(推荐)细菌、酵母菌、霉菌、放线菌异同

注意：由于实验内容较多，所以我们只要把蓝色字体部分写在实验报告上即可，黑体字部分自己看一下。

由于11-13周为教学质量检查周，督导随时可能来查，所以预习报告还是要写。

细菌、酵母菌、放线菌和真菌接种方法和形态观察一、微生物的接种技术1 目的1.1学习掌握微生物的几种接种技术1.2 建立无菌操作的概念，掌握无菌操作的基本环节2 基本原理将微生物培养物或含有微生物的样品在无菌条件下移植到培养基上的操作技术称为接种。

接种的关键是严格进行无菌操作。

常用的接种方法有斜面接种、液体接种、穿刺接种、平板接种和固体接种等。

3 实验材料3.1 菌种：大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、啤酒酵母、玫瑰暗黄链球菌、曲霉、荨麻青霉的斜面培养物3.2 培养基：营养琼脂培养基、马铃薯葡萄糖琼脂培养基及高氏1号培养基的斜面和平板3.3 试剂：5ml无菌生理盐水试管3.4 仪器与其他用品酒精灯、记号笔、试管、橡胶塞、试管架、接种环、培养皿、超净台等。

4 操作步骤4.1 斜面接种法斜面接种法主要用于传代活化、纯化培养、鉴定或保存菌种。

通常先从平板培养基上挑取分离的单个菌落，或挑取斜面，液体培养基中的纯培养物接种到斜面培养基上。

操作应在无菌室、接种柜或超净工作台上进行。

4.1.1准备工作将菌种斜面培养基(简称菌种管)与待接种的新鲜斜面培养基(简称接种管)持在左手拇指、食指、中指及无名指之间，菌种管在外侧，接种管在内侧，斜面向上管口对齐，并能清楚地看到两个试管的斜面，注意不要持成水平，以免管底凝集水浸湿培养基表面。

4.1.2接种环灭菌右手持接种环柄，将接种环垂直放在火焰上灼烧。

镍铬丝部分（环和丝）必须烧红，以达到灭菌目的，然后将除手柄部分的金属杆全用火焰灼烧一遍。

4.1.3拔管塞和烧烤试管口用右手的小指和手掌之间及无名指和小指之间拨出试管棉塞，将试管口在火焰上通过，以杀灭可能沾污的微生物。

4.1.4接种环冷却和取菌将灼烧灭菌的接种环插入菌种管内，先接触无菌苔生长的培养基上，待冷却后再从斜面上刮取少许菌苔取出。

微生物学简答题1、G+菌和G-菌细胞壁结构和组成上有何差别，以及与革兰氏染色反应的关系。

结构：G+菌细胞壁厚，仅1层；G-菌细胞壁薄，有多层。

组成：G+菌细胞壁含有肽聚糖且含量高、磷壁酸；G-菌细胞壁薄含有肽聚糖但含量低，不含磷壁酸，但含有脂多糖、膜蛋白等。

与革兰氏染色反应的关系：G+菌细胞壁含有肽聚糖且含量高，经酒精脱色时，失水网孔变小，能够阻止结晶紫和碘复合物被洗脱；而G-菌细胞壁的外膜易被酒精洗脱，内层肽聚糖层薄，不能够阻止结晶紫和碘复合物被洗脱。

2、什么是糖被，其成分是什么，有何功能。

成分：多糖和糖蛋白；功能：保护作用，贮藏养料，作为透性屏障和离子交换系统，表面附着作用，细菌间的信息识别作用，堆积代谢废物；3、试述一位著名的微生物学家对微生物学的主要贡献？你从中有何启发。

XXX：发酵的实质；否定了生物的自然发生说；巴斯德消毒法；疫苗生产法。

启发：勇于实践，实践－理论－实践。

勤奋。

不畏权威。

4、简述原核微生物和真核微生物的主要区别?原核微生物：是指一大类细胞核无核膜包裹，只要称为核区的袒露的DNA的原始的单细胞生物，包括古细菌和真细菌两大类。

真核微生物：是指细胞核具有核膜，能进行有丝分裂，细胞质中存有线粒体或同时存在叶绿体等多种细胞器的微生物，包括真菌、微藻类、原生动物、地衣等。

原核微生物与真核微生物的主要区分：比较项目真核微生物原核微生物细胞大小较大（通常直径＞2微米）较小若有壁，其主要成分纤维素、几丁质多半为肽聚糖细胞膜中甾醇有无（支原体例外）细胞膜含呼吸和光组分无有细胞器有无鞭毛结构如有则粗而庞大（9+2型）如有则细而简单核膜有无DNA含量底（约5％）高（约10％）组卵白有少核仁有无染色体数一般大于1一般为1有丝分裂有无减数分裂有无鞭毛举动方式挥鞭毛旋转马达式遗传重组方式有性生殖、准性生殖转化、转导、接合繁育方式有性、无性等多种一般为无性（二平分裂）5、试述革兰氏染色方法步调及道理。

【细菌菌落特征】常见细菌特征性菌落细菌,酵母,霉菌的形态与菌落特征观察实验四、细菌，酵母，霉菌的形态与菌落特征观察一、实验目的细菌：观察食品中常见细菌的平板菌落特征，了解细菌的菌落在细菌形态学检定上的重要性酵母菌：1.学习并掌握观察酵母菌的形态及出芽繁殖的基本方式2.学习区分酵母的死活细胞的实验方法3.观察酵母的平板菌落特征，了解酵母菌的菌落在真菌形态学检定上的重要性霉菌：1.学习并掌握观察四类常见霉菌形态特征的基本方法2.掌握青霉，曲霉的小室栽片培养法，以便更好地观察其个体形态3.观察霉菌的平板菌落特征，了解霉菌的菌落特征在丝状真菌形态学检定上的重要性二、实验原理1．细菌：将单个微生物细胞或多个同种细胞接种于固体培养基表面，经适宜条件培养，以母细胞为中心，在有限空间中大量繁殖，扩展成一堆肉眼可见的有一定形态构造的子细胞群落，成为菌落。

若将某一纯种细胞大量密集接种于固体培养基表面，菌体生长的各菌落连接成片，称为菌苔。

各种细菌在平板上生成的菌落均具有一定特征，对细菌的分类，鉴定有重要意义，菌落主要用于微生物的分离，纯化，鉴定，计数等研究和选种，育种等实际工作中。

2．酵母菌：以出芽繁殖为主要特征的不运动的单细胞真核微生物，其细胞核与细胞质有明显分化，个体大小比常见细菌大几倍甚至几十倍，酵母菌的形态通常有球状，卵圆状，椭圆状，柱状，或香肠状等多种。

酵母菌的无性繁殖主要有芽殖，裂殖与产生掷孢子和厚垣孢子。

有性繁殖通过结合产生子囊孢子。

酵母菌的母细胞在一系列的芽殖后若长大的子细胞与母细胞不分离，就会形成藕节状的假菌丝，称假丝酵母。

美蓝是一种无毒的弱氧化剂染料，其氧化型呈蓝色，还原型呈无色。

用美蓝对酵母的活细胞进行染色时，由于细胞的新陈代谢作用，细胞内具有较强的还原能力，能使美蓝由蓝色的氧化型变为无色的还原型。

因此，具有还原能力的酵母活细胞为无色，而死细胞或代谢作用微弱的衰老细胞则呈蓝色或淡蓝色，故可用美蓝鉴别细胞的死活。

微生物学课后习题（第一部分）第一章原核生物的形态、构造和功能复习思考题1.试设计一张表格,比较一下6个大类原核生物的主要特性。

2.典型细菌的大小和重量是多少?试设想几种形象化的比喻并加以说明。

3.试图示G+和G-细菌细胞壁的主要构造,并简要说明其异同。

4.试图示肽聚糖的模式构造,并指出G+和G-细菌肽聚糖结构的差别。

5.什么是缺壁细菌?试列表比较4类缺壁细菌的形成、特点和实际应用。

6.试述革兰氏染色法的机制并说明此法的重要性。

7.何谓“拴菌试验”?它何以能证明鞭毛的运气机制?8.渗透调节皮层膨胀学说是如何解释芽孢耐热机制的?9.什么是菌落?试讨论细菌的细胞形态与菌落形态间的相关性。

10.名词解释:磷壁酸,LPS,假肽聚糖,PHB,伴胞晶体,基内菌丝,孢囊链霉菌,横割分裂,异形胞,原体与始体,类支原体,羧酶体,孢囊,磁小体。

第二章真核微生物的形态、构造和功能复习思考题1.试解释菌物、真菌、酵母菌、霉菌和蕈菌。

2.试图示并说明真核微生物“9+2”型鞭毛的构造和生理功能。

3.试简介真菌所特有的几种细胞器――膜边体、几丁质酶体和氢化酶体。

4.什么是单细胞蛋白(SCP)?为什么酵母菌是一种优良的单细胞蛋白?5.试图示Saccharomyces cerevisiae 的生活史,并说明其各阶段的特点。

6.试简介菌丝、菌丝体、菌丝球、真酵母、假酵母、芽痕、蒂痕、真菌丝、假菌丝等名词。

7.霉菌的营养菌丝和气生菌丝各有何特点?它们分别可分化出哪些特化结构8.试以Neurospora crassa 为例,说明菌丝尖端细胞的分化过程及其成分变化。

9.试列表比较各种真菌孢子的特点。

10.细菌、放线菌、酵母菌和霉菌四大类微生物的菌落有何不同?为什么? 11.为什么说蕈菌也是真核微生物?12.什么叫锁状联合?其生理意义如何?试图示其过程。

13.试比较细菌、放线菌、酵母菌和霉菌细胞壁成分的异同,并讨论它们的原生质体制备方法。

第三章病毒和亚病毒复习思考题1.什么是真病毒?什么是亚病毒?2.病毒的一般大小如何?试图示病毒的典型构造。

第一章1.设计一张表格，比较一下6个大类原核生物的主要特性。

2．试图示G+和G-细菌细胞壁的主要构造，并简要说明其异同。

3．试述染色法的机制并说明此法的重要性。

革兰氏染色的机制为：过结晶紫液初染和碘液媒染后，形成不溶于水的结晶紫与碘的复合物。

G+细菌由于细胞壁较厚、肽聚糖网层次多和不含脂类，故经过乙醇脱色后仍保持紫色；G-细菌则因其细胞壁薄、外膜层类脂含量高、肽聚糖层薄，遇到乙醇脱色后细胞褪色；再经红色染料复染后，G-细菌呈红色，而G+细菌则仍保留最初的紫色。

重要性：此法证明了 G+和 G-主要由于起细胞壁化学成分的差异而引起了物理特性的不同而使染色反应不同，是一种积极重要的鉴别染色法，不仅可以用与鉴别真细菌，也可鉴别古生菌。

把原核生物分为G+和G-两大类，并揭示其在结构、功能、生理、遗传、生态等特性上的不同，故具有重要的理论和实践意义。

4．试讨论细菌的细胞形态与菌落形态间的相关性。

相关性：因不同形态、生理类型的细菌，在其菌落形态、构造等特征上也有许多明显的反映，故细菌的细胞形态与菌落形态间存在明显的相关性现象，如，无鞭毛、不能运动的细菌尤其是球菌通常都形成较小、较厚、边缘圆整的半球状菌落；长有鞭毛、运动能力强的细菌一般形成而平坦、边缘多缺刻、不规则的菌落；有糖被的细菌，会长出大型、透明、蛋清状的菌落；有芽孢的细菌往往长出外观粗糙、“干燥”、不透明且表面多褶的菌落等等。

名词解释菌落：菌落即单个（或聚集在一起的一团）微生物在适宜的固体培养基表面或内部生长、繁殖到一定程度可以形成肉眼可见的、有一定形态结构的子细胞生长群体。

菌苔：如果把大量分散的纯种细菌密集的接种在固体培养基的较大面积上，结果长出的大量“菌落”已相互连成一片即称菌苔。

伴孢晶体：是少数芽孢杆菌在形成芽孢的同时，会在芽孢旁形成一颗菱形、方形或不规则形的碱溶性蛋白质晶体。

基内菌丝：是孢子落在固体基质表面并发芽后，不断伸长、分枝并以放射壮向基质表面和内层扩展，形成大量色浅、较细的具有吸收营养和排泄代谢废物功能的菌丝。

细菌、放线菌、酵母菌、霉菌的菌落测定一、目的要求1．观察细菌、放线菌、酵母菌和霉菌的代表种类的菌落形态特征。

2．学习细菌菌落制片的方法。

二、墓本原理菌落形态是指某种微生物在一定的培养基上由单个菌体形成的群体形态。

细菌、放线菌、酵母菌和霉菌，每一类微生物在一定培养条件下形成的菌落各具有某些相对的特征，利用观察这些特征，来区分各大类微生物及初步识别、鉴定微生物，方法简便快速，在科研和生产实践中常被采用。

利用血液培养基富有营养及粘性等特性来培养细菌，在此培养基上生长的菌落在固定时粘性很大，能够牢固地附着在载玻片或盖玻片上，便于制片和观察。

另外，血液培养基又是较好的保存菌种用培养基，故由此培养基所制的菌落制片能保存较长时间。

三、器材圆褐固氮菌，枯草芽孢杆菌，灰色链霉菌，酿酒酵母，青霉的单个菌落平板，白色葡萄球菌（Staphylococcus albus）；Bouin氏固定液，0．01％结晶紫溶液，羊血或兔血，肉膏蛋白胨琼脂培养基，酒精等。

四、操作步骤1．观察圆褐固氮菌、枯草芽孢杆菌、灰色链霉菌、酿酒酵母、青霉的单个菌落特征，并按实验一菌落特征描述的方法记录结果。

2．血液琼脂培养基的制备：(1)成分pH7．6肉膏蛋白胨琼脂培养基10ml，无菌脱纤维羊血（或兔血）1ml。

(2)将肉膏蛋白胨琼脂培养基加热溶化。

(3)待冷至45℃时，以无菌操作加1ml无菌脱纤维羊血于培养基内，立即摇荡使血液和琼脂培养基充分混匀。

(4)迅速以无菌操作倒入平板，使成血液琼脂平板，注意不要产生气泡。

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(5)置37℃过夜，如无菌生长即可使用。

(6)将无菌的平板取出进行划线接种分离单个菌落，因要保持琼脂表面完整，接种改用圆头光滑玻棒，注意不要把琼脂划破。

第一章原核生物的形态、构造和功能2、试图示G+细菌和G-细菌细胞壁的主要构造，并简要说明其异同。

答：图示：G+细菌与G-细菌细胞壁成分的比较：占细胞壁干重的%成分G+细菌G-细菌肽聚糖含量很高（一般为90%）含量很低（5～20）磷壁酸含量较高（﹤30）0脂质一般无（﹤2）含量较高（约20）蛋白质0～少量含量较高3、试述革兰氏染色的机制。

答：革兰氏染色的机制为：通过结晶紫初染和碘液媒染后，在细菌的细胞膜内可形成不溶于水的结晶紫与碘的复合物。

G+由于其细胞壁较厚、肽聚糖网层次多和交联致密，故遇脱色剂乙醇处理时，因失水而使网孔缩小，在加上它不含类脂，故乙醇的处理不会溶出缝隙，因此能把结晶紫与碘的复合物牢牢留在壁内，使其保持紫色。

反之，G-细菌因其细胞壁薄、外膜层类脂含量高、肽聚糖层薄和交联度差，遇脱色剂乙醇后，以类脂为主的外膜迅速溶解，这时薄而松散的肽聚糖网不能阻挡结晶紫与碘复合物的溶出，因此细胞退成无色。

这时，再经沙黄等红色染料复染，就使G-细菌呈现红色，而G+细菌则仍保留最初的紫色（实为紫加红色）。

重要性：此法证明了G+和G-主要由于起细胞壁化学成分的差异而引起了物理特性的不同而使染色反应不同，是一种积极重要的鉴别染色法，不仅可以用与鉴别真细菌，也可鉴别古生菌。

4、何为“拴菌试验”？它的创新思维在何处？答：“拴菌”试验是1974年，美国学者西佛曼和西蒙曾设计的一个实验，做法是：设法把单毛菌鞭毛的游离端用相应抗体牢牢“拴”在载玻片上，然后在光学显微镜下观察细胞的行为。

因实验结果发现，该菌只能在载玻片上不断打转而未作伸缩“挥动”，故肯定了“旋转论”是正确的。

6、什么是缺壁细菌？试列表比较4类缺壁细菌的形成、特点和实践意义。

答：在自然界长期进化中和实验室菌种的自发突变中都会产生少数缺细胞壁的种类，或是用人为的方法通过抑制新生细胞壁的合成或对现成细胞壁进行酶解而获得人工缺壁的细菌统称为缺壁细菌。

比较如下：第二章 真核微生物的形态，构造和功能3、试对酵母菌的繁殖方式做一表解。