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蜡样芽孢杆菌检测方法研究进展

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多 重 ＰＣＲ（ｍＰＣＲ）、实 时荧 光 定 量 ＰＣＲ（Ｒｅａｌ—ｔｉｍｅ ＰＣＲ）、叠 氮 溴 化 丙 锭一 定 量 ＰＣＲ（ＰＭＡ－ｑＰＣＲ）、微 滴 数 字 ＰＣＲ
技 术 （ｄｄＰＣＲ）、环 介 导 等 温 扩 增 （ＬＡＭＰ）及 酶 联 免 疫 吸 附 测 定 （ＥＬＩｓＡ）。从 传 统 方 法 到 新 兴 技 术 ，涉 及 传 统 检 测
中 国 畜 牧 兽 医 ２０１８，４５（３）：６３５—６４２ Ｃｈｉｎａ Ａｎｉｍａｌ Ｈ ｕｓｂａｎｄｒｙ ＆ Ｖｅｔｅｒｉｎａｒｙ Ｍ ｅｄｉｃｉｎｅ
蜡 样 芽 孢 杆 菌 检 测 方 法 研 究 进 展
黄 晶菁 。，罗 静 ，何 宏轩
（１．中 国 科 学 院 动 物 研 究 所 ，动 物 生 态 与 保 护 生 物 学 重 点 实 验 室 ，北 京 １００１０１； ２．中 国科 学 院大 学 生 命 科 学 学 院 ，北 京 １００１０１）
技 术 、分 子 生 物 学 检 测 和免 疫 学 检 测 技 术 ，作 者 主要 总 结 了各 方 法 的 原 理 、检 测 范 围 ，并 对 各 方 法 的 优 缺 点 进 行 了
比较 。 这些 检测 方 法 的 灵 敏 度 、精 确 度 、样 本 要 求 等 有 所 不 同 ，可 根 据 检 测 需 要 和 条 件 限 制 进 行 选 择 。 将 分 子 生 物
病 原 及 其 致 病 力 。 总 的来 说 ，蜡 样 芽 孢 杆 菌 对 人 畜 的健 康 安 全 均 构 成 了 威 胁 ，快 速 准 确 地 检 测 能 有 效 辅 助 治 疗 和
提 前 预 防 ，作 者 将 主 要 检 测 方 法 进 行 了 总结 ，希 望 能 有 助 于 全 面 准 确 地 评 估 蜡 样 芽 孢 杆 菌 的风 险 ，为 主 动 监 测 和 预
警 提 供 科 学 依 据 。
关 键 词 ：蜡 样 芽 孢 杆 菌 ；检 测 ；食 物 中 毒
中 图 分 类 号 ：￥８５２．６１ ６
文 献 标 识 码 ：Ａ
文 章 编 号 ：１６７１－７２３６（２０１８）０３—０６３５—０８
Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｐｒｏｇｒｅｓｓ ｏｎ Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ Ｍ ｅｔｈｏｄｓ ｆｏｒ Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｃｅｒｅｕｓ
ＨＵＡＮＧ Ｊｉｎｇｊｉｎｇ ， ＬＵＯ Ｊｉｎｇ ， ＨＥ Ｈｏｎｇｘｕａｎ （１． Ｋｅｙ Ｌａｂｏｃａｔｏｒｙ ｏｆ Ａｎｉｍａｌ Ｅｃｏｌｏｇｙ ａｎｄ Ｃｏｎｓｅｒｖａｔｉｏｎ Ｂｉｏｌｏｇｙ， Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｏｆ Ｚｏｏｌｏｇｙ，
Ｃｈｉｎｅｓｅ Ａ ｃａｄｅｍｙ ｏｆ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｂｅｉｊｉｎｇ １００１０１， Ｃｈｉｎａ； ２． Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ Ｌｉｆｅ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ａｃａｄｅｍｙ ｏｆ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｂｅｉｊｉｎｇ １００１０１， Ｃｈｉｎａ）
学 方 法 和 免疫 学 等 方 法 有 效 地 结 合 起 来 ，多 角 度 多 层 次 地 对 样 品 进 行 检 测 ，可 全 面 而 准 确 地 呈 现 检 测 结 果 。蜡 样
芽 孢 杆 菌 能 产 生 多 种 毒 素 ，这 些 毒 素 决 定 了其 致 病 性 ，所 以除 了 检 测 菌 体 外 ，还 可 以 对 毒 素 进 行 检 测 ，有 助 于 确 定
特 别 是 能 够 引 起 人 畜 肠 道 疾 病 ，导 致 腹 泻 型 或 呕 吐 型 食 物 中毒 。快 速 准 确 检 测 蜡 样 芽 孢 杆 菌 是 控 制 其 污 染 和感 染
后 治 疗 的 关 键 环 节 。作 者 对 蜡 样 芽 孢 杆 菌 的 检测 方法 进行 了 全 面详 细 的 总 结 ，主 要 包 括 传 统 检 测 方 法 、普 通 ＰＣＲ、
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｃｅｒｅｕｓ ｉｓ ａ ｃｏｍ ｍｏｎ ｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｃａｕｓｉｎｇ ｆｏｏｄ ｐｏｉｓｏｎｉｎｇ，ｇｒａｍ—ｐｏｓｉｔｉｖｅ ｏｐｐｏｒｔｕｎ— ｉｓｔｉｃ ｐａｔｈｏｇｅｎ，ａｎｄ ｗ ｉｄｅｌｙ ｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｎｇ ｉｎ ｓｏｉｌ，ｗ ａｔｅｒ ａｎｄ ａｌｌ ｋｉｎｄｓ ｏｆ ｆｏｏｄ．Ｉｎ ｒｅｃｅｎｔ ｙｅａｒｓ，Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｃｅｒｅｕｓ ａｌｓｏ ｈａｓ ｂｅｅｎ ｆｏｕｎｄ ｉｎ ａ ｖａｒｉｅｔｙ ｏｆ ａｎｉｍ ａｌｓ ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ ｐｅｏｐｌｅ ａｓ ａ ｚｏｏｎｏｔｉｃ ｂａｃｔｅｒｉｕｍ ．Ｉｔ ｇｉｖｅｓ ｒｉｓｅ ｔｏ ｇａｓｔｒｏｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ ｄｉｓｅａｓｅ，ｗｈｉｃｈ ｌｅａｄｉｎｇ ｔｏ ｄｉａｒｒｈｏｅａｌ ｏｒ ｅｍｅｔｉｃ ｔｙｐｅ ｏｆ ｆｏｏｄ ｐｏｉｓｏｎｉｎｇ． Ｔｈｕｓ，ａ ｒａｐｉｄ ａｎｄ ａｃｃｕｒａｔｅ ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ｉＳ ｃｒｉｔｉｃａｌ ｆｏｒ ｃｏｎｔｒｏｌｌｉｎｇ ｔｈｅ ｐｏｌｌｕｔｉｏｎ ｏｒ ｔｈｅ ｔｒｅａｔｍ ｅｎｔ。Ｔ ｈｉｓ ｓｔｕｄｙ ｃｏｎｄｕｃｔｅｄ ａ ｃｏｍ ｐｒｅｈｅｎｓｉｖｅ ａｎｄ ｄｅｔａｉｌｅｄ ｓｕｍｍ ａｒｙ ｆｏｒ ｔｈｅ ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ｍ ｅｔｈｏｄｓ ｏｆ Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｃｅ— Ｋｅｕｓ，ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ ｃｏｎｖｅｎｔｉｏｎａＩ ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ，ｃｏｎｖｅｎｔｉｏｎａｉ ＰＣＲ ，ｍｕｌｔｉｐｌｅｘ ＰＣＲ ，Ｒｅａｌ—ｔｉｍｅ ＰＣＲ ，ｐｒｏｐｉｄｉ— ｕｍ ｍ ｏｎｏａｚｉｄｅ—ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅ ＰＣＲ ，ｄｒｏｐｌｅｔ ｄｉｇｉｔａｌ ＰＣＲ ，ｒｉｎｇ—ｍ ｅｄｉａｔｅｄ ｉｓｏｔｈｅｒｍ ａｌ ａｍ ｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｔｅｃｈ— ｎｏｌｏｇｙ ａｎｄ ｅｎｚｙｍ ｅ—ｌｉｎｋｅｄ ｉｍｍ ｕｎｏｓｏｒｂｅｎｔ ａｓｓａｙ （ＥＬＩＳＡ ）．Ｆｒｏｍ ｔｈｅ ｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌ ｍ ｅｔｈｏｄ ｔｏ ｔｈｅ ｅｍｅｒｇｉｎｇ ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，ｉｎｖｏｌｖｉｎｇ ｔｈｅ ｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌ ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｂｉｏｌｏｇｙ ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ａｎｄ ｉｍ ｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，ｔｈｅ ａｕｔｈｏｒｓ ｄｅｓｃｒｉｂｅｄ ｔｈｅ ｐｒｉｎｃｉｐｌｅ，ｒａｎｇｅ ａｎｄ ｔｈｅ ａｄｖａｎ一
摘 要 ：蜡 样 芽 孢 杆 菌是 一 种 可 引 起 食 物 中毒 的 常 见 食 源 性 细 菌 ，属 于 革 兰 氏 阳 性 的 条 件 பைடு நூலகம் 病 菌 ，广 泛 存 在 于 土
壤 、空 气 、水 及 植 物 源 、动 物 源 加 工 的 食 品 中 。近 年 发 现 也 能 感 染 包 括 人 在 内 的 多 种 动 物 ，是 一 种 人 兽 共 患 性 细 菌 ，

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乳制品中蜡样芽孢杆菌的暴露研究的开题报告

乳制品中蜡样芽孢杆菌的暴露研究的开题报告

乳制品中蜡样芽孢杆菌的暴露研究的开题报告一、研究背景及意义蜡样芽孢杆菌（Bacillus cereus）是一种广泛分布在环境中的细菌，其能在各种食品中引起食源性疾病。

乳制品是其中最常见的食品之一，因此，了解乳制品中蜡样芽孢杆菌的暴露情况对公共卫生至关重要。

目前，乳制品中蜡样芽孢杆菌的研究较为有限，存在一定的不确定性和争议。

一些研究表明，在乳制品中蜡样芽孢杆菌的含量相对较低，且不易生长；然而，另一些研究则发现，在一些不适宜的条件下，蜡样芽孢杆菌可以生长并繁殖，增加食品安全风险。

因此，本研究将对不同品牌和类型的乳制品中蜡样芽孢杆菌的暴露进行研究和评估，以加深对其在乳制品中的分布和影响的认识，为食品安全提供科学依据。

二、研究方法及步骤1. 样品采集与处理在本研究中，将选择市场上常见的不同品牌和类型的乳制品进行采集，包括牛奶、酸奶、乳酪等。

样品将在符合卫生标准的实验室环境下进行采集，并按照标准化程序进行处理和保存。

2. 分离与鉴定对采集到的样品进行分离和鉴定，以确定其是否存在蜡样芽孢杆菌。

在分离过程中，采用标准微生物学方法并结合分子生物学技术进行检测和分析。

3. 统计分析根据实验结果，分析不同品牌和类型的乳制品中蜡样芽孢杆菌的含量和分布情况，以及其可能对人体健康和食品安全产生的潜在影响。

并采用SPSS等统计学软件对数据进行统计分析和处理，得出相应的结果。

三、预期成果及意义通过本研究，预计可以了解不同品牌和类型的乳制品中蜡样芽孢杆菌的含量和分布情况，为相关部门提供科学依据，进一步优化和改进乳制品的生产、储存和销售流程。

同时，本研究还将增加对蜡样芽孢杆菌在乳制品中的认识和了解，为相关领域的研究提供参考和启示，为保障食品安全和公共健康做出贡献。

蜡样芽孢杆菌防治植物病虫害的研究进展

蜡样芽孢杆菌防治植物病虫害的研究进展


方式 ，从 “ 被遗 忘 的角落 ”重返 “ 史的舞 台” 。 历
现代生物技术手段正成为人类改变非 良性农业循 环模式的一把利刃，极大缓解了科技与生产、人类 与 自然的突出矛盾 。
展极大促进了农村及社会经济的进步。然而 ， 一系 列不可修复的问题随之涌现 ：农村及城镇生态环境
严重破 坏 ，植物病 虫害抗 药性 增强 ，部分 生物种群 濒 临灭 绝 ，食品 内化 肥农 药残 留使人 类摄 入过量 引
Ａｄ ａ ｅ ｓｉ ｌ ｎ ｓ ａ ｅ ｎ ｓ ｓＣｏ ｔ ｏ ｙ Ｂａ ｉ ｕ ｅ ｅ ｓ ｖ ｎ ｅ ｎ Ｐ ａ ｔ Ｄｉｅ ｓ ｓａ ｄ Ｐｅ ｔ ｎ ｒ ｌ ｃｌ ｓｃ ｒ ｕ ｂ ｌ
ＧＵ Ｎ Ｊｎ． ｏｇｈ ｎ ， Ａ Ｇ Ｗｅ ．ｅ， ｕ ．ｉｇ． ａｊ ｎ Ａ ｕ ＨＵ Ｙ ｎ —ｏ ｇ Ｙ Ｎ ｎｇ ＮＩ ｅ ｎ ＭＡ Ｈ ｉｕ Ｊ ｐ －
发疾病 。 科技与 生 产、 类与 自然 的关系极 不和 谐 ， 人
１ 蜡样芽孢杆菌 （ ａ ｉ ｓ ｅｅｓ Ｂ ｃ ｌ ｒｕ ）简介 ｌ ｃ ｕ
Ｂ ｃ ｌｓ ｅｅｔ是一 种 革兰 氏阳性大杆菌 ， 要 ａ ｉｕ ｒｔ ｌ ｃ ｓ 主 分布生 芽孢 。与营养体 细胞 相 比 ，芽孢对热 的抗
（． ｏｌ ｅｏ ｉ ｃｅｃ ｎ ｈｒ ａｙ Ｎａｊ ｇＵ ｉｅｓｙｏ ｅｈｏｏ ｙ Ｎ ｎｉｇ ２ ０ ０ ； ． ｉｎｓ ｅｔ ｉｅ １ Ｃ ｌ ｇ ｆ ｆ Ｓ ｉｎｅａｄＰ ａｍ ｃ ， ｎｉ ｎｖ ｌｔ ｆ ｃ ｎ ｌｇ ， ａｊ ０ ９ ２ Ｊ ｇｕＰ ｓｃ ｅ Ｌｅ ｎ ’ ｉ Ｔ ｎ １ ａ ｉｄ
Ｒ ｓａｃ ｓｔｔ， ａｊ ｇ ２ ０ １） ｅｅｒｈＩ ｔｕｅＮ ｎｉ １０ ９ ｎｉ ｎ
Ａｂｓ ｒ ｃ ：Ｓ ｍｅｓｕ ｉｓｉｄｃ ｔｄｔａ ｓ ｆｌ ａ ｉｕ ｅｅ ｓｈ ｄｇ ｏ ｆｅ ｔ ｉ ｌｎｓ ｇ ｏ ｈａ ｄｃ ｕｄｃ ｎｒ ｌ ｌｎ ｔ ａ ｔ ｏ ｔｄｅ ｉａｅ ｔ ｅｕ ｃｌ ｓｃ ｒｕ ａ ｏ ｄｅｆｃｓ ｎｐａ ｔ’ ｒｗｔ ｎ ｏ ｌ ｏ ｔ ａ ｔ ： ｎ ｈ ｕ Ｂ ｌ ｏｐ
荧光PCR检测蜡样芽孢杆菌及溶血素基因应用研究

荧光PCR检测蜡样芽孢杆菌及溶血素基因应用研究


食品等 。资料表 明， ．ｅ ｕ 是北欧最常见的食物 Ｂ ｃｒ ｓ ｅ 中毒致病菌之一 ， Ｊ在我 国 Ｂ ｃｒ ｓ ． ｅ ｕ 引起 的食物 中 ｅ 毒也很 常见 。腹泻型食物 中毒则为多种肠毒素 的 作用结果 ， 因此 ， 除了要监测食物 中蜡样芽孢杆菌 的 数量外 ， 了解其致病性也为极其重要。 目 前对该类蜡 样 芽孢 杆 菌 的检 测 主要采 用 传统 的培 养 、 化 检测 方 生 法 ， 要长 时 间的 选 择性 培养 增 菌 过 程 及 生 化 检测 ， 需 是 一项 费 时费力 的工 作 。为 了 降低 对 蜡 样 芽 孢 杆 菌 的检测 时 间 ， 研究 运 用 荧 光 定 量 Ｐ Ｒ， 立 快 速 检 本 Ｃ 建 测 的方 法 ， 同时 为 了监 测 致 病 蜡 样 芽孢 杆 菌 ， 我们 以 溶血 素 （ Ｂ ） 因和非 溶 血 素 （ Ｈ 基 因为 目的基 Ｈ Ｌ基 Ｎ Ｅ） 因进 行 荧 光 Ｐ Ｒ检 测 ， 现 对 致 病 蜡 样 芽孢 杆 菌 肠 Ｃ 实 毒素 的 监测 。
西ｔ ２ １ 年７月第３ ｉ学 ０ １ ３卷第７ 期
８８ ５
ห้องสมุดไป่ตู้
荧 光 Ｐ Ｒ检测蜡样 芽孢杆菌及溶血 素基 因应 用研究 Ｃ
王 红 唐振柱 黄 彦 孙 贵娟 李 秀桂
５０ ２ ） ３０ ８ （ 西壮族 自治 区疾 病 预防 控制 中心 ， 宁市 广 南
【 摘要 】 目的 建立实时荧光 Ｐ Ｒ检测蜡样 芽孢杆 菌的快速检测方法， Ｃ 为食品中蜡样芽孢杆菌污染的调 查及食物 中毒的快速准确定量检测提供手段 。同时检测 ３ ４株蜡样 芽孢杆菌溶血素基 因， 了解各种食品 中蜡样 芽孢杆 菌 溶血 素基 因分 布情 况 。方法 将 广 西各 地 食 品样 品 蜡 样 芽孢 杆 菌 分 离株 经 纯化 培 养 ， 取 Ｄ Ａ， 提 Ｎ 应 用 荧光 Ｐ Ｒ进 行确认 检 测 ， Ｃ 并检 测 ３ 疑 似蜡 样 芽孢 杆 菌溶 血 素 基 因及 非 溶 血 素基 因。结 果 除 １株 荧光 ４株
蜡样芽孢杆菌GW-01全基因组测序及生物学特性分析

蜡样芽孢杆菌GW-01全基因组测序及生物学特性分析

刘珊，蒋杨丹，颜佶沙，等. 蜡样芽孢杆菌GW-01全基因组测序及生物学特性分析[J]. 食品工业科技，2024，45（7）：167−176. doi:10.13386/j.issn1002-0306.2023060031LIU Shan, JIANG Yangdan, YAN Jisha, et al. Whole Genome Sequencing and Biological Characterization of Bacillus cereus GW-01[J]. Science and Technology of Food Industry, 2024, 45(7): 167−176. (in Chinese with English abstract). doi: 10.13386/j.issn1002-0306.2023060031· 生物工程 ·蜡样芽孢杆菌GW-01全基因组测序及生物学特性分析刘　珊1,2，蒋杨丹1,2，颜佶沙1,2，谢宇宣1,2，赵思佳1,2，何启田3，赵甲元1,2,*（1.西南土地资源评价与监测教育部重点实验室（四川师范大学），四川成都 610101；2.四川师范大学生命科学学院，四川成都 610101；3.浙江大学生物系统工程与食品工程学院，浙江杭州 310000）摘　要：目的：通过全基因组测序和生物信息学，研究前期筛选可降解高效氯氰菊酯（β-CY ）蜡样芽孢杆菌GW-01的基因组序列信息和生物学特性，为其安全性评估提供参考。

方法：利用HPLC 验证了GW-01降解β-CY 的能力。

GW-01的整个基因组基于二代Illumina NovaSeq 与三代PacBio Sequel 测序平台相结合的测序技术，对菌株GW-01进行全基因组测序，并对测序数据进行基因组组装、基因预测与功能注释、碳水化合物活性酶预测、毒力因子和抗生素抗性分析，此外，还基于gyrA 基因序列对菌株GW-01构建系统发育树。