14种柑橘皮中多甲氧基黄酮成分分析

14 种柑橘皮中多甲氧基黄酮成分分析许引1,2，吕小健1,2，李明1,*，龙涛2，徐兰英2，李士明2,*（1.武汉纺织大学化学与化工学院，湖北武汉 430200；2.黄冈师范学院化学化工学院，催化材料制备及应用湖北省重点实验室，湖北黄冈 438000）摘 要：建立柑橘皮中9 种多甲氧基黄酮（polymethoxyflavonoids，PMFs）快速定量检测方法，比较不同品种来源柑橘皮中PMFs的含量差异，为寻找高含量PMFs高生物活性柑橘皮的药食两用素材提供参考。

采用超声乙醇提取、高效液相色谱方法快速准确检测PMFs，并对14 种柑橘皮、陈皮中9 种特征物质PMFs含量进行比较。

结果显示9 种PMFs在对照品溶液质量浓度范围内具有良好的线性关系，且准确度和精确度良好。

分析发现，不同品种来源柑橘皮中PMFs种类和含量差异很大。

江西陈皮、重庆柑橘、广西皇帝柑、广西砂糖橘果皮中PMFs总含量很高，均在7 495.19 μg/g以上，其中广西沙糖橘果皮PMFs总含量高达10 412.18 μg/g。

该方法简便，稳定性好，可为柑橘皮中PMFs生物活性研究的深入、柑橘皮产品开发和中药原料选材及其质量控制提供科学依据。

关键词：柑橘皮；多甲氧基黄酮；陈皮；高效液相色谱Analysis of Polymethoxyflavones in Citrus Peels of Different VarietiesXU Yin1,2, LÜ Xiaojian1,2, LI Ming1,*, LONG Tao2, XU Lanying2, LI Shiming2,*(1. College of Chemical and Chemical Engineering, Wuhan Textile University, Wuhan 430200, China; 2. Hubei Key Laboratory for Processing and Application of Catalytic Materials, College of Chemical and Chemical Engineering,Huanggang Normal University, Huanggang 438000, China)Abstract: This study aimed to develop a rapid method for the quantification of nine polymethoxyflavones (PMFs) in the peels of fourteen citrus varieties. The citrus peel samples were compared for their PMFs contents in order to provide useful data for discovering PMFs-rich citrus peels with potent bioactivity for both medicinal and culinary purposes. Citrus peel extracts were prepared by ultrasonic-assisted extraction using ethanol as a solvent. A rapid and accurate high performance liquid chromatography (HPLC) method was used to measure the content of PMFs in citrus peels. The method showed good linearity repeatability and precision. The types and quantities of PMFs greatly varied with citrus variety. Pericarpium Citri Reticulatae from Citrus reticulata Kinokuni and the dried peels of Chongqing tangerine, Guangxi Emperor tangerine and Shatangju mandarin contained high contents of PMFs (more than 7 495.19 μg/g). Notably, total PMFs of Shatangju mandarin peel was as high as 10 412.18 μg/g. The HPLC method is simple and reliable and can provide a useful approach for study of PMFs in citrus peels.Keywords: citrus peels; polymethoxyflavones; Pericarpium Citri Reticulatae; high performance liquid chromatographyDOI:10.7506/spkx1002-6630-20181006-026中图分类号：TS207.3 文献标志码：A 文章编号：1002-6630（2019）08-0136-05引文格式：许引, 吕小健, 李明, 等. 14 种柑橘皮中多甲氧基黄酮成分分析[J]. 食品科学, 2019, 40(8): 136-140. DOI:10.7506/ spkx1002-6630-20181006-026. XU Yin, LÜ Xiaojian, LI Ming, et al. Analysis of polymethoxyflavones in citrus peels of different varieties[J]. Food Science, 2019, 40(8): 136-140. (in Chinese with English abstract) DOI:10.7506/spkx1002-6630-20181006-026. 收稿日期：2018-10-06基金项目：国家自然科学基金面上项目（31571832）第一作者简介：许引（1992—）（ORCID: 0000-0003-2881-0091），女，硕士，研究方向为天然产物化学和功能食品。

E-mail: 769663416@*通信作者简介：李明（1980—）（ORCID: 0000-0003-2476-7727），男，副教授，博士，研究方向为资源材料与循环利用。

E-mail: lim@李士明（1963—）（ORCID: 0000-0002-6167-0660），男，教授，博士，研究方向为功能食品。

E-mail: shiming@柑橘属植物的果皮具有很高的药用价值。

例如，陈皮为芸香科柑橘属植物橘（Citrus reticulata Blanco ）的干燥成熟果皮，可药食两用。

传统医学认为，陈皮性温味苦辛，可归为脾肺两经，具有疏肝理气功效。

陈皮及其他柑橘皮的特征成分为黄酮类化合物：多羟基黄酮化 合物[1-2]、多甲氧基黄酮以及羟基多甲氧基黄酮[3-7]，例如川陈皮素可以抑制NF-κB ，降低Cox-2和iNOS 等炎症介质的产生[8-9]；可抑制清道夫受体表达，抑制血脂对靶细胞的攻击[10-11]；橘皮黄酮可以有效抑制血小板聚集，防止心血管栓塞发生等[12]；川陈皮素和陈皮素能够调节脂肪细胞因子的分泌和脂肪细胞的增大[13]；橘皮黄酮可直接对抗肥胖，降低实验动物甘油三酯和胆固醇的水平[14]。

近期研究表明，橘皮中橘皮素、川陈皮素和3,5,6,7,8,3’,4’-七甲氧基黄酮等多甲氧基黄酮，以及5-去甲基川陈皮素等羟基多甲氧基黄酮是柑橘属植物果实皮的特有成分[3]。

研究发现，陈皮的药效及重要生物活性大多与其含有的黄酮，特别是与多甲氧基黄酮相关[15-16]。

同样，柑橘果皮中多甲氧基黄酮的种类和含量受柑橘种类和多种生长环境因素的影响。

柑橘果皮来源选材不同，其中多甲氧基黄酮种类和含量也会不同，进而影响橘皮的药效[17]。

因此，分析不同品种、不同产地柑橘果皮中多甲氧基黄酮含量，对于橘皮的选材及多甲氧基黄酮的质量控制具有重要意义。

目前，国内外对柑橘果皮尤其是陈皮的研究逐渐增多，但研究多集中于其中一个或几个常见品种[18]，鲜少有对不同品种的柑橘果皮、陈皮中的多甲氧基黄酮成分进行综合考察分析。

文献多报道橘皮总黄酮含量的测定，方法主要有分光光度法[19-20]、二氯氧锆比色法[21]、薄层色谱法[22-23]，以及运用高效液相色谱（high performance liquid chromatography ，HPLC ）、液相色谱-质谱联用技术测定橘皮中常见的多甲氧基黄酮，如川陈皮素、橘皮素和3,5,6,7,8,3’,4’-七甲氧基黄酮含量的测定方法也有报道[24-27]，但是3,5,6,7,3’,4’-六甲氧基黄酮、 5,6,7,4’-四甲氧基黄酮和5-去甲基橘皮素相关定量分析的报道很少。

本实验建立同时测定橘皮中9 种多甲氧基黄酮（结构式见图1）含量的方法，以期为多甲氧基黄酮柑橘皮原材料选材、质量合理控制提供重要参考。

1 材料与方法1.1 材料与试剂1.1.1标准品9 种多甲氧基黄酮标准品，包括5,6,7,4’-四甲氧基黄酮、甜橙黄酮、橘皮素、3,5,6,7,3’,4’-六甲氧基黄酮、川陈皮素、3,5,6,7,8,3’,4’-七甲氧基黄酮、5-去甲基橘皮素、5-去甲氧基川陈皮素、5-羟基-3,6,7,8,3’,4’-六甲氧基黄酮，为实验室自制，纯度均大于98.5%。

1.1.2柑橘皮及陈皮新鲜柑橘共11 种，包括2 种橙类（安远脐橙、赣南脐橙）；3 种柑类（重庆柑橘、蒲江丑橘、广西皇帝柑）；5 种橘类（蒲江美人橘、广西沙糖橘、台州蜜橘、宜昌蜜橘、黄冈本地橘）；金钱橘，购买于京东生鲜水OOOOMeOMeOMeOMe OMe OMeOMe OMeOMeOMe OMe OMeOMeOMeOMeOMeOMeOMeOMeOMeOMeOMeMeO MeOMeO MeO MeO MeO MeO MeO MeOMeOMeOMeOMeOMeOO OOMeOMeO OMe OOMeOMeOMe OMeO MeOOMe O OMeOMeOO5. 3,5,6,7,8,3’,4’-г⭢≗ 哴䞞3. 䱸Ⳟ㍐6.₈Ⳟ㍐2. 3,5,6,7,3’,4’- ⭢≗ 哴䞞1. ⭌₉哴䞞4. 5,6,7,4’- ⭢≗ 哴䞞O7. 5- ⭢ 䱸Ⳟ㍐O8. 5-㗏 -3,6,7,8,3’,4’- ⭢≗ 哴䞞OOHO9. 5- ⭢ ₈Ⳟ㍐Me.甲基。