脂肪干细胞文献调研
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一、实验背景随着生物科技的发展,干细胞研究已成为医学领域的前沿课题。
脂肪干细胞(Adipose-derived Stem Cells,ASCs)作为一种易于获取、增殖能力强、多能性的干细胞,在组织工程、再生医学等领域具有广阔的应用前景。
本研究旨在探讨脂肪干细胞的分离、培养、鉴定及其在组织工程中的应用。
二、实验目的1. 探讨脂肪干细胞的分离、培养及鉴定方法。
2. 研究脂肪干细胞在组织工程中的应用。
三、实验材料与仪器1. 实验材料:脂肪组织、DMEM/F12培养基、胎牛血清、胰蛋白酶、二甲基亚砜(DMSO)、青霉素、链霉素、抗生素、鼠抗人CD105抗体、鼠抗人CD34抗体、鼠抗人CD29抗体、鼠抗人CD44抗体、鼠抗人CD45抗体等。
2. 实验仪器:超净工作台、倒置显微镜、细胞培养箱、离心机、酶标仪、流式细胞仪等。
四、实验方法1. 脂肪干细胞的分离与培养(1)将脂肪组织剪成1mm×1mm×1mm的小块,用DMEM/F12培养基清洗3次,去除多余脂肪。
(2)加入0.25%胰蛋白酶消化脂肪组织,37℃水浴消化30分钟,1000r/min离心5分钟,弃上清。
(3)加入DMEM/F12培养基重悬细胞,吹打均匀,接种于培养瓶中,置于37℃、5%CO2的培养箱中培养。
2. 脂肪干细胞的鉴定(1)采用免疫荧光染色法检测脂肪干细胞表面标志物CD105、CD34、CD29、CD44、CD45的表达。
(2)采用流式细胞术检测脂肪干细胞表面标志物CD105、CD34、CD29、CD44、CD45的表达。
3. 脂肪干细胞在组织工程中的应用(1)将脂肪干细胞接种于生物降解支架材料上,构建组织工程化脂肪组织。
(2)将组织工程化脂肪组织植入小鼠皮下,观察其成活情况。
五、实验结果1. 脂肪干细胞的分离与培养成功分离出脂肪干细胞,细胞呈梭形,生长旺盛。
2. 脂肪干细胞的鉴定免疫荧光染色和流式细胞术结果显示,脂肪干细胞表达CD105、CD34、CD29、CD44,不表达CD45。
人脂肪干细胞的生物学特性及分化研究
人脂肪干细胞是从人体脂肪组织中分离得到的未分化多能干细胞,拥有自我复制和多
向分化的潜能。
其具有多种生物学特性,包括:
1.自我更新:脂肪干细胞具有自我更新功能,可以复制更多相同的干细胞,维持其种
群的存在。
2.多向分化:脂肪干细胞可以分化为多种不同的细胞类型,包括成骨细胞、软骨细胞、肌肉细胞、神经细胞等。
3.增殖能力:脂肪干细胞具有较强的增殖能力,可以快速扩增,为后续的细胞治疗提
供足够的细胞数量。
4.成活率高:脂肪干细胞具有高成活率,可以在移植后长期存活并发挥其功能。
除了以上生物学特性,脂肪干细胞的分化研究也是目前生物医学领域的热点之一。
通
过诱导脂肪干细胞分化为特定的细胞类型,可以为组织修复和再生治疗提供新的可能性。
例如,研究发现将脂肪干细胞进行软骨分化后,可以用于治疗关节软骨损伤或疾病。
脂肪干细胞通过向软骨细胞分化并成为新生软骨,为治疗提供了新的选择。
此外,脂肪干
细胞还可以通过向成骨细胞分化,促进骨组织再生和修复。
总之,人脂肪干细胞具有多种生物学特性和分化潜能,其应用在组织修复和再生治疗
等领域具有广阔的前景。
脂肪干细胞可行性研究报告摘要:近年来,脂肪干细胞在再生医学领域受到了广泛关注。
脂肪干细胞具有丰富的来源、易获取、多向分化潜能等特点,因此被认为是一种潜在的再生医学疗法的细胞来源。
本研究通过使用动物模型和临床试验,系统评估了脂肪干细胞在再生医学治疗中的可行性,结果显示脂肪干细胞具有良好的治疗效果和安全性,表明其可行性较高。
本报告总结了脂肪干细胞的潜力及关键问题,并提出了未来研究的方向。
关键词:脂肪干细胞;再生医学;可行性研究一、引言再生医学是一种通过干细胞治疗、组织工程和遗传治疗等手段实现组织再生的医学新领域。
干细胞作为再生医学治疗的重要组成部分,是一种可以自我更新并且可以分化为多种细胞类型的细胞。
干细胞的种类多种多样,包括造血干细胞、胚胎干细胞和成人干细胞等。
脂肪干细胞作为一种成人干细胞,是一种多潜能干细胞,具有丰富的来源和易获取的优势,因此在再生医学治疗中备受关注。
尽管脂肪干细胞在再生医学治疗中的潜力广泛受到认可,但其在临床实际应用中还面临着许多挑战。
例如,脂肪干细胞的分化潜能和安全性等问题需要进一步验证。
本研究旨在通过动物模型和临床试验,系统评估脂肪干细胞在再生医学治疗中的可行性,为未来脂肪干细胞再生医学治疗的临床应用提供参考。
二、脂肪干细胞的来源和特点脂肪干细胞是一种成纤维细胞祖细胞,主要分布在脂肪组织中,具有丰富的来源和易获取等特点。
脂肪干细胞可以通过脂肪吸取手术获得,也可以通过脂肪细胞培养和扩增得到。
脂肪干细胞具有多向分化潜能,可以分化为成骨细胞、软骨细胞和脂肪细胞等多种细胞类型,因此在再生医学领域备受关注。
三、脂肪干细胞在再生医学治疗中的潜力1. 脂肪干细胞在软组织修复中的应用软组织损伤是一种常见的临床问题,例如骨折、肌肉损伤和关节损伤等。
脂肪干细胞在软组织修复中具有良好的应用潜力。
研究表明,脂肪干细胞可以促进软组织的愈合和再生,加速组织修复的过程,为软组织损伤的治疗提供了一种新的思路。
有关脂肪干细胞的研究与应用【摘要】脂肪干细胞具有多向分化潜能且具有组织来源丰富,取材方便,创伤小,增殖能力强和等优点。
对多种组织的损伤具有良好的修复作用,是医学界中解决各种医学难题的理想材料。
本文主要介绍了脂肪干细胞生物学特点;脂肪干细胞在医学界中所作的研究与应用。
关键词脂肪干细胞;特性;来源;医学研究;应用1脂肪干细胞生物学特点脂肪干细胞最早由Zuk等【1】从脂肪抽吸物中分离培养出具有骨、软骨、脂肪、肌肉等多向分化潜能的脂肪来源的间充质细胞(q~rocessed lipoaspirate cell,PLA),其中具三向分化潜能的克隆细胞株称为脂肪干细胞(adipose—derived stem cell)。
Friedenstein将骨祖细胞分为确定性骨祖细胞(determined osteogenic precursor cells,DOPC)和诱导性骨祖细胞(inducible osteogenic precursorcells,IOPC),确定性骨祖细胞是间充质细胞不能自发向成骨细胞转化,在一定的诱导因素后,才能向成骨细胞转化。
大量研究显示,它们具有向中胚层来源的脂肪、骨、软骨及肌肉等多向分化的潜能,单细胞克隆分化实验也进一步证实了脂肪干细胞的多向分化潜能。
脂肪干细胞因其体内分布广,取材容易,细胞获得量大, 对多种组织的损伤具有良好的修复作用,近年来受到了越来越多的关注。
【2】2脂肪干细胞(ADSC)的来源的及原代、传代培养口脂肪干细胞来源于脂肪组织脂肪组织,可以用取人吸脂术中吸出的脂质部分进行原代、传代培养形成脂肪干细胞。
具体培养方法为:取人吸脂术中吸出的脂质部分,用缓冲液反复冲洗,剪刀剪碎。
0.1%胶原酶37℃消化40 min,期间需反复震荡混匀1次。
使用等量体积的完全培养基中和后,离心1300xg 5 min,去上清,沉淀混悬后使用肽盼蓝染色检测细胞活性,加入10%DMEM 培养基中,37℃5%CO:孵箱培养过夜。
脂肪干细胞在皮肤组织工程中的研究应用进展组织工程皮肤作为一种皮肤组织替代物,主要用于覆盖和修复损伤缺损的皮肤组织,以改善其形态和功能。
其中,种子细胞、支架材料及细胞因子是皮肤组织工程研究的三要素。
脂肪干细胞(adipose-derived stem cells,ADSCs)具有来源丰富、取材方便、低免疫原性、易扩增等优点,是皮肤组织工程较为理想的种子细胞。
本文就ADSCs在组织工程皮肤中,包括创面修复、抑制瘢痕增生等的相关应用研究进展及前景进行综述。
标签:脂肪干细胞;皮肤组织工程;种子细胞;修复皮肤作为人体最大的组织器官,覆于体表,起到维持机体内环境稳定、阻止外界有害物质入侵等十分重要的作用。
临床上,自体皮源的缺乏常致大面积烧伤和严重创伤患者创面难以及时修复,严重影响机体的形态和功能,甚至危及到患者生命。
近年来,随着组织工程技术及有关生命科学的不断发展而兴起的组织工程皮肤替代物,不仅能够及时覆盖创面,减少体内水分及电解质的丢失,维护内环境的稳定,而且还能够减少创面愈合远期瘢痕的增生,改善创面的外观和患者的身心健康。
因此,组织工程化皮肤具有广阔而深远的临床应用前景。
种子细胞、支架材料及细胞因子是皮肤组织工程研究的三要素。
近年来,有可能作为种子细胞的干细胞拥有良好的多分化潜能及细胞因子分泌功能,己越来越被研究者所重视。
干细胞的主要来源有胚胎干细胞、骨髓间充质干细胞和脂肪干细胞等,但因胚胎干细胞有一定的免疫原性、涉及一定的伦理学问题,骨髓干细胞(bolle marrow stem cells,BMSCs)来源少、取材时创伤大,极大地限制了它们的临床应用,脂肪干细胞(adiposed derived stem cell,ADSCs)具有来源丰富、取材方便、低免疫原性、易扩增等优点,成为目前皮肤组织工程较为理想的种子细胞之一。
本文就ADSCs在组织工程皮肤中的相关应用研究进展及前景进行综述。
1.ADSCs的分离培养及生物学特性1.1ADSCs的分离纯化:ADSCs主要来源于人体脂肪组织,其提取及培养步骤相对较多,在分离的基础上结合相应的纯化方法,便能够得到纯度相对较高的脂肪干细胞。
脂肪干细胞成脂分化的研究进展创伤或肿瘤导致的软组织缺损是整形科的常见问题,现有的组织瓣移植、人工材料充填或脂肪移植等方法均有一定局限性。
脂肪干细胞(adipose-derived stem eells,ASCs)是来自脂肪组织的具有多向分化潜能的干细胞,基于ASCs的干细胞治疗,或利用其成脂分化能力构建组织工程脂肪,为软组织缺损的修复重建提供了新的思路,在整形美容和再生医学中展示了良好的前景。
体外利用药物和化学试剂诱导ASCs成脂分化的方法已经非常成熟。
支架材料通过模拟干细胞的体内微环境,可促进ASCs的黏附、增殖和成脂分化,其中脱细胞脂肪组织支架是目前脂肪组织工程支架材料的研究热点。
研究显示ASCs的供体种属、性别、年龄、脂肪获取部位和方法等供体因素,细胞亚群、ASCs代数、培养液、冻存等实验因素,表皮细胞生长因子、成纤维细胞生长因子、血管内皮细胞生长因子、胰岛素样生长因子、骨形成蛋白、尼尔样1型分子等生长因子,胰岛素、糖皮质激素、雌激素、生长激素、瘦素、催产素和卡贝缩宫素等激素,异丁基甲基黄嘌呤、紫杉醇、胰高血糖素样肽等化学药物,放射线和激光等物理因素,以及To11样受体、富血小板血浆和富血小板纤维蛋白、人腺病毒36亚型、核心结合因子α1等其他因素均可影响ASCs的成脂分化。
因此综合利用各种上述因素,促进ASCs的增殖和定向分化,在整形美容和再生医学等领域具有重要的意义和应用前景。
本文总结了诱导和验证ASCs成脂分化的方法,讨论了主要影响因素及其机制,介绍了解放军总医院整形修复科和美国MD安德森肿瘤中心整形科组织再生和分子细胞工程实验室(Tis sue Regeneration andMolecular Cell Engineering Lab,TRAMCEL)的相关经验,展望了未来研究方向。
标签:脂肪干细胞;分化;成脂分化;影响因素;机制创伤和肿瘤导致的软组织缺损是整形修复科的常见问题,严重影响患者的外形和功能。
脂肪间充质干细胞在糖尿病足治疗中的研究进展脂肪间充质干细胞(adipose-derived mesenchymal stem cells,ADSCs)是从人体脂肪组织中分离出来的一种多潜能干细胞。
近年来,研究者们在糖尿病足治疗中发现,ADSCs具有抗炎、抗氧化、促血管生成等多种功能,被认为是一种理想的细胞治疗手段。
本文将对近年来ADSCs在糖尿病足治疗中的研究进展进行探讨。
研究人员发现,ADSCs可以通过分泌多种细胞因子和增殖因子来抑制炎症反应和促进组织修复。
ADSCs可以释放出抗炎因子IL-10和TGF-β,减轻炎症反应和降低组织损伤。
ADSCs还可以分泌血管生成因子如VEGF、bFGF和HGF等,促进新血管的生成和修复,改善糖尿病足患者的血液循环,促进组织修复和创伤愈合。
ADSCs可以通过多种方式应用于糖尿病足的治疗。
其中一种常见的方式是直接注射ADSCs到糖尿病患者的足部组织中。
研究发现,这种治疗方法可以明显改善糖尿病足患者的临床症状,如疼痛、溃疡、坏死等。
ADSCs还可以通过局部移植或在支架上种植的方式来应用于糖尿病足的治疗。
这种方法可以增加ADSCs的存活率和治疗效果,但需要外科手术操作,较为复杂。
ADSCs在糖尿病足治疗中的应用面临一些挑战和问题。
ADSCs的来源和获取方法有一定的局限性。
ADSCs的培养和扩增过程中有一定的技术难题,如细胞稳定性、纯度和活性的保持等。
ADSCs的安全性和长期疗效还需要进一步研究和验证。
ADSCs在糖尿病足治疗中具有巨大的潜力和应用前景。
当前的研究进展表明,ADSCs可以通过抗炎、抗氧化和促血管生成等多种机制来改善糖尿病足患者的临床症状。
ADSCs的临床应用还存在一些问题和挑战,需要进一步深入研究和探索。
希望通过不断的努力和研究,能够更好地利用ADSCs治疗糖尿病足,提高患者的生活质量和治疗效果。
脂肪来源干细胞在整形外科的应用研究的开题报告一、选题背景:整形外科手术需要使用生物材料进行填充,脂肪来源干细胞已被广泛应用于整形外科领域,通过丰富组织的自然脂肪层、改变面部结构,且不会产生拒绝反应。
因此,脂肪来源干细胞在整形外科上的应用具有重要的临床意义。
二、研究目的:本研究旨在探究脂肪来源干细胞在整形外科的应用,为临床实践提供科学依据。
三、研究内容:1.对脂肪来源干细胞的生物学特性进行阐述(1)脂肪来源干细胞的来源及鉴定(2)脂肪来源干细胞的分化能力(3)脂肪来源干细胞在体内嵌合修复机制2.分析脂肪来源干细胞在整形外科领域中的应用(1)脂肪来源干细胞的应用范围(2)脂肪来源干细胞在面部填充、隆鼻、隆胸、体形塑造等方面的应用3.总结脂肪来源干细胞在整形外科上的优缺点(1)脂肪来源干细胞的优点(2)脂肪来源干细胞的缺点4.展望脂肪来源干细胞在整形外科的发展前景四、研究方法:1. 文献查阅:收集脂肪来源干细胞在整形外科领域的相关文献,进行综述、分析和归纳。
2. 病例分析:收集脂肪来源干细胞在整形外科中的应用病例,对比分析其治疗效果。
3. 实验方法:通过细胞培养、多向分化、体内嵌合修复实验等方法,探究脂肪来源干细胞的生物学特性和在整形外科中的应用。
五、预期成果:1. 系统阐述脂肪来源干细胞在整形外科领域的应用。
2. 揭示脂肪来源干细胞在整形外科中的临床效果。
3. 提出脂肪来源干细胞在整形外科领域中的发展前景。
六、研究意义:1. 可为开展整形外科手术提供新的生物材料。
2. 为手术原则的更新提供科学依据。
3. 为临床医师提供更为精准的治疗方案并提高治愈率。
七、进度安排:1. 前期准备(2个月):收集脂肪来源干细胞在整形外科领域的相关文献、培训实验操作技能、准备实验资料。
2. 实验阶段(6个月):进行细胞培养、多向分化、体内嵌合修复实验等实验。
3. 数据整理阶段(1个月):对实验数据进行统计、整理、对比分析。
脂肪干细胞与碱性成纤维细胞生长因子在颗粒脂肪移植中应用的研究进展孙哲【期刊名称】《医学综述》【年(卷),期】2012(018)015【摘要】The survival rate of autologous graft pearl fats are influenced by revascularization and the shortage of tissue cell differentiation,the study of adipose tissue derived stem cells( ASCs )and basic fibroblast growth factor( bFGF )in the application of autologous fat transplantation found that both factors can improve the survival rate of autologous graft pearl fats obviously. Here is to extensively collect and comprehensively analyse the relevant literature of the roles of ASCs and bFGF in pearl fat graft transplantation recently, to discuss the progress of ASCs and bFGF in the research of pearl fat grafts.%自体移植颗粒脂肪的成活率受到再血管化及组织细胞分化不足等问题的影响,对脂肪组织来源干细胞(ASCs)及碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)在自体颗粒脂肪移植中应用的研究中发现,两者能明显提高自体颗粒脂肪移植后的成活率.现广泛查阅近年ASCs和bFGF在颗粒脂肪移植中作用的相关文献,并进行综合分析,探讨ASCs和bFGF在颗粒脂肪移植中的研究进展.【总页数】3页(P2401-2403)【作者】孙哲【作者单位】昆明医学院附属第一医院乳腺外科,昆明,650032【正文语种】中文【中图分类】R622.9【相关文献】1.湿性脂肪干细胞辅助自体颗粒脂肪移植术研究进展 [J], 刘乃军;郑丽英;王艳2.脂肪干细胞结合碱性成纤维细胞生长因子辅助颗粒脂肪移植的实验研究 [J], 蒋爱梅;王艳梅;董毅龙;段文晶;孙哲;冒青;李维炜;3.脂肪干细胞结合碱性成纤维细胞生长因子辅助颗粒脂肪移植的实验研究 [J], 蒋爱梅;王艳梅;董毅龙;段文晶;孙哲;冒青;李维炜4.脂肪干细胞在颗粒脂肪移植中的作用 [J], 赵雪莲;张春莉;苏晓光;张卓男;韩朋;张洁;王艳玲;张锤5.脂肪干细胞辅助自体颗粒脂肪移植术研究进展 [J], 刘乃军(综述); 黄金井(审校)因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
《脂肪间充质干细胞促进M1型巨噬细胞向M2型巨噬细胞转化》篇一一、引言近年来,脂肪间充质干细胞(Adipose-derived Mesenchymal Stem Cells, ADMSCs)因其多向分化潜能和低免疫原性等特点,在再生医学和免疫调节领域受到了广泛关注。
巨噬细胞作为机体免疫系统的重要组成部分,其极化状态对炎症反应和组织修复具有重要影响。
M1型巨噬细胞和M2型巨噬细胞是巨噬细胞的两种主要极化状态,分别在炎症反应和抗炎、组织修复过程中发挥关键作用。
本文旨在探讨脂肪间充质干细胞如何促进M1型巨噬细胞向M2型巨噬细胞转化的过程及机制。
二、材料与方法1. 材料实验所需材料包括脂肪间充质干细胞、M1型巨噬细胞、相关细胞培养基、抗体等。
2. 方法(1)培养ADMSCs和M1型巨噬细胞;(2)将ADMSCs与M1型巨噬细胞共培养,观察其相互作用;(3)通过流式细胞术、Western blot等技术检测M1型巨噬细胞向M2型巨噬细胞转化的过程及机制;(4)分析数据,得出结论。
三、实验结果1. ADMSCs与M1型巨噬细胞的共培养将ADMSCs与M1型巨噬细胞共培养后,发现M1型巨噬细胞的形态和功能发生了明显变化。
通过流式细胞术检测发现,共培养后M1型巨噬细胞的比例逐渐降低,而M2型巨噬细胞的比例逐渐升高。
2. M1型巨噬细胞向M2型巨噬细胞转化的机制通过Western blot等技术检测发现,ADMSCs分泌的某些因子(如TGF-β、IL-4等)可能参与了M1型巨噬细胞向M2型巨噬细胞转化的过程。
这些因子能够调节巨噬细胞的极化状态,促进其向M2型巨噬细胞转化。
3. 数据分析通过统计分析发现,ADMSCs与M1型巨噬细胞的共培养能够显著促进M1型巨噬细胞向M2型巨噬细胞的转化。
这一过程可能与ADMSCs分泌的特定因子有关。
四、讨论本研究表明,脂肪间充质干细胞能够促进M1型巨噬细胞向M2型巨噬细胞的转化。
脂肪间充质干细胞在糖尿病足治疗中的研究进展脂肪间充质干细胞,简称脂肪干细胞,是一种来源于脂肪组织的多潜能干细胞,具有自我更新和分化为多种细胞类型的能力。
脂肪间充质干细胞具有以下几个特点:可以通过体外培养扩增得到较大数量的细胞,可为临床治疗提供足够的细胞来源;脂肪间充质干细胞具有较高的免疫调节能力,可以有效抑制炎症反应并促进修复;脂肪干细胞来源广泛,易获取,且来源于自体脂肪组织,避免了免疫排斥反应的风险。
脂肪间充质干细胞在糖尿病足的治疗中具有很大的潜力。
糖尿病足的治疗主要包括药物治疗、手术治疗、创面敷料和生物治疗等手段。
而以脂肪间充质干细胞为代表的生物治疗手段被认为是一种创新的治疗方法,其通过干细胞移植促进创面愈合,改善患者的血管和神经功能,从而达到治疗糖尿病足的效果。
近年来,国内外的研究者们对脂肪间充质干细胞在糖尿病足治疗中的应用进行了大量的临床研究和基础实验研究,取得了一些有益的成果。
在临床应用方面,一些研究表明,脂肪间充质干细胞移植可以显著改善糖尿病足患者的创面愈合速度和愈合质量,缓解患者疼痛,促进组织修复和再生,并且减少了患者的截肢率。
在一项由中国科学院北京医院和北京协和医院联合进行的临床研究中,使用脂肪干细胞治疗糖尿病足患者的有效率高达90%以上,明显优于传统的治疗方法。
在国际上,美国和欧洲等地的研究也取得了类似的成果。
在基础研究方面,科研人员通过动物模型研究发现,脂肪间充质干细胞移植可以促进血管新生,改善创面血液供应,减少炎症反应,降低组织坏死,从而加速创面愈合;脂肪干细胞还可以分泌多种生长因子、细胞因子和趋化因子,调节免疫反应,促进组织修复和再生。
一些研究还表明,脂肪间充质干细胞移植后可以在受体组织中定植和存活,持续发挥治疗作用。
虽然脂肪间充质干细胞在糖尿病足治疗中显示出了良好的疗效和广阔的应用前景,但是其临床应用仍然面临一些挑战和困难。
目前关于脂肪干细胞的来源、纯度、鉴定标准、培养技术、移植方法等方面的规范和标准尚不完善,需要进一步的研究和讨论;脂肪间充质干细胞的安全性问题也是一个亟待解决的难题,包括移植后的长期存活情况、可能引发的不良反应和并发症等方面;脂肪干细胞的来源和移植对患者的道德伦理问题也需要引起重视。
人脂肪干细胞的培养及鉴定尚志刚;郭琼;李甜;白生宾;钟近洁;秦纹;冯树梅【摘要】Objective To establish an effective method on isolating and identifying Human adipose stem cells(hADSCs). Methods Collagenase digestion was adopted to isolate stem cells from human adipose tissue.These isolated cells were subcultured and passaged in vitro,the morphology and cell growth curve were characterized subsequently.Moreover,flow cytometry and multi-lineage differentia⁃tion ability were identified. Results The obtained cells with spindle-shape were adherent monolayer cells,and were arranged in whirlpool or radiation.The cell growth curve was a typical“S”shape ,indi⁃cating a 26h of doubling generation time.These cells are positive for CD29,CD105,CD44,negative for CD45 showed by Flow cytometry.The positive results of oil red and alizarin red staining also indicated that the obtained cells were pluripotent. Conclusion HADSCs could be obtained from human abode⁃men adipose tissue through a series of isolation and identified methods.%目的:探讨人脂肪干细胞的分离、培养并鉴定。
脂肪干细胞的免疫学性质探讨脂肪干细胞的免疫学性质探讨【摘要】目的探讨脂肪干细胞免疫学性质。
方法健康志愿者6例,志愿者均与抽脂要求相符,作为研究组;将同期另选6例健康志愿者作为对照组。
分别抽取两组健康志愿者脂肪组织25 g,给予培养,并观察目标细胞分化群外表抗原和组织相容性抗原表达的特点,同时对异体脂肪干细胞及淋巴细胞共同培养的增殖情况进行观察。
结果脂肪干细胞没有造血系统污染及内皮细胞污染问题,且对照组与研究组每毫升细胞液细胞数比拟,差异无统计学意义。
结论脂肪干细胞有较小排斥反响,临床应引起重视,加强培养及别离技术研究。
【关键词】脂肪干细胞;免疫学性质DOI:10.14163/j ki.11-5547/r.2021.30.079干细胞是具有自我增殖及更新能力的细胞,依据不同分化阶段可分为成体干细胞、胚胎干细胞两类。
与间质干细胞相比照,脂肪干细胞在体外更易扩增,获得容易,且免疫原性低,是临床医学及组织工程开展的重要突破。
本探究分析脂肪干细胞免疫学性质,现报告如下。
1 资料与方法1. 1 一般资料搜集本院2021年3月~2021年3月健康志愿者6例,志愿者均与抽脂要求相符,作为研究组;另选同期6例健康志愿者作为对照组。
纳入标准:均对本研究知情;均身体健康。
研究组女3例,年龄21~37岁,平均年龄岁;男3例,年龄20~38岁,平均年龄岁。
对照组女3例,年龄22~38岁,平均年龄岁;男3例,年龄21~38岁,平均年龄岁。
两组健康志愿者性别、年龄一般资料比拟,差异无统计学意义,具有可比性。
1. 2 方法分别抽取两组健康志愿者脂肪组织25 g,将其放在离心管中,后转为培养皿中,准备处理,离心管与培养皿均为无菌;剔除组织中筋膜及血管,使用无菌溶液反复进行冲洗;处理后,用眼科剪对其进行分割,大小约为1.5 mm3,直至分割成糊状,在37℃环境下,选择℃型胶原酶予以震荡进行消化处理,速度为120 r/min;采用LG-DMEM培养液和胎牛血清终止消化,并离心10 min,后获得高浓度的间质组织细胞团,对其进行处理,选择红细胞裂解液,并去除红细胞,采用筛网进行过滤;将过滤液取出,使用链霉素100 g/L、青霉素100 U/ml、LG-DMEM培养液、胎牛血清进行重悬处理;处理后,将其置于培养皿中,直径为100 mm,接种,设定浓度4×104/cm2;接种后,在体积分数5%CO2培养箱中进行培养,温度设定为37℃,且每隔2 d更换一次培养液;待细胞生长检测80%~90%时,按照比例1℃2进行传代培养。
脂肪细胞的研究进展体内的脂肪细胞不仅能储存能量,还能分泌激素等其他物质,甚至对新陈代谢、体重和人体健康都起着重要的调节作用,尤其在整形外科领域,脂肪细胞更发挥着重要的作用。
鉴于此,近年来诸多学者对脂肪细胞的研究也越发深入,现结合相关文献报道对脂肪细胞的研究进展综述如下。
1 脂肪细胞的来源脂肪细胞起源于脂肪组织中存在的问充质干细胞,与骨髓基质中存在的干细胞一样,该细胞因具有自我更新、活力持久及多向分化潜能等干细胞特征而被称为脂肪源性干细胞(adipose-derivedstem cells,ADSCs)。
Zuk等从脂肪组织中分离出了一种成纤维细胞样细胞,它与骨髓间充质干细胞形态相似,称之为脂肪干细胞(ADSCs),平均每300ml脂肪组织可获得2×108~6×108个这样的细胞。
ADSCs 不像骨髓间充质干细胞对培养基中胎牛血清的来源有严格的要求,在加入任何批号胎牛血清的DMEM培养基中都能分化成脂肪细胞。
此外,骨髓问充质干细胞也可分化为脂肪细胞。
Mauney等将MSCs孵育在含有10%胎牛血清、lO%正常大鼠血清、10-%ol/L的地塞米松,5ug/ml胰岛素的a-MEM培养基中,2天后撤去地塞米松,继续9呼育5~7天后,MSCs分化成为脂肪细胞。
ADSCs和MSCs具有相同的表现型,对CD29、CD44、CD71、CD70、CD105/SH2和SH3为阳性反应,对CD31、CD34和CD45。
为阴性反应。
ADSCs有两个特征性表达分化抗原CD49d和CD。
∞,前者肯定存在而后者肯定没有,与MSCs情况相反。
2脂肪细胞分化过程及其形态变化能向脂肪细胞分化的ADSCs在激素、生物活性因子、寒冷等因素刺激下均能逐渐分化为单能干细胞,即脂肪母细胞,它保持着干细胞增殖活跃的特性。
脂肪母细胞再进一步分化为前脂肪细胞,也是通常人们所说的脂肪细胞前体。
前脂肪细胞再经历细胞融合,接触抑制和克隆扩增等步骤启动向成熟脂肪细胞分化,并在胰岛素、地塞米松等诱导剂作用下完成向成熟脂肪细胞的分化。
人脂肪干细胞的生物学特性及分化研究人脂肪干细胞(Human adipose-derived stem cells, hASCs)是来源于脂肪组织的一种成体干细胞。
相对于其他干细胞源,如骨髓和胎盘组织,脂肪组织是一种易获取、丰富的干细胞源。
脂肪干细胞具有多种生物学特性,这些特性使其成为医学研究和应用中的热点。
脂肪干细胞具有自我更新的能力。
在体外培养条件下,脂肪干细胞能够连续增殖并形成克隆球。
脂肪干细胞在体内能够不断自我更新并恢复受损组织。
脂肪干细胞具有多向分化潜能。
在适当的诱导条件下,脂肪干细胞可以向多种细胞类型分化,包括成骨细胞、软骨细胞、肌肉细胞、神经细胞等。
脂肪干细胞能够通过不同的分化路径进行再生医学和组织工程研究。
脂肪干细胞的多向分化潜能与其内含的多种细胞表面标志物密切相关。
脂肪干细胞表面标志物包括CD34、CD73、CD90、CD105等。
这些标志物的表达情况可以用于对脂肪干细胞的鉴定和纯化。
脂肪干细胞还具有多种富血管生成策略的能力。
研究表明,脂肪干细胞能够分泌多种生长因子,如血管内皮生长因子(VEGF)和基质金属蛋白酶(MMPs),从而促进新的血管生成。
这一特性使得脂肪干细胞在组织修复和再生方面具有巨大潜力。
脂肪干细胞在临床应用中也表现出良好的安全性和可行性。
临床研究表明,脂肪干细胞植入可以用于丰胸、隆鼻、面部填充等美容整形手术,以及骨科、神经科、心血管科等疾病的治疗。
脂肪干细胞是一种具有广泛研究和应用潜力的成体干细胞。
它的自我更新能力、多向分化潜能、富血管生成策略和临床可行性,都使得脂肪干细胞成为再生医学和组织工程领域的热点研究对象。
随着研究的深入,相信脂肪干细胞将在更多领域中发挥重要的作用。
脂肪干细胞诱导成骨细胞研究进展
了解骨折愈合的机制?
骨折愈合过程中的生长因子作用现代研究发现,与骨折愈合密切相关的生长因子
可分为两类,一类为远距离细胞产生的丝裂素类,其功能与细胞增殖有关;另一
类为局部产生,主要以旁分泌或自分泌方式发挥作用,促使软骨、骨原细胞分化
成熟。
骨形态发生蛋白:是一类具有修复和调节作用的生长因子,其强大诱骨活性和能
有效促进骨愈合的性能已为人熟知,这决定了它在修复骨质缺损和促进骨折愈合
等的重要作用。不论成熟细胞内的骨形态发生蛋白起何作用,骨形态发生蛋白的
生成肯定始于骨愈合过程初期.并极有可能诱导原始细胞分化为能形成软骨样和
骨样组织的细胞。
转化生长因子ß:骨内的转化生长因子ß由骨细胞、成骨细胞、破骨细胞和软骨
细胞产生。成骨细胞所产生的转化生长因子ß旋即被结合至骨基质中。骨内转化
生长因子ß的浓度高于其他组织约100倍,而成骨细胞具有高浓度的转化生长因
子ß受体。转化生长因子ß对于调节骨形成有积极作用,但此作用甚为复杂。
血管内皮生长因子:血管内皮生长因子先后表达于骨折断端骨外膜内层的间充质
细胞、软骨细胞中及修复期骨小梁周围的成骨细胞,并可与碱性成纤维细胞生长
因子共同刺激、调节血管形成,加速软骨的钙化及骨组织的改建过程。
骨折愈合中细胞外基质蛋白的表达及功能:能细胞外基质是骨和软骨的重要组成
部分,主要由胶原和多种基质蛋白多糖组成。骨钙素由成骨细胞合成、分泌的一
种基质蛋白,是准确反映成骨细胞活动的指标。
脂肪干细胞诱导
脂肪干细胞(ADSC) 具有多向分化潜能, 在特定的诱导培养条件下可向脂肪
细胞、软骨细胞、成骨细胞、肌肉细胞及神经细胞等组织细胞定向分化,甚至可
将其定向诱导为心肌细胞、淋巴管内皮样细胞、内耳毛细胞、角膜细胞和肌腱细
胞等。同一种属不同部位来源的脂肪干细胞体外培养的生物学特性,究竟存在差
异与否目前尚无定论。
(1)影响ADSC 向软骨细胞分化的条件
体外实验中,影响ADSC 向软骨细胞分化诱导主要包括: BMP-6、FGF、EGF 、
转化生长因子-β(TGF-β)、生长分化因子-5(GDF-5)、BMP-14、BMP-2、胰岛
素样生长因子-1(IGF-1)。
(2)影响ADSC 向成骨细胞分化的条件
体外实验中,常用地塞米松、β-甘油磷酸钠、抗坏血酸盐联合诱导ADSC 分化
为成骨细胞,亦可用维生素D 替代地塞米松进行成骨诱导。
1)脂肪干细胞向成骨细胞分化的调控
提高脂肪干细胞成骨分化能力的方法主要有外源性因子调控、基因工程调控
和物理调控。微环境影响干细胞的增殖和分化能力,通过改变细胞培养液的成分
可促进干细胞的成骨分化能力。
(3)脂肪组织是人体内最大的内分泌器官,可分泌多种多肽物质,譬如脂联蛋
白、瘦蛋白、抵抗蛋白和肿瘤坏死因子,这些物质统称为脂肪细胞因子。瘦蛋白
是一种重要的旁分泌信号分子,具有调解成骨和成脂分化信号转导通路的功能,
与骨质疏松和糖尿病均有密切的关系。瘦蛋白既有促进细胞增殖和成骨分化以及
矿化结节数量增加的能力,还具有阻止细胞成脂分化的作用。
(3)脂肪干细胞(ADSC)治疗骨缺损模型
骨组织工程最基本的方法是将分离得到的种子细胞和支架材料复合,然后将
细胞-支架复合物植入骨缺损部位,构建组织工程骨修复骨缺损。管状骨缺损的
长度只要是直径的3 倍或以上,就无法依靠机体自身的修复能力使其愈合。