FDA水解酶(Fluorescein diacetate,FDA)试剂盒说明书

土壤酶活性测定几种水解酶：芳基硫酸酯酶（Arylsulphatase(EC 3.1.6.1)）, 葡萄糖苷酶（β-glucosidase(EC 3.2.1.21) ）和磷酸单酯酶（phosphmonoesterase(EC 3.1.3)）测定：这三种酶的测定都是依据人工合成底物（p-nitrophenyl sulphate, p-nitrophenyl glucoside and p-nitrophenyl phosphate,respectively）裂解后释放的p-nitrophenol 的量来测定。

Arylsulphatase(EC 3.1.6.1)：称取1g土（湿重），与4ml 500mM乙酸缓冲液（acetate buffer）（pH5.8）和1ml底物（25mM）混匀。

对照为4ml乙酸缓冲液加1ml灭菌蒸馏水。

土壤稍作涡旋振荡，置于旋转摇床20℃，200rpm培养2h。

然后，往样品中加1ml 无菌蒸馏水，往对照中加1ml底物。

再加入1ml 500mM 氯化钙和4ml 500mM 氢氧化钠以终止反应。

悬浮液在旋转摇床上20℃，200rpm振荡30min。

9464×g离心5min，然后在400nm波长下测定上清夜中所提取的p-nitrophenol 的颜色深度。

如果是在中性条件下测定，则用蒸馏水取代乙酸缓冲液。

标准曲线制作：用蒸馏水配制p-nitrophenol溶液，浓度范围0-50ug/ml。

β-glucosidase(EC 3.2.1.21)：缓冲液换为改进的通用缓冲液（modified universal buffer）(pH6.0);底物浓度25mM，提取液用Tris缓冲液（pH12.0）.phosphmonoesterase(EC 3.1.3): 缓冲液换为改进的通用缓冲液（modified universal buffer）(pH4.0和9.0)（分别测定酸性和碱性磷酸酯酶），底物浓度为15mM。

动物细胞β-半乳糖苷酶活性化学发光法定量检测试剂盒产品说明书（中文版）主要用途动物细胞β-半乳糖苷酶活性化学发光法定量检测试剂是一种旨在使用化学方法，快速有效地裂解动物细胞，通过高速离心，获得澄清细胞裂解悬液，在β-半乳糖苷酶反应体系里，以人工合成的二恶二酮类化合物作为发光底物，水解所产生的发光产物，通过发光探测仪（Luminometer）测定其相对冷光单位（RLU）的变化，以此进行测算酶活性的权威而经典的技术方法。

该技术经过精心研制、成功实验证明的。

广泛应用于基因组学、蛋白质组学和其它分子生物学研究。

其适用于转基因后的活体细胞外源性以及衰老细胞内源性半乳糖苷酶活性分析。

产品即到即用，性能稳定，参数优化，操作简便、高度敏感。

技术背景大肠杆菌的标志基因Lac Z编码β-半乳糖苷酶（β-galactosidase ；β-gal），在其催化作用下，半乳糖可从乳糖的水解作用中得到。

β-半乳糖苷酶非常稳定，对蛋白水解降解作用抗性强，且容易测试。

因此β-半乳糖苷酶成为目前最常用的报告基因，以评价载体转染的效果。

在衰老细胞内，显示β-半乳糖苷酶活性。

甲氧基二恶二酮氯代金刚烷苯基吡喃半乳糖苷（3- (4-methoxyspiro [1, 2-dioxetane-3, 2'- (5'-chloro) tricyclo [3.3.1.13,7]-decan]-4-yl-phenyl -ß-D-galacto pyranoside），是一种二恶二酮（dioxetane）类发光底物，以替代乳糖，在β-半乳糖苷酶（pH7.8）的催化下，去糖基化后，产生二恶二酮，进而在多聚苯甲基乙烷乙烯基苯甲氯化铵和荧光素钠（poly (benzyldimethylvinylbenzyl) ammonium chloride and sodium fluorescein）的启动反应作用下，同时pH调整到12，由此二恶二酮分解，发出冷光，在冷光仪（475nm波长）下，检测发光信号，来测定β-半乳糖苷酶的活性。

细胞膜流动性（f1uidity）PDA荧光检测试剂盒产品说明书（中文版）主要用途细胞膜流动性（f1uidity）PDA荧光检测试剂是一种旨在通过苯并在癸酸荧光染料，选择性地与细胞膜整合，并与之产生空间交互作用，形成激基缔合物，其荧光散发波长的转移，即荧光比值的增强或减弱，来分析膜流动性的权威而经典的技术方法。

该技术经过精心研制、成功实验证明的。

其适用于各种人体或动物贴壁或悬浮细胞膜流动性的动力学检测。

产品严格无菌，即到即用，活体检测，操作简易，性能稳定。

技术背景细胞膜和细胞质微管以及微丝的动力学特征和微泡和囊泡内脂质的流动动力学，即流变学（rheo1ogica1）细胞功能，受到细胞膜流动性（f1uidity）或粘性（Visssity）调节，包括细胞膜酶系的活化，微管和微丝的特定装配或流动，化学引诱物受体亲和力的强化，膜结构和功能的作用等。

一旦调节失衡，会导致病理演变或膜性变异。

苯并花癸酸（PyrenedeCanOiCaCid：PDA）为多环芳香IS（po1ycyc1icaromatichydrocarbon）化合物，一种亲脂性苯并花荧光探针染料，用于膜生物物理学研究：第一，具有亲脂性；第二，与细胞膜脂质具有类似性（ana1og）,可以与细胞膜整合；第三，进入膜结构空间后，与之产生交互作用，形成激基缔合物（eximer）,其荧光散发波长山372nm转移到470nm,通过缔合物和单体的荧光比值（ratio）,分析膜流动性强弱，包括动力学，影响因子等。

产品内容染色液（Reagen1A）微升稀糅液（Reagen1B）毫升清理液（Reagen1C）毫升强化液（Reagen1D）微升产品说明书1份保存方式保存清理液（ReagentC）在4℃冰箱里，其余的保存在一20℃冰箱里；染色液（Reagen1A）避免光照; 有效保证6月用户自备胰蛋白酶乙二胺四乙酸混合液（GMS12024）：用于细胞脱离操作完全细胞培养液（GMS12052）：用于细胞脱落操作1.5毫升离心管：用于样品操作的容器微型台式离心机：用于样品操作培养箱：用于染色孵育（共聚焦）荧光显微镜：用于荧光定性分析比色皿或黑色96孔板：用于荧光定量分析的容器荧光分光光度仪或荧光酶标仪：用于荧光定量分析细胞流式仪：用于荧光分析实验步骤实验开始前，将一20℃冰箱里的试剂盒中的染色液（ReagentA）置.入冰槽里融化，稀释液（Reagentin和强化液（ReagentD）放进25℃恒温水槽里预热。

Beijing Solarbio Science & Technology Co., LtdTel: 400-968-6088过氧化物酶（POD）活性检测试剂盒说明书微量法注意：本产品试剂有所变动，请注意并严格按照该说明书操作。

货号：BC0095规格：100T/96S产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系索莱宝工作人员。

试剂名称规格保存条件提取液液体110 mL×1瓶2-8℃保存试剂一液体20 mL×1瓶2-8℃保存试剂二液体0.04 mL×1瓶2-8℃保存试剂三液体3 mL×1瓶2-8℃保存溶液的配制：1、试剂二：液体置于试剂瓶内EP管中，使用前需先离心。

2、试剂二工作液：取0.01mL试剂二加入3.2 mL试剂一混合备用（约106T），现配现用，也可根据样本量按比例配制。

产品说明：POD（EC 1.11.1.7）广泛存在于动物、植物、微生物中，可催化过氧化氢氧化酚类和胺类化合物，具有消除过氧化氢和酚类、胺类毒性的双重作用。

POD在有过氧化氢存在的情况下，能使愈创木酚发生氧化，生成茶褐色物质，该物质在470nm有最大光吸收。

注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。

如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。

需自备的仪器和用品：可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、可调式移液器、微量玻璃比色皿/96孔板、研钵/匀浆器、冰和蒸馏水。

操作步骤：一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）1、细菌、细胞或组织样本的制备细菌或培养细胞：先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量（104个）：提取液体积（mL）为500~1000：1的比例（建议500万细菌或细胞加入1mL提取液），超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率200W，超声3s，间隔10s，重复30次）；8000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。

植物类黄酮-3’,5’-羟化酶（F3 ’ ,5 ’H ）试剂盒（ELISA）使用说明书⚫本试剂盒用于体外定量检测组织、细胞及相关液体样本中植物类黄酮-3’,5’-羟化酶（F3 ’ ,5 ’H ）的含量。

⚫有效期：6个月⚫保存条件：2-8℃⚫本试剂盒仅供科研使用，不得用于临床诊断实验原理试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。

往预先包被植物类黄酮-3’,5’-羟化酶（F3 ’ ,5 ’H ）捕获抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻底洗涤。

用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅和样品中的植物类黄酮-3’,5’-羟化酶（F3 ’ ,5 ’H ）呈正相关。

用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），计算样品浓度。

样本处理及要求1. 血清：将收集于血清分离管的全血标本在室温放置2小时或4℃过夜，然后1000×g离心20分钟，取上清即可，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。

2. 血浆：用EDTA或肝素作为抗凝剂采集标本，并将标本在采集后的30分钟内于2-8℃1000×g离心15分钟，取上清即可检测，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。

3. 组织匀浆：用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织，去除残留血液（匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果），称重后将组织剪碎。

将剪碎的组织与对应体积的PBS（一般按1:9的重量体积比，比如1g的组织样品对应9mL的PBS，具体体积可根据实验需要适当调整，并做好记录。

推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂）加入玻璃匀浆器中，于冰上充分研磨。

为了进一步裂解组织细胞，可以对匀浆液进行超声破碎，或反复冻融。

最后将匀浆液于5000×g离心5~10分钟，取上清检测。

4. 细胞培养物上清或其它生物标本：请1000×g离心20分钟，取上清即可检测，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。

果胶酶活性检测试剂盒说明书微量法货号：BC2635规格：100T/48S产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系索莱宝工作人员。

试剂名称规格保存条件提取液液体100mL×1瓶4℃保存试剂一液体25mL×1瓶4℃保存试剂二液体20 mL×1瓶4℃保存标准品粉剂×1支4℃保存溶液的配制：1、试剂一：若溶液中有不溶解物质，可以50℃水浴溶解。

2、标准品：10mg 半乳糖醛酸。

临用前加入0.943mL 蒸馏水，配成50μmol/mL 的标准液。

产品说明：果胶酶（pectinase ）是分解果胶的酶类，包括原果胶酶，果胶酯酶，多聚半乳糖醛酸酶和果胶裂解酶四大类，广泛存在于高等植物果实和微生物中，是水果加工中最重要的酶。

果胶酶水解果胶生成半乳糖醛酸，半乳糖醛酸与DNS 试剂反应生成在540nm 有特征吸收峰的棕红色物质，测定540nm 处吸光值变化可计算得果胶酶活性。

注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。

如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。

需自备的仪器和用品：可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、微量玻璃比色皿/96孔板、可调式移液枪、研钵/匀浆器、冰和蒸馏水。

操作步骤：一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）1、组织：按照组织质量（g ）：提取液体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g 组织，加入1mL 提取液）进行冰浴匀浆，然后10000g ，4℃，离心10min ，取上清置于冰上待测。

2、菌类：按照细菌数量（104个）：提取液体积（mL ）为500~1000：1的比例（建议500万细菌加入1mL 提取液），冰浴超声波破碎细菌（功率300w ，超声3秒，间隔7秒，总时间3min ）；然后10000g ，4℃，离心10min ，取上清置于冰上待测。

3、液体：直接检测。

货号: QS2402 规格：50管/48样脂肪酶（Lipase ，LPS ）活性试剂盒说明书可见分光光度法注意：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。

测定意义：LPS又称甘油酯水解酶，催化甘油三酯水解生成脂肪酸和甘油（或者甘油二酯和单酯）。

LPS广泛的存在于各种生物中。

血清中LPS的异常增高常见于胰腺炎和胰腺癌。

测定原理：LPS催化油酯水解成脂肪酸，利用铜皂法测定脂肪酸生成速率，即可计算LPS活性。

自备实验用品及仪器：研钵、台式离心机、震荡混匀器、可见分光光度计、1mL玻璃比色皿、可调式移液枪、冰和蒸馏水。

试剂组成和配制：试剂一：液体×1瓶，4℃保存。

试剂二：液体×1瓶，4℃保存。

每次使用前用震荡混匀器剧烈震荡20min。

试剂三：液体×1瓶，4℃保存。

试剂四：液体×1瓶，4℃保存。

标准品：液体×1瓶，10 µmol/mL的标准溶液，4℃保存。

临用前加入3.168 mL试剂三，充分溶解。

粗酶液提取：1.组织：按照组织质量（g）：试剂一体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL试剂一）进行冰浴匀浆。

12000g，4℃离心10min，取上清置冰上待测。

2.细菌、真菌：按照细胞数量（104个）：试剂一体积（mL）为500~1000：1的比例（建议500万细胞加入1mL试剂一），冰浴超声波破碎细胞（功率300w，超声3秒，间隔7秒，总时间3min）；然后12000g，4℃，离心10min，取上清置于冰上待测。

3.血清等液体: 直接检测。

LPS测定操作：1.分光光度计预热30 min以上，调节波长到710 nm，蒸馏水调零。

2. 试剂一和试剂二置于37℃水浴预热30min以上。

3. 空白管：取5 mL离心管，依次加入650 μL试剂一250 μL试剂二和100 μL蒸馏水，置于37℃震荡反应10 min；加入1.2mL试剂三，反复震荡混匀10min，25℃，2000g离心10 min；小心吸取上层溶液1 mL，加入1.5mL离心管中，再加入500μL试剂四，反复震荡5min；25℃，2000g离心10 min，小心吸取上层溶液800 μL，加入1mL玻璃比色皿，于710nm处测定吸光值。

本试剂盒只能用于科学研究，不得用于医学诊断小鼠小鼠（（MouseMouse））肿瘤坏死因子可溶性受体肿瘤坏死因子可溶性受体ⅠⅠ（TNFsR-TNFsR-ⅠⅠ）ELISA检测试剂盒使用说明书检测原理试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。

往预先包被肿瘤坏死因子可溶性受体Ⅰ（TNFsR-Ⅰ）抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻底洗涤。

用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅和样品中的肿瘤坏死因子可溶性受体Ⅰ（TNFsR-Ⅰ）呈正相关。

用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度。

样品收集、处理及保存方法1.血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。

2.血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。

3000转离心30分钟取上清。

3.细胞上清液：3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。

4.组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。

3000转离心10分钟取上清。

5.保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

自备物品1.酶标仪（450nm）2.高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL3.37℃恒温箱操作注意事项1.试剂盒保存在2-8℃，使用前室温平衡20分钟。

从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶，这属于正常现象，水浴加热使结晶完全溶解后再使用。

2.实验中不用的板条应立即放回自封袋中，密封（低温干燥）保存。

3.浓度为0的S0号标准品即可视为阴性对照或者空白；按照说明书操作时样本已经稀释5倍，最终结果乘以5才是样本实际浓度。

4.严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。

5.所有液体组分使用前充分摇匀。

过氧化氢酶（CAT ）活性检测试剂盒说明书紫外分光光度法注意：本产品试剂有所变动，请注意并严格按照该说明书操作。

货号：BC0200规格：50T/48S产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系索莱宝工作人员。

试剂名称规格保存条件提取液液体60 mL×1瓶4℃保存试剂一液体60 mL×1瓶4℃保存试剂二液体320 μL×1瓶4℃保存溶液的配制：1、试剂二：液体置于试剂瓶内EP 管中，使用前需先离心。

2、检测工作液的配制：取100μL 试剂二加入20mL 试剂一，充分混匀（约20T ），作为工作液，现用现配；或者根据比例配制。

产品说明：CAT(EC 1.11.1.6)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，是最主要的H 2O 2清除酶，在活性氧清除系统中具有重要作用。

H 2O 2在240nm 下有特征吸收峰，CAT 能够分解H 2O 2，使反应溶液240nm 下的吸光度随反应时间而下降，根据吸光度的变化率可计算出CAT 活性。

注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。

如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。

需自备的仪器和用品：紫外分光光度计、台式离心机、可调式移液器、1mL 石英比色皿、研钵/匀浆器、冰和蒸馏水。

操作步骤：一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）1、细菌、细胞或组织样本的制备a 、细菌或培养细胞：收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量（104个）：提取液体积（mL ）为500-1000:1的比例（建议500万细菌或细胞加入1mL 提取液），超声波破碎细菌或细胞（功率200w ，超声3秒，间隔10秒，重复30次）；8000g 4℃离心10分钟，取上清，置冰上待测。

b 、组织：按照组织质量（g ）：提取液体积（mL ）为1：5-10的比例（建议称取约0.1g 组织，加入1mL提取液），进行冰浴匀浆。