粒细胞集落刺激因子作用机理 -回复

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表４　炽灼残渣测定　

６重金属测定　６．１仪器、试剂及药品ＳＸ２—４一１０箱形电阻炉；试剂均为　

分析纯（莱阳双双化工有限公司）；黄芩苷（山东鲁抗大禹药　

业有限公司生产）　６．２方法取炽灼残渣项下遗留的残渣，加硝酸０．５ｍＬ蒸　

干，至氧化氮蒸气除尽后，放冷，加盐酸２ｍＬ，置水浴上蒸干　

后加水１５ｍＬ，滴加氨试液至对酚酞指示液显中性，再加醋　

酸盐缓冲液（ｐＨ３．５），微热溶解后，移置纳氏比色管中，加水　

稀释成２５ｍＬ为甲管；另取配制供试溶液的试剂，置瓷皿中　

蒸干后，加醋酸盐缓冲液（ｐＨ３．５）２ｍＬ与水１５ｍＬ，微热溶　

解后，移置纳氏比色管中，加标准铅溶液１ｍＬ，再用水稀释　齐鲁药事Ｑｉｈｌ　Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ　Ａｆｆａｉｒｓ　２００７　Ｖｏ１．２６，Ｎｏ．６　

成２５ｍＬ为乙管；再在甲乙两管中分别加硫代乙酰胺试液各　

２ｍＬ，摇匀，放置２ｍｉｎ，同置白纸上，自上而下透视，甲管中　

显示的颜色与乙管比较。不同批号的成品重金属测定（见表　

５），规定不得过百万分之十。　

表５　重金属测定　

７　小结　黄芩苷（注射用）以上检测项目，经过我厂生产车间批量　

生产几十批验证，均能达到所规定要求，质量稳定，具有可控　

性。本方法充实了黄芩苷（注射用）原料药质量标准控制手　段。　

参考文献　［１］《中国药典１２００５年版二部．北京：化学工业出版社，２００５．　

重组人粒细胞集落刺激因子热稳定性研究　

赵先亮，黄玉录，王春雨，李景，冯宗梅　

（山东科兴生物制品有限公司，山东济南２５０２００）　

摘要：　采用凝胶排阻ＨＰＬＣ、ＳＤＳ—ＰＡＧＥ非还原电泳、生物学活性、蛋白含量等检测方法对两种保护缓冲体系中的重　

组人粒细胞集落刺激因子（ｒｈＧ—ＣＳＦ）稳定性进行研究。在４Ｏ℃（加速试验）、２５℃（室温留样）、２～８＂Ｃ（贮藏温度）、冻溶一次　

条件下检测了两种保护缓冲体系中ｒｈＧ—ＣＳＦ稳定性。结果ｒｈＧ—ＣＳＦ原液于２～８℃保存下，外观、含量、纯度及生物学活性　

陕西医学杂志２００２年９月第３１卷第９期　

人血清粒细胞集落刺激因子与肿瘤△　

西安市中心医院（西安７１０００３）　李　民　综述　李　蓉。　审校　

近年来集落刺激因子的基础研究和临床应用成为一　个热门的研究课题，本文就人粒细胞集落刺激因子　

（Ｇｒａｎｕｌｏｃｙｔｅ　ｃｏｌｏｎｙ　ｓｔｉｍｕｌａｔｉｎｇ　ｆａｃｔｏｒ，Ｇ—ＣＳＦ）与肿瘤　

的关系作一综述。　

１　Ｇ—ＣｓＦ与非小纲胞肺癌　

Ｎｏｒｔｈｅｒｎ　ｂｌｏｔ［　］分析１４／８４份手术标本中，１６．７　

（１Ｏ／３Ｏ）为鳞癌，３／５０为腺癌，１／４为大细胞癌。８例（５７．　

１　，８／１４）ＮＳＣＬＣ有Ｇ—ＣＳＦ基因表达并伴有外周血　

ＷＢＣ增加（＞８×１０　／Ｌ）。１０例Ｉ或Ｉ期ＮＳＣＬＣ有基因　

表达的患者预后明显不好　＜０．００１）。表明Ｇ．ＣＳＦ在早　

期初发ＮＳＣＬＣ中的基因表达是普遍的，但不能完全解释　

由肺癌所致的外周血喊增加。　

Ｔｏｍｉｚａｗａ等［２］报道１例５１岁男性，胸片示右上叶阻　

塞性肺炎伴阴影，右胸膜渗出。胸水检查示腺癌。ＷＢＣ２６．　

５４×１Ｏ　／Ｌ，血清Ｇ—ＣＳＦ１１２ｐｇ／ｍｌ，免疫组化示抗Ｇ－ＣＳＦ　

单克隆抗体阳性。人院２１ｄ后死亡。肿瘤的生长速度比预　

期的肺腺癌快得多。表明Ｇ—ＣＳＦ诱导肿瘤的生长　Ｆｕｋａｔａ等［　报道６５岁男性，因发热、贫血和上腹部　

疼痛入院。胸片和ＣＴ示右上肺一圆形阴影（８ｃｍ）并与胸　

壁相连且有纵隔淋巴结转移。实验室检查ＷＢＣ１６．８×　

１Ｏ　／Ｌ、ＣＲＰＩＩ．６ｍｇ／￣、血清Ｇ－ＣＳＦ９０ｐｇ／ｍｌ。上消化道造　

影和胃镜示幽门窦有一溃疡样粘膜下转移灶。行右上叶　

和胸壁切除术。一月后行胃切除术。术后ＷＢＣ计数恢复　

正常、ＣＲＰ和血清Ｇ—ＣＳＦ下降。病理证实为分化极差的　

大细胞肺癌伴有胃转移。抗Ｇ—ＣＳＦ单克隆抗体免疫组化　

染色，肺内染色阴性而胃内呈阳性。胃切除术后３周出　

院。出院后２月死于进行性衰竭和胸壁肿瘤复发。　Ｈｉｒｏｋａｗａ等［．］报道７３岁男性，因体重减轻和发热人　

中华老年　Ｃ．ｑｆ￣ｎｋ管病杂志２Ｏ０　９年２月第１】卷第２期Ｃｈｉｎ　Ｊ（ｋ，ｒｉａｔｒ　Ｈｅａｒｔ　Ｂｒａｉｎ　Ｖｅｓｓｅｌ　Ｄｉｓ，Ｆｅｂ　２００９，Ｖｏｌ　１１，Ｎｏ．２　

基础研究　

粒细胞集落刺激因子对乳鼠缺氧心肌细胞　

的保护作用及机制探　

付振虹，董蔚，盖鲁粤　讨　

摘要：目的　研究粒细胞集落刺激因子（Ｇ－ＣＳＦ）对缺氧心肌细胞的影响．探讨Ｇ—ＣＳＦ发挥心肌细胞保护作用的分　子机制。方法　将心肌细胞分为３组，对照组、缺氧组和Ｇ—ＣＳＦ组。流式细胞仪检测各组心肌细胞的存活率、凋亡　率和坏死率。Ｎｏｒｔｈｅｒｎ　ｂｌｏｔ法检测３组心肌细胞中Ｂｃｌ一２、Ｂａｘ、ｃａｓｐａｓｅ一３　ｍＲＮＡ的表达，Ｗｅｓｔｅｒｎ　ｂｌｏｔ法检测３组　心肌细胞中细胞色素（、（Ｃｙｔ　Ｃ）、信号转导与转录激活因子３（ＳＴＡＴ一３）、ｃａｓｐａｓｅ一３蛋白的表达。结果　６　ｕｇ／Ｌ　Ｇ－ＣＳＦ开始发挥对缺氧心肌细胞的保护作用，１　５０　ｉ２．ｇ／Ｉ　保护作用最强，３０／ｚｇ／Ｉ　和７５０　ｔ＊ｇ／Ｉ　保护作用相似。对照　组、缺氧组和（、ｒｃｓＦ组心肌细胞的存活率、凋亡率和坏死率差异有统计学意义。与缺氧组比较，Ｇ－ＣＳＦ组Ｂｃｌ－２　ｍＲＮＡ表达增加，Ｂａｘ、ｃａｓｐａｓｅ一３　ｍＲＮＡ、Ｃｙｔ　Ｃ和ｃａｓｐａｓｅ　３蛋白表达减少（Ｐ＜０．０１）。结论　缺氧心肌细胞中，　Ｇ－ＣＳＦ可能通过线粒体途径发挥抗凋亡的作用。　关键词：缺氧；心肌梗塞；粒细胞集落刺激因子；细胞凋亡；线粒体　

Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ　ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　ｇｒａｎｕｌｏｃｙｔｅ—ｃｏｌｏｎｙ　ｓｔｉｍｕｌａｔｉｎｇ　ｆａｃｔｏｒ　ｏｎ　

ｈｙｐｏｘｉｃ　ｃａｒｄｉｏｍｙｏｃｙｔｅｓ　ａｎｄ　ｉｔｓ　ｍｅｃｈａｎｉｓｍ　

ＦＵ　Ｚｈｅｎ—ｈｏｎｇ．ＤＯＮＧ　Ｗｅｉ．ＧＡＩ　ＬＵ—ｙｕｅ　

（Ｄｅｐａｒｔｎｌｅｎｔ（　ｆ　Ｃａｒｄｉｏｌｏｇ　，Ｃｈｉｎｅｓｅ　ＰＬＡ　Ｇｅｎｅｒａｌ　Ｈｏｓｐｉｔａｌ，Ｂｅｉｊｉｎｇ、００８５３，Ｃｈｉｎａ）　Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ　Ｔｏ　ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅ　ｔｈｅ　ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　ｇｒａｎｕｌｏｃｙｔｅ—ｃｏｌｏｎｙ　ｓｔｉｍｕｌａｔｉｎｇ　ｆａｃｔｏｒ（Ｇ—ＣＳＦ）ｏｎ　

1 对于 Ⅲ-Ⅳ度骨髓抑制，或发热性粒细胞缺乏患者，短效还是长效升白药的起效时间更快，持续时间更长？

短效重组人粒细胞刺激因子的药代动力学资料显示皮下注射的半衰期为2.5-5.8小时，而长效制剂的的药代动力学资料显示其平均半衰期依据剂量不同而波动于27-47小时之间。且资料显示，常规剂量给予短效制剂1天后嗜中性细胞成熟（不给药状态下一般需要5-7天），从骨髓进入血液，这样似乎短效制剂起效相对迅速。

短效制剂主要由肾小球滤过排出，而长效制剂由于其独特的PEG链上的环氧乙烷单元高度水合形成的环状结构能够避免其蛋白成分被相关酶水解或被巨噬细胞吞噬，同时避免其被肾小球滤过，所以其进入人体后主要由中性粒细胞表面的RHG-CSF受体介导清除，随着外周血中性粒细胞绝对计数（ANC）的升高，血浆中的长效制剂浓度呈现与ANC负相关表现。这样既可以达到持续有效改善白细胞缺乏，同时也能减少ANC过高风险。

在石远凯教授组织的关于聚乙二醇化长效制剂的临床Ⅰ期临床耐受性实验，以及徐兵河教授组织的关于聚乙二醇化长效制剂预防化疗后中性粒细胞减少的多中心随机对照Ⅱ期临床研究中，也得到了支持上述观点的相关结论（分别发表于2006年《癌症》及2016年《中国肿瘤临床与康复》）。

2 影响G-CSF疗效的原因有哪些？

患者的治疗依从性，药物副反应（包括罕见但严重的副反应如脾破裂/毛细血管渗漏综合症等），患者一般体力状态/既往化疗方案及次数/年龄因素（间接反映患者的骨髓储备功能水平）。

对于短效制剂还应当考虑到作为大肠埃希菌的表达产物，其免疫原性和抗原性导致机体产生中和性抗体导致药效减退的因素。

3 放疗状态下出现的粒细胞减少，G-CSF如何使用？

参考ASCO建议，对于致死剂量全身放射治疗或意外全身照射的患者应考虑在终止放射暴露后G-CSF应用治疗（该推荐基于美国放射事故登记中心的辐射急症救援中心的病例观察资料而提出）。