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第 1 页 共 2 页 关于粪大肠菌群等检出限及结果报出问题的回复 （实用版） 目录 一、引言 二、粪大肠菌群和总大肠菌群的检出限及结果报出问题 1.地表水和地下水的检出限问题 2.结果报出问题的解答 三、粪大肠菌群等检出限及结果报出的相关标准规范 1.《水质粪大肠菌群的测定多管发酵法和滤膜法》 2.其他相关标准规范 四、结论 正文 一、引言 近期，关于粪大肠菌群及总大肠菌群在地表水和地下水中的检出限及结果报出问题，在业界引起了广泛的关注和讨论。针对这一问题，本文将提供相关的解答和解析。
二、粪大肠菌群和总大肠菌群的检出限及结果报出问题 1.地表水和地下水的检出限问题 粪大肠菌群和总大肠菌群在地表水和地下水中的检出限问题，主要涉及到监测方法和统计学方法。根据《水质粪大肠菌群的测定多管发酵法和滤膜法》（HJT347-2007），多管发酵法的检出限是根据统计学方法计算出来的 MPN（最可能数）值，而非试验方法的实际检出值。因此，在实际应用中，可能会出现检出限与实际检出值之间的差异。
2.结果报出问题的解答 第 2 页 共 2 页
针对结果报出问题，有关专家建议，应按照相关标准规范进行结果报告。根据《水质粪大肠菌群的测定多管发酵法和滤膜法》（HJT347-2007），在报告结果时，应同时给出检出限和实际检出值，以便于更好地评估水质状况。
三、粪大肠菌群等检出限及结果报出的相关标准规范 1.《水质粪大肠菌群的测定多管发酵法和滤膜法》 《水质粪大肠菌群的测定多管发酵法和滤膜法》（HJT347-2007）是针对粪大肠菌群和总大肠菌群检测的一部标准规范。该标准规定了多管发酵法和滤膜法两种检测方法，并明确了检出限和结果报告的要求。
2.其他相关标准规范 除了《水质粪大肠菌群的测定多管发酵法和滤膜法》（HJT347-2007）外，还有其他一些相关标准规范也涉及到粪大肠菌群和总大肠菌群的检出限及结果报出问题，如《地表水环境质量标准》（GB3838-2002）和《地下水质量标准》（GBT14848-2017）等。这些标准规范对于粪大肠菌群和总大肠菌群的检出限及结果报出问题也具有一定的指导意义。
探析总大肠菌群的检测方法及其优缺点大肠菌群是引起人类肠道传染病的主要病原体，它普遍存在于人类的生活用水中，如果人类生活用水的安全质量不能得到保证，饮用了总大肠菌群超标的水，轻则会使细菌在肠道内慢慢积累引起肠道疾病，使得人们拉肚子，重则可能会威胁到人们的生命安全，导致病菌中毒死亡等。
基于此，以下就总大肠菌群的检测方法及其优缺点进行探讨分析，以供参考。
1总大肠菌群的概述饮用水中的总大肠菌群主要是指大肠杆菌、大肠菌群和粪大肠菌群三大类型细菌共同组成的大肠菌群。
总大肠菌群是指在37℃条件下培养时，能够使乳糖进行发酵，并且在全天24小时之内都产酸、产气的革兰氏阴性无芽孢杆菌。
主要包括埃希氏菌属、柠檬酸细菌属肠杆菌属及克雷伯氏菌属四种细菌。
总大肠菌群既包括存在于人及动物粪便的大肠菌群，也包括存在于其他环境中的大肠菌群。
在日常的检测过程中，特别是在饮用水的检测中，总大肠菌群的检测对检测环境、检测人员的操作水平和经验要求都很高，且检测时间长达三天。
由于其数量大，在体外存活时间与肠道致病菌相近，且检验方法比较简便，故被作为检验肠道致病菌的指示菌。
水中大肠菌群数的多少，表明水体被粪便污染的程度，并间接地表明有肠道致病菌存在的可能性。
因此，总大肠菌群是评价饮用水水质的重要指标，具有广泛的卫生学意义。
2总大肠菌群的检测方法检测总大肠菌群的方法主要有两种，分别是多管发酵法和滤膜法。
2.1总大肠菌群多管发酵法多管发酵法是做早被用作水质检测的技术，至今应用已超过80年，在水样大肠菌群的检测中一直在应用。
其核心是将水样进行10倍系列稀释，分别接种到乳糖蛋白胨培养液中，在35℃培养48小时，观察细菌生长情况。
将产酸产气的发酵管分别转种在伊红美篮琼脂平板上进行分离培养，并通过革兰染色、镜检和进行证实试验。
结果通过检索最可能数检索表、报告每100ml水样中总大肠菌群可能数值。
这种方法影响因素比较多，例如，非大肠菌群细菌的干扰，同时不能实行准确的定量，花费时间比较多，越需要96h以上，由于最后是通过检索MPN检索表得出的是一种推论的结果，这就决定了该法有时还会低估水样中大肠菌群的数目甚至造成漏检。
粪大肠菌群检测标准
粪大肠菌群检测是评价消化道微生物菌群组成和功能的重要指标，常用于评估肠道健康和消化功能。
以下是一般粪大肠菌群检测的参考标准：
1. 总菌群量：正常情况下，粪便样本中的大肠菌群数量应该在10^7~10^9 CFU/g之间。
2. 菌群多样性指数：通常使用菌群多样性指数（如Shannon指数）评估菌群的多样性程度。
正常情况下，指数应该在较高水平。
3. 优势菌群和病原菌：粪大肠菌群检测还可以确定主要的优势菌群种类和比例，以及是否存在潜在的病原菌。
正常情况下，优势菌群应该是益生菌（如双歧杆菌、乳酸菌等），而病原菌应该是少量或不存在。
4. 菌群平衡和稳定性：正常的粪大肠菌群应该具有良好的平衡和稳定性。
如果菌群失调或不稳定，可能会导致肠道问题和消化不良等症状。
需要注意的是，粪大肠菌群检测的标准可能因不同的实验室和研究领域而有所差异。
因此，具体的标准应根据实验室或临床医生的建议进行参考。
耐热⼤肠菌群定义及检验⽅法！耐热⼤肠菌群定义及检验⽅法！⼀、耐热⼤肠菌群的定义耐热⼤肠菌群在不同的检验⽅法中有不同的定义（如下表所⽰），它指的是具有某些特性的⼀群细菌，⽽⾮⽣物学分类概念。
北美国家⼀般使⽤“粪⼤肠菌群”概念，如AOAC、FDA。
SN中的“粪⼤肠菌群”概念为等同采⽤AOAC⽅法，故⽽使⽤粪⼤肠菌群概念；⽽欧洲使⽤“耐热⼤肠菌群”概念，较少使⽤“粪⼤肠菌群”。
⼀般欧洲学者认为，“粪⼤肠菌群”的提法不太科学，耐热⼤肠菌群的范围⽐粪⼤肠菌群范围⼤。
作为⼀种卫⽣指标菌，耐热⼤肠菌群中很可能含有粪源微⽣物，因此耐热⼤肠菌群的存在表明可能受到了粪便污染，可能存在⼤肠杆菌。
但是，耐热⼤肠菌群的存在并不代表对⼈有什么直接的危害。
作为粪便污染指标菌，耐热⼤肠菌群与⼤肠菌群、⼤肠杆菌相似，主要以其检出情况来判断⾷品是否受到了粪便污染。
粪便是肠道排泄物，有健康者，也有肠道病患者或带菌者粪便，所以粪便中既有正常肠道菌，也可能有肠道致病菌（如沙门⽒菌、志贺式菌、霍乱弧菌、副溶⾎弧菌等）和⾷物中毒者。
因此，⾷品既然受到粪便污染就有可能对⾷⽤者造成潜在的危害。
通常情况下，耐热⼤肠菌与⼤肠菌群相⽐，在⼈和动物粪便中所占的⽐例较⼤，⽽且由于在⾃然界容易死亡等原因，耐热⼤肠菌群的存在可认为⾷品直接或间接的受到了⽐较近期的粪便污染。
因⽽，耐热⼤肠菌群在⾷品中的检出，与⼤肠菌群相⽐，说明⾷品受到了更为不清洁的加⼯，肠道致病菌和⾷物中毒菌的可能性更⼤。
耐热⼤肠菌群⽐⼤肠菌群能更贴切地反应⾷品受⼈和动物粪便污染的程度，且检测⽅法⽐⼤肠杆菌简单地多，⽽受到重视。
⼆、耐热⼤肠菌的检测⽅法国际⽬前耐热⼤肠菌群的检验⽅法主要有四种，NMKL有两个，分别针对不同产品，ISO有两个，仅适⽤于⽔的检验。
下⾯以出⼝⽔产品中耐热⼤肠菌群的检验⽅法（根据NMKL、N96、1994⽅法整理）为例进⾏介绍。
1、定义：见上表。
、适⽤范围：新鲜和冷冻⽔产品，包括鱼、鱼制品、贻贝、贻贝制品、贝类及贝类制品。
大肠菌群检测知识及MPN法检测的注意要点一、大肠菌群的定义：1、指一群在36℃条件下培养48h能发酵乳糖、产酸产气的需氧和兼性厌氧革兰氏阴性无芽胞杆菌。
2、该菌群主要来源于人畜粪便, 作为粪便污染指标评价食品的卫生状况, 推断食品中肠道致病菌污染的可能。
3、大肠菌群不是细菌学上分类命名，而是一组与粪便污染有关的细菌。
这群细菌包括：大肠埃希氏菌、柠檬酸杆菌、产气克雷伯氏菌和阴沟肠杆菌。
4、生化特征及血清学反应并非完全一致。
5、典型大肠杆菌的IMVIC与硫化氢试验结果：++---。
二、分布：1、广泛分布于自然环境。
2、来源于人和温血动物的粪便。
三、卫生学意义：1、大肠菌群作为粪便污染的指标菌评价样品中是否受到粪便的污染。
2、大肠菌群计数的高低，直接反映了样品受粪便污染的程度。
3、表示对人体健康是否具有潜在的危险性。
大肠菌群是理想的粪便污染的指标菌4、是人类和温血动物肠道菌群，在数量上占优势。
5、随粪便排出体外后，在外界环境影响下，其存活时间应与肠道致病菌大致相似或稍长。
6、检验方法简便，易于检出与计数。
7、对消毒剂的抵抗力应不低于肠道致病菌。
四、主要修改内容：将原标准拆分为大肠菌群、粪大肠菌群和大肠杆菌计数三个独立的标准方法，标准名称变化。
大肠菌群的MPN法中乳糖胆盐等培养基改为月桂基硫酸盐胰蛋白眎(LST)肉汤为主的培养基；增加了对样品匀液的pH范围要求；增加了大肠菌群的平板计数法；MPN法的结果报告由原每100g（mL）大肠菌群的MPN值，修改为每1 g（mL）大肠菌群的MPN值。
五、大肠菌群在不同培养基上的形态：六、大肠菌群检验MPN法：新老标准异同，结果报告单位不同：原方法：MPN/ 100g(mL)；现方法：MPN/ g(mL)；操作过程请大家仔细阅读 GB4789.3-2010。
1、MPN法注意事项：•全过程不得超过15min。
•样品匀液的pH值应在6.5～7.5之间，•（如接种量需要超过1mL，则用双料LST肉汤）•以48h±2h为最终观察结果时限。
大肠菌群的定义及测定意义(一)大肠菌群的定义及范围根据国家1994年颁布的食品卫生检验方法微生物学部分，大肠菌群(coliform bacteria)系指一群在37 ℃、24 h能发酵乳糖，产酸、产气，需氧和兼性厌氧的革兰氏阴性无芽胞杆菌。
大肠菌群主要是由肠杆菌科中四个菌属内的一些细菌所组成，即艾希氏菌届、拘橼酸杆菌属、克雷伯氏菌属及肠杆菌属，其生化特性分类见表5-4。
由上表可以看出，大肠菌群中大肠艾希氏菌I型和Ⅲ型的特点是，对靛基质、甲基红、v-P和拘橼酸盐利用四个生化反应分别为“十十一一”，通常称为典型大肠杆菌；而其他类大肠杆菌则披称为非典型大肠杆菌。
(二)大肠菌群的测定意义1. 粪便污染的指标细菌早在1892年，沙尔丁格(Schardinger)氏首先提出大肠杆菌作为水源中病原菌污染的指标菌的意见，因为大肠杆菌是存在于人和动物的肠道内的常见细菌。
一年后，塞乌博耳德“斯密斯(Theobold．Smith)氏指出，大肠杆菌因普遍存在于肠道内，若在肠道以外的环境中发现，就可以认为这是由于人或动物的粪便污染造成的；从此，就开始应用大肠杆菌作为水源中粪便污染的指标菌。
据研究发现，成人粪便中的大肠菌群的含量为：108个／g一109个／g。
若水中或食品中发现有大肠菌群，即可证实已被粪便污染，有粪便污染也就有可能有肠道病原菌存在。
根据这个理由，就可以认为这种含有大肠菌群的水或食品供食用是不安全的。
所以目前为评定食品的卫生质量而进行检验时，也都采用大肠菌群或大肠杆菌作为粪便污染的指标细菌。
当然，有粪便污染，不一定就有肠道病原菌存在，但即使无病原菌，只要被粪便污染的水或食品，也是不卫生的，不受人喜欢的。
2．粪便污染指标菌的选择作为理想的粪便污染的指标菌应具备以下几个特性，才能起到比较正确的指标作用。
①存在于肠道内持有的细菌，才能显示出指标的特异性。
⑧在肠道内占有极高的数量，即使被高度稀释后，也能被检出。
⑧在肠道以外的环境中，其抵抗力大于肠道致病菌或相似，进入水中不再繁殖。
大肠杆菌总大肠菌群粪大肠菌群区别与联系
相互关系
大肠菌群（总大肠菌群） > 粪大肠菌群&耐热大肠菌群 > 大肠杆菌
一、大肠菌群介绍
大肠菌群并非细菌学分类命名，而是卫生细菌领域的用语，它不代表某一个或某一属细菌，而指的是具有某些特性的一组与粪便污染有关的细菌，这些细菌在生化及血清学方面并非完全一致，其定义为：需氧及兼性厌氧、在37℃能分解乳糖产酸产气的革兰氏阴性无芽胞杆菌。
一般认为该菌群细菌可包括大肠埃希氏菌、柠檬酸杆菌、产气克雷白氏菌和阴沟肠杆菌等。
大肠菌群分布较广，在温血动物粪便和自然界广泛存在。
调查研究表明，大肠菌群细菌多存在于温血动物粪便、人类经常活动的场所以及有粪便污染的地方，人、畜粪便对外界环境的污染是大肠菌群在自然界存在的主要原因。
粪便中多以典型大肠杆菌为主，而外界环境中则以大肠菌群其他型别较多。
大肠菌群是作为粪便污染指标菌提出来的，主要是以该菌群的检出情况来表示食品中有否粪便污染。
大肠菌群数的高低，表明了粪便污染的程度，也反映了对人体健康危害性的大小。
粪便是人类肠道排泄物，其中有健康人粪便，也有肠道患者或带菌者的粪便，所以粪便内除一般正常细菌外，同时也会有一些肠道致病菌存在（如沙门氏菌、志贺氏菌等），因而食品中有粪便污染，则可以推测该食品中存在着肠道致病菌污染的可能性，潜伏着食物中毒和流行病的威胁，必须看作对人体健康具有潜在的危险性。
大肠菌群是评价食品卫生质量的重要指标之一，目前已被国内外广泛应用于食品卫生工作中。
二、总大肠菌群
所谓总大肠菌群系指一群在37℃培养24小时能发酵乳酸、产酸产气、需氧和兼性
厌氧的革兰氏阴性无芽胞杆菌。
三、耐热大肠菌群与粪大肠菌群的比较
北美国家一般使用“粪大肠菌群”概念，如AOAC、FDA。
SN中的“粪大肠菌群”概念
为等同采用AOAC方法，故而使用粪大肠菌群概念；而欧洲使用“耐热大肠菌群”概念，较少使用“粪大肠菌群”。
一般欧洲学者认为，“粪大肠菌群”的提法不太科学，耐热大肠菌群的范围比粪大肠菌群范围大。
耐热大肠菌群
NMKL、ISO
在44.5℃培养，24h天内能产酸产气的细菌
粪大肠菌群
NMKL
在胰蛋白胨肉汤中于44.5℃，24h内产生吲哚的耐热大肠菌群
AOAC
于LST中36℃培养48h内产气，并于EC内培养44℃24h产气的一群细菌
耐热大肠菌群的卫生学意义
作为一种卫生指标菌，耐热大肠菌群中很可能含有粪源微生物，因此耐热大肠菌群的存在表明可能受到了粪便污染，可能存在大肠杆菌。
但是，耐热大肠菌群的存在并不
代表对人有什么直接的危害。
作为粪便污染指标菌，耐热大肠菌群与大肠菌群、大肠杆菌相似，主要以其检出情况来判断食品是否受到了粪便污染。
粪便是肠道排泄物，有健康者，也有肠道病患者或
带菌者粪便，所以粪便中既有正常肠道菌，也可能有肠道致病菌（如沙门氏菌、志贺
式菌、霍乱弧菌、副溶血弧菌等）和食物中毒者。
因此，食品既然受到粪便污染就有
可能对食用者造成潜在的危害。
通常情况下，耐热大肠菌与大肠菌群相比，在人和动物粪便中所占的比例较大，而且由于在自然界容易死亡等原因，耐热大肠菌群的存在可认为食品直接或间接的受到了
比较近期的粪便污染。
因而，耐热大肠菌群在食品中的检出，与大肠菌群相比，说明
食品受到了更为不清洁的加工，肠道致病菌和食物中毒菌的可能性更大。
耐热大肠菌
群比大肠菌群能更贴切地反应食品受人和动物粪便污染的程度，且检测方法比大肠杆
菌简单地多，而受到重视。
四、大肠杆菌（E-Coli）
大肠杆菌（dachangganjun）（Escherichiacoli）细菌门。
细胞杆状，直径约1微米，长约2微米，两端钝圆，周身具鞭毛，可运动。
革兰氏染色阴性，不形成芽孢。
菌落
圆形，白色或黄白色，光滑而具闪光，低平或微凸起，边缘整齐。
最适条件下培养20分钟可繁殖1代。
大肠杆菌是人和温血动物肠道内普遍存在的细菌，是粪便中的主要
菌种。
一般生活在人大肠中并不致病，可能在肠中对合成维生素K起作用。
但它侵入
人体一些部位时，可引起感染，如腹膜炎、胆囊炎、膀胱炎及腹泻等。
人在感染大肠
杆菌后的症状为胃痛、呕吐、腹泻和发热。
感染可能是致命性的，尤其是对孩子及老人。
大肠杆菌的致病物质为定居因子，即大肠杆菌的菌毛和肠毒素，此外胞壁脂多糖的
类脂A具有毒性，O特异多糖有抵抗宿主防御屏障的作用。
大肠杆菌的K抗原有吞噬
作用。
由大肠杆菌导致的疾病：一是肠道外感染。
多为内源性感染，以泌尿系感染为主，
如尿道炎、膀胱炎、肾盂肾炎。
也可引起腹膜炎、胆囊炎、阑尾炎等。
婴儿、年老体弱、慢性消耗性疾病、大面积烧伤患者，大肠杆菌可侵入血流，引起败血症。
早产儿，尤其是生后30天内的新生儿，易患大肠杆菌性脑膜炎；二是急性腹泻。
某些血清型大肠杆菌能引起人类腹泻。
其中肠产毒性大肠杆菌会引起婴幼儿和旅游者腹泻，出现轻
度水泻，也可呈严重的霍乱样症状。
腹泻常为自限性，一般2～3天即愈，营养不良者可达数周，也可反复发作。
肠致病性大肠杆菌是婴儿腹泻的主要病原菌，有高度传染性，严重者可致死。
细菌侵入肠道后，主要在十二指肠、空肠和回肠上段大量繁殖。
此外，肠出血性大肠杆菌会引起散发性或暴发性出血性结肠炎，可产生志贺氏毒素样
细胞毒素。
五、致病性大肠菌
大肠杆菌（escherichia coli）一般不致病。
但致病性大肠菌株能引起食物中毒。
致
病性菌株能侵入肠粘膜上皮细胞，具有痢疾杆菌样致病力。
已知大肠杆菌有菌体（O）抗原170种，表面（K）抗原近103种，鞭毛（H）抗原60种，因而构成了许多血清型。
最近菌毛（F•）抗原被用于血清学鉴定，最常见的血清型K88，K99，分别命名为F4和F5型。
在引起人畜肠道疾病的血清型中，有肠致病性大肠杆菌（简称EPEC）、肠毒素性大肠杆菌（简称ETEC）和肠侵袭性大肠杆菌（间称EIEC）等之分，多数肠
毒素性大肠杆菌都带有F•抗原。
在170种“0”型抗原血清型中约1/2左右对禽有致病性，但最多的是O1、O2、O78、O35四个血清型。
另有产肠毒素大肠杆菌，其肠毒素有耐热性及不耐热性两种，均能使人致病。
该菌在室温下能生存数周，在土壤或水中可存
活数月。
加热60℃15～20分钟可杀灭大多数菌株。
不耐热性肠毒素60℃、1分钟即
破坏；耐热性肠毒素加热100℃、30分钟尚不被破坏。
中毒机制致病性大肠杆菌随食
物入消化道后，可侵入肠粘膜上皮细胞并繁殖，致回肠及结肠有明显的炎症病变，引
起急性菌痢样症状。
产肠毒素大肠杆菌亦可在小肠繁殖并释出肠毒素，引起米泔水样
腹泻。
