班氏法测定尿糖的原理
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班氏试剂与菲林试剂的比较班氏试剂的配置取无水硫酸铜1.47g,溶于100ml热水中,冷却后稀释到150ml,取柠檬酸钠173g,无水碳酸钠100g和600ml水共热,溶后冷却并加水至850ml,再将冷却的150ml硫酸铜倾入即可。
鉴定糖尿的结果沸水浴加热后的现象葡萄糖含量(g/dl)透明蓝色无加热时无变化,仅冷却后有少量沉淀微量,约0.5以下加热1分钟后即出现少量黄绿色沉淀少量,约0.5-1加热10-15秒后即出现土黄色沉淀中量,约1-2加热时很快出现多量砖红色沉淀大量,约2以上班氏试剂与斐林试剂比较:首先,两者的配方不一样。
斐林试剂主要由质量浓度为0.1g·mL-1的NaOH溶液和质量浓度为0.05g·mL-1的CuSO4溶液配制而成。
其中0.1g·mL-1的NaOH溶液称为斐林试剂甲,0.05g·mL-1的CuSO4溶液称为斐林试剂乙。
而班氏试剂的配方为:①400mL水中加85g柠檬酸钠和50g无水碳酸钠;②50mL 加热的水中加入8.5g无水硫酸铜,制成CuO4溶液;③把CuSO4溶液倒入柠檬酸钠?Na2CO3溶液中,边加边搅,如产生沉淀可滤去。
其次,两者在反应原理上略有差别。
利用斐林试剂鉴定时,斐林试剂甲和斐林试剂乙直接反应产生Cu(OH)2,Cu(OH)2和可溶性还原糖反应产生砖红色沉淀。
而班氏试剂中Cu(OH)2的产生却是这样的:柠檬酸钠和碳酸钠均为强碱弱酸盐,在水中它们均可水解产生OH-,与柠檬酸钠?Na2CO3溶液和CuSO4溶液混合时,Cu2+和OH-结合,生成Cu(OH)2,Cu(OH)2与葡萄糖中的醛基反应产生砖红色沉淀。
第三,两种试剂的保存方式不同。
斐林试剂甲和斐林试剂乙可强烈反应产生Cu(OH)2,Cu(OH)2很容易沉淀析出,因此斐林试剂一般为现用现配;而班氏试剂的配方中,柠檬酸钠?Na2CO3为一对缓冲物质,产生的OH-数量有限,与CuSO4溶液混合后产生的Cu(OH)2浓度相对较低,不易析出,因此该试剂可长期保存。
尿糖测定的原理多为什么尿糖测定是一种常见的临床检验方法,用于检测尿液中的糖含量。
尿糖测定的原理多种多样,下面将详细介绍几种常见的原理。
1. 比色法:比色法是尿糖测定的最常用方法之一。
其原理是利用尿液中的糖与还原剂结合产生可见光吸收的彩色物质,通过测量吸光度来判断尿液中糖的含量。
常用的还原剂有尿糖试剂片中的双氯芬酸和3,5-二硝基水杨酸等。
这些还原剂在酸性条件下具有特定的颜色,可以与糖产生可见光吸收作用,吸光度与尿液中糖的浓度成正比。
2. 酶法:酶法是尿糖测定的一种常见方法。
其原理是利用尿液中的糖酶,如葡萄糖氧化酶、葡萄糖脱氢酶等与糖发生特异性反应产生色素,并通过测量颜色的强度来判断尿液中糖的浓度。
具体步骤为将尿液中的糖与酶底物(如葡萄糖或NADP+)反应,产生的色素与染料分子比例相关,通过比色计测量光吸光度来定量糖的含量。
3. 尿糖试纸法:尿糖试纸法是一种简便、快速的尿糖测定方法,适用于实验室和家庭检测。
其原理是尿糖试纸上涂有含有还原剂、酶底物或酶的试剂,当尿液滴在试纸上时,这些试剂与尿液中的糖发生反应产生色素,通过比色来判断尿液中糖的浓度。
尿糖试纸法的优点是简单、快速、不需要复杂的仪器,适用于大规模筛查和临床应急检测。
4. 其他方法:除了上述常见的尿糖测定原理外,还有一些其他方法被用于尿糖测定。
例如,高温蒸发法利用高温将尿液蒸发至干燥,再用酚酞试剂染色,通过比色来判断尿液中糖的含量。
硒酸亚铁法与硫酸铜法利用硒酸亚铁或硫酸铜与糖发生反应,产生氧化还原反应所需的气体或颜色变化来定量糖的含量。
综上所述,尿糖测定的原理多种多样,可以分为比色法、酶法、尿糖试纸法和其他方法等。
这些方法根据不同的化学反应和测量原理来判断尿液中糖的含量,具有不同的优缺点和适用范围。
了解这些原理,可以帮助临床医师和实验室人员准确测定尿液中糖的浓度,从而判断糖尿病等疾病的发生和发展情况。
医学检验—临检基础(十九)尿化学检查一、尿糖当血糖浓度超过8.88mol/L时,超过肾糖阈,尿液中开始出现葡萄糖。
葡萄糖是尿糖的主要成分。
(一)检测方法:(1)班氏法:是非特异性测定葡萄糖的试验,Vc会导致班氏法出现假阳性。
(2)试带法:适用于自动化分析(3)薄层层析法:临床上少用(二)尿糖检查的临床应用1.血糖增高性糖尿(1)摄入性糖尿:摄入大量糖类食品,引起血糖暂时性增高,导致糖尿;静脉输注高渗葡萄糖溶液后,引起尿糖增高。
(2)应激性糖尿:由于情绪激动、脑血管意外、颅脑外伤等情况,出现暂时性高血糖和一过性糖尿。
(3)代谢性糖尿:最常见的是糖尿病。
(4)内分泌性糖尿:见于甲亢、肢端肥大症、库欣综合征等。
2.血糖正常性糖尿(1)肾糖阈降低所致的肾性糖尿,如家族性糖尿,比如Fanconi综合征(2)新生儿糖尿:肾小管对葡萄糖的重吸收功能还不完善所致。
(3)后天获得性肾性糖尿:见于慢性肾炎、肾病综合征,伴肾小管损伤者。
(4)妊娠期或哺乳期妇女:因细胞外液容量增高,肾滤过率增高,而近曲小管的重吸收能力受到抑制,使肾糖阈减低,出现糖尿。
二、尿酮体尿酮体(KET)是尿液中乙酰乙酸(占20%)、β-羟丁酸(占78%)及丙酮(占2%)的总称。
(一)检测方法:试带法:基于亚硝基铁氰化钠法而设计,是目前临床最常用的尿酮体筛检方法。
亚硝基铁氰化钠可与尿中的乙酰乙酸、丙酮起反应呈现紫色,但不与β-羟丁酸起反应。
(二)质量控制:尿酮体中丙酮和乙酰乙酸都具有挥发性,因此测定时应使用新鲜尿液标本。
(三)临床意义:1.糖尿病酮症酸中毒(1)糖尿病酮症酸中毒早期诊断(尿酮体阳性),并能与乳酸中毒或高血糖高渗透性糖尿病昏迷相区别(尿酮体阴性)。
(2)治疗监测:糖尿病酮症酸中毒早期病例中,主要酮体成分是β-羟丁酸(一般试带法无法测定),而乙酰乙酸很少或缺乏,此时测得结果可导致对总酮体量估计不足。
当糖尿病酮症酸中毒症状缓解之后,β-羟丁酸转变为乙酰乙酸,反而使乙酰乙酸含量比急性期早期增高,此时易造成对病情估计过重。
尿糖(GLU)尿糖(GLU)介绍:正常人尿液中可有微量葡萄糖,尿内排出量<2.8mmol/24h用普通定性方法检查为阴性。
糖定性试验呈阳性的尿液称为糖尿,一般是指葡萄糖尿(glucosuria)偶见乳糖尿、戊糖尿、半乳糖尿等。
尿糖形成的原因和机制为:当血中葡萄糖浓度大于8.8mmol/L时,肾小球滤过的葡萄糖量超过肾小管重吸收肾力即可出现糖尿。
尿中是否出现葡萄糖取决于三个因素:①动脉血中的葡萄糖浓度②每秒流经肾小球中的血浆量;③近端肾小管上皮细胞重吸收葡萄糖的能和即肾糖阈。
肾糖阈可随肾小球滤过率和肾小管葡萄糖重吸收率的变化而改变,当肾小球滤过率诂低时可导致“肾糖阈”提高,而肾小管重吸收减少时则可引起肾糖阈降低。
葡萄糖尿除可因血糖浓度过高引起的外,出因肾小管重吸收能力降低引起的,后者备糖可正常。
目前尿糖的定性过筛试验多采用:①葡萄糖氧化酶试带法,此法特异性台、灵敏主蒿、简便、快速、并可用于尿化学分析仪。
②以前采用的班氏尿糖定性试验是测定葡萄糖的特异试验。
凡尿中存在其它糖(如果糖、乳糖、戊糖等)及其它还原物质如肌酐、尿酸、维生素C等也可呈阳性反应,现多已不用。
③薄层层析法是鉴别、确保尿糖种类的特异敏感的实验方法,但操作复杂,仅在必要时应用。
尿糖(GLU)正常值:正常人尿液中可有微量葡萄糖,尿内排出量<2.8mmol/24h用普通定性方法检查为阴性。
[参考值]定性:阴性(-)定量:<2.8mmol/24h(<0.5g/24h)。
浓度为0.1-0.8mmol/L(1-15mg/dl)。
尿糖(GLU)临床意义:异常结果:1.血糖增高性:糖尿(1)饮食性糖尿:可因短时间摄入大量糖类而引起。
因此为确诊有无糖尿,必须检查清晨空腹的尿液以排除饮食的影响。
(2)一过性糖尿:也称应激性糖尿。
于颅脑外伤、脑血管意外、情绪激动等情况下,延脑血糖中枢受到刺激,导致肾上腺素、胰高血糖至少大量释放,因而事出现暂时性高血糖和糖尿。
尿液干化学分析原理及其临床意义尿液的干化学分析在各级医院甚至诊所的应用已经十分普遍,各品牌的尿分析仪及其配套试纸虽略有差异,项目代码也略有不同,但检测原理基本相同:一、葡萄糖(GLU)[反应原理]:采用酶法测试,用两种酶,分别是葡萄糖氧化酶和过氧化氢酶。
主要反应过程如下:现在几乎所有的试纸都是采用酶法,因为酶法具有特异性强、灵敏度高、反应时间短等优点。
不同型号的试纸所选用的指示剂有所不同。
[临床意义]:1. 生理性糖尿为一过性糖尿,是暂时性的,排除生理因素后恢复正常。
主要有三种:①饮食性糖尿,即在短时间内服用大量糖类,引起血糖浓度过大;②应急性糖尿,在脑外伤、脑血管意外、情绪激动、剧烈运动周期性四肢麻痹等情况下,延脑糖中枢受刺激,使肾上腺激素或胰岛素分泌异常,可出现暂时性的糖尿;③妊娠中后期多可见糖尿。
2. 病理性糖尿也可分为三种:①真性糖尿,既胰岛素的分泌量相对或绝对不足,使血糖浓度超过肾糖阈尿糖检查不仅可以诊断糖尿病,还可以指导临床医生决定胰岛素的用量、判断疗效;②肾性糖尿,即肾小管对葡萄糖的重吸收功能减退,新生儿的近曲小管功能未完善也能出现糖尿;③其他糖尿,如生长激素过多(肢端肥大症)、甲状腺激素过多(甲亢)、肾上腺激素过多(嗜铬细胞瘤)、皮质醇(Cμshing综合症)、胰高血糖素等都可使血糖浓度高过肾糖阈而出现糖尿;另外,肥胖病、高血压也可能出现糖尿。
[注意事项]:1. 因为尿糖分析试纸的后一步反应是氧化还原反应,当尿液中含有比色素还原能力更强的物质时,可使测试结果偏低甚至出现假阴性。
如尿液中含有维生素C时就能使测试结果偏低甚至假阴性。
2. 抗生素对班氏法糖定性、糖定量测定结果都有一定的影响,而对干化学法的测试结果无影响。
尿液存放时间过长也能使尿糖被细菌分解使浓度下降,但含有抗生素时几乎不下降。
3. 高浓度的酮体尿可引起假阴性;尿液比重增高,可降低试剂带对尿糖的敏感性;服用大量左旋多巴时,该药物的代谢产物会对测试反应产生抑制作用,使测试结果偏低或出现假阴性;尿液被过氧化物或次氯酸盐等强氧化性物质污染的时候能出现假阳性。
高中生物必修3实验归纳学习高中生物需要讲究方法和技巧,更要学会对知识点进行归纳整理。
下面是店铺为大家整理的高中生物必修3实验知识点,希望对大家有所帮助!高中生物必修3实验篇一:模拟尿糖的检测目的:学会尿糖的检测方法、检查“尿样”中是否含有葡萄糖。
1、取样:正常人的尿液和糖尿病患者的尿液2、检测方法:斐林试剂(水浴加热)或班氏试剂或尿糖试纸3、结果:(用斐林试剂检测)试管内发生出现砖红色沉淀的是糖尿病患者的尿液,未出现砖红色沉淀的是正常人的尿液。
4、分析:因为糖尿病患者的尿液中含有还原糖,与斐林试剂发生反应产生砖红色沉淀,而正常人尿液中无还原糖,所以没有发生反应。
班氏试剂:①在40ML水中加入85ML柠檬酸钠和50g无水碳酸钠,形成柠檬酸钠――Na2CO3溶液。
②在50ML热水中加入8.5g无水CuSO4制成CuSO4溶液,③把CuSO4溶液倒入柠檬酸钠――Na2CO3溶液中,边加边搅拌,如有沉淀可过滤。
班氏试剂同斐林试剂一样,同还原糖反应,生成砖红色沉淀。
优点:1,班氏试剂可长期保存,不必现配现用,柠檬酸钠――Na2CO3为缓冲对,产生的OH-有限,2,碱性比斐林试剂弱,灵敏度高,干扰因素少,实际应用更多。
高中生物必修3实验篇二:探究水族箱(或鱼缸)中群落的演替要求:(1)水族箱必须是密封的,且是透明的,放置于室内通风、光线良好的地方,但要避免阳光直接照射。
(2)组成成分:非生物成分、生产者、消费者和分解者(3)各生物成分的数量不宜过多,以免破坏食物链实验目的:设计一个生态缸,观察这一人工生态系统中群落的演替情况实验原理:在有限的空间内,依据生态系统的原理,将生态系统具有的成分进行组织,构建一个人工微型生态系统是可能的。
但同时,这个人工生态系统的稳定性是有条件的,也可能是短暂的,它会发生群落的演替。
步骤:(1)按100cm×70cm×50cm的标准制作生态缸框架。
(2)在生态缸内底部铺垫花土和沙土,花土在下面,一边高,一边低;沙土在上面,沙土层厚5~10cm。
一、实验目的1. 熟悉尿糖测定的原理和方法。
2. 掌握尿糖测定的操作步骤。
3. 了解血糖、尿糖的关系,以及尿糖测定在临床诊断中的应用。
二、实验原理尿糖测定是利用葡萄糖氧化酶法检测尿液中的葡萄糖含量。
葡萄糖在葡萄糖氧化酶的作用下,与氧气反应生成葡萄糖酸和过氧化氢,过氧化氢在过氧化物酶的作用下分解生成水和氧气,同时将色原氧化成有色物质,通过比色法测定吸光度,从而计算出尿糖含量。
三、实验材料1. 实验试剂:- 葡萄糖氧化酶试剂- 过氧化物酶试剂- 草酸铵- 甲基红- 溴甲酚绿- 标准葡萄糖溶液- 尿液样本2. 实验仪器:- 酶标仪- 移液器- 移液管- 试管- 烧杯- 研钵- 电子天平四、实验步骤1. 标准曲线绘制:- 准备不同浓度的标准葡萄糖溶液。
- 按照试剂说明书进行操作,测定各浓度溶液的吸光度。
- 以葡萄糖浓度为横坐标,吸光度为纵坐标,绘制标准曲线。
2. 样本测定:- 将尿液样本按照试剂说明书进行稀释。
- 按照标准曲线绘制步骤,测定尿液样本的吸光度。
- 根据标准曲线,计算出尿液样本的葡萄糖浓度。
3. 结果计算:- 将尿液样本的葡萄糖浓度换算成尿糖浓度(mmol/L)。
- 根据尿糖浓度,判断尿糖的阳性程度。
五、实验结果1. 标准曲线绘制:- 标准曲线线性良好,相关系数R²>0.99。
2. 样本测定:- 尿液样本的葡萄糖浓度为5.0 mmol/L。
3. 结果计算:- 尿糖浓度为5.0 mmol/L,为阳性。
六、实验讨论1. 本实验采用葡萄糖氧化酶法测定尿糖,该方法灵敏度高、准确性好、操作简便,是临床常用的尿糖测定方法。
2. 尿糖测定在临床诊断中具有重要意义,可协助诊断糖尿病、尿崩症等疾病。
3. 本实验过程中,应注意以下几点:- 标准曲线的绘制要准确,避免误差。
- 尿液样本的稀释要均匀,避免影响测定结果。
- 严格遵守操作规程,确保实验结果的准确性。
七、实验总结本次实验成功完成了尿糖的测定,掌握了尿糖测定的原理、方法和操作步骤。
班氏法测定尿糖的原理
班氏法测定尿糖的原理
班氏法是一种用于测定尿液中糖分含量的化学分析方法。
该方法通过添加班氏试剂到尿样中来测定尿液中的糖含量。
这种试剂由苯酚和氨水混合而成,它们与糖分子有特定的化学反应,生成一种深褐色化合物。
班氏法的原理基于糖的还原性质。
当糖分子与班氏试剂反应时,它们会被还原成更简单的化合物。
班氏试剂中的苯酚和氨水被还原为3,5-二羟甲基苯并噻唑类物质(巴尔多湖紫)。
这种化合物有强烈的吸收峰,可以用于测量尿液中糖分的含量。
因此,班氏试剂的颜色深度与尿液中糖的浓度成正比。
班氏法的操作比较简单。
首先,将尿样与班氏试剂混合并深度加热,使其充分反应。
然后将反应混合物冷却,并用分光光度计或比色计测量其吸光度。
尿中糖分量的浓度可根据吸光度数据计算出。
总体来说,班氏法是一种简单、快速且准确测定尿液中糖分含量的方法。
它在临床和科研领域有着广泛的应用。
但是,班氏法不能区分不同类型的糖分子,因此不能用于鉴定尿液中特定类型的糖。
此外,该
法也不能测定非糖的物质含量,因此对于需要同时测定其他化学成分的尿液来说并不适用。
总之,班氏法是一种基于糖的还原性质测定尿液中糖分含量的方法。
它简单、快速、准确,但不能区分不同类型的糖分子,也不能同时测定其他非糖成分的含量。