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酶法测定膳食纤维的推荐方法：试剂：1. 0.1M PBS, PH=0.6.2. 4M HCl ; 4M NaOH3. 95%乙醇，78%乙醇4. 丙酮酶：淀粉酶，蛋白酶，胰酶步骤：1. 湿样品需要均质并冻干，所有样品都需要粉碎至粒径0.3mm。
2. 当脂肪含量大于6-8%时或者需要适当粉碎时，需要在室温下用石油醚抽脂15min。
3. 称取1g样品，精确到0.1mg，转移至锥形瓶。
向其中加入25ml 0.1M的PBS，PH=6，充分悬浮样品。
4. 加入100ul 淀粉酶。
用膜盖住锥形瓶顶部，沸水浴保温15min，偶尔摇晃一下。
5. 室温下放凉，加入20ml蒸馏水，用HCL调至PH=1.5，用少量蒸馏水冲洗电极。
6. 加入100mg 胃蛋白酶，顶部盖膜，40℃保温并搅拌60min.7. 加入20ml蒸馏水，用NaoH调PH至6.8，少许蒸馏水冲洗电极。
8. 加入100ml 胰酶，顶部盖膜，40℃保温并搅拌60min.9. 用HCl调PH至4.5.10. 用干燥的称量过的G2坩埚（含0.5g硅藻土）作为辅助过滤设施。
用20m蒸馏水分两次冲洗。
A. 滤液残留（不溶性膳食纤维）：11. 用20ml 95%乙醇和20ml 丙酮分两次冲洗。
12. 105℃干燥至恒重，干燥器内冷却后称重（D1）。
13. 550℃灰化5h，干燥器内冷却后称重（I1）B．滤液（可溶性膳食纤维）14. 将滤液可冲洗水合并定容至100ml.15. 加入微热（60℃）的95%乙醇400ml，沉淀1h（时间可以缩短）.16. 用含有0.5g硅藻土的G2坩埚过滤。
17. 用20ml 78%乙醇、20ml 95%乙醇和20ml丙酮分别分两次冲洗。
18. 105℃烘至恒重，在干燥器内冷却后称重（D2）19. 550℃至少灰化5h，干燥器内冷却后称重（I2）空白：水溶性膳食纤维和不溶性膳食纤维空白值（B1和B2）的测定都是在没有添加样品的情况下进行。
食品中纤维素含量的测定与分析在现代人的饮食结构中，纤维素成分占据着重要的地位。
纤维素是一种碳水化合物聚合物，存在于植物细胞壁中。
我们平时所说的“膳食纤维”或者“食物纤维”，其实就是指这种存在于食物中的纤维素。
在人体内，纤维素可以帮助消化道蠕动，促进肠道蠕动，预防便秘，并且对于控制体重和维持心血管健康也有很大的帮助。
因此，食品中纤维素含量的测定和分析是十分重要的。
食品中纤维素含量的测定方法多种多样，其中常用的方法有两大类：化学方法和理化方法。
化学方法是最常用的分析方法之一。
它主要是通过将样品在特定的酸溶液中进行加热处理，使得样品中的纤维素分解为单糖、醛酸和醇等化合物，然后使用分析仪器来测定这些化合物的含量以得出纤维素的含量。
另外，还可以通过浸提食品样品中的纤维素，使用纤维素酶来降解纤维素并测定酶解产物含量的方法来测定。
理化方法则是使用一系列的理化参数，通过样品在不同条件下的变化来测定纤维素含量。
比如，通过流变学方法可以测定纤维素的粘度、流变性质等；通过热分析方法可以测定纤维素的热稳定性和热解特性；通过红外光谱等光谱学方法可以判断纤维素的结构等。
除了测定纤维素的含量外，对纤维素的分析也是很有必要的。
通过分析纤维素的种类、比例和结构等信息，可以更好地了解食物中的纤维素含量。
纤维素主要分为可溶性纤维素和不溶性纤维素，可溶性纤维素主要存在于水果、蔬菜等食物中，而不溶性纤维素则主要存在于谷类食物、豆类食物等。
不同种类的纤维素在人体内的作用和效果也有所不同。
另外，纤维素的分子结构也会影响其在食物中的含量和性质。
比如，纤维素的分子量越大，其溶解性越差，对消化道的刺激作用也越强。
纤维素的含量和分析不仅对于食品行业来说很重要，对于消费者来说也是有很大帮助的。
消费者可以通过了解食物中纤维素的含量来做出更科学的膳食选择，以达到更健康、均衡的饮食。
此外，对于食品行业来说，了解食物中纤维素的含量和分析结果可以帮助其进行产品研发和市场定位。
1.2.2 膳食纤维物性测定方法1.2.2.1 膳食纤维溶胀性测定[7] 称取1.00g 样品, 置于温条件下静置24h, 读取液体中样品的体积。
按下式计算溶胀性:溶胀性=[溶胀后纤维体积(mL)- 干品体积(mL)]/样品干重(mL)20mL 试管中, 吸15mL 蒸馏水加入其中, 振荡后在室1.2.2.2 膳食纤维持水力测定[7] 称取1.00g 样品放入20mL 试管中, 加入蒸馏水15mL 室温下浸泡24h 后,然后用胶头滴管吸取上层澄清液, 插入滤纸条, 使其最底部刚刚接触渣液平面, 12h 后沥干样品水分。
之后将取下滤纸条的试管放在电子天平上准确称重。
按下式计算持水力:持水力=[样品湿重(g)- 样品干重(g)]/样品干重(g)1.3.5.1 膳食纤维膨胀力测定[8]称取0.10g 样品，置于50ml 量筒中，吸5ml 蒸馏水加入其中，振荡后在25℃条件下密封放置24h，读取液体中样品的体积。
按下式计算膨胀力：膨胀力=[溶胀后纤维体积(ml)－干品体积(ml)]/样品干重(ml)1.3.5.2 膳食纤维持水力测定[8]称取2.00 g 样品放入100ml 烧杯中，加入20℃蒸馏水40ml 常温下浸泡1h 后，在定量滤纸上沥干样品水分，并将其迅速转入表面皿中称重。
按下式计算持水力：持水力=[样品湿重(g)－样品干重(g)]/样品干重(g)1.3.5.3 膳食纤维结合水力测定称取1.00g 样品，置于平皿中，加入20℃蒸馏水20ml，室温下保持1h 后移置定量滤纸上沥干水分，将湿样移入10ml 刻度离心管中，在4000r/min 条件下离心5min 后弃去水分，所获得湿样所含水分即为结合水，其与干样的重量之比即为结合水力。
按下式计算结合水力：结合水力=[离心后样品湿重(g)－样品干重(g)]/ 样品干重(g)1.3.6 高品质膳食纤维的评定方法高品质膳食纤维的可溶性成分含量应达12% 以上，膨胀力大于10ml/g，持水力不小于7g/g，结合水力不低于5g/g[3][8]。
食品膳食纤维含量的检测与分析研究食品膳食纤维是指存在于食物中而又不被人体消化吸收的部分。
它在人体内具有重要的生理功能，如促进肠道蠕动、增加饱腹感、调节血糖和血脂等。
因此，准确检测和分析食品中的膳食纤维含量对于保障食品安全和指导膳食健康具有重要意义。
一、膳食纤维的种类和特点膳食纤维包括水溶性膳食纤维和不溶性膳食纤维两大类。
水溶性膳食纤维能与水形成黏胶状物质，如果胶、半乳聚糖等。
而不溶性膳食纤维则几乎不溶于水，如木质素、纤维素等。
这两类膳食纤维在食物中存在的比例和含量各不相同，因此需要进行分别检测和分析。
二、食品膳食纤维含量的检测方法目前，常见的食品膳食纤维含量检测方法主要有理化法和生化法两种。
理化法是通过测定食品中总纤维和可溶性纤维的含量来确定膳食纤维含量。
其中，总纤维的检测通常采用Gravimetric方法或Enzyme gravimetric方法，可溶性纤维的检测则采用比色法或滴定法。
这些方法操作简便，且结果可靠，因此被广泛应用于实际检测工作中。
生化法是通过测定食品中特定酶解产物的含量来间接估算膳食纤维含量。
常用的生化法有消化酶法和发酵法。
消化酶法是将食品样品经过一系列酶解反应，然后测定酶解产物的含量，从而推算出食品中的膳食纤维含量。
而发酵法则是利用人工肠道模型，通过测定发酵过程中产生的短链脂肪酸来分析膳食纤维含量。
生化法虽然比理化法更加复杂，但能更准确地估算出食品中膳食纤维的含量和种类。
三、膳食纤维含量的分析意义准确检测和分析食品中膳食纤维的含量对于食品工业具有重要意义。
首先，它可以指导食品生产过程中的加工和配比，有助于提高食品质量；其次，可以帮助消费者合理选择食品，保证膳食纤维的摄入量，预防疾病；最后，也可以为政府制定相应的食品标准和健康指导提供科学依据。
四、食品膳食纤维含量检测中存在的问题和挑战虽然食品膳食纤维含量的检测方法已经有了一定的成熟度，但仍然存在一些问题和挑战。
首先，不同的分析方法会导致结果有所差异，需要进一步规范和标准化。
膳食纤维含量的分析方法及其作用膳食纤维是指不被小肠消化吸收的食物成分，包括纤维素、半纤维素、木质素和胶质等。
膳食纤维素在人体内具有很多重要的作用，如促进肠道蠕动，增加粪便量，防止便秘，减缓肠道内有毒物质的吸收，并降低血液中的胆固醇和三酸甘油酯等。
因此，膳食纤维素对人体健康的重要性不可忽视。
但是，如何准确地测定膳食纤维含量，一直是食品科学领域关注的问题。
本文将介绍膳食纤维含量的分析方法及其作用。
一、膳食纤维含量的分析方法目前，常用的膳食纤维含量分析方法主要包括酶解重量法、酶解色谱法和酒精碱解法三种。
1. 酶解重量法酶解重量法是将食物样品加入酶解液中，通过酶解去除可溶性纤维，再将残渣干燥至恒重，通过与原样比较得出膳食纤维含量。
该方法的优点是操作简单，不需要特殊药剂或设备，能够同时测量可溶性纤维和不可溶性纤维。
但是，该方法受到酶解液组分、温度、酶解时间等因素的影响，可以引入误差。
2. 酶解色谱法酶解色谱法是将食物样品加入酶解液中，在一定温度下酶解后，通过离子交换色谱柱或凝胶色谱柱等柱层析技术分离出可溶性纤维和不可溶性纤维。
该方法能够定量测量各种纤维素组分的含量，具有高精度、高灵敏度的优点。
但是，该方法需要特殊的色谱设备和技术，并且分析时间较长。
3. 酒精碱解法酒精碱解法是将食物样品用浓度为1.25%的乙醇氢氧化钾溶液转移至试管中，在恒温电热板上加热反应，利用酒精钠溶液中法定浓度的稳定化学试剂，测定生成的酸的量，从而计算出膳食纤维含量。
该方法的优点是简单易行，结果准确。
但是，由于纤维素和半纤维素对碱或酸有不同的抗性，因此可能会低估或高估膳食纤维含量。
二、膳食纤维含量的作用1. 促进肠道健康膳食纤维具有良好的水溶性、胶原质和糊粉质等特性，能够吸附水分并形成粘胶状物质，增加肠内粪便的体积和湿度，促进肠道蠕动，减少便秘和肠癌的发生率。
2. 降低胆固醇水平膳食纤维可以与胆固醇和胆汁酸结合，使其不能被吸收，从而降低血液中的胆固醇水平，减少心血管疾病的发生。
三维滤袋法测定食品中膳食纤维的研究发布时间：2021-01-22T05:57:18.742Z 来源：《中国科技人才》2021年第2期作者：杨霞[导读] 膳食纤维是人体所必须的营养物质，膳食纤维过多或过少都不利于人的身体健康，本文对三维滤袋法测定食品中膳食纤维展开研究，分析膳食纤维的功能，探究三维滤袋法的发展和应用，探索测定实验的展开，并对试验测定结果进行讨论。
发挥技术优势，以便充分了解膳食纤维的特点，使检测活动满足生产需求。
杨霞北京市食品安全监控和风险评估中心（北京市食品检验所） 100094摘要：膳食纤维是人体所必须的营养物质，膳食纤维过多或过少都不利于人的身体健康，本文对三维滤袋法测定食品中膳食纤维展开研究，分析膳食纤维的功能，探究三维滤袋法的发展和应用，探索测定实验的展开，并对试验测定结果进行讨论。
发挥技术优势，以便充分了解膳食纤维的特点，使检测活动满足生产需求。
关键词：膳食纤维；测定实验；样品粒度引言人类的健康生存需要七大营养素，包括水、碳水化合物、蛋白质、脂肪、维生素、矿物质、膳食纤维。
就膳食纤维而言，饮食中摄入的纤维素过多或不足都会引起健康问题。
因此，准确测量食物中膳食纤维的含量对于提高人民的生活水平和健康水平十分重要。
一、膳食纤维基本介绍膳食纤维主要由食用植物成分、碳水化合物和其他类似物质的总和组成，可在人类的小肠内被消化吸收，并部分或全部在大肠内发酵。
膳食纤维包含相对丰富的内容，如糖、木质素等，可以根据溶解性质，将膳食纤维分为两大类，一种是水溶性膳食纤维，另一种是不溶于水的膳食纤维。
膳食纤维的功能复杂多样，第一，膳食纤维可以吸收肠道内的水，并扩张起来，还能形成高粘度的溶胶，使人产生较为强烈的饱腹感，另外还能有效刺激肠道，这对预防癌症相关疾病具有重要的积极影响[1]。
第二，膳食纤维可以通过调节肠道pH值来改善肠道内有益菌群的繁殖环境，同时也能有效改善肠道系统中微生物群落的构成。
第三，膳食纤维可以吸收各种变异源的有机分子，如胆固醇酸和胆固醇，有效抑制胰腺血糖素的分泌，并能够在预防糖尿病等疾病上发挥重要作用。
实验：蔬菜中纤维含量的测定
目的
本实验的目的是测定蔬菜中的纤维含量。
纤维是一种重要的营养成分，它有助于促进消化系统的运作和维持身体健康。
通过测定蔬菜中的纤维含量，我们可以评估蔬菜的营养价值。
实验步骤
1. 准备实验所需的材料和设备，包括蔬菜样本、显微镜、玻璃片、滤纸、显微镜片、载玻片等。
2. 将蔬菜样本洗净并切成小块。
3. 将切好的蔬菜样本放入锅中，加入适量的水，煮沸。
4. 煮沸后，将蔬菜样本捞出，并用凉水漂洗干净。
5. 将洗净的蔬菜样本放入试管中，加入约30ml的浸泡液（如乙醇-醋酸酯混合液）。
6. 用显微镜镜头将蔬菜样本压碎，使其释放纤维。
7. 将压碎的蔬菜样本倒入滤纸中，用滤纸包裹并挤压，使纤维固定在滤纸上。
8. 将固定在滤纸上的纤维转移到显微镜片上。
9. 将显微镜片放入载玻片中，并用显微镜观察纤维的形态和数量。
10. 根据观察结果，计算蔬菜中的纤维含量。
结果与分析
通过观察纤维形态和计算纤维含量，我们可以得出蔬菜中纤维的含量。
这将有助于我们评估蔬菜的营养价值和选择适合的蔬菜食材。
注意事项
- 实验中应注意操作安全，避免伤害和污染。
- 实验过程中，应保持环境清洁，并使用干净的设备和试剂。
- 实验结果可能会受到蔬菜种类、处理方式和测量方法等因素的影响，因此需要进行多次实验并取平均值。
总结
本实验介绍了一种测定蔬菜中纤维含量的方法。
通过观察纤维形态和计算纤维含量，我们可以评估蔬菜的营养价值。
这个实验方法可以用于研究蔬菜的营养成分，并为选择健康的蔬菜食材提供参考。
食品及保健食品中总膳食纤维的测定本方法适用于食品及保健食品中总膳食纤维的测定检测依据：AOAC第16版1 原理此测试结合酶和重量分析方法，测定食物中的全部食物纤维。
干燥的、无脂肪的食物样本用热稳定的α-淀粉酶胶化，用淀粉葡萄糖苷酶去掉样本中的蛋白和淀粉。
加入乙醇沉淀可溶解的食物纤维。
然后用乙醇和丙酮过滤并清洗残余物。
干燥后，称重残余物。
将样本的一半用于蛋白质分析。
另一半烧成灰烬。
总的食物纤维是残余物质的重量减去蛋白和灰烬的重量。
2 试剂2.1 α-淀粉酶，热稳定。
Sigma产品号A3306。
2.2 蛋白酶。
Sigma产品号P3910。
2.3 淀粉葡萄糖苷酶。
Sigma产品号A9913。
2.4 C盐，酸洗。
Sigma产品号C8656。
2.5 石油醚2.6 乙醇2.7 丙酮2.8 磷酸二氢钠2.9 磷酸氢二钠2.10 氢氧化钠2.11 盐酸2.12 磷酸盐缓冲液。
0.08M，pH6.0溶解1.4克的磷酸氢二钠和8.4克无水的磷酸二氢钠于700ml水中。
用水稀释至1升。
检查pH值，如需要，用氢氧化钠或磷酸校准。
室温下储存于密封容器中。
2.13 氢氧化钠溶液。
0.275mol/L用水稀释275毫升1.0mol/L氢氧化钠溶液至1升体积的烧杯中。
室温下储存于密封容器中。
2.14 盐酸溶液。
0.325mol/L用水稀释275毫升1.0mol/L氢氧化钠溶液至1升体积的烧杯中。
室温下储存于密封容器中。
3 仪器3.1 耐高温垂熔漏斗3G33.2 真空泵3.3 酸度计3.4 高温炉3.5 干燥箱3.6 600ml高脚烧杯3.7 分析天平精确至0.1毫升4 操作方法4.1 称量4份待测试样本，每份1克，放入高脚烧杯中。
样本的重量偏差不要超过20毫克。
重量精确度为0.1毫克。
每个烧杯中加入50毫升pH6.0的磷酸盐缓冲液。
每个烧杯中加入0.10毫升α-生化酶，A3306，充分混合。
用铝箔将烧杯封好，放入沸腾的水浴中。
食品中食品中纤维素含量的新测定方法在如今注重健康饮食的社会中，食品中纤维素含量的检测成为人们关注的焦点之一。
纤维素是植物细胞壁的主要组成部分，它具有促进肠道蠕动、降低胆固醇和维持血糖水平稳定等重要功能。
因此，寻找一种准确快速的测定方法，既有助于消费者了解食品中的纤维素含量，又有助于食品工业更好地控制产品质量。
目前，常见的测定食品中纤维素含量的方法主要有化学和生物学两种。
化学方法主要包括铅醋法、硫酸盐法和酶解方法，而生物学方法则利用大肠杆菌等微生物来测定纤维素的含量。
然而，这些方法在操作过程中存在一些问题。
首先，传统的化学方法通常需要使用腐蚀性强的化学试剂，如硫酸和盐酸等，这不仅影响操作人员的健康，还对环境造成污染。
其次，化学方法的操作流程繁琐，需要耗费大量的时间和人力，不利于高效率的生产。
最后，传统的生物学方法虽然准确性较高，但也存在一些问题，如操作流程复杂、时间长、成本高等。
因此，近年来，科学家们开始探索新的测定食品中纤维素含量的方法。
其中，一种新的方法是利用纳米技术进行纤维素的测定。
纳米技术是指通过控制物质在10^-9米级别上的制备、处理和应用来实现特殊性质和功能的技术。
科学家们利用纳米颗粒与纤维素反应的特性，发展出了一种基于纳米技术的纤维素测定方法。
这种新的纤维素测定方法具有诸多优点。
首先，它使用纳米颗粒作为测定材料，无需使用腐蚀性化学试剂，从而避免了对操作人员和环境的伤害。
其次，利用纳米技术，这种方法可以简化操作流程，缩短测定时间，提高生产效率。
最重要的是，这种方法还能够准确测定食品中各类纤维素的含量，包括可溶性纤维素和不可溶性纤维素，从而更好地满足消费者对食品营养成分的需求。
此外，这种新的纤维素测定方法还具有一定的应用前景。
纤维素作为一种重要的食品成分，在食品工业中发挥着重要的功能。
准确测定食品中的纤维素含量，不仅有助于食品工业更好地控制产品质量，还能够帮助消费者选择更加健康的食品。
因此，这种新的测定方法有望在食品工业和消费者中得到广泛应用。
膳食纤维的测定方法
酶-重量法
1.原理：
样品分别用α-淀粉酶、蛋白酶、葡萄糖苷酶进行酶解消化以去除蛋白质和可消化的淀粉。
总膳食纤维（TDF）是先酶解，然后用乙醇沉淀，再将沉淀物过滤，将TDF残渣用乙醇和丙酮冲洗，干燥称重。
不溶性和可溶性膳食纤维（IDF 和SDF）是酶解后将IDF过滤，过滤后的残渣用热水冲洗，经干燥后称重。
SDF是将上述滤出液用4倍量的95%乙醇沉淀，然后再过滤，干燥，称重。
TDF、IDF和SDF量通过蛋白质、灰分含量进行校正。
2.适用范围
本方法适用于各类植物性食物和保健食品。
3.仪器
烧杯：400或600ml高脚型。
过滤用坩埚：玻料滤板，美国试验和材料学会（ASTM）40-60μm，Pyrex 60ml（Corning buchner，或同等的）。
如下处理：
（1）在灰化炉525℃灰化过夜。
炉温降至130℃以下取出坩埚。
（2）用真空装置移出硅藻土和灰质。
（3）室温下用2%清洗溶液浸泡1小时。
（4）用水和去离子水冲洗坩埚；然后用15ml丙酮冲洗然后风干。
（5）在干燥的坩埚中加硅藻土，在130℃烘干恒重。
（6）在干燥器中冷却1小时，记录坩埚加硅藻土重量，精确至。
真空装置：
（1）真空泵或抽气机作为控制装置。
（2） 1L的厚壁抽滤瓶。
（3）与抽滤瓶相配套的橡皮圈。
振荡水浴箱：
（1）自动控温使温度能保持在98±2℃。
（2）恒温控制在60℃。
天平：分析级，精确至±。
马福炉：温度控制在525±5℃。
干燥箱：温度控制在105和130±3℃。
干燥器：用二氧化硅或同等的干燥剂。
干燥剂两周一次在130℃烘干过夜。
PH计：注意温控，用、和缓冲液标化。
移液管及套头：容量100μl和5ml。
分配器或量筒：
（1）15±，供分配78%的乙醇，95%的乙醇以及丙酮。
（2）40±，供分配缓冲液。
. 磁力搅拌器和搅拌棒。
4. 试剂
全过程使用去离子水，试剂不加说明均为分析纯试剂
乙醇溶液：
（1） 85%：加895ml95%乙醇在1L量筒中，用水稀释至刻度。
（2） 78%：加821ml95%乙醇在1L量筒中，用水稀释至刻度。
丙酮：
供分析用酶：在0-5℃下储存。
（1）热稳定α-淀粉酶溶液：Cat. No. A3306，Sigma Chemical Co.，St. Louis，MO63178，或 Termamyl 300L，Cat. No. 361-6282，Novo-Nordisk，Bagsvaerd，Denmark，或等效的酶。
（2）蛋白酶：Cat. No. P3910，Sigma Chemical Co.，或等效的。
当天用MES/TRIS缓冲液中现配50mg/ml酶溶液。
（3）淀粉葡糖苷酶溶液：Cat. No. AMG A9913，Sigma Chemical Co.，或等效的。
硅藻土：酸洗（Celite 545 AW，，Sigma Chemical Co.，或等效的）。
洗涤液：两者挑一。
（1）铬酸：120g重铬酸钠Na2Cr2O7·2H2O，1000ml蒸馏水和1600ml浓硫酸。
（2）实验室用液体清洁剂，预备急需清洗的（Micro，International Products Corp.，Trenton，NJ08016，或等效的）。
用水配制2%溶液。
MES-TRIS缓冲液：L，温度在24℃时pH值为。
（1） MES：2-（N-吗啉代）磺酸基乙烷（，Sigma Chemical Co.或等效的）。
（2） TRIS：三羟（羟甲基）氨基甲烷（，Sigma Chemical Co.或等效的）。
在的蒸馏水中溶解和，用6mol/L NaOH调pH到，用水定容至2L。
（注意：24℃时的pH为，但是，如果缓冲液温度在20℃，pH就为，如果温度在28℃，pH为。
为了使温度在20-28℃之间，需根据温度调整pH值。
）
盐酸溶液：/L，加L盐酸到700ml水中，用水定容至1L。
5. 操作方法
. 样品制备：
（1）固体样品：如果样品粒度＞，研磨后过（40-60目）筛。
（2）高脂肪样品：如果脂肪含量＞10%，用石油醚去脂。
每克样品用25ml，每次提取完静置一会儿再小心将烧杯倾斜，慢慢将石油醚倒出，共洗三次。
（3）高碳水化合物样品：如果样品干重含糖＞50%，用85%乙醇去除糖份，每克样品每次10ml，共洗三次轻轻倒出，然后在40℃烘箱中不时翻搅干燥过夜，并研磨过筛。
. 样品消化
（1）准确称取双份±样品（M1和M2），置于高脚烧杯中。
（2）在每个烧杯中加入40ml MES-TRIS缓冲液，在磁力搅拌器上搅拌直到样品完全分散。
（防止团块形成，使受试物与酶能充分接触）。
（3）用热稳定的淀粉酶进行酶解处理：加100μl热稳定的淀粉酶溶液，低速搅拌。
用铝箔片将烧杯盖住，在95-100℃水浴中反应30分钟。
（起始的水浴温度应达到95℃）。
（4）冷却：所有烧杯从水浴中移出，凉至60℃。
打开铝箔盖，用刮勺将烧杯边缘的网状物以及烧杯底部的胶状物刮离，以使样品能够完全的酶解。
用10ml蒸馏水冲洗烧杯壁和刮勺。
（5）用蛋白酶进行酶解处理：在每个烧杯中各加入100μl蛋白酶溶液。
用铝箔盖住，在60℃持续摇动反应30分钟（开始时的水浴温度应达60℃），使之充分反应。
（6） pH值测定：30分钟后，打开铝箔盖，搅拌中加入L HCL至烧杯中。
60℃时用1mol/L NaOH溶液或1mol/L HCL 溶液调最终pH为。
（注意：当溶液为60℃时检测和调整pH，因为在较低温度时pH会偏高。
）
（7）用淀粉葡糖苷酶溶液酶解处理：搅拌同时加100μl淀粉葡糖苷酶溶液。
用铝箔盖住，在60℃持续振摇反应30分钟，温度应恒定在60℃。
测定
总的膳食纤维测定
（1）用乙醇沉淀膳食纤维：在每份样品中，加入预热至60℃的95%乙醇225ml，乙醇与样品的体积比为4∶1。
室温下沉淀1小时。
（2）过滤装置：用15ml78%乙醇将硅藻土湿润和重新分布在已称重的坩埚中。
用适度的抽力把坩埚中的硅藻土吸到玻板上。
（3）酶解过滤，用78%乙醇和刮勺转移所有内容物微粒到坩埚中。
（注意：如果一些样品形成胶质，用刮勺破坏表面，以加速过滤。
）
（4）抽真空，分别用15ml的78%乙醇，95%乙醇和丙酮冲洗残渣各2次，将坩埚内的残渣抽干后在105℃烘干过夜。
将坩埚置干燥器中冷却至室温。
坩埚重量，包括膳食纤维残渣和硅藻土，精确称至。
减去坩埚和硅藻土的干重，计算残渣重。
（5）蛋白质和灰分的测定:取成对的样品中的一份测定蛋白质，用本书前述或方法测定。
用（N×作为蛋白质的转换系数）。
分析灰分时用平行样的第二份在525℃灼烧5小时，在干燥器中冷却，精确称至，减去坩埚和硅藻土的重量，即为灰分重量。
.不溶性膳食纤维测定：
（1）称适量样品按进行酶解，过滤前用3ml水湿润和重新分布硅藻土在预先处理好的坩埚上，保持抽气使坩埚中的硅藻土抽成均匀的一层。
（2）过滤并冲洗烧杯，用10ml70℃水洗残渣2次，然后再过滤并用水洗，转移到600ml高脚烧杯，保留用以测定可溶性膳食纤维，按。
（3）用抽滤装置，分别用15ml78%乙醇，95%乙醇和丙酮各冲洗残渣2次。
（注意：应及时用78%乙醇、95%乙醇和丙酮冲洗残渣否则可造成不溶性膳食纤维数值的增大。
）
（4）按用双份样品测定蛋白质和灰分。
可溶性膳食纤维测定：
（1）将不溶性膳食纤维过滤后的滤液收集到600ml高脚烧杯中，对比烧杯和滤过液，估计容积。
（2）加约滤出液4倍量已预热至60℃的95%乙醇。
或者将滤液和洗过残渣的蒸馏水的混合液调至80g，再加入预热至60℃的95%乙醇320ml。
（3）室温下沉淀1小时。
下面按测定总膳食纤维，从"湿润和重新分布硅藻土……"。
6. 计算
TDF、IDF、SDF均用同一公式计算
膳食纤维（DF，g/100g）测定：
DF={[（R1+R2）/2]-P-A}/[（M1+M2）/2]×100
式中：R1和R2=双份样品残留物重量（mg）
P和A=分别为蛋白质和灰分重量（mg）
M1和M2=样品重量（mg）。
