香鳞毛蕨提取物对红色毛癣菌的抑制作用研究

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新疆欧洲鳞毛蕨中总生物碱的提取及抑菌活性研究

新疆欧洲鳞毛蕨中总生物碱的提取及抑菌活性研究周贤春;玛丽亚木.阿布里米提;苏力坦.阿巴白克力;何春霞【期刊名称】《地方病通报》【年(卷),期】2007(22)5【摘要】目的研究欧洲鳞毛蕨中总生物碱体外抑菌活性,为合理开发利用欧洲鳞毛蕨提供理论依据。

方法超声辅助提取欧洲鳞毛蕨中的总生物碱,采用滤纸片法测定总碱抑菌活性,琼脂平板稀释法进行MIC的测定,欧洲鳞毛蕨总生物碱具有较强的抑菌作用。

结果欧洲鳞毛蕨总生物碱对供试菌种的最低抑菌浓度分别为:大肠埃希杆菌0.8 mg/mL,金黄色葡萄球菌0.4 mg/mL,枯草杆菌1.6 mg/mL,奇异变形杆菌1.6 mg/mL,酵母3.2 mg/mL。

结论欧洲鳞毛蕨总生物碱具有较强的抑菌作用,对细菌、酵母都具有一定的抑菌作用,开发前景乐观。

【总页数】3页(P14-16)【关键词】欧洲鳞毛蕨;总生物碱;超声辅助提取;抗菌活性【作者】周贤春;玛丽亚木.阿布里米提;苏力坦.阿巴白克力;何春霞【作者单位】新疆大学生命科学与技术学院;新疆师范大学生物化学学院【正文语种】中文【中图分类】Q586;Q949.36【相关文献】1.新疆欧洲鳞毛蕨黄酮的提取及抗氧化活性 [J], 何春霞;曹文尧2.超声波法提取欧洲鳞毛蕨中总黄酮的研究 [J], 何春霞;曹文尧3.亳芍总生物碱提取及抑菌活性的研究 [J], 陈乃东;朱旺生;杨小东4.香鳞毛蕨提取液对镰孢菌抑菌活性的研究 [J], 王文重;陈玲玲;卜志刚;高睿;闵凡祥;高云飞;杨帅;魏琪;董学志5.牛心朴子草总生物碱超声提取工艺及抑菌活性研究 [J], 景炳年;王伟;刘雨晴;谢晓阳;周雍;宁二娟;张华南;陈飞;魏磊因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

中药射干提取物对皮肤癣菌抑菌作用研究.docx

中药射干提取物对皮肤癣菌抑菌作用研究中药射干提取物对皮肤癣菌抑菌作用研究中华皮肤科杂志1998年第5期第31卷论著摘要作者：刘春平王凤荣南国荣四荣联王刚生郭文友单位：050051 石家庄，河北医科大学第三医院(刘春平)；第二医院(南国荣四荣联王刚生郭文友)；河北医科大学病理研究室(王凤荣)本实验选用中药射干进行研究，测定各部分提取物对5种常见皮肤癣菌的抑菌作用，以期为临床采用射干提取物治疗皮肤癣菌病提供科学依据。

一、材料和方法1.菌种：红色毛癣菌(Tr)、须癣毛癣菌(Tm)、犬小孢子菌(Mc)、石膏样小孢子菌(Mg)和絮状表皮癣菌(Ef)各1株，均为购于中国协和医科大学皮肤病研究所菌种保藏中心的标准株。

2.药物、药物提取及培养基制备：射干1000g，由本院中药房提供。

根据李应勤等［1］的方法，取射干1000g 粉碎后，以95%乙醇回流提取3次。

合并提取液，加热浓缩，得稠膏200g，加水溶解，滤去不溶物。

水溶液依次用乙醚、乙酸乙酯和正丁醇萃取，减压回流，三部分得量分别是25g、9g和30g。

取三部分提取物和前两部分混和物(1∶1) 各2g、2g、5g和2g，分别溶于3ml二甲基亚砜中，将4种溶液分别以沙堡琼脂培养基稀释至10 0ml做为初浓度，再倍比稀释5次，得6个浓度的系列药基。

设实验组、对应浓度的二甲基亚砜对照组及空白对照组。

冷藏备用。

3.抑菌效果观察：将5种皮肤癣菌分别移种于沙堡琼脂培养基，25℃培养7～14天，以手术刀刮取菌丝体，加入无菌生理盐水，研磨，至形成菌悬液(菌丝长度约为10～50μm)。

离心(40 00r/min，5分钟)，弃上清液。

取沉淀菌丝分别加入沙堡液体培养基中，用血细胞计数板调节菌丝浓度为0.5～1.0×107CFU/ml。

5种菌悬液分别振荡混匀，接种于实验组和对照组培养基斜面的底部，接种量10μl，平行样品3管。

试管直立放置，25℃培养2周。

3管均无生长为阴性，阴性管的最低药物浓度为对该菌的最小抑菌浓度(MIC)。

香鳞毛蕨对红色毛癣菌的抑制作用及机制研究

鳞毛蕨对红色毛癣菌有明显的抑制作用，抑菌效果与浓度相关，生药的ＭＩＣ值为０．２５ｇ・ｍＬ。。；透射电镜观察发现药物能够改
变红色毛癣菌菌体形态，细胞质聚集明显，细胞壁模糊且部分缺失，菌体的膜性系统发生破坏。结论具有较强的抑制作用，其主要作用机理与破坏菌体的细胞壁结构相关。
ＴｈｅｔｒａｎｓｍｉｓｓｉｏｎｅｌｅｃｔｒｏｎｍｉｃｒｏｓｃｏｐｅｓｈｏｗｅｄｇｒｅａｔｃｈａｎｇｅｓｉｎＴｒｉｃｈｏｐｈｙｔｏｎｒｕｂｒｕｍｔｈａｌｌｕｓ，ｔｈｅｃｙｔｏｐｌａｓｍｇａｔｈｅｒｉｎｇｏｂｖｉｏｕｓｌＹ，ｔｈｅｃｅｌｌｗａｌｌｂｌｕｒｒｙａｎｄｄｅｆｅｃｔｉｖｅｉｎｐａｒｔ．Ａｓａｒｅｓｕｌｔ，ｔｈｅｃｅｌｌｍｅｍｂｒａｎｃｅｓｙｓｔｅｍｗａｓｄｅｓｔｒｏｙｅｄ．ＣｏｎｃｌｕｓｉｏｎＤｒｙｏｐｔｅｒｉｓｆｒａ￣ａｎｓｅｘｔｒａｃｔｃａｎｉｎ — ｈｉｂｉｔｔｒｉｃｈｏｐｈｙｔｏｎｒｕｂｒｕｍ’ ｓｇｒｏｗｔｈ，ａｎｄｉｔｓｉｎｈｉｂｉｔｏｙｒｍａｃｈｉｎｉｓｍｉｓｄｅｓｔｒｏｙｉｎｇｔｈｅｃｅｌｌｗａｌ１．

我国中草药抗真菌的回顾性分析

我国中草药抗真菌的回顾性分析夏雅静;吴永卓;雷佳银;杨荣杰;郭芸;邓丹琪【摘要】病原菌感染是目前威胁人类健康的一大因素,真菌感染为其中重要的一类.抗真菌药物有西药类和中草药,西药的种类较少,且有一定的毒副作用.中草药作为抗真菌药物的重要补充,在我国由来已久,有其独特的地位.本文通过复习我国中草药抗真菌的相关文献,对我国抗真菌中草药的种类、疗效等现状进行了综述.【期刊名称】《皮肤病与性病》【年(卷),期】2019(041)001【总页数】4页(P26-29)【关键词】中草药;真菌;抗真菌【作者】夏雅静;吴永卓;雷佳银;杨荣杰;郭芸;邓丹琪【作者单位】昆明医科大学第二附属医院皮肤科,云南昆明650101;昆明医科大学第二附属医院皮肤科,云南昆明650101;昆明医科大学第二附属医院皮肤科,云南昆明650101;昆明医科大学第二附属医院皮肤科,云南昆明650101;昆明医科大学第二附属医院皮肤科,云南昆明650101;昆明医科大学第二附属医院皮肤科,云南昆明650101【正文语种】中文【中图分类】R243;R978.5真菌是一类具有典型细胞核的真核细胞微生物，临床上感染真菌后可引起浅部真菌病和深部真菌病。

浅部真菌病较易发现，诊断及预后较好，而深部真菌感染的临床表现无特异性，且起病隐匿，易被原发疾病所掩盖，诊断及治疗较为困难[1、2]。

目前临床应用的抗真菌药物较少，且多为化学类药物，存在疗效差异大、价格贵，部分毒性大等缺点[3-5]。

从中草药中提取出副作用小、价格低廉、疗效佳、不易耐药的新型抗真菌药物已成为目前的研究热点。

我国地广物博，拥有丰富的中草药资源，自古就有抗真菌的方剂，且近几十年对于抗真菌中草药的研究也在逐年增多，这揭示了本领域潜在的前景。

1 抗真菌中草药的一般情况近年来，我国对中草药抗真菌的研究越来越重视，相关的研究机构及发表的文献也越来越多。

所发表的文献以体外实验和临床观察居多，而动物实验和临床实验的研究较少。

香鳞毛蕨抑菌特性比较研究

ｅｅＭｅｉｉｅＰｈｒｃｕｉａｌｇ，Ｈａｂｎ１０４，Ｃｈｎ；３ｎｔｕｅｏｔｒｎｏｏｙｓｄｃｎａｍａｅｔｌＣｏｌｅｃｅｒｉ００５ｉａ．ＩｓｉｔｆＮａｕｅａｄＥｃｌｇｔ
１．香鳞毛蕨抑茵提取液制备及抑茵实验．２２
取制备好的香鳞毛蕨样品粉末１，加５％乙０ｇ０醇１０ｍ０Ｌ，６ ℃超声提取５ｍｉ，真空抽滤去沉淀Ｏｎ
后取待用。应用滤纸片扩散法，以蒸馏水和５％乙醇溶液０
ａｈｓｍｅｔｍｅ，ｔａｅａｅｄｉｍｅｅｒｆａｔｃｅｒｌ．６ｃ。ｔｔｌｈｏｏｌｉｏｌ１ｔｔｅａｉｈｅｖｒｇａｔｏｎｉｔｉ１９ｍｂａａｏａｐｌｒｇｕｅｎ１７．４％ｉＤ．ｎｃａｓｒｉｏａ，ｔｗａｓｉｇｕｓｅｅｒｔａｎｏｈａｄ，ａｄｉｗａｒｉｉａｒｒｖｄｔａｔｈｅｗａｒｓｉｈｚｍｉｓｄｉｔｎｉｈｄｂ￣ｅｈｔｅｒｐｓｎｔｓｐｅｌｎ！ｐｏｅｈｅｒｓｍｔｔｅｃｒｌｔｅｅｈｈａｔｉｔｓｏｔｉｒｂａｏｙｐｅｓａｄｓａｙｈｉ．ｈｏｒｅａｉｂｔｅｎｔｅｃａｒｃｅｒｉｆｏｎｗｓｃａｎｉｃｏｉｆＤｒｏｔｆｎｃｌａｒｍｉ
含间苯三酚类物质有关Ｉ。研究表明我国黑龙江、
而日益受到关注ｕ，现已证实其抑菌特性与其所

香鳞毛蕨的功效与作用

香鳞毛蕨的功效与作用香鳞毛蕨（拉丁学名：Dryopterisfragrans），鳞毛蕨科鳞毛蕨属植物，高约20-30厘米。

根状茎直立或斜升，顶端连同叶柄基部密被红棕色、膜质、卵圆形或卵圆披针形，先端短渐尖，边缘疏具锯齿的鳞片。

叶簇生，叶柄通常长仅1－2厘米，生于石缝中的植株，长可达12厘米。

植株高约20-30厘米。

根状茎直立或斜升，顶端连同叶柄基部密被红棕色、膜质、卵圆形或卵圆披针形，先端短渐尖，边缘疏具锯齿的鳞片。

叶簇生，叶柄通常长仅1－2厘米，生于石缝中的植株，长可达12厘米，禾秆色，有沟槽，密被红棕色，长圆披针形，边缘具锯齿的鳞片和金黄色腺体；叶片长圆披针形，长10-25厘米，中部宽约2-4厘米，先端短渐尖，向基部逐渐狭缩，最基部宽不足1厘米，二回羽状至三回羽裂；羽片约20对，斜展，彼此靠近，往往相接，披针形，钝尖至急尖头，中部羽片长约1．5-2厘米，基部宽约6-8厘米，下部数对狭缩呈耳状，羽状或羽状深裂；小羽片（裂片）矩圆形，边缘具锯齿或浅裂。

叶草质，干后上面褐色，下面棕色，两面光滑，沿叶轴与羽轴被亮棕色披针形鳞片和腺体，叶脉羽状，两面不显。

孢子囊群圆形，背生于小脉上；囊群盖膜质，圆形至圆肾形，边缘疏具锯齿，大，成熟后彼此靠近并往往伸出叶边之外，背面具腺体。

孢子椭圆形，周壁具瘤状突起，染色体n=41，二倍体。

香鳞毛蕨是落叶多年生草本,生于高寒地区的滑石坡、森林中的碎石坡上和火山周围的岩浆缝隙中。

主要分布于黑龙江省五大连池地质公园内、塔河县白卡兽山、呼中的大白山的高山地带及小兴安岭北部地区。

其中尤以生长于五大连池的香鳞毛蕨活性最强，这可能与五大连池地区独特的地理环境有关。

据北方民间验方记载,香鳞毛蕨能治疗各种皮肤病和关节炎,如牛皮癣、湿疹、顽癣、荨麻疹、皮疹、皮炎、脚气和干癣等。

尤其对牛皮癣和关节炎的治疗效果非常显著。

黑龙江省北部的居民把香鳞毛蕨视为“皮肤病的克星”,用香鳞毛蕨的水煎液涂擦患处以治疗上述疾病。

香鳞毛蕨的化学成分研究

香鳞毛蕨的化学成分研究王静;曾伟民;刘国庆;张彦龙【摘要】本文对香鳞毛蕨水提液进行大孔树脂柱色谱,用水、30％、60％、95％乙醇依次洗脱,从香鳞毛蕨30％乙醇组分中分离得到10个化合物,通过波普数据和理化性质分别鉴定为:5,7二羟基-2-羟甲基色原酮(1)、咖啡酸甲酯(2)、2S-圣草素-7-O-β-D-葡萄糖苷(3)、二氢松柏醇(4)、1,3-二羟基-5-丙基苯(5)、3β-羟基-5α,6α-环氧-7-大柱香波龙烯-9-酮(6)、2-羟基苯甲酸(7)、咖啡酸(8)、对羟基苯乙酮(9)、圣草素(10),以上化合物中4～10为首次从鳞毛蕨属植物中分离得到.【期刊名称】《天然产物研究与开发》【年(卷),期】2014(026)003【总页数】3页(P345-347)【关键词】香鳞毛蕨;化学成分;结构鉴定【作者】王静;曾伟民;刘国庆;张彦龙【作者单位】黑龙江大学生命科学学院,黑龙江大学分子生物学省高校重点实验室,哈尔滨150080;黑龙江大学生命科学学院,黑龙江大学分子生物学省高校重点实验室,哈尔滨150080;黑龙江大学生命科学学院,黑龙江大学分子生物学省高校重点实验室,哈尔滨150080;黑龙江大学生命科学学院,黑龙江大学分子生物学省高校重点实验室,哈尔滨150080【正文语种】中文【中图分类】R284.2香鳞毛蕨(Dryopteris fragrans(L．)schott)为多年生落叶草本，属于鳞毛蕨科鳞毛蕨属植物，生长于高寒地区的滑石坡、森林中的碎石坡和火山周围的岩浆缝隙中。

我国的东北、华北、俄罗斯、日本以及欧美均有分布。

另据五大连池地方志记载，达斡尔族居民在几百年前就已经使用香鳞毛蕨水煎液治疗多种疾病，尤其对皮肤病疗效独特。

经研究发现，香鳞毛蕨还具有抗菌、抗炎、抗肿瘤、抗氧化等多方面的药理作用［1］。

为了更深入的研究香鳞毛蕨的药理活性，本实验从香鳞毛蕨30%乙醇组分中分离鉴定了10个化合物，其中化合物4～10为首次从鳞毛蕨属植物中分离得到。

8种蕨类植物多糖提取物抑菌效果的研究

8种蕨类植物多糖提取物抑菌效果的研究
许柑叶;郑怡;陈晓清
【期刊名称】《福建师范大学学报：自然科学版》
【年(卷),期】2005(21)2
【摘要】从8种蕨类植物中提取多糖,采用苯酚硫酸法测定多糖的含量,并采用纸片扩散法研究多糖对8种细菌和真菌的抑制效果.结果表明,8种蕨类中多糖的含量差异较大,蕨类多糖的抑菌效果良好,浓度为500g/L时的抑菌圈直径在15～48mm 间,蕨类多糖的最小抑菌浓度在5～15g/L范围.
【总页数】4页(P99-102)
【关键词】蕨类;多糖;抑制效果;细菌;真菌
【作者】许柑叶;郑怡;陈晓清
【作者单位】福建师范大学生物工程学院
【正文语种】中文
【中图分类】Q945
【相关文献】
1.红薯茎叶多糖提取物抑菌活性的研究 [J], 张彧;高荫榆;张锡彬;聂艳玲;于旖斯
2.九种蕨类植物多糖提取物抗动植物病原菌活性 [J], 陈晓清;许柑叶
3.丁香提取物对枝孢霉菌的抑菌效果及抑菌机理 [J], 曾志红;陈玲苗;黄秋蓉
4.黄丝藻提取物及2种微藻多糖的抑菌活性分析 [J], 刘哲;张莉;李润植;崔红利
5.灰树花粗多糖提取物体外抑菌及抗氧化活性初步探究 [J], 薛小兰;范瑜珊
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3种药用蕨类植物水提取液抗菌性研究

3种药用蕨类植物水提取液抗菌性研究摘要:以内江市3种重要的野生药用蕨类植物凤尾蕨(Pteris multifida)、肾蕨(Nephriosorus auriculata)和贯众(Cyrtomium fortunei)的水提取液为试验材料,采用纸片扩散法测定其对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、枯草杆菌和浓杆菌的抑菌活性效果。

结果表明,不同部位对不同的菌种的抑菌效果不同,其中,对大肠杆菌的抑菌活性效果最强,对金黄色葡萄球菌的抑菌效果次之,对浓杆菌的抑菌效果最小。

关键词:药用蕨类;水提液;抑菌效果StduyontheInhibitoryEffectofWaterExtractsfromThreeSpeciesofMedicinalPterido phytesTAO Guang-song1CUI Sheng-bin 1JIANG Jian-hui 1ZHUO Zhi-yuan 1DENG Yang-yang 1ZHANG Xuan-bo 2 *(1Department of Biology,Neijiang Normal University,Neijiang Sichuan 641112;2 Key Laboratory of Colleges and Universities for Research and Utilization of Distinctive Agricultural Undertakings,Neijiang Normal Univercity)AbstractThe water extracts of Pteris multifida,Nephriosorus auriculata and Cyrtomium fortunei in Neijiang were used to study the inhibitory effect on Staphs lococcus,Escherichia coli,Bacillus subtilis and Pseudomonas aeruginosa.The results showed that the different part of medicinal pteridophytes had different inhibitory effect. The bacteriostatic activity of pteidophyte against Escherichia coli was the highest,Staphs lococcus was the second and Pseudomonas aeruginosa was the lowest.Key wordsmedicinal pteridophytes;water extract;inhibition effect蕨类植物也称羊齿植物,在植物分类学中被列为蕨类植物门。

香鳞毛蕨化学成分的研究的开题报告

香鳞毛蕨化学成分的研究的开题报告
题目：香鳞毛蕨化学成分的研究
一、选题的背景和意义
香鳞毛蕨是一种常见的草本植物，具有广泛的药用价值。

已有研究
表明，香鳞毛蕨具有清热解毒、祛风散寒、止痛等功效，被广泛用于治
疗风湿病、痛经、胃痛等疾病。

然而，目前对香鳞毛蕨的化学成分研究
还较为薄弱，因此有必要对其主要化学成分进行深入研究，以进一步挖
掘其药用价值，并为其合理利用提供科学依据。

二、研究的目的和方案
1. 目的
本研究旨在通过对香鳞毛蕨的化学成分进行分离、鉴定和定量分析，探索其化学成分及其与药效之间的关系，为其合理利用提供科学依据。

2. 方案
（1）样品采集与制备
在研究中选用野生香鳞毛蕨作为研究对象，进行药材鉴定和采集，
通过烘干和打粉的方式制备样品。

（2）化学成分分离与鉴定
首先以乙醇为溶剂进行提取，再应用薄层色谱、硅胶柱层析等方法
进行分离纯化，最终通过质谱、核磁共振等手段对分离出的化合物进行
结构鉴定。

（3）化学成分定量分析
分别采用高效液相色谱法、气相色谱法等方法对香鳞毛蕨的一些化
学成分进行定量分析。

三、研究的预期结果
通过本研究，可以初步确定香鳞毛蕨的主要化学成分，并探究其与药效的关系。

同时，对香鳞毛蕨的深入认识可以为其合理利用和开发提供科学依据和引导作用。

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香鳞毛蕨提取物对红色毛癣菌的抑制作用研究
目的研究香鳞毛蕨醇提取物对红色毛癣菌角鲨烯环氧化酶和β-（1，3）-D-葡聚糖合成酶的抑制作用，初步探讨其抗真菌作用机制。

方法采用ELISA测定角鲨烯环氧化酶活性，还原糖法测定β-（1，3）-D-葡聚糖合成酶活性。

结果香鳞毛蕨提取物不同浓度组均能降低红色毛癣菌角鲨烯环氧化酶的活性，差异有统计学意义（P＜0.05），随香鳞毛蕨提取物浓度增加，红色毛癣菌角鲨烯环氧化酶的活性逐渐降低，香鳞毛蕨提取物中浓度组和高浓度组能降低β-（1，3）-D-葡聚糖合成酶活性，差异有统计学意义（P=0.002，P=0.000）。

结论香鳞毛蕨提取物抗真菌作用机制可能和角鲨烯环氧化酶和β-（1，3）-D-葡聚糖合成酶活性受到抑制有关。

标签：香鳞毛蕨提取物；红色毛癣菌；角鲨烯环氧化酶；β-（1，3）-D-葡聚糖合成酶
红色毛癣菌T. rubrum 是临床常见的皮肤癣菌，也是浅部真菌病的主要病原菌，是一种在世界范围内广泛传播的病原真菌，它能引起各种浅表感染，如头癣、体癣、股癣、手癣、足癣以及甲癣。

红色毛癣菌是一种专性致病菌，一旦感染红色毛癣菌则很难根治，在停用抗真菌药物后会经常复发[1]。

香鳞毛蕨（Dryopteris fragrans L.）为鳞毛蕨科鳞毛蕨属植物，生长于海拔1000～1700m的山坡或岩石缝中，用于治疗真菌感染的手足癣、体股癣等，疗效甚佳，不易复发[2]。

为了探讨香鳞毛蕨提取物抗皮肤癣菌的作用机制，本实验研究了香鳞毛蕨提取物对红色毛癣菌角鲨烯环氧化酶活性和β-（1，3）-D-葡聚糖合成酶的影响，为研究香鳞毛蕨抗真菌作用原理提供实验依据。

1 材料
1.1药物供试药材本实验研究所用的香鳞毛蕨采集于黑龙江省，经鉴定为鳞毛蕨科鳞毛蕨属植物香鳞毛蕨，香鳞毛蕨提取物采用70% 醇提液，用二甲基亚砜（DMSO）配制成含生药浓度为625mg/ml的储存液，存于-70℃冰箱备用。

1.2菌株红色毛癣菌购自中国医学科学院皮肤病防治研究所菌种保藏中心。

1.3 主要试剂真菌角鲨烯环氧化酶酶联免疫分析试剂盒；真菌细胞β-（1，3）-D-葡聚糖合成酶活性定量检测试剂盒，美国GENMED SCIENTIFICS INC 产品。

1.4主要仪器生化培养箱（Forma 3111），美国赛默飞世尔科技产品；生物安全柜（Thermo Forma 1389），美国赛默飞世尔科技产品；高速低温离心机，德国Eppendorf公司产品；酶标仪（Bio-Rad X mark），美国Bio-Rad公司产品；荧光光度计（Thermo Scientific Lumina），美国赛默飞世尔科技产品。

2 方法
2.1实验分组分空白生长对照组和香鳞毛蕨提取物低、中、高浓度组（香鳞毛蕨70% 醇提液含生药浓度由低向高依次为62.5，125，250mg/ml）。

实验方法参照美国临床实验室标准化协会（CLSI）药物敏感性试验方案，将不同浓度的香鳞毛蕨提取物和红色毛癣菌在25℃孵育7d，然后收集培养物菌丝样品用于酶活性测定。

2.2 ELISA测定角鲨烯环氧化酶活性收集红色毛癣菌（空白对照组和香鳞毛蕨提取物低、中、高浓度组）培养液，1000 g离心10 min，分离红色毛癣菌培养物菌丝，用pH 7. 0的PBS缓冲溶液漂洗3次，1000 g离心10 min，上清弃掉。

每组称取培养物菌丝样品0.3g，加1 ml PBS缓冲溶液（pH 7. 0），超声破碎细胞，-20℃放置过夜，第2d反复冻融3次，然后5000g 离心5min，吸取上清，酶活性测定按照ELISA试剂盒说明书进行操作。

每组重复实验3次，计算其酶活性平均值。

2.3β-（1，3）-D-葡聚糖合成酶活性测定本实验采用还原糖测定法（分光光度法）进行β-（1，3）-D-葡聚糖合成酶活性测定。

收集5 ml真菌细胞培养液，裂解后按试剂盒说明说进行操作。

每组重复实验3次，计算其酶活性平均值。

2.4统计学分析采用SPSS17.0数据处理软件，不同浓度组对酶活性的影响采用单因素方差（ANOV A）分析，组间两两比较采用LSD-t检验。

3 结果
3.1不同浓度香鳞毛蕨提取物对红色毛癣菌角鲨烯环氧化酶活性的影响ANOV A分析，不同浓度组香鳞毛蕨提取物处理后红色毛癣菌角鲨烯环氧化酶活性差异有统计学意义（F=39.403，P=0.000），表1结果表明，香鳞毛蕨提取物不同浓度组均能降低红色毛癣菌角鲨烯环氧化酶的活性（差异有统计学意义，P＜0.05），不同浓度组香鳞毛蕨提取物对红色毛癣菌角鲨烯环氧化酶活性的影响两两比较差值均有统计学意义，且图1结果显示随香鳞毛蕨提取物浓度增加，红色毛癣菌角鲨烯环氧化酶的活性逐渐降低，香鳞毛蕨提取物高浓度组红色毛癣菌角鲨烯环氧化酶的活性最低。

3.2不同浓度香鳞毛蕨提取物对红色毛癣菌β-（1，3）-D-葡聚糖合成酶活性ANOV A分析，不同浓度组香鳞毛蕨提取物处理后红色毛癣菌β-（1，3）-D-葡聚糖合成酶活性差异有统计学意义（F=1
4.521，p=0.001），不同浓度组香鳞毛蕨提取物对红色毛癣菌β-（1，3）-D-葡聚糖合成酶活性的影响两两比较结果表明（表2），和对照组相比，香鳞毛蕨提取物低浓度组红色毛癣菌β-（1，3）-D-葡聚糖合成酶活性差异无统计学意义（P=0.200），中浓度组和高浓度组差异有统计学意义（P=0.002，P=0.000）。

4 讨论
香鳞毛蕨是一种重要的药用植物，有研究发现，香鳞毛蕨具有显著的抗皮肤癣菌作用，逐渐地被人们重视[2]，但其抗真菌作用机制目前还不太明确。

麦角甾醇是真菌细胞膜的重要结构成分，在确保膜结构的完整性、生物调节、细胞活力以及物质运输等方面起着重要作用[3]。

目前临床最常用的抗真菌药物主要有两性霉素B、氟康唑、酮康唑、伊曲康唑和特比萘芬，它们都是针对真菌细胞膜上的特有脂质麦角甾醇来发挥其抗真菌作用的[4]。

角鲨烯环氧化酶是真菌细胞膜麦角甾醇生物合成通路中的一个重要酶，它能使角鲨烯转变成羊毛甾醇。

角鲨烯环氧化酶如受到抑制，将导致真菌重要膜成分麦角甾醇生物合成受到抑制，真菌细胞发生损伤或死亡[5]。

本实验研究结果显示，香鳞毛蕨提取物不同浓度组均能降低红色毛癣菌角鲨烯环氧化酶的活性（差异有统计学意义，P＜0.05），随香鳞毛蕨提取物浓度增加，红色毛癣菌角鲨烯环氧化酶的活性逐渐降低，香鳞毛蕨提取物浓度高浓度组红色毛癣菌角鲨烯环氧化酶的活性最低。

提示香鳞毛蕨抗真菌机制可能是通过抑制角鲨烯环氧化酶的活性，从而影响真菌细胞膜重要成分麦角甾醇的生物合成有一定的关系。

葡聚糖是细胞壁的主要成分，占细胞干重的48% ～60%，β-（1，3）-D-葡聚糖合成酶活性如受到抑制，就可致真菌细胞壁结构破坏，细胞破裂死亡[6]。

本实验研究结果显示香鳞毛蕨提取物可能对β-（1，3）-D-葡聚糖合成酶活性有抑制作用，提示香鳞毛蕨提取物可能通过相应途径破坏真菌细胞壁起抗真菌作用。

综上所述，本实验通过研究香鳞毛蕨不同浓度的提取物对红色毛癣菌角鲨烯环氧化酶和β-（1，3）-D-葡聚糖合成酶活性的影响，结果提示香鳞毛蕨抗真菌机制可能是通过抑制角鲨烯环氧化酶和β-（1，3）-D-葡聚糖合成酶的活性，影响真菌细胞膜重要成分麦角甾醇的生物合成有一定的关系。

参考文献：
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