山东省局部地区番茄黄化曲叶病毒的分子鉴定

番茄满棚“黄化”，“缺素”还是“病毒”，分子检测大揭秘！天气回暖，虽有清明前后几天的冷天气，已然拦不住春天的脚步，万物复苏，遍地花开。

近来有山东农户反映自己这边棚里一人多高的番茄满棚“黄化”，不同人员会诊，多数说明为缺素，自己拿捏不准，就是心里感觉不对劲。

我们前去观察采样，借助实验检测，确诊这满棚的番茄“黄化”，又是病毒病惹的祸，“是去是留”，我们的棚友心里终于有个着落！1、田间现状听说棚友番茄出现异样，我们应邀赶去现场会诊，首先映入眼帘的是满棚的“黄花”（图1）通过和棚友介绍和现场观察，我们了解到以下情况：图1 满棚“黄花”2、大家一起来会诊（1）定植时间：2017年11月份（2）田间管理：定植后，粉虱出现过一阵子（2017年11月份），但是随即就被按下去，我们去的时候（2018年3月底），跑遍全棚几乎看不到粉虱的影子。

（3）“不对劲的时候”：定植后1月左右，膝盖高的番茄，棚友感觉出不对劲，头部有些发黄，且部分叶脉发紫，不过鉴于当时气温低，疑为低温影响导致。

年关过后，天气回暖，虽有黄化现象，但是番茄不断长高，时至今日，有1米7左右的番茄棵子。

（4）会诊史：多处会诊，考虑到前期低温，品种适应性，诊为根系不好，缺素。

前期虽有怀疑病毒病，但是棚内的番茄仍不断生长，现如今已经一人多高，早期得了病毒病一般明显矮化，还能长一人多高？因此前期的诊断是排除病毒病危害引起。

3、室内检测，解疑答惑图2 1号番茄植株图3 2号番茄植株图4 3号番茄植株根据现场观察，番茄植株虽然不断长高，但是相比同时期番茄（2米多高）生长相对迟缓，依然显矮；叶片脉间黄化明显（图2、图3、图4），疑似番茄病毒病。

分别在棚内采集了3株表现不同症状的番茄植株，带回实验室内，利用分子生物学方法，分别进行DNA和RNA 提取和病毒检测，检测结果，三个病样均能通过TYLCV-1/2（番茄黄化曲叶病毒的引物）和ToCV-1/2（番茄褪绿病毒的引物）扩增出约与预测大小一致的条带，初步表明了这3个番茄均复合感染番茄褪绿病毒（Tomato chlorisis virus，T oCV）和番茄黄化曲叶病毒（Tomato yellow leaf curl virus，TYLCV）；以此类推，该棚的番茄多数均感染了病毒病。

番茄黄化曲叶病毒病的研究进展分析番茄黄化曲叶病毒病（Tomato Yellow Leaf Curl Virus Disease，缩写TYLCV）是一种由番茄黄化曲叶病毒（TYLCV）引起的严重病害。

该病毒主要感染茄科植物，如番茄、辣椒等，会导致植株黄化、卷曲、发育不良等严重症状，严重影响茄科作物的产量和品质。

本文将对目前关于TYLCV病毒的研究进展进行分析。

一、病毒鉴定与检测方法研究人员通过分子生物学手段对TYLCV病毒进行鉴定和检测。

其中最常用的方法是PCR扩增和序列分析。

研究人员通过设计引物和探针来扩增病毒的特定片段，并通过序列分析比对已知的TYLCV基因组序列，确定病毒的种属和亚种。

还有一些新的检测方法正在研究中，如聚合酶链反应-酶联免疫吸附试验（PCR-ELISA）和卷曲病毒病症集检测（ToCV SBT）。

二、病毒传播途径和宿主范围TYLCV病毒主要通过白薯蝽传播。

白薯蝽是TYLCV的主要媒介昆虫，其通过在植株间传播病毒。

种子传播和接种传播也是TYLCV的传播途径。

TYLCV病毒具有广泛的宿主范围，除了茄科植物外，还可以感染一些豆科和鸭跖草科植物。

三、病毒与寄主植物互作研究研究人员通过病毒、宿主和宿主免疫系统之间的互作研究，深入了解TYLCV的致病机制。

研究发现，TYLCV病毒可以通过抑制植物的防御响应和调节宿主基因表达来促进自身的繁殖。

研究还发现一些植物基因在病毒感染中起到重要的调控作用，如植物雄性不育基因B2（SlNOB1）和Rp1-DeltaK遗传变异体等。

四、抗性品种筛选和遗传改良通过筛选和培育抗TYLCV的品种，是防控TYLCV病毒病的重要手段。

研究人员通过种质资源的评估和遗传背景的分析，筛选出一些具有抗TYLCV性状的品种，并将其引入育种工作中。

研究人员还通过分子遗传学和基因组学的方法进行分子标记辅助选择和基因功能研究，为育种提供了更多的科学依据。

当前关于TYLCV病毒的研究主要集中在病毒鉴定与检测、病毒传播途径和宿主范围、病毒与寄主植物互作、抗性品种筛选和遗传改良以及病毒的生物学特性和传递机制等方面。

番茄抗黄化曲叶病基因Ty-2的分子标记及种质资源初步鉴定王宁;李景富;李会佳【摘要】以抗番茄黄化曲叶病毒病材料‘CLN2498D’为父本,感病材料‘早粉2号’为母本,以其F2代为研究对象,采用AFLP及SSR两种标记方法,筛选与Ty-2基因连锁的标记.通过对256对AFLP引物及30对SSR引物的筛选,共获得5个AFLP标记和2个SSR标记与Ty-2基因连锁,其中标记E02M11距离目标基因5.8cM,另有3个标记距离均在10 cM以内.将标记E02 M11用于30份番茄材料的种质资源筛选,获得12个含有该标记的番茄材料,为番茄抗黄化曲叶病毒育种工作提供基础.【期刊名称】《植物保护》【年(卷),期】2015(041)001【总页数】6页(P78-83)【关键词】番茄黄化曲叶病毒;Ty2;分子标记;种质资源鉴定【作者】王宁;李景富;李会佳【作者单位】东北农业大学园艺学院,哈尔滨150030;东北农业大学园艺学院,哈尔滨150030;东北农业大学园艺学院,哈尔滨150030【正文语种】中文【中图分类】S436.412.11番茄黄化曲叶病毒（Tomato yellow leaf curl virus，TYLCV）属于双生病毒科（Geminiviridae）菜豆金色花叶病毒属（Begomovirus），通过烟粉虱（Bemisia tabaci）进行传播［1］，国际病毒分类委员会将其分为TYLCV、TYLCAx V、TYLCCNV、TYLCGu V、TYLCIDV、TYLCKaV、TYLCMaIV、TYLCMLV、TYLCSV、TYLCTHV、TYLCVNV，同时每种病毒又包含不同株系。

这些病毒均能引起番茄黄化曲叶病毒病。

番茄对该病毒的抗性基因已报道的共有5个，分别被命名为Ty-1、Ty-2、Ty-3、Ty-4和Ty-5。

这些抗性基因逐步被科学家采用多种方法进行定位。

Ty-1基因来自于智利番茄‘LA1969’。

山东寿光地区番茄黄化曲叶病毒株系的分子鉴定纪文磊;李文丽;王富【摘要】本试验对山东寿光地区两份番茄病毒病样品进行分子鉴定,结果证明山东寿光地区番茄感染的病毒为番茄黄化曲叶病毒(TYLCV).对两病毒样品的DNA-A(该病毒总基因组)全长序列进行测定分析,发现两样品病毒DNA-A全长序列共有2 781个核苷酸,两序列同源性达99.9%以上,很可能为同一分离物.将此序列经nucleotide blast(核苷酸序列比对程序)比对后分析发现该序列与我国上海、安徽等地报道的番茄黄化曲叶病毒序列同源性在99.0%以上,且山东寿光地区番茄黄化曲叶病毒应为TYLCV-Israel株系的分离物.【期刊名称】《青岛农业大学学报（自然科学版）》【年(卷),期】2010(027)003【总页数】4页(P216-219)【关键词】寿光;番茄黄化曲叶病毒(TYLCV);DNA-A;分子鉴定【作者】纪文磊;李文丽;王富【作者单位】青岛农业大学园林园艺学院,山东,青岛266109;青岛农业大学园林园艺学院,山东,青岛266109;青岛农业大学园林园艺学院,山东,青岛266109【正文语种】中文【中图分类】S641.2病毒病一直是造成番茄大面积减产的主要病害之一。

番茄黄化曲叶病毒病(Tomato yellow leaf curl virus disease,TYLCVD)是一种对番茄产量影响非常严重的病害,该病最早于 1964年在以色列被发现,目前已在中东、东南亚、东亚、非洲等众多的国家和地区陆续发现[1,2]。

近年来在我国的浙江、上海、广东、广西、云南、重庆、江苏、山东等地相继发生[3,4],年发生面积超过 100万亩,给当地的番茄生产造成了巨大的损失。

山东一向是我国的蔬菜生产大省,自2007年发现该病毒病以来,目前已在全省大部分地区发生,并以接近江苏省的荷泽、枣庄地区发病最早也最为严重,在寿光、东营、临沂、淄博、济宁、济南和日照等地也有相当程度发生,并有逐年加重且蔓延全省的趋势,其主要危害为越夏番茄和秋延后栽培番茄,严重时可造成绝产。

侵染茄科蔬菜的三种病毒以及番茄黄化曲叶病毒伴随卫星的检测与分子鉴定植物病毒病是蔬菜种植业的重要限制因素,目前已经成为制约我国蔬菜产业可持续发展的重要因素。

番茄黄化曲叶病毒(Tomato yellow leaf curl virus, TYLC V),属于双生病毒科菜豆金黄花叶病毒属,引起番茄黄化曲叶病,是通过媒介昆虫-烟粉虱传播的蔬菜生产上的一种毁灭性病害。

蚕豆萎蔫病毒(Broad bean wilt virus, BB WV),为世界性流行的病毒,它的寄主范围极广,造成严重的危害,在各产区均有分布。

番茄褪绿病毒(Tomato chlorosis virus, ToCV)病是从国外传入我国的一种烟粉虱传播的新型病毒病,可以侵染多种植物。

本研究主要以TYLCV及其卫星、BBWV口ToCV为主要对象,以PCR技术为基础,对山东省、河南省、河北省和辽宁省蔬菜主产区展开系统调查,目的是摸清蚕豆萎蔫病毒与番茄褪绿病毒的发生分布情况和寄主范围,以及伴随番茄黄化曲叶病毒的卫星分子。

研究结果表明,在对山东省、河南省、河北省和辽宁省TYLCV 样品的检测过程中,同时利用双生病毒卫星DNA的通用引物beta01/beta02,对TYLCV阳性样品进行了DNAβ的检测,结果发现,山东昌邑县、河南焦作市感病样品可以扩增出约1.3Kb的特异性条带,经序列比对,发现与越南黄化曲叶病毒卫星分子(Tomato yellow leaf curl Vietnam betasatellite(TYLCVNB)一致性为88%,均为越南黄化曲叶病毒卫星DNAβ分子,表明山东省、河南省TYLCV分离物中含有这种新型的DNAβ分子,这是国内首次发现T YLCV病毒DNA-A与越南黄化曲叶病毒卫星DNAβ以病害复合体形式存在。

通过检测和序列分析,基本确定了TYLCV病毒伴随卫星分子的主流种类和其发生蔓延、分子变异及流行趋势等；基本摸清了BBWV病毒在山东省辣椒主产区的发生分布情况。

番茄黄化曲叶病毒的快速分子检测李常保;崔彦玲;张丽英;李传友【期刊名称】《遗传》【年(卷),期】2012(34)3【摘要】番茄黄化曲叶病毒是当前世界范围内危害番茄生产的毁灭性病害.文章针对番茄黄化曲叶病毒全基因组序列的特异区段自主设计了1 对特异性PCR 引物(上游引物TYLCV-F:5′-ACGCATGCCTCTAATCCAGTGTA-3′,下游引物TYLCV-R:5′-CCAATAAGGCGTAAGCGTGTAGAC-3′),依据PCR 扩增特异片段543 bp 的有无可以快速、准确、高效、特异地检测出是否感染了TYLCV 病毒,这项技术可以方便地应用到工厂化育苗的带毒性检测、蔬菜大规模生产中植株发病情况的快速检测以及抗病毒育种,从而为蔬菜安全可持续生产提供科技支撑.【总页数】5页(P366-370)【作者】李常保;崔彦玲;张丽英;李传友【作者单位】北京市农林科学院蔬菜研究中心,北京100097;北京市农林科学院蔬菜研究中心,北京100097;北京市农林科学院蔬菜研究中心,北京100097;中国科学院遗传与发育生物学研究所,北京100101【正文语种】中文【相关文献】1.沈阳市新民地区番茄黄化曲叶病毒分子检测 [J], 苗则彦;白元俊;李颖;赵杨2.中国台湾番茄曲叶病毒侵染引起广东番茄黄化曲叶病 [J], 何自福;虞皓;毛明杰;罗方芳;林奕韩;王穗涛3.山东烟草番茄黄化曲叶病毒的分子检测和序列分析 [J], 李刚;李现道;赵黎明;李景山;王云;竺晓平4.北京番茄黄化曲叶病毒病的发生及分子检测 [J], 李常保;柴敏;李季;郑建秋5.番茄褪绿病毒与番茄黄化曲叶病毒复合侵染对番茄褪绿病毒传播的影响 [J], 廖锦钰;黄莉萍;张战泓;张德咏;谭新球;刘勇;史晓斌因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

番茄黄化曲叶病毒病防控技术意见20XX年，山东省首次在济宁市鱼台县发现番茄黄化曲叶病毒病，20XX年山东省该病毒的发生面积近1.3万hm2，发病田病株率一般在20%～30%，严重的达60%～80%，其中潍坊、淄博、菏泽、烟台、泰安等地发生严重，如寿光有7000～8000hm2 番茄严重减产乃至绝产。

为有效防控番茄黄化曲叶病毒病，为蔬菜生产安全和人民健康提供技术保障，山东省蔬菜产业技术体系通过调研、试验和分析，研究制定了冬季番茄黄化曲叶病毒病防治技术意见。

一、病毒鉴定番茄黄化曲叶病毒（Tomato yellow leaf curl virus, 简称TYLCV 或TY ），最早于1964年在以色列被发现，该病毒主要通过“超极害虫”烟粉虱传播，可以侵染茄科、豆科等多种植物，是一种对番茄产量有毁灭性影响的严重病害，目前该病已在中东、东南亚、东亚、地中海区域、加勒比海地区、美洲和非洲等近40个地区和国家相继被发现。

目前该病在我国传播基本呈现自南向北、自东向西的蔓延趋势。

山东省现代农业产业技术体系蔬菜创新团队对山东省8个地区，12份番茄病毒病样品进行分子鉴定，结果证明山东地区番茄感染的病毒为番茄黄化曲叶病毒（TYLCV）。

对病毒样品的DNA-A（该病毒总基因组）全长序列进行测定分析，发现样品病毒DNA-A全长序列共有2 781个核苷酸，序列之间同源性达99.42%，很可能为同一分离物。

将各序列经比对后分析发现各序列与我国上海、安徽、浙江、江苏等地报道的番茄黄化曲叶病毒序列同源性在98.0%以上，而已知中国上海番茄黄化曲叶病毒（AM282874）与安徽番茄黄化曲叶病毒（FJ646411）均为TYLCV-ISR株系的分离物，因此，山东地区番茄感染的番茄黄化曲叶病毒应该也是TYLCV-ISR株系的一个分离物。

二、典型症状及危害特点该病在番茄花期、结果期、采收期各阶段均可发生。

番茄植株感染病毒后，发生初期主要表现为植株生长迟缓或停滞，节间缩短，植株明显矮化；上部叶片黄化，叶脉间叶肉发黄，叶片边缘上卷，叶片有褶皱，叶片变小变厚，叶质脆硬，以植株上部叶片症状典型，下部老叶症状不明显；无法正常开花结果；后期表现坐果少，果实变小，膨大速度慢，成熟期的果实不能正常转色。

山东省农业厅关于加强番茄黄化曲叶病毒病查治工作的紧急通知文章属性•【制定机关】山东省农业厅•【公布日期】2009.09.01•【字号】鲁农发电[2009]66号•【施行日期】2009.09.01•【效力等级】地方规范性文件•【时效性】现行有效•【主题分类】农业管理综合规定,原材料工业正文山东省农业厅关于加强番茄黄化曲叶病毒病查治工作的紧急通知（鲁农发电〔2009〕66号）各市农业局（农委）：番茄黄化曲叶病毒病是一种由烟粉虱传播的暴发性、毁灭性病害，发病田块一般减产20%-30%，严重的甚至绝收。

今年以来，该病在我省发生面积近20万亩，发病田病株率一般在20%-30%，重的达60%-80%，其中潍坊、淄博、菏泽等地发生严重。

为加强防治，有效地控制该病在我省的蔓延，最大限度减少损失，现紧急通知如下：一、提高认识、加强领导番茄黄化曲叶病毒病作为新传入我省的病害，基层技术人员和农民对其了解不多，防治技术储备不足，加之生产上还没有防治病毒病的有效药剂，造成该病防治难度大。

各级农业部门一定要充分认识这种病害的危害性，加强领导，尽快采取措施，把番茄黄化曲叶病毒病的查治作为保障蔬菜生产安全和农民增收的重要工作抓紧抓好。

二、及时准确掌握病情当前正值传毒昆虫烟粉虱发生高峰期，各地要迅速组织专业技术人员，对烟粉虱和番茄黄化曲叶病毒病进行广泛调查，准确掌握其发生动态。

一是要准确掌握病毒病发生危害情况。

二是要调查烟粉虱发生程度。

三是要监测烟粉虱带毒情况。

四是要分析烟粉虱发生与病毒病危害关系。

五是要确保病虫信息传递及时到位。

三、采取措施科学防控防治番茄黄化曲叶病毒病要坚持预防为主、综合防治。

主要针对传毒烟粉虱，采取农业、物理、化学等各种措施进行有效防控。

1.农业措施。

关键措施是培育无病无虫秧苗，选择远离烟粉虱和病毒病发生的区域集中育苗。

同时要适期晚移植，降低幼苗在移栽棚里受烟粉虱和病毒侵染机会。

及时清除衰枝老叶深埋或烧毁以减少种群数量。