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番茄褪绿病毒与番茄黄化曲叶病毒复合侵染对番茄褪绿病毒传播的影响作者：廖锦钰黄莉萍张战泓张德咏谭新球刘勇史晓斌来源：《植物保护》2021年第03期摘要：番茄褪绿病毒Tomato chlorosis virus（ToCV）是一种由烟粉虱Bemisia tabaci传播的正义单链RNA病毒，在田间常与番茄黄化曲叶病毒Tomato yellow leaf curl virus（TYLCV）復合侵染而造成番茄生产上重大的经济损失。
为了明确ToCV与TYLCV的复合侵染对烟粉虱传播ToCV所造成的影响，本文采用RT-PCR以及qRT-PCR检测了复合侵染的番茄对烟粉虱获取和传播ToCV的影响。
研究表明，烟粉虱取食复合侵染的番茄后对ToCV的传播效率显著提高，仅25头烟粉虱的传毒率即可达到100%，ToCV在烟粉虱以及番茄体内的累积量均显著提高。
说明这种复合侵染促进了烟粉虱对ToCV的传播，在田间应当及时防控烟粉虱，警惕病毒与烟粉虱的蔓延。
关键词：番茄褪绿病毒; 番茄黄化曲叶病毒; 烟粉虱; 复合侵染中图分类号：S 436.412.11文献标识码： ADOI： 10.16688/j.zwbh.2020063Influence of co-infection of Tomato chlorosis virus and Tomato yellowleaf curl virus on the transmission of Tomato chlorosis virusLIAO Jinyu1，2， HUANG Liping1，2， ZHANG Zhanhong3， ZHANG Deyong2， TAN Xinqiu2， LIU Yong2*， SHI Xiaobin1，2*（1. Subcollege of Longping， Graduate School of Hunan University， Changsha 410128，China;2. Hunan Plant Protection Institute， Hunan Academy of Agricultural Sciences， Changsha 410125， China;3. Hunan Vegetable Institute， Hunan Academy of Agricultural Sciences， Changsha 410125，China）AbstractTomato chlorosis virus （ToCV） is a positive single-stranded RNA virus transmitted by Bemisia tabaci， which is usually co-infected with Tomato yellow leaf curl virus （TYLCV） in the field and causes significant economic losses in tomato production. In order to clarify the influence of co-infection of ToCV and TYLCV on the transmission of ToCV， RT-PCR and real-time quantitative PCR were used to detect the effect of co-infection on the virus acquisition and transmission of ToCV by B.tabaci. The results showed that the ToCV transmission efficiency was significantly improved after co-infection. Only 25 B.tabaci individuals could cause a 100% transmission rate， and the quantities of ToCV in B.tabaci and tomato were significantly increased. This co-infection promoted the spread of ToCV by B.tabaci. The whitefly should be prevented timely， and the spread of virus and whitefly should be highly regarded in the field.Key wordsTomato chlorosis virus; Tomato yellow leaf curl virus; Bemisia tabaci; co-infection番茄褪绿病毒Tomato chlorosis virus （ToCV），隶属于长线性病毒科Closteroviridae，毛形病毒属Crinivirus，是一种由烟粉虱Bemisia tabaci传播的半持久性RNA病毒，于2004年在我国台湾首次报道[1]。
番茄黄化叶曲病的认识及防治导读：本文番茄黄化叶曲病的认识及防治，仅供参考，如果觉得很不错，欢迎点评和分享。
番茄黄化叶曲病的认识及防治河北科技师范学院园艺科技学院设施农业科学与工程安然021*******指导教师：宋世清摘要：番茄黄化曲叶病毒病是新近传入我国的植物病害，是一种双生病毒，由烟粉虱传播，受害植物表现为生长缓慢，植株明显矮化；顶部叶片皱缩、叶周边向上卷曲，叶片变厚变小，叶片区域性黄化；病株顶端似菜花状；坐果少，果实硬、小，不能正常转色，丧失商品性；为害严重时不能开花坐果，严重影响果实与植株的品质。
由于该病扩展迅速，爆发性强，因此要采取全方位的防治措施，如选用抗病或耐病优良品种，采取农业防治措施、物理措施和化学措施等方法进行防治。
关键词番茄黄化曲叶病毒烟粉虱防治1病原与症状番茄黄化曲叶病毒（Tomato yellow leaf curlvirus，TYLCV）为菜豆金色花叶病毒属（Begomovirus－es）的一种双生病毒，由媒介昆虫烟粉虱传播（ZhangHui et al.，2009）。
番茄植株感染病毒后，初期植株生长迟滞矮化，节间缩短，上部叶片黄化，叶片边缘向上卷曲，褶皱簇状，叶厚且脆。
后期叶片变枯，新叶有黄绿不均的斑，严重时坐果少，果实小，畸形果多，成熟慢。
幼苗染病严重矮化，开花结果异常，成株染病的植株上部叶片和新芽表现症状，中下部叶片一般无影响。
2流行规律2.1发病周期4～5月份和7～9月发病重。
从零星发现个别植株矮化到发现个别植株顶部叶片异常，一般需2周时间，再经2周后有30％植株感病，在无有效防治措施情况下，病情不断增加，发病区域迅速扩大，3～4 d后田间病株率达80％以上。
2.2传播媒介烟粉虱是番茄黄化曲叶病毒病的主要传毒介体。
获毒后可终生传毒，但不经卵传播。
大棚内病毒株呈明显的传染性病毒分布，而且低密度的烟粉虱仍可导致病毒的扩散与流行。
其中以B型烟粉虱虫口数量增长快、传毒能力强，繁殖世代短，适应能力强，成为近年来烟粉虱暴发、番茄黄化曲叶病毒病流行的主要原因。
番茄黄化曲叶病及抗病育种研究概况张春奇;李红波;潘永【摘要】Tomato yellow leaf curl disease is the most destructive virus disease of tomato in tropical and subtropical regions. With the development of protected production in north white fly can over-winter and spread the virus disease. Tomato yellow leaf curl virus is now becoming one of the major limiting factors for tomato production in China and the world. The progresses of tomato yellow leaf curl virus disease damage,virus biology research and breeding of resistant varieties reviewed in this article.%番茄黄化曲叶病是热带、亚热带地区最具毁灭性的番茄病毒病之一.随着保护地的发展,温室烟粉虱在北方保护地越冬、传播、危害,现已成为影响我国乃至全世界番茄生产的主要限制因素之一.从番茄黄化曲叶病毒病为害情况、病毒研究概况、抗病品种选育进展等方面进行了综合阐述.【期刊名称】《中国瓜菜》【年(卷),期】2011(024)005【总页数】5页(P50-54)【关键词】番茄黄化曲叶病;研究概况;烟粉虱;抗性;分子标记【作者】张春奇;李红波;潘永【作者单位】河南省洛阳市农业科学院河南洛阳475100;河南省洛阳市农业科学院河南洛阳475100;河南省洛阳市农业科学院河南洛阳475100【正文语种】中文番茄黄化曲叶病最早在1939年发现于以色列约旦河一带，1964年被正式命名为番茄黄化曲叶病（tomato yellow leaf curl disease，TYLCD）[1-2]。
番茄黄化曲叶病毒病的研究进展分析作者：高敏丽张华来源：《粮食科技与经济》2019年第03期[摘要】本文对番茄黄化曲叶病毒病的发病症状、病毒的特性与分布、基因组结构及侵染进行分析，同时对番茄黄化曲叶病毒病的高效检测方法及防治策略等进行了系统的概述，以期为该病的监控、防治等提供科学依据。
[关键词]番茄黄化曲叶病毒病;高效检测方法;防治策略番茄又名西红柿，原产于美洲亚热带地区，生长适应性强。
番茄由于风味清新、营养丰富，同时具有降压、利尿、健胃消食、清热解毒、凉血平肝等功效，在我国得到了大面积的种植栽培，并且种植面积在不断扩大，生产种植规模仅次于美国、意大利，排世界第3位。
番茄黄化曲叶病毒病是番茄的主要病害之一，也是一种杀伤性非常强的病害，近年来在我国的发病率也逐渐扩大，主要由番茄黄化曲叶病毒（ TYICV）引起，该病毒被称为“植物癌症”。
据数据统计，发病地段不严重的，番茄将减产20%～30%;发病比较严重的，番茄可减产50%甚至颗粒无收，对中国的番茄种植业造成了严重的影响，给农民生产造成了巨大的经济损失。
1 番茄黄化曲叶病毒病的发病症状近年来，TYLCV给全国种植番茄的区域造成了很大的危害。
番茄植株生长初期比较容易感染黄化曲叶病毒，主要症状是植株上的叶片变小，顶端的叶片边缘会轻微发黄并且上卷，叶脉间的叶肉也会发黄，整片叶萎缩、褶皱，植株生长得非常慢或者是不再生长，节间缩短，明显矮化，仅为正常株的1/2～2/3。
已长大植株发病的主要症状是叶脉变成紫色，叶片增厚变硬或者变成焦枯，新长出的叶片会出现黄绿不均匀的斑点，有凹凸不平的皱缩或者变形，严重时叶片会萎缩，即使到最后生长至成熟植株，也不会正常开花结果。
但是如果开花后又感染了黄化曲叶病毒，结果的数量也会减少，果实变小产生畸形，不能正常变色成熟，产量和商品价值也会下降，严重时会绝收[1-2]。
2 番茄黄化曲叶病毒病的特性、发生与分布番茄黄化曲叶病是由以TYLCV为代表的多种双生病毒引起的。
番茄黄化曲叶病毒一、危害症状番茄黄化曲叶病毒病( TYLCV)，或“番茄黄化卷叶病毒”，Toamtos Yellows Leaf Curl Virus 简称TYLCV 或TY ，一种植物单链DNA 病毒，该病在番茄花期、结果期、采收期各阶段均可发生。
番茄植株感染病毒后，初期主要表现生长迟缓或停滞，生长点黄化，节间变短，植株明显矮化，叶片变小变厚，叶质脆硬，叶片有褶皱、向上卷曲，叶片边缘至叶脉区域黄化，以植株上部叶片症状典型，下部老叶症状不明显；后期表现坐果少，果实变小，膨大速度慢，成熟期的果实不能正常转色。
番茄植株感染病毒后，尤其是在开花前感染病毒，果实产量和商品价值均大幅度下降。
严重时造成的损失可达100%，是严重危害番茄生产的病害之一。
因此抗病毒病育种成为消除番茄黄化曲叶病毒病威胁的主要策略。
目前国内对番茄黄化曲叶病毒病的品种抗( 耐) 性选育研究还甚少，导致很多种植户与农户由于得不到抗病的优良品种，只能少种植，甚至改种其他蔬菜品种。
为此，国内一些科研院、所和种子生产企业及农业技术推广部门加强与国内外企业、院校合作和交流，在抗病品种培育和推广上开展了大量工作，目前优良品种的筛选工作正在进行，以TY病毒重灾区山东省为例，区域内寿光、临淄、广饶、莘县等蔬菜主产区纷纷成为国内外种子企业、院校试验TY的前沿基地。
以“蔬菜之乡”--寿光为例，数十家国外知名种子公司，如：瑞士先正达、以色列海泽拉、荷兰瑞克斯旺、荷兰德澳特等陆续推出了抗TY病毒的番茄品种。
二、发病规律番茄黄化曲叶病毒属于双生病毒科菜豆金色花叶病毒属病毒，寄主为戟叶鹅绒藤、曼陀罗、兵豆、番茄、醋栗番茄、烟草、菜豆、苦苣菜等植物。
烟粉虱（B 型）是番茄黄化曲叶病毒病的主要传毒介体，烟粉虱获毒后可终生传毒，但不经卵传播。
机械摩擦和种子不传毒，嫁接可导致病毒传播。
三、危害特点椐报道，番茄黄化曲叶病毒病起源于中东地区和地中海盆地，主要分布在地中海西部、日本、美国东南部和加勒比海地区，是一种热带、亚热带地区最具毁灭性的番茄病毒病。
园艺学报 2014，41（2）：268–276 http: // www. ahs. ac. cn Acta Horticulturae Sinica E-mail: yuanyixuebao@PaLCuCNV和TYLCCNV复合侵染引起更严重的番茄黄化曲叶病熊艳1，周常勇1,2,*，李茵1，王春艳1，孙现超1，青玲1,2,*（1西南大学植物保护学院，植物病害生物学重庆市高校级重点实验室，重庆 400716；2中国农业科学院柑桔研究所，重庆 400712）摘 要：从四川攀枝花市田间采集36份表现严重矮化、黄化和曲叶症状的番茄病株样本，利用双生病毒简并引物PA/PB从所有样本中均扩增得到约500 bp的片段，经全序列测定及分析，检测出中国番木瓜曲叶病毒（Papaya leaf curl China virus，PaLCuCNV）和中国番茄黄化曲叶病毒（Tomato yellow leaf curlChina virus，TYLCCNV），这两种双生病毒的复合侵染率达97.2%。
系统进化分析表明，这两种双生病毒分别与已报道的PaLCuCNV河南番茄分离物（PaLCuCNV-[HeNZMI]）及TYLCCNV云南元谋烟草分离物（TYLCCNV-[Y295]）的核苷酸序列相似性最高，分别为99.1%和97.9%。
检测发现，所有分离物均伴随有卫星DNA β分子，全序列测定表明所得9个DNA β分子均为TYLCCNV的卫星TYLCCNB，且与其四川番茄分离物（TYLCCNB-[SC65]）的核苷酸序列相似性最高，为87.7% ~ 94.5%。
本文首次报道PaLCuCNV与TYLCCNV/TYLCCNB病害复合体复合侵染番茄引起更严重的番茄黄化曲叶病。
关键词：番茄；中国番木瓜曲叶病毒；中国番茄黄化曲叶病毒；全序列；复合侵染；卫星DNA β分子中图分类号：S 641.2 文献标志码：A 文章编号：0513-353X（2014）02-0268-09The More Severe Tomato Yellow Leaf Curl Disease is Caused by Co-infection of PaLCuCNV and TYLCCNVXIONG Yan1，ZHOU Chang-yong1,2,*，LI Yin1，WANG Chun-yan1，SUN Xian-chao1，and QING Ling1,2,*（1Chongqing Key Laboratory of Plant Disease Biology，College of Plant Protection，Southwest University，Chongqing 400716，China；2Citrus Research Institute，Chinese Academy of Agricultural Sciences，Chongqing 400712，China）Abstract：Thirty-six tomato samples with severe stunting，yellowing and leaf-curling symptoms were collected in Panzhihua，Sichuan Province. Fragments of about 500 bp were amplified from all samples using the begomoviruses degenerate primers PA and PB. The complete genome sequence analysis showed that the diseased tomato samples were infected by Papaya leaf curl China virus（PaLCuCNV）and Tomato yellow leaf curl China virus（TYLCCNV）and 97.2% samples were infected with both viruses. Sequence analysis showed that PaLCuCNV had the highest sequence identity（99.1%）with PaLCuCNV-[HeNZMI] isolated from tomato in Henan，and TYLCCNV shared the highest sequence identity（97.9%）with TYLCCNV-[Y295] isolated from tobacco in Yuanmou，Yunnan. In addition，all isolates were found to be associated with DNA β molecules. Nine complete DNA β sequences were determined and showed收稿日期：2013–08–05；修回日期：2014–01–10基金项目：国家自然科学基金项目（30971897，31272013）* 通信作者Author for correspondence（E-mail：qling@；changyong@）2期熊 艳等：PaLCuCNV和TYLCCNV复合侵染引起更严重的番茄黄化曲叶病 269the highest sequence identity with DNA β of TYLCCNV（TYLCCNB-[SC65]），being ranged from 87.7% to 94.5%. This is the first report that tomato yellow leaf curl disease was caused by the co-infection of PaLCuCNV and TYLCCNV/TYLCCNB.Key words：tomato；Papaya leaf curl China virus；Tomato yellow leaf curl China virus；full length DNA sequences；co-infection；satellite DNA β番茄（Solanum lycopersicum）是双生病毒（whitefly-transmitted geminiviruses，WTGs）的重要寄主（Fauquet et al.，2008）。
目前全世界已报道60余种双生病毒侵染番茄造成严重危害，这些WTGs 引起的番茄病毒病已在多个国家番茄种植区暴发，造成巨大经济损失（Moriones & Navas-Castillo，2000；Mansoor et al.，2003；Hanssen et al.，2010；Nava et al.，2013）。
在中国自2006年上海大面积暴发番茄黄化曲叶病以来（Wu et al.，2006），该病已在浙江、江苏、山东、河北、北京、陕西、河南、四川、新疆等地迅速蔓延，给番茄主产区造成严重损失（Zhang et al.，2009；熊艳等，2011；张升等，2012；宗园园等，2012；阮涛等，2013；宋晰等，2013）。
目前在中国能引起番茄黄化曲叶病的双生病毒有近10种，包括番茄黄化曲叶病毒（Tomato yellow leaf curl virus，TYLCV）、中国番茄曲叶病毒（Tomato leaf curl China virus，ToLCCNV）、中国番茄黄化曲叶病毒（Tomato yellow leaf curl China virus，TYLCCNV）、广东番茄曲叶病毒（Tomato leaf curl Guangdong virus，ToLCGDV）、台湾番茄曲叶病毒（Tomato leaf curl Taiwan virus，ToLCTWV）、泰国番茄黄化曲叶病毒（Tomato yellow leaf curl Thailand virus，TYLCTHV）、烟草曲茎病毒（Tobacco curly shoot virus，TbCSV）和中国番木瓜曲叶病毒（Papaya leaf curl China virus，PaLCuCNV）等，且各地毒源不近相同。
中国攀西地区是重要的蔬菜生产基地，番茄是当地的主要蔬菜作物。
作者在攀枝花市曾发现该地区番茄受TYLCCNV的侵染危害（熊艳等，2011），随后在调查WTGs的发生为害时，从该地区红格镇和益民乡共采集到36份番茄病株，与2009年所观察到的感染TYLCCNV的症状相比，叶片下卷症状更加严重。
本研究中利用PCR及克隆测序等技术，对番茄样品中可能存在的双生病毒种类进行了分子鉴定，并进行了序列分析。
1 材料与方法1.1材料36份染病番茄样品于2010—2012年间采自四川省攀枝花市红格镇和益民乡，植株表现矮化、叶片黄化且严重下卷等双生病毒侵染的典型症状（图1），病叶保存于–80 ℃备用。
图1 田间表现植株矮化、叶片黄化卷曲症状的番茄植株Fig. 1 Severe stunting，yellowing and leaf-curling symptoms on tomato plants with tomato yellow leaf curl disease270 园艺学报41卷酶、克隆载体及菌株：Ex Taq TM Polymerase购自TaKaRa公司；PCR产物回收采用TIANGEN 试剂盒；克隆载体pGEM-T Easy购于Promega公司；大肠杆菌Escherichia coli DH5α菌株为西南大学植物病毒实验室保存。
1.2植物总DNA提取以常规CTAB法提取番茄病叶总DNA，–20 ℃保存备用。
1.3 PCR扩增、克隆和序列测定利用双生病毒简并引物PA/PB（Deng et al.，1994）扩增双生病毒共同区及外壳蛋白部分区域（约500 bp），并进行克隆及序列测定，然后根据测出的序列设计引物对SC249F（5′-ACTCCCCAGATACA TTAGGGTACG-3′）/SC249R（5′-TGTTTGACGTGACTACTTGGGGAC-3′）及TYLCCNV-Y6F1（5′-ACCGGATGTACAGAAGCCCTGA-3′）/S1C1（5′-CTTTCGATACATGGGCCTGTTG-3′），分别扩增PaLCuCNV和TYLCCNV的DNA-A近全长分子；特异引物对YM1PF（5′-TCACAAACAAAAGG AGGTCA-3′）/YM1PR（5′-GAATATGTAACACATTCAA-3′），及YM8TF（5′-TCACCAGAAGACAAA T-3′）/YM8TR（5′-AATTGATGTAATTGAAGATC-3′）分别用于检测TYLCCNV和中国番木瓜曲叶病毒（Papaya leaf curl China virus，PaLCuCNV）的DNA-A。
