灭菌操作规程
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. 灭菌操作规程
一、微生物检验器皿的包扎
1、目的
杀菌前的准备工作
2、所用器具
(1)、棉花
(2)、橡胶塞
(3)、牛皮纸或报纸
(4)、棉绳
3、操作方法
(1)、试管：塞上棉塞，然后用牛皮纸或报纸把试管头包扎起来。做乳糖胆盐培养基时，将试管头塞上专用塑料塞放入铁丝框。
(2)、吸移液管：将吸移液管一头塞上棉塞，然后单支或几只用纸包起来，或用盒装。
(3)、三角瓶、抽滤瓶：将三角瓶〔抽滤瓶〕口用棉塞塞好，或塞上橡胶塞，然后用牛皮纸把塞头部包起来。
(4)、玻璃洗瓶：将玻璃洗瓶瓶口用棉塞或橡胶塞塞好，用牛皮纸把塞头部包起来。
(5)、磁性漏斗：用牛皮纸或报纸将磁性漏斗整个包扎起来。
(6)、平皿：10 个为一组，用牛皮纸包裹或盒装。
二、高压蒸汽灭菌
1、适用范围 .实用文档.
. 本法适用耐湿热器具的灭菌如：
(1)、易分解的、耐热性的培养基
(2)、耐热性好的玻璃器皿
(3)、橡胶
(4)、耐热性塑料
2、原理
利用1.5kgf/cm2，121℃的饱和蒸汽，灭菌20分钟。
4、仪器和设备
高压灭菌锅
5、操作方法
(1)、包装
a.装入培养基的〔箱〕瓶用螺旋盖盖上，容器用棉塞塞住，再用牛皮纸包扎。螺旋盖应微松。
b.在瓶中的培养液不要超过1L，否那么灭菌不彻底。
c.容器的上部应留有足够的空间，以便产生气泡。
d.器具用牛皮纸包裹，放入灭菌袋中。
e.器具的组合和包裹应允许灭菌蒸汽接触所用物品。
f.各类器具装入釜内时，相互间要留有空隙以使蒸汽自由流动。
(2)、高压杀菌
a.在灭菌器内参加适量的水〔不得低于釜底指示横片，露出加热盘管〕，放入需灭菌物品，盖上内盖，拧紧外盖上的螺栓。拧紧时要注意对称的进行，否那么容易造成漏气。 .实用文档.
. b.开始加热前，将排气阀翻开。
c.待温度上升至100 oC 时〔即当所有的冷空气已排出时〕，关闭放汽阀门，使压力上升至1.05kgf/cm2〔15 磅/英吋2〕，在此压力下维持20 分钟。
注意：加热时间不要过长，但也不要低于指定的20分钟。
(3)、断开电源。
(4)、排气阀关闭的状态下，让釜内压力自然下降。
(5)、翻开高压杀菌锅。注意必须使灭菌釜内无压力为宜。
(6)、灭菌后的物品冷却至室温，取出。
(7)、翻开出水阀门，放尽釜内剩水。
6、考前须知
高压灭菌器上的平安阀，是保障平安使用的重要机构，不得随意调节。
三、干热灭菌
1、目的
保持在枯燥状态下的玻璃器皿和金属的灭菌。
2、适用范围
本法适用以下的物品：
(1)、枯燥的玻璃器皿〔吸管、平皿等〕
(2)、金属器具〔镊子等〕
(3)、粉状物品
(4)、瓷器
3、原理 .实用文档.
. 在160oC干热空气中灭菌2小时。
4、仪器和设备
电热枯燥箱
5、操作方法
(1)、器具用牛皮纸或灭菌袋包〔装〕扎，放入金属容器内。
(2)、器具在枯燥箱加热前放入，每个器具之间留有足够的空隙，使热空气能畅通。
(3)、关闭箱门接通电源，翻开通气孔，使箱内湿空气能逸出，至箱内温度到达100℃时关闭。
(4)、加热至160℃，保持2小时。
(5)、切断电源，冷却至60 ℃ 时，翻开箱门，取出灭菌器具，并翻开箱顶通气口。
6、考前须知
(1)、灭菌时必须注意温度不能超过180 ℃，以免使棉花、报纸烘焦。
(2)、灭菌时不得翻开箱门。
(3)、枯燥箱未冷却时，不要取出里面器具，防止内外温差过大造成玻璃器具爆炸。
四、紫外线灭菌
1、目的
无菌室内的台面和空气的灭菌。
2、原理
紫外灯发出的紫外线波长为200—300nm 之间，具有杀菌能力。波长.实用文档.
. 为265—266nm时，杀菌力最强。由于紫外线的作用光谱和核酸的吸收光谱相一致，作为遗传物质的DNA 能强烈的吸收紫外线，从而诱导形成胸腺嘧啶二聚体，抑制DNA的复制，到达菌体致死的目的。
3、操作方法
(1)、开紫外灯前，可以在室内喷洒酚溶液。一方面使空气中附着有微生物的尘埃降落，另一方面可以杀死一局部细菌和芽孢。
(2)、开紫外灯前，室内桌面、椅子等可用消毒液擦洗，以加强紫外灯的灭菌效果。
(3)、开紫外灯照射20—50 分钟后，关掉紫外灯。
(4)、30 分钟后进无菌室进行操作。
