵染的马铃薯病毒,有利于马铃薯病毒病的早期检测和防治,将为云南省马铃薯种苗脱毒、继代、田间植株的高产栽培等有重要实践作用.【期刊名称】《云南农业大学学报》【年(卷),期】2015(030)004【总页数】6页(P535-540)【关键词】马铃薯;病毒;多重RT-PCR检测【作者】黄丹;余琨;陈建斌;蔡红;朱有勇【作者单位】云南农业大学植物病理重点实验室,云南昆明650201;云南省建水县农业技术推广所,云南建水654399;云南农业大学植物病理重点实验室,云南昆明650201;云南农业大学植物病理重点实验室,云南昆明650201;云南农业大学植物病理重点实验室,云南昆明650201【正文语种】中文【中图分类】S435.32马铃薯病毒病是马铃薯非常重要的一类病害,病毒的侵染可引起马铃薯种质退化,导致产量急剧下降[1]。
我国各马铃薯主产区均有马铃薯病毒病发生[2]。
主要的马铃薯病毒种类有马铃薯X病毒(Potato virus X,PVX)、马铃薯卷叶病毒(Potato leaf roll virus,PLRV)、马铃薯Y病毒(Potato virus Y,PVY)、马铃薯A病毒(Potato virus A,PVA)和马铃薯S病毒(Potato virus S,PVS)[3-4]。