浆膜腔积液检验
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浆膜腔积液标本采集和保存
(一)采集
积液标本一般由临床医师行无菌穿刺术采集。
最好留取中段液体于消毒容器,如试管或消毒瓶内,记录液量。
不得混入消毒剂。
积液采集后分装于三个无菌试管中:第一管作微生物学检查及一般性状检查;第二管用肝素抗凝(每毫升关节液用25U肝素钠),作细胞学及化学检查;第三管不加抗凝剂,以观察有无凝固。
关节积液标本不宜选用草酸盐和EDTA粉剂
抗凝,会影响关节积液的结晶检查。
细菌学检查包括涂片染色镜检、细菌培养及药敏试验等,标本应从三通管或注射器中直接排入无菌容器里。
积液常规及生化检验约留2ml,细胞学检查留100~200ml,厌氧菌培养留1ml,结核分枝杆菌检查约需10ml。
细胞学检查可用适量的EDTA-K2,生化检验可用普通肝素抗凝,而以观察凝固
现象为目的的标本则不加任何抗凝剂。
为避免漏检,确保病原体的检出,应尽量在抗菌药物使用前采集标本。
床边接种可提高病原菌检出率。
(二)保存
积液标本采集后应立即送检,以免标本出现凝块、细胞
变性、细菌破坏自溶等。
关节积液如不能及时送检,则应将离心除去细胞后低温保存(4℃下可存10天,必要时置于-20℃下冻存;对补体和酶等,可保存在-70℃以下)。
(三)送检
申请单必须唯一标识,注明患者姓名、性别、年龄、临床诊断、标本来源、采集时间、检验目的及抗生素使用情况等,以便检验时能选用相应培养基和适宜培养环境,有利于对检验结果综合评估。
送检标本必须与检验申请单有相同的唯一标识。
标本采集后室温下>2小时未送检者可视为不合
格标本。
一、浆膜腔积液理学检查1目的:掌握浆膜腔积液理学检查内容和方法。
2范围:适用于体液室,急诊化验室3定义:无4内容:4.1试验原理因漏出液和渗出液的产生机制不同,故各种体液的颜色,透明度,凝固性等也有不同,可以通过肉眼和感官的方法区别。
4.2标本要求最好留取中段液体于消毒容器或试管内约需2ml,于室温下立即送检,必要时用EDTA抗凝管留取。
4.3操作步骤4.3.1观察颜色:肉眼观察浆膜腔积液的颜色,渗出液浑浊,可呈深浅不同的黄色、红色、乳白色等;漏出液多为淡黄色,稀薄透明根据观察到的颜色如实报告。
4.3.2观察透明度:观察时可轻摇标本,以肉眼观察浆膜腔积液透明度的变化。
漏出液清晰透明;渗出液可出现不同浊度。
4.3.3观察凝固性:倾斜浆膜腔积液试管,肉眼观察有无凝块形成,渗出液常有凝固性,漏出液一般无凝固性。
4.3.4报告方式:根据不同性状和颜色如实报告。
4.4 参考值:漏出液为浅黄色清晰透明或微浑;渗出液为黄色,黄红色,褐色,咖啡色等不同的颜色,浑浊。
4.5 注意事项:4.5.1标本:收集后应立即送检,除此之外为防止出现凝块,细胞变性,细菌破坏自容等,宜用EDTA.K2 抗凝,加留一管不加抗凝剂的以观察有无凝固现象。
4.5.2结果判读:当标本颜色或透明度改变不明显或难以观察时,可在试管后以白色或黑色为背景,灯光下仔细观察。
4.5.3妥善处理残余标本:检验完毕后,余留的标本和使用的器皿应按照《临床实验室废物处理原则》的规定处理,以免造成污染。
二、浆膜腔积液黏蛋白定性试验检查1 目的:掌握浆膜腔积液蛋白定性(李凡他)的方法。
2 范围:适用于体液室,急诊化验室3 定义:无4 内容:4.1 试验原理浆膜腔积液漏出液中,只有微量的黏蛋白,李凡他试验为阴性。
当炎症时,浆膜腔上皮细胞被刺激,分泌黏蛋白增多,李凡他试验为阳性。
黏蛋白是一种酸性糖蛋白,等电点或PH 为3-5,因此可在稀乙酸中出现白色沉淀。
4.2 标本浆膜腔穿刺液4.3 器材100ml量筒滴管吸头4.4 试剂冰乙酸蒸馏水4.5 操作4.5.1 加试剂:在100ml量筒加入0.1ml冰乙酸,再加入蒸馏水100ml,使PH值为3-5,充分混匀静置数分钟。
浆膜腔液常规检查标准操作程序1 检验目的浆膜腔液常规检查对许多疾病及并发症的诊断、鉴别诊断、疗效观察及预后判断具有参考价值。
2 检测原理一般性状检查采用目测法;李凡它(蛋白)定性试验;细胞学检查采用显微镜手工检查法。
3 性能参数浆膜腔液常规检查是手工试验,目前还没有试验性能指标。
4 标本采集与接收4.1 浆膜腔液标本由临床医师行胸腔穿刺术,腹腔穿刺术或心包穿刺术分别采集。
送验标本最好留取中段液体于消毒容器试管或消毒瓶内,常规及细胞学检查约留取 2 毫升,生化检验留 2 毫升,厌氧菌培养留 1 毫升。
如查结核杆菌则约需 10 毫升。
为防止出现凝块,细胞变性、细菌破坏自溶等,除应即时送验及检查外,常规及细胞学检查宜用 EDTA-K2 抗凝,生化检查标本宜用肝素抗凝。
加留 1 管不加任何抗凝剂用以观察有无凝固现象。
4.2 标本采集后要立即送检,因为放置时间过久,其性质可能发生改变,可能影响检验结果。
采集的浆膜腔液标本应尽量避免混入血液。
5 设备和试剂5.1 仪器:复星公司 ACT-2000 超高倍显微镜系统,Sysmex XT-4000i 分析仪。
5.2 试剂:冰醋酸。
5.3 设备:血细胞计数池。
6 容器和添加剂浆膜腔液常规检查试验的容器为消毒的玻璃试管,一般情况下添加剂(可用EDTA 盐抗凝 1:10 抗凝)。
7 操作步骤7.1 检验申请单及标本的审核检察浆膜腔液常规检验申请单标本,审核合格后,对浆膜腔液检验申请单姓名和标本标识进行复查,确认一致后进行检测。
7.2 一般性状检查浆膜腔液的颜色和透明度测量采用目测法。
7.3 李凡它定性试验7.3.1 取冰醋酸 2ml 置于 100ml 量筒内,用滴管滴入浆膜腔液 1~2 滴,衬以黑背景,立即观察结果。
7.3.2 结果判断:阴性:清晰透明,不显雾状;弱阳性:微呈白雾状,在黑色背景下才能看到;阳性:有明显白色浑浊或浓絮状沉淀;强阳性:有白色絮状物凝块。
7.4 细胞计数7.4. 1 手工法:对澄清的浆膜腔液混匀后用滴管直接滴入一次性计数板,用低倍镜计数全部方格内细胞数;混浊或带血的浆膜腔液可用细胞稀释液或者生理盐水稀释后加入事先准备好的管壁带有冰乙酸的小试管中,混匀后滴入一次性计数板内,用低倍镜计数全部方格内细胞数。