HBV—DNA和乙肝血清标志物检测的相关分析

HBV—DNA乙肝患者的检测结果观察与分析目的：观察并分析乙肝患者的乙肝病毒脱氧核糖核酸（HBV-DNA）的检测结果。

方法：随机选取我院门诊及住院部在2012年2月-2013年4月收治的1000例慢性乙肝患者为研究对象，应用荧光定量-核酸扩增（PCR）检测法以及酶联免疫吸附试验（ELISA）检测所有患者血清标本的HBV-DNA含量。

结果：所有乙肝病毒血清两对半检测组合（HBVm）模式中所占比例最高的是小三阳模式449例（44.9%）和大三阳模式358例（35.8%），两种检测组合模式中HBV-DNA 陽性检出率对比具有明显差异，其中大三阳模式的HBV-DNA阳性检出率（62.3%）明显高于小三阳模式（33.4%），差异对比具有统计学意义（P＜0.05），经乙肝患者的HBV-DNA含量检测结果分析，提示HBeAg阳性的病毒复制旺盛，具有较强的传染性。

结论：HBV-DNA的定量检测可直接反映乙肝病毒的复制及传染性，是诊断乙肝以及临床病情变化的重要指标。

标签：乙肝；HBV-DNA；PCR检测；检测结果；观察分析乙型肝炎是我国较为流行的一种传染性疾病，分布范围较广，该病主要是由于乙型肝炎病毒（HBV）感染所致，经体液和血液均可传播，具有HBV乙肝病毒慢性携带状态[1]。

乙型肝炎是我国发病率和感染率最高的传染性疾病，据相关数据统计[2]，乙肝病毒脱氧核糖核酸（HBV-DNA）含量可直接反映HBV的传染性以及复制程度，为进一步提高临床诊断水平，为临床治疗提供重要的科学依据，本文对我院1000例HBV-DNA慢性乙肝患者检测结果进行深入分析，具体报道如下。

1资料与方法1.1 研究对象及方法随机选取我院门诊及住院部在2012年2月-2013年4月收治的1000例慢性乙肝患者为研究对象，所有患者均符合全国第6次病毒性肝炎会议关于慢性乙型肝炎的诊断标准[3]。

1000例患者中男700例，女300例；病程均超过6个月；年龄7-65岁，平均（27.2±4.1）岁。

乙型肝炎血清学标志物和HBV-DNA定量对比叶荻庆;张玉洪【期刊名称】《重庆医学》【年(卷),期】2005(34)11【摘要】目的探讨乙型肝炎患者血清标志物与乙型肝炎病毒核酸(HBVDNA)含量关系及其临床意义.方法用ELISA法检测1 515例患者血清乙肝病毒标志物(HBVM),用FQ-PCR法定量检测HBVDNA.结果 1 515例乙肝患者中HBsAg、HBeAg、 HBcAb、阳性640例, 其HBV-DNA阳性595 例,阳性率(0.93),平均拷贝数4.7×106,前PreS1阳性574例,阳性率(0.89).在HBsAg、 HBeAb、 HBcAb 阳性875例, 其HBV-DNA阳性420 例,阳性率(0.48),平均拷贝数3.5×104,前PreS1 324(0.37). HBVDNA与PreS1比,χ2=0.958,P>0.05; HBVDNA与HBeAg 比χ2=52.436,P<0.01. ALT与HBVDNA含量无相关性(r=0.02,P>0.05).结论HBeAg ,前S1蛋白(PreS1)等血清学标志和HBV-DNA定量测定是乙肝病毒感染的重要方法.FQ-PCR定量测定HBV-DNA,有助于乙型肝炎的早期诊断、疗效观察和预后判断.【总页数】2页(P1692-1693)【作者】叶荻庆;张玉洪【作者单位】重庆医科大学附属第一医院检验科,400046;重庆医科大学附属第一医院检验科,400046【正文语种】中文【中图分类】R446.6;R512.62【相关文献】1.乙型肝炎血清学标志物与HBV-DNA定量及肝功能指标相关性研究 [J], 郭明日;吴敏;张立;王冰冰;曹宏2.PCR荧光定量检测HBV-DNA与其血清学标志物检测的对比分析 [J], 熊符;胡朝晖;汪凡军;潘建华;唐永玮;薛耀华;刘本荣;朱庆义3.乙型肝炎血清标志物与HBV-DNA定量结果对比分析 [J], 米海珍;张庆;周永玲;王芳;杨高峰4.PCR荧光定量检测HBV-DNA与其血清学标志物检测的对比分析 [J], 伊继美;田连平;王洋5.HBV-DNA定量与乙型肝炎标志物及谷丙转氨酶结果对比分析 [J], 赵晓利因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

地反映 了病毒复制水平 ， 乙型肝炎的病 因分析 、 在 疾病进 程和
预后判断上有 Ｈ ＶＤ Ａ所 不可替代 的作用 。但血清 学检测 Ｂ －Ｎ
的抗原只是病毒 蛋 白的一 种成 分 ， 不能肯 定受 检者 血清 中是 否存在完整 的 Ｄ ｉ 颗粒 ， 不 能确定 其传染 性 ； 体 的检 测 ａｅ ２ 故 抗
乙肝病毒感染病人 的诊 断 、 治疗传统上 依赖 于各 种 ＨＢ Ｖ
免疫学标志物 。血 清学指 标 反映 了病毒 的表 达水 平 ， 间接 也

检 出结果见 表 １ 。 ＨＢ － Ｖ ＤＮＡ阳性率在 ＨＢ Ｖ血 清标 志物 不 同阳性 组合 状
态时 不 同 ， ＨｍＡｇ ＨＢ Ａｇ 抗－ ｅ三 项 阳性 时 ＨＢ 以 、 ｅ 、 ＨＢ Ｖ－
表 １ ＨＢ 血 清 标 志物 与 ＨＢ － Ｖ Ｖ ＤＮＡ 的 关 系
只说明抗原 曾进入 体 内 ， 也不 能说 明 目 是否存 在传 染性 的 前
病毒颗粒 ， 或有 免疫 保护 作用 。本研究 旨在 探讨 乙型肝炎 患
者体 内 ＨＢ 血 清标 志 物 与 Ｈ Ｖ Ｄ Ａ 的关 系及 其 临床 意 Ｖ Ｂ －Ｎ
维普资讯
数 理 医药学杂志
文章编号 ：０ ４４ ３ （０ ７ ０ －３９ ２ １０ －３ ７ ２ ０ ） ３ １－ Ｏ Ｏ 中图分类号 ：Ｒ １ ．＋２ ５２６ 文献标识码 ： Ａ
２０ 年 第 ２ ０７ Ｏ卷第 ３期
・ 临床科研分析 ・
乙肝患者 血清病毒标志物与 ＨＢ ＤＮＡ 的检测 结果分析 Ｖ—
的《 国病毒性肝炎 防治方案 》 全 。 １ ２ 试剂 和方法 ． ＨＢ Ｖ慢性感染 目前仍是导 致全球 慢性 肝病 的主要原 因 。

结果与 乙肝 免疫标志物相 关性 分析 ，从 而探 讨二者在临床诊 断中的应 用。方法 采 用 ｒａ ｔ Ｃ 法检 测 Ｉ Ｖ— ｅ —ｉ Ｐ Ｒ ｌ ｍｅ － Ｉ ＤＮＡ，Ｅ ＩＡ Ｂ ＬＳ 法检 测血 清 Ｈ Ｖ免 疫标志 物。结 果 １ １ 乙型肝 炎标本 中．ＨＢＡ ＋、ＨＢ Ａ ＋、ＨＢ Ａ ＋阳性 组 患者有 ３ Ｂ ２例 ｓｇ ｅｇ ｃｂ ９例 。血 清 Ｈ Ｖ— Ｂ ＤＮＡ阳性率 ６ ％，平均浓度 Ｉ ２ｘ １ ｕ ｒ１ ７ ． ０ Ｉ ／ｎ；ＨＢＡｇ ４ ｓ ＋，Ｈ ｅ ｂ Ｂ Ａ ＋，ＨＢ Ａ ＋阳性组 患者有 ６ ｃｂ ４例 ，血清 ＨＢ － ＮＡ 阳性率 ４ ％， Ｖ Ｄ ５ 平 均 浓度 ４ ９ｘ １ Ｉ ｍ ；Ｈ ｓ ｇ ． ０ Ｕ／ ｌ Ｂ Ａ ＋，ＨＢ Ａ ２ ｃ ｂ阳性 组 患 者有 ６例 ，血 清 Ｈ ＢＶ— ＤＮＡ定 量值 均 为＜ ０ ；Ｈ ｓ ｇ ５ ０ Ｂ Ａ ＋，ＨＢ Ａｇ ｅ ＋， Ｈ Ａ ＋，Ｈ ｃ ｂ 有 ２例 ，血 清 ＨＢ — ＮＡ 阳性 ５％，平均 浓度 ２９ Ｂｅ ｂ ＢＡ ＋ Ｖ Ｄ ０ ． ６×１ Ｉ ／ 。结论 血清 中 Ｈ Ｖ— ０ Ｕ ｍｌ Ｂ ＤＮＡ定量检测结果与 乙
ｌ ｒ ｓ ｅ ｔｑ ａ ｔ ｖ ＣＲ ｔ ｏ ｎ Ｖ ｍｍ ｕ ｅ ｍａ ｋ ｒ ｔ Ｉ Ａ ｎ ｓ ｒ ｍ ． ｅｈ ｄ Ｒｅ ｌ ｉ ＣＲ ｅ ｅ ｔ ｄ ＨＢ ＤＮＡ， ｆ ｏｅ ｃｎ ｕ ｎｉ ｉｅ Ｐ ｕ ￣ｔ ｍｅ ｄ ａ ｄ ＨＢ ｉ ｈ ｎ ｒ ｅ ｓ ｗｉ ＥＬ Ｓ ｉ ｅ ｕ ｈ Ｍ ｔｏ ｓ ａ— ｍｅ Ｐ ｔ ｄ ｔｃ ｅ Ｖ－
ｗｉ ｅ ａ ｉ ｓ Ｂ ａ ｌｓ ｔ ｈ ｐｔｉ ｈ ｔ ｓ ｍｐ ｅ ，ＨＢｓ ＋ Ａｇ ，ＨＢｅ ＋ Ａｇ ，ＨＢｃ ＋ ｐ ｓｔ ｅ Ａｂ ｏ ｉｖ ｉ

中图 分 类 号 ： Ｒ５ １ ２ ． ６ 。 。 ２ 文献标识码 ： Ａ
Ｃｏ ｒ ｒ ｅ ｌ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ａ ｎａ ｌ ｙ ｓ ｉ ｓ ｂ ｅ ｔ ｗｅ ｅ ｎ ｈ ｅ ｐ ａｔ ｉ ｔ ｉ ｓ Ｂ ｖ ｉ ｒ ｕｓ ｌ ａ ｒ ｇ ｅ ｓ ｕｒ ｆ ａｃ ｅ ｐｒ ｏｔ ｅ ｉ ｎ，ｐｒ ｏＳ １ ａ ｎ ｔ ｉ ｇ ｅ ｎ，ＨＢＶ— ＤＮＡ ａ ｎｄ ｓ ｅ ｒ ｕ ｍ ｍａｒ ｋｅ ｒ ｓ ．
龚 杰 ， 刘 柏 林 ， 方 艳 秋 ， 杨 广 民。
（ １ ．厦 门大 学 医院 体 检 科 ， 福建 厦 门 ３ ６ １ ０ ０ ５ ； ２ ． 吉 林 省 人 民 医院 ， 长春 １ ３ ０ ０ ２ １ ）
摘要： 目的 通 过 对 乙型 肝 炎 患 者 ＨＢ Ｖ — Ｌ Ｐ、 Ｐ ｒ ｅＳ １ 抗原、 ＨＢ Ｖ— Ｄ ＮＡ 载 量 和 乙 型 肝 炎 血 清 标 志 物 的 检 测 ， 探 讨
反 映 不 同血 清学 类 型患 者 体 内病 毒 复制 及 抗 病 毒 疗 效 监 测 的最 佳指 标 以 及 分 析 各 指 标 之 间 的 关 系 。方 法
对检 者 血 清 采 用 Ｅ Ｉ Ｉ Ｓ Ａ 法 定 性 检 测 ＨＢ Ｖ— Ｍ； Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ 双 抗 体 夹 心 法 检 测 ＨＢ Ｖ Ｉ Ｐ、 Ｐ ｒ ｅ — ｓ １ ；
ＧＯＮＧ Ｊ ｉ ｅ ， Ｌ儿 Ｂａ ｉ — ｌ ｉ ｎ ， ＦＡＮＧ Ｙａ ｎ — ｑ ｉ ｕ ， ｅ ｔ ａ １ ． （ １ ．Ｘｉ ａ ｍｅ ｎ Ｕｎ ｉ ｖ ｅ ｒ ｓ ｉ ｔ ｙ Ｈｏ ｓ ｐｉ ｔ ａ ｌ ， Ｘｉ ａ ｍｅ ｎ ３ ６ １ ０ ０ ５， Ｃｈ ｉ ｎ ａ；２ ． Ｊｉ ｌ ｉ ｎ
ｌ ６ ３ ４

血清乙肝病毒抗体与ＨＢＶ－ＤＮＡ关系的临床分析由于分子生物学技术的迅猛发展,人们对乙肝病毒(HBV)相关抗体,尤其是抗-HBs的临床意义有了新的认识。

就此本院肠道门诊收集122例HBV相关抗体阳性血清,应用全自动荧光定量PCR仪来检测血清HBV-DNA(拷贝/mL)与相关抗体间的关系。

分析如下:1 资料与方法1.1 资料:选择2007年10月到2008年8月间125例未接种过乙肝疫苗。

乙肝相关抗体阳性者,设A,B,C三组。

对照组15名,选取曾接种过乙肝疫苗后抗-HBs(+)者。

入选者临床资料见表1。

1.2 方法:血清中相关抗体检测用ELISA法,试剂由上海荣盛公司提供。

血清中HBV-DNA(拷贝/mL)的检测用瑞士罗氏公司出品的LighCyclerTM全自动荧光定量PCR仪,试剂由上海复星公司提供,按说明书进行操作。

2 结果血清HBV-DNA检测结果见表2。

参考值0.05;B组与C组比较,P>0.05;A组与C组比较,P>0.05。

均无显著性差异;A,B,C三组与对照组比较,P0.05,无显著差异。

ABC三组与对照组比较,P<0.01,差异显著。

这结果使得抗-HBs的特定临床意义的传统解释与HBV-DNA检出结果出现不相符的状况。

在抗-HBs出现后肝细胞中的病毒复制仍可持续,即所谓“潜隐性病毒基因组” [4],因此,该抗体的出现并不能标准HBV复制停止,而是复制水平的降低[4]。

今年来文献报道抗-HBs可以单独或(和)HBsAg同时存在于与HBV感染相关的慢性肝病患者血清中,这些患者体内可能有HBV存在和复制[5],认为其可能原因:①HB-VM模式的转变过程中,抗-HBs的滴度较低;②先后感染了不同HBV亚型,抗-HBs仅能中和血清中的同型病毒;③S基因变异。

这些变异株仍具有致病性和传染性[3]。

据有作者认为,自然感染者血清中任何HBV抗体的出现都提示有HBV的存在和复制[5]。

基 因定量水平进 一步证 实 ＨＢ Ａ 确 是反 映乙肝 病毒 复制 的 ｅｇ
Ｈｂ ｋ ｅ Ｌ Ａｇ
（ ）平 例 专 １ ｓ ／ 数 塑 １ 堕 ｆ
ｃ Ｊ ０ 。 ＜ Ｕ ＞ Ｕ
３ 讨 论
血清 Ｈ Ｖ—Ｄ Ａ载量是反应 病毒复 制和宿 主传 染性 的 Ｂ Ｎ 直接指标 ， 本研究证 明患者 中不 同含 量的 Ｈ ｅ ｇ在一定程 度 ＢＡ
的主要依据 。定 量检测 患者血清或 血浆 Ｈ Ｖ—Ｄ Ａ病毒 已 Ｂ Ｎ 成为监测抗病毒 治疗 的有效 性及 预测治 疗成 功与 否 的重要
血， 置于无菌干燥管用 于 ＨＢ Ａ ｅ ｇ含 量检 测 ， 同时采 集另一 管
Ｅ Ｔ 一 Ｋ抗 凝 全 血 ２ ｍ 用 于 Ｈ Ｖ —Ｄ Ａ 载 量 检 测 。 以 ＤＡ ２ ｌ Ｂ Ｎ
度， 以指导治疗。
【 关键词 】 荧光定量聚合酶链 反应 ； Ｈ Ｖ— Ｎ ； Ｈ ｅ ｇ Ｂ Ｄ Ａ Ｂ Ａ
据统计 ， 世界 约有 ３５亿人 感染 慢性 乙肝病 毒 ， 全 ． 乙肝
病毒感染可 以导 致慢性 乙肝 、 肝硬 化 、 肝癌 。 目前 多 以血清 感染标志物 （ 乙肝 两 对半 ， Ｂ Ｈ Ｖ—Ｍ） 荧光 定 量 Ｐ Ｒ检测 及 Ｃ
３ ０ ｍｎ的速度离心 ５ｍｎ分离血 清血浆 。 ０ ０ｒ ｉ ／ ｉ
１３ 试剂 和 方 法 ．
手段 。 由于两对 半 组 合模 式 复杂 多 样 ， 致部 分 患 者 的 导
Ｈ Ｖ病 毒感 Ｎ
１３ １ ＨＢ ．． Ｖ—Ｄ Ａ检测 Ｎ
上可 以提示 Ｈ Ｖ—Ｄ Ａ复 制活跃 程度 ， 与 Ｈ Ｖ—Ｄ Ａ载 Ｂ Ｎ 但 Ｂ Ｎ
量水 平 不 一 定 平 行。在 Ｈ ｅ ｇ＞５ ／ｏ患 者 组 ， 载 量 ＢＡ ０ ｓｃ 高

１ １ 标 本来 源 ２ ２例 患者 标 本 均来 自于 本 院 ２ ０ ． ７ ０５
年 ９月 ￣２ ０ ０ ６年 １ Ｏ月 期 间的就诊 病人 。 １ ２ 乙 型 肝 炎 血 清 标 志 物 ＨＢ Ａｇ 抗 一 ＨＢ 、 ． ｓ 、 ｓ
２ ２ ＨＢ ． Ｖ— Ｄ ＮＡ 定 量 以 １ ０ ． ０×１ 。ｏ ｉｓｍｌ ０ｃ ｐｅ ／ 为
标 志 物 组合 模 式
Ｈ Ｂｓ ｇ Ａ
２ ３ 乙型 肝炎 血清标 志 物 阳性 各组 合 模式 与 ＨＢ ． Ｖ Ｄ ＮＡ 定量 结果 的 比较 见表 １ 。
Ｄ 组 Ｅ组
＋ ＋ ＋ ＋ ＋
表 １ 乙 肝 标 志物 阳性 与 Ｈ Ｖ Ｄ Ａ 定 量 结 果 的 比 较 Ｂ Ｎ
ｓ 、 一ＨＢ ； Ａｇ 抗 ｃＤ组 ： 一ＨＢ 、 一ＨＢ 、 一ＨＢ ； 抗 ｓ抗 ｃ抗 ｅ
乙肝血 清标 志物 ， 究其相 关性 和各 自临床 意义 。 研
１ 材 料 与 方 法
Ｅ组 ： ｓ 、 ｅ ； ＨＢ Ａｇ ＨＢ Ａｇ Ｆ组 ： 一ＨＢ 、 一 ＨＢ ； 抗 ｓ抗 ｃＧ
组 ： 一 ＨＢ ； 组 ： ｓ 。 抗 ｃＨ ＨＢ Ａｇ
则 可能 出现 漏诊 。
【 键 词 】 ＨＢ Ｄ 关 Ｖ ＮＡ 定量 乙型 肝 炎 病毒 标 志 物
堕＋ ＋
提供。 １ ３ ＨＢ ＮＡ定 量检 测 仪 器 由 Ｒ ｃ ｅ公 司生 产 ． ＶＤ ｏｈ Ｌｇ ｔ ｙ ｌ 荧光 定量 分 析仪 ， 剂 由上 海科 华 生 物 ｉｈ Ｃ ｃｅ ｒ 试 技 术有 限公 司提供 。 ２ 结 果 ２ １ ２ ２例 乙型 肝 炎 血清 标 志 物 阳性 经 Ｅ ＩＡ 检 ． ７ ＬＳ
２ ４ 结果 分 析 乙型 肝 炎血 清 标 志 物 阳性 ２ ２例 ， ． ７ ＨＢ ＮＡ定 量检 测 有 １ ８例 阳 性 ， ＶＤ ６ 阳性 检 出率 为 ６ ． 。其 中 Ａ组 １ ８例 阳性 检 出率为 ５ ． ； １８ ２ ６３ Ｂ

Ａ ｇ）ｏｆｈ ａ ｉｉ ｖ ｒ ｎ ｅｐ ｔｔｓ Ｂ ｉｕｓ ａ ｄ ＨＢＶ ＤＮ Ａ ， Ｍ ｅ ｈｏ Ｈ ｅ ａ ｉｉ ｍ ａ ｋｅ ｓａｎ ｅ ａ ｉ ｅ ｅ ｅ ｄ ｔ ｒ ｉｅｄ ｗｉｈ ｅ ｙ ｅ ｔ ｄｓ ｐ ｔｔｓＢ ｒ ｒ ｄ Ｐｒ Ｓ２ ｎｔｇ ｎ ｗ ｒ ｅ ｅ ｍ ｎ ｔ ｎｚ ｍ —
・
３ ・ ８
ＪＣｌ ａ ｓｕ ａ ｅ Ｊ ｎ ２ ０ 。 ｌ１ ， ． ｉ Ｔｒ ｎ ｆｓＬ ｂ Ｍ ｄ，ａ ． Ｏ ９ Ｖｏ １ Ｎ０ １ ｎ
血 清 ＨＢ 标 志 物 、 Ｓ 抗 原 与 ＨＢ Ｄ Ｖ 前 ２ Ｖ ＮＡ 检 测 结果 的相关 性
Hale Waihona Puke 敖 必蓉 卢元 全 【 要】 目的 探 讨 ＨＢ 血 清标 志物 、 Ｓ 抗 原 （ Ｖ ｒＳ一 ） ＨＢ ＮＡ 的相 关 性 。方 法 对 乙肝 患 者 分 别 进 摘 Ｖ 前 ２ ＨＢ Ｐ ｅ ２ Ａｇ 与 ＶＤ 行 五项 ＨＲ 血 清标 志物 、 Ｓ 抗 原 的检 测 ， 时 采 用 Ｐ Ｒ 法 检测 ＨＢ Ｄ Ｖ 前 同 Ｃ Ｖ ＮＡ 的含 量 。结果 大 三 阳 组前 ｓ 抗 原 （ ） 出 ｚ ＋ 检
ｉ ａ ｉｎ ｓｏ ｓ ｎ ｐ ｔ ｔ ｆＨＢ Ａｇ ｅ
（ ） ＨＢ Ａｂ（ ）ａ ｄ ＨＢ Ａｂ 十 ） （ ｒ ｕ ．Ｔｈ ｏ ｉ ｖ ａ ｅｏ 十 ， ｅ ＋ ｎ ｃ （ ｇ ０ ｐ Ｂ） ｅｐ ｓｔ ｅｒ ｔ ｆＨＢＶ ｒ Ｓ 一 ｎ Ｖ ｉ Ｐ ｅ ２Ａｇ ａ ｄ ＨＢ ＤＮＡ ｒ ｉｎ ａ ｔｙｈ ｇ ｅ ｗｅ ｅ ｓｇ ｍｃ ｎ １ ｉ ｈ ｒ
率 和 ＨＢ Ｎ 阳性 检 出率 均 高 于 小 三 阳组 ． 与 小 三 阳组 比较 差 异 均 有 统 计学 意 义 ； Ｓ 抗 原 （ ） 血 清 ＨＢ ＮＡ 检 ｖＤ Ａ 且 前 一 组 ＶＤ

ＤＮＡ 拷 贝数 升 高 而 升 高 ， ＨＢ Ａｂ（ ｐ ｔ ｉ Ｂ ｓ ｒａｅａ ｔ ｏ ｙ 、 ｅ （ ｐ ｔ ｉ Ｂ ｅａ ｔ ｏ ｙ 、 ｃ （ ｐ ｔ ｉ 与 ｓ Ｈｅ ａｉ ｓ ｕ ｆｃ ｎ ｉ ｄ ） ＨＢ Ａｂ Ｈｅ ａｉ ｓ ｎ ｉ ｄ ） ＨＢ Ａｂ Ｈｅ ａｉ ｓ ｔ ｂ ｔ ｂ ｔ Ｂ ｃ ｒ ｎ ｉｏ ｙ 呈 负相 关 。ＨＢ Ｈｅ ａｉ ｓＢ ｖｒ ｓ 感 染后 ＨＢ ＿ ＮＡ 载 量 与 性 别 、 龄 无 关 ； 疫 耐 受 期 患 者 ＨＢ ｏ ｅａ ｔ ｄ ） ｂ Ｖ（ ｐ ｔ ｉ ｉ ） ｔ ｕ ｖＤ 年 免 ｖ＿
Ａｎａ ｙ ｉ ｆ ｃ ｒ ｅ ａ ｉ ｎ ａ ｌｎ ｃ ｌｓ ｇ ｆｃ ｎｃ ｆｑｕ ｎｔｔ ｔｖ ｌ ｓｓ ｏ ｏ ｒ ｌ ｔｏ ｎｄ ｃ ｉ ｉ ａ ｉ ｎｉｉ ａ ｅ ｏ ａ ｉａ ｉ ｅ ｄ ｔ ｃ ｉ ｎ ｏ ｅ ａ ｉｉ ｓ ｒ ｍ ａ ｋｅ ｓ ａ ｅ ａ ｉｉ ｖ ｒ ｓＤＮＡ ｅ ｅ ｔ ｏ ｆ ｈ ｐ ｔｔｓ Ｂ ｅ ｕ ｍ ｒ ｒ ｎｄ ｈ ｐ ｔｔｓ Ｂ ｉ ｕ
西部 医 学 ２ １ ０ ２年 ５月 第 ２ 卷 第 ５期 Ｍｅ ｓ Ｃ ｉａ Ｍａ ０ ２ Ｖ １２ ， ｏ ５ ４ ｄＪＷｅｔ ｈｎ ， ｙ２ １ ， ｏ． ４ Ｎ ．
・ ８ ・ ９ ７
乙 型 肝 炎 血 清 标 志 物 定 量 检 测 与 ＨＢ — Ａ 定 量 Ｖ ＤＮ 检 测 的 相 关 性 及 临 床 意 义
ｉ ｖ ｓ ｉ ａ ｅ ｔ ｅ ｃ ｒ ｅａ ｉｎ ｏ ｅ ｕ ｍａ ｋ ｒ ’ｑ ａ ｔｔ ｆｈ ｐ ｔｔ ｉｕ ｔ ｅ ｕ ｍａ ｋ ｒ ’ｑ ａ ｔ ｙ ｏ Ｂ ＤＮＡ ｎ ｅ ｔ ｔ ｈ ｏ ｒ ｌｔｏ ｆｓ ｒ ｍ ｒ ｅ ｓ ｕ ｎ ｉｙ ｏ ｅ ａ ｉｉ Ｂ ｖ ｒ ｓ ｗｉｈ ｓ ｒ ｍ ｒ ｅ ｓ ｇ ｓ ｕ ｎ ｉ ｆＨ Ｖ— ｔ ａ ｄ ｉ ｖ ｓ ｉ ａ ｅ ｄ ｓ ｒｂ ｔ ｎ ｏ ｎ ｎ ｅ ｔ ｔ ｉｔｉ ｕ ｉ ｆＨＢＶＤＮ ｎ ｇ ｏ ｐ ｆｅ ｆ ｃｅ ｙ ｈ ｐ ｔ ｉ Ｂ Ｖｒ Ｓａ ｄ ｔ ｒ ｖｄ ｈ ａ ｉ ｆ ｒ ａ ｌ ｉｇ ｇ ｏ ｉ ｒ ｕ ｓａ ｔ ｒｉ ｅ ｔ ｄ ｂ ｅ ａ ｉ ｓ ｉＵ ｎ ｏ ｐ ｏ ｉ ｅｔ ｅｂ ｓｓ ｏ ｒ ｄ ａ — ｎ ｔ ｅ ｙ ｎ ｓ ｓ ｒ ｇ ｉ ｄ ｃ ｔｏ ｓ ａ ｄ ｃ ｉ ｉａ ｂ ｅ ｖ ｔ ｎ Ｍ ｅ ｈ ｄ ｏ ｉ ，ｄ ｕ ｎ ｉａ ｉ ｎ ｎ ｌ ｃ １ｏ ｓ ｒ ａ ｉ ． ｎ ｏ ｔｏ ｓ Ｔｉ －ｅ ｏ ｖ ｄ ｆ ｏ ｏ ｍｍｕ ｅ ａ ｓ ｙ（ ｍｅ ｒ ｓ ｌ ｅ ｌ ｒ ｉ ｕ ｎ ｓ ａ ＴＲＦＩ ） ｗａ ｕ ｅ ｏ Ａ ｓ ｓ ｄ ｔ

57CH INA FO REIGN MEDIC AL TRE ATMENT 中外医疗临 床 医 学乙型肝炎是一种严重危害人类健康的传染病,它是我国慢性肝炎、肝硬化和原发性肝癌发生的主要原因。

因此,准确、迅速的诊断对乙肝的治疗和预后极为重要。

本研究采用先进的FQ-PCR 技术检测H BV D NA 含量,T RF I A 法检测乙肝病毒标志物含量,旨在探讨HB VD NA 与各病毒标志物、肝功能之间的关系,为乙肝的临床诊断、抗病毒药物的选择及疗效观察提供参考。

1 资料与方法1.1 一般资料697份血清标本均为2009年4月至2010年6月我院门诊及肝病科的乙型肝炎患者,其中包括急性肝炎74例,慢性乙肝轻度77例,慢性乙肝中度98例,慢性乙肝重度117例,肝硬化149例,亚急性重症肝炎23例,慢性重症肝炎159例,排除有重叠感染及合并可影响肝功能的其他肝病和疾病病例。

全部病例中男558例,女139例,年龄10～81岁,平均(36.25±13.37)岁。

所有患者的诊断均符合2000年中华医学会西安分会修订的《病毒性肝炎防治方案》标准[1]。

1.2 试验方法乙肝病毒标志物定量检测采用TRFIA法,仪器由美国PE公司提供Wallac1235全自动时间分辨免疫荧光分析仪,试剂由广州达瑞抗体工程技术有限公司提供。

H B VD N A 定量检测采用F Q -P C R 法,仪器是由瑞士Roche公司生产的Lightcycle荧光定量检测仪,试剂由上海科华生物技术有限公司提供。

肝功能生化指标检测所用仪器和试剂是由瑞士Roc he公司提供的电化学发光免疫分析仪P800及其配套试剂。

所有试验均严格按照试剂盒说明书操作。

1.3 统计学分析采用SPSS 11.0建立数据库,HBVDNA进行常用对数变换,乙肝病毒标志物和肝功能指标进行自然对数变换,使用Spearman等级相关分析,所有统计操作均在SPSS 11.0统计软件包上进行。

管， 每管 ３ｍ ， ｌ 分别进行 乙肝两对半和 Ｈ Ｖ Ｄ Ａ Ｂ — Ｎ 最 低拷贝数为 １ ２ １ ３ｃｐ／ ｌ 最 高拷 贝数为 ７ ． ￣０ ｏ ｙｍ ， ０ ． 定 量检 测 。
８ ￣ ０ ｃｐ／ ｌ 表 １ ９ １ ｏｙｍ 。见 。
３ 讨 论
从表 １ 得知 ，６ ３ ０ 例标本 中乙肝 “ 大三 阳”模
１ 资料 与方 法
Ｈ ｓｇ ｂＡ 、抗 一 ｂ 、 一 Ｂ 阳性 ；Ｉ 组 ：抗 一 Ｂ 、 Ｈｅ 抗 Ｈ ｃ Ｉ Ｉ Ｈ ｓ
１ 一般资料 ２ ０ 年 １ ． １ ０９ 月至 ２ ０ 年 ９ ０９ 月我 院门 抗 一 ｂ 、抗 一 Ｂ 阳性 ；Ｉ ：Ｈ ｓ ｇ Ｈｅ Ｈ ｃ Ｖ组 ｂＡ 、抗 一 Ｂ Ｈ ｃ 诊 和住 院病 人 共 ６ 进 行 了 乙肝 标 志 物 及 阳性 ；Ｖ组 ：抗 一 ｓ ０３例 ＨＢ 阳性 。６ ３ ０ 例血清标本 中 ，５ ＨＢ —Ｄ Ａ含量检测 ，其 中男 ３ ６ ，女 ２ ７ ， 组 ＨＢ — Ｖ Ｎ ４例 ５例 Ｖ Ｍ阳性例数分别为 ２ ６ ４ 、１ 、２ 、３ １ 、３ ８ ２ ４ 年龄 ８ ５ 岁 。患者抽取空腹静脉血 ２管 ，每 管 ３ 例 。 见 表 １。 ～４
乙型肝炎 （ 下称 乙肝 ）是一种 由乙肝病 毒 （ １ ． 检测方法 （ ）血清标 志物采用时间分辨 ．２ ２ １ Ｈ Ｖ） 引起 的传染病 。全球人 口感染 率很 高 ，我 免疫荧光 分析 法 ，时间分辨荧光 免疫 分析仪及诊 Ｂ 国更是 高发 国家 ，累计 ＨＢ Ｖ感染人群 达 １ ％ 以 断试剂 盒 均 由上 海新波生 物技术 有 限公 司生产 ， ０ 上…，是危 害人 民健康 最严重 的传染病 ，可见 乙 严格按照试剂 盒说 明书操作 。（ ＨＢ — Ｎ ２） Ｖ Ｄ Ａ检 型肝炎病毒的防治任务 十分艰 巨。 目前诊 断 乙肝 测采用 Ｆ — Ｃ Ｑ Ｐ Ｒ法 ，采用美 国 ＭＪ 生产 的 Ｏ ｔ ｎ ｐｉ ｏ 感染 的常用 检测方法有 Ｈ Ｖ血 清标志物 （ Ｂ — Ｄ Ａ Ｅ ｇｎ 型 Ｐ Ｒ扩增仪及上海 科华生物技术 Ｂ Ｈ Ｖ Ｎ ｎ ｉｅ Ｃ Ｍ） Ｈ Ｖ Ｄ Ａ定量检测 。ＨＢ — 和 Ｂ Ｎ Ｖ Ｍ主要 反映人 有 限公 司提供 的荧 光定量 ＨＢ Ｎ Ｖ Ｄ Ａ试剂盒 ，严 体在感 染 Ｈ Ｖ后 的免疫 状态 ，但其在判 断病毒 格 按 照 试 剂 盒 要 求 及 防 污 染 措 施 进 行 操 作 Ｂ 复制 和传染性 大小时有一定 的局限性 ，而 Ｈ Ｖ （ Ｂ — Ｎ Ｂ — Ｈ Ｖ Ｄ Ａ定量参 考范围 ≤５ ０ｃｐ／ １。 ０ ｙ ） ｏ ｍ Ｄ Ａ能反映病毒在体 内复制 的真实情况 ，判断患 １ 统计学 分析 所有统计学检验均在 Ｓ Ｓ １ ． Ｎ ． ３ ＰＳ３ ０ 者病 情变化 ，为临床提高诊 断水平 、指导 用药提 统计软 件包 上进行 ，定 量资料 比较 采用 ｆ 检验 。

Ｔｈｅ ｒ ｅ ｌ ａ ｔ ｉ ｏ ｎｓ ｈ ｉ ｐ ｏ ｆ ｓ ｅ ｒ ｕｍ ｍ ａ ｒ ｋｅ ｒ ｓ ａ ｎｄ Ｈ ＢＶ —ＤＮＡ ｌ ｅ ｖ ｅ ｌ ｓ ｆ ｏ ｒ ｐａ ｔ ｉ ｅ ｎ ｔ ｓ
ｗｉ ｔ ｈ ｈ ｅ ｐ ａ ｔ ｉ ｔ ｉ ｓ Ｂ ａ ｎ ｄ ｉ ｔ ｓ ｃ ｌ ｉ ｎ ｉ ｃ ａ ｌ ｓ ｉ ｇ ｎ ｉ ｉ ｆ ｃ ａ ｎ ｃ ｅ
ｓ Ａ ｇ ／ Ｈ Ｂ ｅ Ａ ｇ ／ 抗一 ＨＢ ｅ阳 性 患 者 ７ ３例 和 ＨＢ ｓ Ａ ｇ ／ 抗一 Ｈ Ｂ ｅ ／ 抗一 Ｈ Ｂ ｃ阳性 患 者 １ ４ ７例 ， 通 过 荧 光 定 量 法 和 微 粒 子 酶 免 法对 Ｈ Ｂ Ｖ— Ｄ Ｎ Ａ 和 血清 标 志物 进行 定 量 分 析 ， 比 较 其 相 关 性 。 结 果 ＨＢ ｓ Ａ ｇ ／ ＨＢ ｅ Ａｇ ／ 抗一 ＨＢ ｃ阳 性 患 者 巾 ， ３ ９例
ｔ ａ ｔ ｉ ｖ ｅ ｍｅ ｔ ｈ ｏ ｄ ａ ｎ ｄ ｍｉ ｃ ｒ ｏ ｐ ａ ｒ ｔ ｉ ｃ ｌ ｅ ｅ ｎ ｚ ｙ ｍｅ ｉ ｍｍｕ ｎ ｏ ａ ｓ ｓ ａ ｙ ｍｅ ｔ ｈ ｏ ｄ ｗｅ ｒ ｅ ｕ ｓ ｅ ｄ ｏｒ ｆ ｔ ｈ ｅ ｑ ｕ ａ ｎ ｔ ｉ ｔ ａ ｔ ｉ ｖ ｅ ａ ｎ ａ ｌ ｙ ｓ ｉ ｓ ｆ ｏ ｒ ｔ ｈ ｅ ＨＢＶ — ＤＮＡ ａ ｎ ｄ ｓ ｅ ｒ ｕ ｍ ｍａ ｒ ｋ ｅ ｒ ｓ ． Ｔｈ ｅ ｃ ｏ ｒ ｒ ｅ ｌ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ｗａ ｓ ｃ ｏ ｍｐ ａ ｒ ｅ ｄ ． Ｒｅ ｓ ｕ ｌ ｔ ｓ Ｉ ｎ ｔ ｈ ｅ ＨＢ ｓ Ａｇ ／ ＨＢｅ Ａｇ ／ ａ ｎ ｔ ｉ － ＨＢｃ ｐ ｏ ｓ ｉ ｔ ｉ ｖ ｅ ｐ ａ ｔ ｉ ｅ ｎ ｔ ｓ ，３ ９
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