小鼠睾丸细胞染色体标本的制备及观察
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小鼠染色体实验报告实验目的:本实验旨在通过染色体观察和分析小鼠基因组的结构和功能,以进一步了解小鼠的遗传特征。
实验材料:1. 小鼠样本(小鼠尸体或小鼠细胞)2. 血细胞裂解液3. 显微镜4. 醋酸酒精定影液实验步骤:1. 取得小鼠样本并进行准备。
尸体样本直接取用,细胞样本需要分离提取。
2. 将小鼠样本悬浮于血细胞裂解液中,进行细胞裂解。
3. 用匀浆棒轻轻研磨,使细胞完全裂解。
4. 将细胞溶液滴于清洁平凹玻片上,并用平玻片将其铺平。
5. 将玻片加热至70℃,使细胞DNA捕获在玻片上。
6. 用醋酸酒精定影液浸泡玻片,使细胞核卷曲收缩。
7. 用显微镜观察染色体的形态和数量。
8. 根据染色体的形态、长度和着色特点进行鉴定和分析。
实验结果与讨论:通过对小鼠样本的染色体观察,我们发现小鼠染色体具有一定的结构和着色特征。
根据染色体的长度和形状,我们可以初步判断出小鼠的染色体是否正常。
特定的染色体畸变或缺失可能表明小鼠有某些遗传疾病或突变。
在本实验中,我们可以观察到小鼠的染色体数量一般为40个。
这与小鼠常见的染色体数目相符,进一步证实了样本的正常性。
我们还可以观察到染色体的长度不一致,这是由于染色体上的基因片段的数量和排列不同所致。
通过进一步的染色体分析,我们可以了解小鼠的遗传特征,如基因突变、遗传疾病等。
这对于进一步研究小鼠的遗传学、发育生物学以及相关疾病模型的建立具有重要意义。
结论:通过对小鼠染色体的观察和分析,我们可以初步了解小鼠的遗传特征。
染色体的形态和数量可以为我们提供重要的基因信息,有助于后续的研究和分析。
本实验为进一步研究小鼠的遗传学提供了基础数据。
姓名:XX 系年级:20XX级齐鲁医学班学号:20130023XXXX科目: 细胞生物学实验实验题目:动物染色体标本的制备与观察染色体标本的制备及组型观察【实验目的】1.掌握染色体标本制作的基本方法;2.认识不同生物的染色体的状态,学会做染色体组型图。
【制作染色体标本的意义】了解染色体的特征(形态、大小、数目)——绘制染色体组型图【染色体组型图的应用】①生物学方面:根据染色体特征鉴别生物及种类:兔44条;小鼠40条;大鼠42条;鸡78条;猫38条;狗78条;人46条;马64条②临床医学方面:主要用于遗传性疾病的诊断和研究:21三体综合症:是21对常染色体多一条,此种人“先天愚型”,或称“伸舌样白痴”卵巢退化症:45 XO,外貌表现为女性,卵巢发育不全或无,1.5米以下,不能生育。
睾丸退化症:47 XXY ,外貌为男性,比一般男性高,睾丸发育不全,有女性样乳房,智力低下或超常,不能生育,发声尖高。
因此,染色组型实验广泛应用于胎儿遗传性疾病早期诊断中(抽羊水做组型)【染色体标本制作的原理】选择活跃的组织:胸腺,骨髓,睾丸,小肠施加药物使细胞分裂:PHA设法得到大量的分裂中期细胞:秋水仙素1.PHA:促进细胞分裂,使淋巴细胞返幼,变成淋巴母细胞。
2.秋水仙素:破坏微管装配,使纺锤体不能形成,使大量细胞停在分裂中期。
3.空气干燥:使细胞与染色体展开。
4.低渗作用:水进入细胞内,细胞内容空间变大,染色体间的距离变大,易于染色体分散开。
5.固定:用Camoy’s solution,作用使蛋白变性,对染色体内的组蛋白讲,变形后硬度增加,保持了染色体的“即时形态”对细胞膜蛋白讲,变性使细胞膜硬度增强,形成屏障作用,防止了细胞内物质外溢和丢失。
姓名:XX 系年级:20XX级齐鲁医学班学号:20130023XXXX科目: 细胞生物学实验实验题目:动物染色体标本的制备与观察【实验用品】1.实验器材:显微镜、载玻片、盖玻片、镊子、手术剪、解剖盘、胶头滴管、离心管、离心机、小烧杯、冰箱、酒精灯、小烧杯2.实验药品:蒸馏水、0.9% NaCl溶液、0.3% KCl溶液,固定液(甲醇:冰醋酸=3:1)、秋水仙素3.实验材料:小鼠【实验步骤】1.取雄性小鼠,以每克体重4微克注射秋水仙素(约1mL),14-16h后,用断头法处死小鼠,取出睾丸用生理盐水(0.9% NaCl溶液)洗去血污,置于解剖盘中。
Isolation and staining of mouse meiotic metaphasechromosomes小鼠睾丸生殖细胞标本制作及减数分裂期染色体观察xx 2011级生科四班201100140120 同组者:xx【实验目的】1、learn to isolate mouse testes cells and stain with Giemsa.学会分离小鼠睾丸细胞并用Giemsa染液染色2、Observe the number and morphology of mouse chromosomes观察小鼠染色体的数目及形态特征【实验材料】【Reagents】秋水仙素colchicine solution吉姆萨染液Giemsa stains solution生理盐水physiological saline氯化钾溶液KCl solution固定液fixation solution【Tools and equipments】Dissecting tray,beaker,centrifuge tube,microscope,glass slide,pipette,scissors,forceps,copper mesh.解剖盘,烧杯,离心管,显微镜,载玻片,吸管,剪刀,镊子,铜网【实验原理】meiosis is a process of reductional division in which the number ofchromosomes per cell is cut in half. In animals, meiosis always results in the formation of gametes, while in other organisms it can give rise to spores. 减数分裂是细胞分裂染色体数减半的过程,在动物中,减数分裂的结果总是在形成配子,而在其他生物可以产生孢子。
简述小鼠染色体制备的流程小鼠染色体制备。
选只小鼠,得挑健康的,不能是病怏怏的那种。
然后,得给它打麻药,让它舒舒服服地睡一觉。
这样咱们就能轻松取得细胞了。
取细胞这活儿,得迅速。
从骨髓或者脾脏里取,这得看实验需求。
取出来后,咱们得让细胞在低渗环境里待会儿,这样染色体就能胀大,看得更清楚。
然后,用固定液固定一下,这样细胞形态就稳定了。
接下来,就是染色和观察了。
用专门的染料给染色体上色,让它们变得五彩斑斓的。
然后,在显微镜下瞅瞅,看看这些染色体长啥样,数数有多少个。
这可得细心点,不能漏看了。
说起来,小鼠染色体制备这事儿,看着简单,其实挺考验技术的。
得选对小鼠,还得会取细胞、染色、观察。
不过,只要技术到位,就能得到清晰的染色体,为后面的研究打好基础。
小鼠细胞分裂标本的制备与观察一、实验目的a)掌握小鼠精巢染色体标本制作法。
b)观察减数分裂过程中不同时期的染色体。
c)观察腹水瘤细胞有丝分裂中不同时期的染色体形态。
二、实验原理a)减数分裂(Meiosis)是发生于生殖细胞的一种特殊的细胞分裂方式,DNA复制一次,而细胞连续分裂两次,形成单倍体的精子和卵子。
减数分裂远比有丝分裂复杂,经两次细胞分裂,分别称减数分裂Ⅰ、减数分裂Ⅱ,两次分裂间又一个较短的间期,这个间期DNA不复制。
b)雄性动物精子发生于睾丸曲精细管的生精上皮细胞,由其中的精原细胞经多次有丝分裂和生长,形成初级精母细胞,初级精母细胞经减数分裂形成次级精母细胞,次级精母细胞有丝分裂成精细胞,再经一系列变化成精子。
c)因此,通过分离曲细精管、剪碎并加入液体吹打,可使官腔各种细胞游离出来,然后经过低渗、固定、染色等过程就可制成包含减数分裂各期的标本。
三、实验试剂及仪器a)材料:成年雄性小白鼠b)用品:注射器、平皿、尖头镊子、剪刀(普通剪刀、眼科小剪刀)、吸管、离心管、离心机、玻片等。
c)试剂:1、100μg/ml秋水仙素。
2 、2%柠檬酸钠溶液3、 0.075M的KCI4、3:1甲醇:冰醋酸及1:1甲醇:冰醋酸(应现配)5、PH6.8,0.01M的PBS缓冲液6、Gimesa原液7、Gimesa工作液:1份Gimesa原液加9份PH6.8,0.01M的PBS缓冲液,混匀。
工作液应现用现稀释。
四、实验步骤a)细胞收集i.小鼠精巢细胞收集1.注射秋水仙素,增加中期分裂相。
(试验前4-5小时,小鼠腹腔注射秋水仙素0.5ml(100μg/ml)。
2.取睾丸并清洗。
断颈处死小鼠,剖开腹部,取出肾形睾丸,放入盛有4-5 ml2%柠檬酸钠溶液的平皿中,洗去污血,去掉胞外脂肪等物。
3.挑出曲细精管并剪碎。
弃污液,另加柠檬酸钠溶液1 ml,用尖头镊尖将曲细精管拉出,并用眼科剪尽量将其剪碎。
4.游离并收集细胞。
姓名系年级组别同组者科目细胞生物学实验题目小鼠睾丸细胞染色体标本的制备及观察学号小鼠睾丸细胞染色体标本的制备及观察一.实验目的1.了解快速制备动物染色体标本的方法,掌握小鼠睾丸细胞染色体标本的制备方法。
2.观察小鼠睾丸染色体的数目及其形态特征。
3.掌握小鼠睾丸染色体标本制备基本过程,了解操作步骤的原理。
二.实验原理(一)染色体染色体是基因的载体。
真核细胞染色体的数目和结构是重要的遗传指标之一。
制备染色体标本无疑是细胞学最基本的技术之一,优良的染色体制片是进行染色体显带、组型分析、原位杂交等的先决条件。
染色体的制备在原则上可以从所有发生有丝分裂的组织和细胞悬浮液中得到。
最常用的途径是从骨髓细胞、血淋巴细胞和组织培养的细胞中制备染色体。
本实验采用的方法是从小鼠的睾丸细胞中获取。
染色体的形态结构在细胞增殖周期中是不断地运动变化的,一般在有丝分裂中期,染色体的形态最典型、最易辨认和区分。
因此,制备染色体标本获取的是中期细胞。
染色体特征:1.数目(2n=?)2.长度(绝对长度、相对长度)3.着丝粒位置(M/SM/ST/T)4.随体与次溢痕的数目、大小和位置5.带型分析(二)操作方法小型动物的染色体制片最好最有效的材料就是骨髓组织(由于分裂活动旺盛,睾丸也可以)。
利用睾丸细胞的制片技术虽然需要离心以及细致的操作,但其基本程序是简便的。
在小鼠睾丸中,细胞有丝分裂和减数分裂比较旺盛,因此不需要体外培养就可以直接得到分裂中期细胞。
通过小鼠睾丸得到染色体比较简便,一般不需要无菌操作。
用秋水仙素作为有丝分裂的抑制剂。
由于小鼠睾丸细胞分裂活动旺盛,具有高度的分裂能力,本实验采用这一材料,通过前处理、低渗、固定、制片、染色等步骤制得染色体标本,可观察到许多处于分裂中期的染色体,可以进行染色体组型分析。
减数分裂是细胞分裂染色体数目减半时发生在性细胞的形成过程中。
哺乳动物在性成熟以后,精巢内的性细胞总是在分批分期不断的成熟,因此,对哺乳动物的精巢进行一定的技术处理,随时都可以获得减数分裂过程中各个时期染色体的标本。
染⾊体核型分析姓名程开源系年级2010级临床医学⼋年制同组者孙琳、孙晶鑫、窦云德科⽬分⼦细胞⽣物学题⽬染⾊体核型分析学号201000232012【实验⽬的】1.了解⼩⽩⿏睾丸细胞染⾊体的形态及数⽬。
2.初步掌握⼩⽩⿏睾丸细胞染⾊体的玻⽚标本制作⽅法。
3.观察动物细胞染⾊体的数⽬和形态。
【实验原理】染⾊体的制备在原则上可以从所有发⽣有丝分裂的组织和细胞悬浮液中得到。
最常⽤的途径是从⾻髓细胞、⾎淋巴细胞和组织培养的细胞中制备染⾊体。
⼩型动物的染⾊体制⽚最好最有效的材料就是⾻髓组织。
⾻髓细胞中,有丝分裂指数相当⾼,因此可以直接得到中期细胞⽽不必象淋巴细胞或其它组织那样要经过体外培养;对⼤型动物通常采⽤对⾻骼、脊或胸⾻穿刺术吸取红⾻髓,⼩型动物多采⽤剥离术取股⾻以获得⾻髓细胞。
制作染⾊体标本的先决条件1. 细胞具有旺盛的分裂能⼒选择活跃的组织:胸腺,⾻髓,睾丸,⼩肠施加药物使细胞分裂:PHA2. 设法得到⼤量的中期细胞:秋⽔仙素(1) PHA:粗细胞分裂,使淋巴细胞返幼,变为淋巴母细胞(2) 秋⽔仙素:破坏微管装配,使纺锤体不能形成,使⼤量细胞停⽌在分裂中期。
(3) 低渗作⽤:⽔进⼊细胞内,细胞内容空间变⼤,染⾊体间的距离拉⼤,易于染⾊体展开(4) 空⽓⼲燥:使细胞和染⾊体展开(5) 固定:⽤甲醇:冰醋酸=3:1作⽤使蛋⽩质变性,对染⾊体内的组蛋⽩讲,变性后硬度增加,保持了染⾊体的“及时形态”,对细胞膜蛋⽩讲,变性使细胞膜硬度增强,形成屏障作⽤,防⽌了细胞内物质外溢和丢失。
对于⼩⿏精巢染⾊体标本的制作,⼀般包括以下⼏个要点: 1. ⽤⼀定剂量的秋⽔仙素破坏纺锤丝的形成,使细胞分裂停滞在中期, 使中期染⾊体停留在⾚道⾯处; 2. ⽤低渗法使将细胞膨胀, 以⾄于在滴⽚时细胞被胀破, 使细胞的染⾊体铺展到载玻⽚上; 3.空⽓⼲燥法可使使细胞的染⾊体在载⽚上展平, 经Giemsa染⾊后便可观察到染⾊体的显微图象。
课程教学C ur r i cul um T e ac hi ng 爝煎逦尉动物遗传学教学实验‘q、鼠睾丸细胞减数分裂染色体标本制作,方法改进的研究张燕军赖双英苏蕊张文广(内蒙古农业大学动物科学学院内蒙古呼和浩特010018)摘要“减数分裂期染色体制备实置F’是动物遗传学实验课程重要内容。
本文介绍了小鼠睾丸细胞减数分裂染色体标本制作的改进方法,通过本方法可制备和观察到大量分散良好、背景清晰、染色体结构紧凑的睾丸细胞减数分裂各期分裂相,得到较好的实验效果。
关键词动物遗传学睾丸细胞减数分裂染色体改进中图分类号:G424文献标识码:AA ni m al G enet i cs T eachi ng Exper i m ent’’M ous e Tes t i s M ei ot i cC hr om os om e Speci m en’’M et hods I m pr ovem entZ H A N G Y anj un,L灿Shuangyi ng,SU R ui,Z H A N G W enguang(C ol l ege of A ni m al Sci e nce,I n ner M ongol i a A gr i cul t ur al U ni ve r s i t y,H ohhot,I nne r M ongol i a010018)A bs t r ac t’’P r epa ra t i on of m ei ot i c cl l r om os om es e xper i m e nt”i s al l i m port a nt pa r t of ani m al ge net i c s experi m ent cour se.Thi sar t i cl e des cr i bes t he m ous e t est i s m ei ot i c chr om os om e s peci m en of t he i m pr o ved m et hod,can be prepar ed by t hi s m e t hod and obs erved a l ar ge num be r of w el l—di sper s ed,cl ea r backgr ound,com pact t es t i cul ar m ei ot i c cl l r om os om e st r uct ur e of e ach phas e of t he di vi s i on,ge t be t t e r ex per i m ent al r es ult s.K ey w or ds ani m al gen et i cs;t est i cul a r cel l s;m ei osi s;cl l r om os om e;i m pr ovem ent遗传学既是一门历史悠久的学科,又是一门发展迅速、实践性很强的学科,研究范围正在不断拓宽和深化,新技术、新方法不断涌现。
姓名系年级组别同组者
科目细胞生物学实验题目小鼠睾丸细胞染色体标本的制备及观察学号
小鼠睾丸细胞染色体标本的制备及观察
一.实验目的
1.了解快速制备动物染色体标本的方法,掌握小鼠睾丸细胞染色体标本的制备方法。
2.观察小鼠睾丸染色体的数目及其形态特征。
3.掌握小鼠睾丸染色体标本制备基本过程,了解操作步骤的原理。
二.实验原理
(一)染色体
染色体是基因的载体。
真核细胞染色体的数目和结构是重要的遗传指标之一。
制备染色体标本无疑是细胞学最基本的技术之一,优良的染色体制片是进行染色体显带、组型分析、原位杂交等的先决条件。
染色体的制备在原则上可以从所有发生有丝分裂的组织和细胞悬浮液中得到。
最常用的途径是从骨髓细胞、血淋巴细胞和组织培养的细胞中制备染色体。
本实验采用的方法是从小鼠的睾丸细胞中获取。
染色体的形态结构在细胞增殖周期中是不断地运动变化的,一般在有丝分裂中期,染色体的形态最典型、最易辨认和区分。
因此,制备染色体标本获取的是中期细胞。
染色体特征:
1.数目(2n=?)
2.长度(绝对长度、相对长度)
3.着丝粒位置(M/SM/ST/T)
4.随体与次溢痕的数目、大小和位置
5.带型分析
(二)操作方法
小型动物的染色体制片最好最有效的材料就是骨髓组织(由于分裂活动旺盛,睾丸也可以)。
利用睾丸细胞的制片技术虽然需要离心以及细致的操作,但其基本程序是简便的。
在小鼠睾丸中,细胞有丝分裂和减数分裂比较旺盛,因此不需要体外培养就可以直接得到分裂中期细胞。
通过小鼠睾丸得到染色体比较简便,一般不需要无菌操作。
用秋水仙素作为有丝分裂的抑制剂。
由于小鼠睾丸细胞分裂活动旺盛,具有高度的分裂能力,本实验采用这一材料,通过前处理、低渗、固定、制片、染色等步骤制得染色体标本,可观察到许多处于分裂中期的染色体,可以进行染色体组型分析。
减数分裂是细胞分裂染色体数目减半时发生在性细胞的形成过程中。
哺乳动物在性成熟以后,精巢内的性细胞总是在分批分期不断的成熟,因此,对哺乳动物的精巢进行一定的技术处理,随时都可以获得减数分裂过程中各个时期染色体的标本。
用适量的秋水仙素溶液注入动物腹腔内,可以阻止分裂细胞纺锤丝的形成,
姓名系年级组别同组者
科目细胞生物学实验题目小鼠睾丸细胞染色体标本的制备及观察学号
从而积累大量处于分裂中期的细胞。
利用上述原理,通过常规的制片方法,观察小鼠睾丸细胞的染色体。
(三)Giemsa染色法
MGG由May-Grunwald染料和Giemsa染料组成。
前者化学名为曙红亚甲基蓝Ⅱ,对胞质着色较好;后者对胞核着色较好。
因此MGG染色,可兼两者的优点,常用于细胞涂片染色。
染色结果:染色将细胞核染成紫红色,细胞质和核仁染成蓝紫色。
其优点:染色方法简单,且兼有瑞氏、姬氏两种染色的优点,并且涂片可保存十多年而不退色。
MGG染色对胞质胞核染色效果均较好,结构清晰,所染细胞亦比HE染色的细胞大;同时对细菌、霉菌及胆固醇结晶的显示也很清楚。
因此适用于淋巴造血系统的细胞标本、胸腹水、穿刺标本等。
尤其对鉴别恶性淋巴瘤的类型,MGG染色更有帮助。
三.实验材料
1.材料
小白鼠。
2.试剂
秋水仙素、0.3% KCl、固定液(甲醇:冰醋酸=3:1)、0.9%的NaCl 、Giemsa 染液等。
3.器材
注射器、针头、解剖盘、解剖剪、镊子、玻璃吸管、10ml刻度的离心管、离心机、载玻片(冰片)、显微镜、铜网、擦镜纸、小烧杯、吸水纸、天平等。
四.实验步骤
实验步骤:预处理→取睾丸→剪碎→离心→低渗→离心→固定→离心→固定→滴片→染色→观察
1.取雄性小鼠以每克体重4μg注射秋水仙素,经14~16小时后,断头法杀死小鼠,取出睾丸用生理盐水(0.9%的NaCl)洗去血污。
2.放入装有1ml 0.3%KCl液的小烧杯中剪碎(呈乳白色)。
3.用铜网过滤到刻度离心管中,再加0.3%KCl液至4ml。
4.37℃静置30min,进行低渗处理。
5.离心:800-1000r/min 离心8 min ,弃上清。
6.加入2ml甲醇冰醋酸固定液(3:1),并用吸管吹气,轻轻打散细胞,固定8min。
7.再以800-1000r/min离心8 min。
8.弃去上清液,加1ml固定液,制成细胞悬液固定5min。
9.取洁净的低温预冷载片,距载片10~15cm高度滴下2~3滴细胞悬液,从载片一边向另一边轻轻吹气,并同时轻轻敲打载片,以使细胞均匀分布和促使染色体展开。
10.用滤纸擦去载片上多余液体,在背面做上标记,空气干燥。
11.用 Giemsa染色20-30min(采用倒置染色法,目的在于可使载玻片充分接触
姓名系年级组别同组者
科目细胞生物学实验题目小鼠睾丸细胞染色体标本的制备及观察学号
染液,若有杂质也可沉降至底部,不会和玻片直接接触),细水冲洗玻片背面,去多余染液,气干。
11.镜检:低倍镜下寻找分散良好、染色适中的分裂相,高倍镜下观察染色体形态并计数。
五.实验结果
1.实验结果如下图所示
图1 小鼠睾丸细胞中期染色体观察图(10×40)
图2 小鼠睾丸细胞中期染色体观察图放大图(10×40)
由图2,能看到清晰的分裂中期的染色体,清楚地看到着丝点。
可以大致数出染色体的数目为32条。
视野中还有许多细胞的染色体没有完全展开,或者没有破裂,可能原因有:滴片时的高度过低,导致细胞没有破裂,或者是低渗处理没处理好,染色体没充分展开。
六.思考与讨论
1.注意事项
⑴用一定剂量的秋水仙素破坏纺锤丝的形成,使细胞分裂停滞在中期,使中期染色体停留在赤道面处。
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科目细胞生物学实验题目小鼠睾丸细胞染色体标本的制备及观察学号
⑵用低渗法使将细胞膨胀,以至于在滴片时细胞被胀破,使细胞的染色体铺展到载玻片上,低渗与离心等步骤的操作要轻。
⑶空气干燥法可使使细胞的染色体在载片上展平, 经Giemsa染色后便可观察到染色体的显微图象。
⑷细胞完整,轮廓清晰,染色体分布在同一水平面上。
⑸染色体形态和分布良好,最好无重叠,即使有个别重叠,也要能明确辩认,以免差错。
⑹所观察的细胞处于同一有丝分裂阶段(分裂中期),即染色体螺旋化程度或染色体长短大致一样,在所观察的细胞周围,没有离散的单个或多个染色体存在,以免影响观察和计数。
⑺固定液和Giemsa染液须现配现用。
⑻低渗时间应掌握准确。
⑼低渗后的细胞吹打时动作要轻,离心速度不能高于1000 r/min。
2.实验结果分析
本实验可能至少有以下几点导致实验失败或影响实验观察:
⑴取睾丸时用生理盐水冲洗睾丸时未冲洗干净,导致血污仍然存在,影响实验结果观察。
⑵剪碎时组织块仍比较大,分离出的单个细胞仍较少。
⑶低渗时因时间过长或试剂浓度过低导致细胞吸水涨破。
⑷离心时因时间过长或转速过快导致细胞破裂,或因时间不够、转速过低而未达到预期目的。
⑸固定时加液的量不合适或时间过长。
⑹滴片时未将细胞震碎,吹气和敲打时未使细胞均匀散开,影响实验观察。
⑺染色不充分或不均匀。
3.实验小结
通过本次实验,进一步练习掌握了处死小鼠及小鼠内脏器官的观察。
同时,通过小鼠睾丸细胞染色体标本的制作及观察,认识了小鼠睾丸细胞染色体的基本特征。
虽然观察染色体时间较长,但是通过耐心的观察,找到了比较理想的分裂中期染色体。
本次实验,锻炼了我们的动手操作能力以及科学严谨耐心的实验精神,收获很大。