番茄花园-知识点

注意设备内部的凹处及露出的小配管等蒸 汽不能到达的部位。
▪ ⑶ 固体培养基灭菌
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▪ ⒉ 影响培养基灭菌的因素
▪ ⑴ 培分数(1％～2％)的NaCl溶液
▪ ⑵ pH值
▪ pH值6.0～8.0，微生物最耐热；pH<6.0，氢 离子易渗入微生物细胞内，从而改变细胞的 生理反应促使其死亡
▪ 消毒不一定能达到灭菌的要求，而灭菌则 可达到消毒的目的。
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▪ ⒈ 干热灭菌法
▪ 进行干热灭菌时，微生物细胞发生氧化， 微生物体内蛋白质变性和电解质浓缩引起 中毒等作用，其中氧化作用导致微生物死 亡是主要依据。由于微生物对干热的耐受 力比对湿热强得多，故干热灭菌所需的温 度要高，时间要长，一般160～170 ℃， 1～1.5 h。
达到0.044～0.049 MPa以上。培养基采用连
续灭菌时，需在培养基进入发酵罐前，直接
用蒸汽进行空罐灭菌（空消），用无菌空气
保压，待培养基流入罐后，开始冷却。灭菌
时对培养基的加热可采用各种加热器。培养
基的冷却方式有喷淋冷却式、真空冷却式、
薄板换热器式几种方式，其过程均包括加热、
维持和冷却。
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▪ ⒍ 过滤除菌法
▪ 利用过滤方法阻留微生物，也可达到除菌 的目的，这就是过滤除菌法。
▪ 此法仅适用于澄清液体和气体的除菌。工 业上常用过滤法大量制备无菌空气，供好 氧微生物培养过程使用。
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▪ 二、湿热灭菌的原理
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▪ 三、培养基的灭菌
▪ ⒈ 培养基湿热灭菌方法
▪ ⑴ 连续灭菌 连续灭菌也叫连消，其温度 一般以126～132 ℃为宜，总蒸汽压力要求
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▪ ⑶ 75％酒精溶液 75％酒精溶液的杀菌作用 在于使细胞脱水，引起蛋白质凝固变性。对 营养细胞、病毒、霉菌孢子均有杀死作用， 但对细菌的芽孢杀死作用较差。常用于皮肤 和器具表面杀菌。
▪ ⑷ 新洁尔灭 新洁尔灭是表面活性剂类洁净 消毒剂。它在水溶液中以阳离子形式与菌体 表面结合，引起菌体外膜损伤和蛋白变性。 10 min能杀死营养细胞，但对细菌芽孢几乎
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▪ ⑴ 高锰酸钾 高锰酸钾溶液的灭菌作用是 使蛋白质、氨基酸氧化，使微生物死亡， 一般用0.1％～0.25％的溶液。
▪ ⑵ 漂白粉 漂白粉的化学名称是次氯酸盐 (次氯酸钠，NaOCl)，它是强氧化剂，也是 廉价易得的灭菌剂。它的杀菌作用是次氯 酸钠分解为次亚氯酸，后者不稳定，在水 溶液中分解为新生态氧和氯，使细菌受强 烈氧化作用而导致死亡，对杀死细菌和噬 菌体均有效。
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▪ ⒋ 湿热灭菌法
▪ 利用饱和蒸汽进行灭菌的方法称为湿热灭菌 法。其原理是借助于蒸汽释放的热能使微生
物细胞中的蛋白质、酶和核酸分子内部的化
学键，特别是氢键受到破坏，引起不可逆的
变性，使微生物死亡。由于蒸汽有很强的穿
透能力，湿热灭菌对耐热芽孢杆菌来说，温
度升高10 ℃时，灭菌速度常数可增加8～10
▪ ⑶ 培养基中的颗粒
▪ ⑷ 泡沫 泡沫中的空气形成隔热层，使传
热困难，热难穿透过去杀灭微生物
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▪ ⒊ 分批灭菌和连续灭菌比较 ▪ 连续灭菌与分批灭菌比较的优点： ▪ ① 可采用高温短时灭菌，培养基受热时间
短，营养成分破坏少，有利于提高发酵产 率；
▪ ② 发酵罐利用率高； ▪ ③ 蒸汽负荷均衡； ▪ ④ 采用板式换热器时，可节约大量能量； ▪ ⑤ 适宜采用自动控制，劳动强度小。
▪ 实际应用时，对一些要求保持干燥的实验 器具和材料可以采用干热灭菌法。
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▪ ⒉ 火焰灭菌法
▪ 利用火焰直接杀死微生物的灭菌法称为火焰 灭菌法。该法方法简单，灭菌彻底，但使用 范围有限，仅适用于接种针、玻璃棒、三角 瓶口等的灭菌。
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▪ ⒊ 电磁波、射线灭菌法
▪ 以紫外线最常用。紫外线对芽孢和营养细 胞都能起作用，但细菌芽孢和霉菌孢子对 紫外线的抵抗力强。紫外线的穿透力低， 仅适用于表面灭菌和无菌室、培养间等空 间的灭菌，且距照射物不超过1.2 m；对固 体物料灭菌不彻底，也不能用于液体物料 的灭菌。
没有杀灭作用。一般用于器具和生产环境的 消毒，不能与合成洗涤剂合用，不能接触铝 制品。
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▪ ⑸ 甲醛 甲醛(HCHO)是强还原剂，它能与 蛋白质的氨基结合，使蛋白质变性，对氨 基和蛋白质的变性有较强活性，这是用甲 醛作为灭菌剂的根据。使用时可以以2份37 ％甲醛溶液与1份KMnO4混合，或者将37％甲 醛溶液直接加热，产生气态甲醛用于灭菌。 甲醛灭菌的缺点是穿透力差。
▪ ⑹ 过氧乙酸 过氧乙酸是强氧化剂，它是 广谱、高效、速效的化学杀菌剂，对营养 细胞、细菌芽孢、真菌孢子和病毒都有杀 灭作用。
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▪ ⑺ 戊二醛 在酸性条件下，不具有杀死芽 孢的能力，只有在碱性条件下，才具有杀 死芽孢的能力，常用2％的溶液，常用于器 具、仪器和工具等灭菌。
▪ ⑻ 酚类 苯酚毒性较大，易污染环境，且 水溶性差，使应用受到限制，而酚类衍生 物的使用，扩大了作为消毒剂的使用范围。
倍，对营养细胞更高。蒸汽来源方便，价格
低廉，灭菌效果可靠，是目前最为常用的灭
菌方法。一般的湿热灭菌条件为121 ℃，30
min。
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▪ ⒌ 化学药剂灭菌法
▪ 某些化学药剂能与微生物发生反应而具有 杀菌的作用。
▪ 化学药剂适于生产车间环境的灭菌，接种 操作前小型器具的灭菌等。
▪ 化学药品的灭菌使用方法，根据灭菌对象 的不同有浸泡、添加、擦拭、喷洒、气态 熏蒸等。
微生物与发酵工艺
知识点2.2
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知识点2.2 第一节 灭 菌 第二节 空气的净化
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第一节 灭 菌
▪ 一、灭菌的方法
▪ 灭菌指利用物理和化学的方法杀灭或除去 物料及设备中一切生命物质的过程。
▪ 消毒是指用物理或化学的方法杀死物料、 容器、器具内外的病源微生物，一般只能 杀死营养细胞而不能杀死芽孢。
培养基配料 配料罐 加热器 维持罐 冷却器 无菌培养基
连续灭菌流程
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▪ ⑵ 间歇灭菌
▪ 间歇灭菌即实消，是在每批培养基全部流 入发酵罐后，就在罐内通入蒸汽加热至灭 菌温度，维持一定时间，再冷却到接种温
度。实罐灭菌时，发酵罐与培养基一起灭 菌。
▪ 其他灭菌设备一般采用蒸汽灭菌，如设备 十分耐压，则可采用较高的温度，但必须