1 目的规范ABO及Rh（D）血型鉴定流程图2 范围ABO血型的正反定型及Rh（D）血型鉴定。3 职责3.1 责任人实验室当班工作人员。3.2 完成时间当班工作时间。4 工作流程抗A 抗B 血型Ac Bc 血型Rh(D) Rh血型+ - A - + A + Rh阳性- + B + - B - Rh阴性- - O + + O + + AB - - AB 注：1、“+”表示凝集，“-”表示不凝集。2、患者Rh(D)阴性时，不可能输入Rh(D)阳性血。3、玻片镜检难以确定真、假凝集时，加一滴生理盐水涂抹均匀后散开为正定型反定型正定型1 取试管2，标明Ac、Bc。2. 每管加入病人血清2滴。1.取试管1支。2.加5%病人人红细胞悬液1滴1.取试管2支、标明抗A、抗B。2.每管加入5%病人红细胞悬液2滴。假凝集；或者37℃加温蔬秒散开为冷凝集。4、对于正反鉴定不符，洗涤红细胞重做，若确实难解决同志血库人员。
ABO及RhD血型鉴定试验标准操作规程
(一)检验目的
检测红细胞表面ABO血型抗原、RhD抗原及血清(或血浆)中抗A、抗B抗体，确定受检者ABO及RhD血型。
(二)检验原理
1.手工试管法、玻片法或纸板法 利用标准IgM抗A／B血清鉴定红细胞表面ABO抗原即正定型，利用已知ABO血型反定型红细胞鉴定同一标本血清(或血浆)中的抗A／B抗体即反定型，综合正反定型结果确定受检标本ABO血型；利用标准IgM抗D直接鉴定RhD血型。
2.微柱凝胶法 ABO／RhD卡的微管中装填有葡聚糖凝胶颗粒和抗A、抗B、抗D标准血清，如果红细胞表面存在A或B或D抗原，就会与对应的抗体发生凝集反应，凝胶颗粒具有分子筛的作用，可以阻滞凝集的红细胞在离心力的作用下通过凝胶颗粒，使其悬浮在凝胶颗粒中，未凝集的红细胞则可以通过凝胶颗粒到达微管底部。
3.玻璃珠微柱法 ABO／RhD卡的微管中装填有玻璃微珠和抗A、抗B、抗D标准血清，如果红细胞表面存在A或B或D抗原，就会与对应的抗体发生凝集反应，玻璃微珠具有分子筛的作用，可以阻滞凝集的红细胞在离心力的作用下通过玻璃微珠，使其悬浮在玻璃微珠层的上端，未凝集的红细胞则可以通过玻璃微珠之间的微小空隙到达微管底部。 (三)适用范围
适用于手工、半自动、全自动ABO血型及RhD血型鉴定试验。
(四)设备性能参数
各种血型检测系统性能指标参见相应血型检测系统说明书。
(五)器材与试剂
1.器材WADiana全自动血型配血系统、SWING-SAXO血型配血系统、Techno全自动血型配血系统、Othro AutoVue
Innova全自动血型配血系统、B600-A型低速离心机、KA-2200血清学专用离心机、阅片灯箱、塑料软试管、塑料硬质试管(100mm×12mm和75mm×l2mm)、血型鉴定专用纸板、玻片、试管架、一次性塑料滴管、记号笔。
1 目的
规范ABO及Rh（D）血型鉴定流程图
2 范围
ABO血型的正反定型及Rh（D）血型鉴定。
3 职责
3.1 责任人 实验室当班工作人员。
3.2 完成时间 当班工作时间。
4 工作流程
抗A 抗B 血型 Ac Bc 血型 Rh(D) Rh血型
+ - A - + A + Rh阳性
- + B + - B - Rh阴性
- - O + + O
+ + AB - - AB
注：1、“+”表示凝集，“-”表示不凝集。
2、患者Rh(D)阴性时，不可能输入Rh(D)阳性血。
3、玻片镜检难以确定真、假凝集时，加一滴生理盐水涂抹均匀后散开为正定型 反定型 正定型
1 取试管2，标明Ac、Bc。
2. 每管加入病人血清2滴。 1. 取试管1支。
2. 加5%病人人红细胞悬液1滴 1. 取试管2支、标明抗A、抗B。
2. 每管加入5%病人红细胞假凝集；或者37℃加温蔬秒散开为冷凝集。
4、对于正反鉴定不符，洗涤红细胞重做，若确实难解决同志血库人员。
ABO和Rh （D) 血型鉴定操作规程(盐水法）
一．目的
规范ABO/Rh （D) 血型鉴定的操作流程；保证临床用血的安全性及有效性。
二．职责
血库技术人员负责ABO和Rh （D） 血型鉴定。
三．适用范围
适用于血库ABO和Rh(D）血型鉴定血标本。
四．所需材料和设备
1。材料
抗—A、抗-B、抗-D试剂、A、B、O型反定型试剂红细胞、生理盐水、小试管、滴管、患者血标本。
2.设备
普通离心机、显微镜、血型血清学专用离心机.
五．操作步骤
1。将标本2000r/分钟离心2分钟，使标本血浆/血清与红细胞分离，并吸取红细胞配制3%悬液.
2。取小试管3支,分别标明—A、抗-B、抗—D，用滴管分别加抗-A、抗—B、抗-D试剂各2滴于试管底部，再以滴管分别加入受检者3%红细胞悬液1滴，混匀。
3.另取小试管3支,分别标明A、B、O细胞，用滴管分别加入受检者血清2滴于试管底部，再分别以滴管加入3% A、B、O型试剂红细
胞悬液1滴,混匀.
4.以1000r/分钟离心1分钟。
5。将试管轻轻摇动，使沉于管底的红细胞浮起，先以肉眼观察有无凝集（或溶血）现象，如肉眼不见凝集，应将反应物倒在玻片上，再以显微镜检查。
6。 ABO血型结果判定（见下表）：
ABO血型结果判断
分型试剂+受检者红细胞（正定型)
受检者血清+试剂红细胞(反定型）
抗—A 抗—B A细胞 B细胞 O细胞 血型
＋ － － ＋ — Ａ
－ ＋ ＋ － — Ｂ
－ － ＋ ＋ — Ｏ
＋ ＋ － － — AB
注：“＋” 凝集；“－” 不凝集
7. Rh（D)血型判定： 红细胞与抗-D试剂凝集为Rh (D) 阳性
无凝集为Rh阴性。
8.凝集强度判断标准:
4+ 红细胞凝集成一大块,背景清晰透明;
3+ 红细胞凝集成数小块，背景尚清晰；
ABO、RH血型检测（试管法）标准操作规程
【操作人员】经批准人授权的同志
【部门主管】
【质量控制员】
【目的】
保证测试结果的准确性。
【适用仪器范围】
双目显微镜、普通离心机。
【该SOP变动程序】
该标准操作程序的更改，可由任一使用本程序的操作人员提出并报请专业主管及科主任签字后生效。
【应用范围】
ABO、RH血型检测的手工操作。
【标本采集和处理】
由临床科室采用真空负压EDTA K2抗凝管采集3ml-5ml，作好标记，立即送检。检验人员认真核对患者姓名、性别、床号、检验目的以及标本是否与申请单一致。确认无误后用专用记号笔在试管与申请单上编写对应数字序号，并按日期索引进行登记。将标本置于台式离心机内，放置保证平衡，以1500转/min离心10分钟。保证血浆于血球有效分离。溶血标本应重采取、乳糜血及标本量不足应加以登记，溶血性疾病应注明。
【检查项目】
一、ABO血型
（一）原理
根据红细胞上有或无A抗原或（和）B抗原，将血型分为A型、B型、AB型和O型四种。可利用红细胞凝集试验，通过正、反定型准确鉴定ABO血型。所谓正定型，是用已知抗-A和抗-B 分型血清来测定红细胞上有无相应的A抗原或（和）B抗原；所谓反定型，是用已知A红细胞B 红细胞来测定血清中有无相应的抗-A 或（和）抗-B。
（二）试剂和材料
1．抗-A（B 型血）、抗-B（A 型血）。
2．5％A 、B 试剂红细胞盐水悬液。
3．受检者血浆。
4．受检者5％红细胞悬液。
试剂可在室温2～8℃下避光保存至有效期。 （三）操作步骤
1．试管法
(1)正向定型
a．取试管2支，分别标上A、B字样。
b．向A管滴加抗A分型试剂1滴，向B管滴加抗B分型试剂1滴。
c．向A、B管各滴加5％的待检红细胞悬液各1滴。
d．混匀（天冷时试管架置370C水浴箱15分钟）后配平衡，在离心机内1000转/min离心1分钟。将试管轻轻摇动，使沉于管底的红细胞浮起，先以肉眼观察有无凝集（溶血）现象，如肉眼不见凝集，应将反应物倒在玻片上，再以低倍镜检查。
