液滴逆流色谱

高速逆流色谱原理(HSCCC：High Speed Counter-Current Chromatography)液相色谱系统构成高速逆流色谱系统构成TBE300A＋ÄKTA Prime逆流色谱原理萃取：利用物质在两种互不相溶（或微溶）的溶剂中溶解度或分配系数的不同，使物质从一种溶剂内转移到另外一种溶剂中。

逆流色谱原理液－液分配色谱：利用样品中各组分在两相溶剂间分配比的差异，进行分离。

它是不用固态载体的全液态的液-液分配色谱技术.优点：不存在样品的不可逆吸附，理论回收率为100％极大地避免了样品的变性问题操作简单，无需太多样品前处理等。

HSES 流体静力平衡体系在充满下（上）相的螺旋管内慢慢注入上（下）相，最终会形成整个管柱里上下两相交替分段分布的状态。

无论哪一相作为流动相，都能建立起流体静力平衡状态。

如果流动相与管壁亲和性强，它会均衡沿管壁流过形成连续流，如果亲和性较弱，会形成小滴穿过固定相。

液滴逆流色谱(DCCC)旋转腔室逆流色谱(RLCCC)离心分配逆流色谱仪(CPC)利用离心力产生的恒定立场讲固定相保留在又管道连接的一系列腔体中。

优点：噪声小、平衡性好，多数溶剂系统都可在该仪器使用，流动相流速为数毫升每分钟。

由于死体积存在，两相溶剂难以充分混合，与同体积的流体动力学的逆流色谱仪相比分离效率差。

这类一起都是采用旋转密封接头，不可避免产生溶剂渗漏问题。

HDES流体动力平衡体系螺旋管力能保留住任一相充当的固定相，并能形成在数量上超过螺旋单元数的分配单元。

在螺旋管的各个部位，由大量小滴构成了两相间广阔的界面，这些小滴在支撑相里剧烈而稳定的震荡，减小了质点传递阻力，避免了使样品区带展宽的层流的产生。

螺旋管里不存在完全由流动相占据的无效空间，无论以哪一相做流动相，在整个螺旋管的有效空间里总是有一相会形成剧烈而稳定震动小滴，靠这样的运动和分布能开发出有效的逆流色谱仪。

两相不相溶的溶剂在一根绕自身轴旋转的螺旋管内，其中一相的小液滴会向首端迁移，另一相向尾端迁移。

化学分离中的逆流色谱法原理化学分离是化学分析、工业生产等领域中的一个重要过程，其中，色谱法作为一种常用的分离技术，其原理和应用也备受关注。

在色谱法中，逆流色谱法作为一种高效、准确的分离技术备受推崇。

本文将详细讲解逆流色谱法的原理和应用。

一、逆流色谱法的概念逆流色谱法是一种速度较快、分离效果良好的体积计数法，适用于分离中小分子有机化合物和离子。

其原理是将流动相（溶液）通过逆流器后，在固定相（色谱柱）与流动相的作用下，溶液中的样品分子与固定相发生相互作用，使样品分子在色谱柱中发生分离，最后从出口处依次流出。

二、逆流色谱法的基本原理逆流色谱法的基本原理可以分为三大部分：逆流器、色谱柱、检测器。

（一）逆流器逆流器主要是利用多级电离器、离子对撞机等离子体设备对样品分子进行离子化，然后通过溶液进行循环，并利用固体捕获物质将其在离子源中分离，从而实现样品分子的准确分离。

它的主要作用是将样品分子与溶液分离，达到分离提纯的效果。

（二）色谱柱色谱柱是逆流色谱法中最为重要的一部分，其主要作用是分离各种组分及其含量。

其分离过程主要是通过化学亲和力异常及矩阵材料的物理吸附、化学反应来实现的。

从而实现最终样品的分离。

色谱柱的种类很多，不同的柱子有着不同的分离效率和特点。

（三）检测器检测器通常是用来对色谱柱中的有机物和离子物质进行检测，常用的方法有滴定法、荧光法、紫外-可见吸收法、电导率法、荧光差动压力法等。

其中，紫外-可见吸收法检测结果较为准确，受到广泛应用。

三、逆流色谱法的应用（一）分离样品逆流色谱法可以分离出样品中的不同组分，达到分离提纯的目的。

比如，如果在样品中含有多种不同的氨基酸或者蛋白质等杂质，逆流色谱法可以将其分离出来，提炼出目标化合物。

（二）制备纯度高的化合物逆流色谱法不仅能够分离出类似结构的分子，而且还可以提高目标化合物的纯度，降低不纯物质的含量。

因此，其在制备优质、纯度高的化合物上得到广泛应用。

（三）药物分析逆流色谱法在药物分析方面得到了广泛应用。

逆流色谱原理简介任何熟悉液液萃取（使用分液漏斗）和色谱（例如HPLC）技术的人都很容易理解逆流色谱液液萃取的原理(countercurrentchromatography(CCC))。

液液萃取为化学家们分离大量的化学物质提供了一个简单的方法，而且使用的溶剂最少。

把样品溶在两相溶剂系统中，振摇使两相充分混合，静置后，两相重新分层。

这些步骤是分离样品组分的关键。

这种经典的液液萃取在色谱工作者看来，最大的缺点是它在分离过程中只有一个理论塔板数。

（事实上，这种情况下没什么理论可言。

这一个分离塔板数是源自于工业上的分馏。

因此，化学工作者要么设计一合适的单步分离方法去适应自己的需要，要么就用多次液液萃取去提高分离度。

通常使用前者，因为后者太麻烦了。

（尽管多次液液萃取经常用到，但溶剂系统在不同的提取中通常要改变，以便提高效率。

）为了改善分液漏斗，以经过许多的尝试。

克雷格逆流分布仪是其中一个最引人注意的突破。

这套精妙的仪器，把一系列的分液漏斗有效的排成链，重复的进行系列的步骤：振摇（混合）、静置、分离，再重头开始，这样就提高了塔板数。

假如有足够的塔板数，那这套仪器可以达到色谱级的分离。

液滴逆流色谱（DCCC）在发展过程中又开发出了液滴逆流色谱（DropletCounterCurrentChromatograph）。

这个仪器把一系列垂直的管子用毛细管连接起来。

液体固定相留有直管中，把流动相慢慢的泵进去，（如果流动相比较重就从上方泵进去；反之，则从下方）。

象所有的色谱那样，组分比较容易溶于流动相中的就移动的快；而比较容易溶于固定相中就滞后了。

于是就分离开来了。

很显然，每一个直管只有最小可能的理论塔板数。

所以，要有显著的效能就要用大量这样的直管。

其分离步骤如下：把样品液滴与流动相混合，通过不移动的固定相，期间没有发生振摇。

液滴的大小与其他溶剂系统的参数限制了溶质在两质中的分配。

静置最终在直管末端形成，在这儿，流过固定相的流动相在通过毛细管进入下一根直管前先聚集起来。

一、实验目的1. 熟悉逆流色谱的基本原理和操作方法；2. 学会利用逆流色谱技术对混合物进行分离纯化；3. 了解逆流色谱在中药成分分离中的应用。

二、实验原理逆流色谱是一种液-液分配色谱技术，利用液体固定相和流动相之间的分配系数差异，实现混合物中各组分的有效分离。

实验中，将待分离的混合物加入固定相中，通过改变流动相的组成，使各组分在两相之间发生逆流分配，从而实现分离。

三、实验材料1. 仪器：逆流色谱仪、色谱柱、离心机、微量注射器、容量瓶、移液管等；2. 试剂：固定相、流动相、待分离混合物等；3. 药品：中药样品、分析纯试剂等。

四、实验步骤1. 调节逆流色谱仪，将色谱柱固定在离心机上进行操作；2. 准备固定相和流动相，根据实验要求配制不同浓度的流动相；3. 将待分离混合物加入固定相中，调整固定相的体积，使其充满色谱柱；4. 开启离心机，使色谱柱产生离心力，使固定相和流动相分离；5. 根据实验要求，逐渐改变流动相的组成，使各组分在两相之间发生逆流分配；6. 收集各组分，进行检测和分析。

五、实验结果与分析1. 实验过程中，观察色谱柱中固定相和流动相的分离情况，记录各组分分离时间；2. 根据分离时间，分析各组分在两相之间的分配系数差异，判断分离效果；3. 对分离得到的各组分进行检测和分析，确定其纯度和含量。

六、实验讨论1. 逆流色谱操作过程中，固定相和流动相的选择对分离效果有很大影响。

实验中，应根据待分离混合物的性质和实验要求，选择合适的固定相和流动相；2. 实验过程中，离心机的转速和温度对分离效果也有一定影响。

应根据实验要求调整离心机参数，以获得最佳分离效果；3. 逆流色谱在中药成分分离中具有广泛的应用前景。

实验结果表明，逆流色谱可以有效地对中药样品中的活性成分进行分离纯化，为中药现代化研究提供有力支持。

七、实验总结本次实验成功地将逆流色谱技术应用于混合物的分离纯化，掌握了逆流色谱的基本原理和操作方法。

实验结果表明，逆流色谱在中药成分分离中具有广泛的应用前景，为中药现代化研究提供了有力支持。