taq dna聚合酶名词解释

GoTaq® DNA 聚合酶类产品能够增强聚合酶链式反应(PCR)性能。GoTaq®

DNA 聚合酶是一种有专利配方的Taq DNA 聚合酶，性能强劲，扩增效果至少等同于或优于普通Taq DNA 聚合酶。GoTaq® DNA 聚合酶类产品有多种配方，可提供最大限度的灵活性、可控性以及方便性。

GoTaq® Flexi DNA Polymerase(GoTaq® Flexi DNA 聚合酶)可对PCR 反应中的酶和镁离子的浓度进行优化。所提供的5X 绿色及无色Flexi 反应缓冲液中不包含镁离子。MgCl2 (25mM) 单独提供，可实现对反应条件的最大程度的控制。MgCl2 也可单独提供。

GoTaq® DNA Polymerase(GoTaq® DNA 聚合酶)的反应缓冲液含有镁离子，改进了扩增反应。GoTaq® DNA 聚合酶附带的5XGoTaq® 绿色及无色反应缓冲液中含有浓度为7.5mM

的MgCl2，在1X 反应中的最终浓度为1.5mM

GoTaq®酶附带的5X Green Reaction Buffer(5X 绿色反应缓冲液)及5X Colorless

Reaction Buffer(5X 无色反应缓冲液)可帮助实现直接从热循环仪进入凝胶分析。这些缓冲液含有能够增加样品密度的化合物，使得样品能够很容易沉入琼脂糖凝胶的上样孔内。绿色的缓冲液还含有两种染料( 黄色和蓝色)，在电泳时分散开，便于电泳过程的监控。在1% 的琼脂糖凝胶中，蓝色染料与3–5kb DNA 片段的迁移速度相同。黄色染料比引物迁移得快。

特点：

• 提高性能：这种新的缓冲液及酶的配方使得PCR 反应的性能得以改善。通过使用GoTaq® Flexi 反应缓冲液，也可以摸索反应中的最佳Mg2+ 浓度。

• 提高生产效率：直接从PCR 反应进入凝胶分析。绿色GoTaq®反应缓冲液既是反应缓冲液，又是凝胶加样溶液。

• 不需要改变循环条件：：可将GoTaq®酶( 不论是无色的，还是绿色的) 直接应用于您现有的PCR 反应，不需要改变原来的循环参数。

taq酶 测序 原理

Taq酶测序是一种基于DNA聚合酶的测序方法。Taq酶是一种热稳定的DNA聚合酶，能够耐受高温条件下的DNA扩增反应。Taq酶测序的原理基于DNA链延伸和截断反应。

在Taq酶测序中，首先需要将待测DNA片段进行扩增，通常使用聚合酶链反应（PCR）方法。PCR使用一对引物（primers）在模板DNA的两侧进行扩增。引物在反应体系中的高温下与目标DNA片段特异性结合，并由Taq酶催化下的DNA聚合酶链扩增。

在扩增反应中，加入一种特殊的二进制链终止核苷酸（ddNTPs），它们是缺少3'羟基的核苷酸。由于缺少3'羟基，当ddNTPs被加入新合成的DNA链上时，DNA聚合酶无法再在其上继续延伸，导致链的突然终止。

经过多轮PCR反应，会产生一系列不同长度的DNA片段，每个片段以ddNTPs停止的位置为终点。这些DNA片段随后可以通过凝胶电泳进行分离，然后通过染料标记或放射性测定等方法进行检测。

通过对不同长度的DNA片段的测定，可以推断出原始DNA片段的序列。由于每个ddNTPs只能终止于特定的碱基，因此可以通过测定每条DNA片段上的终止核苷酸来确定原始序列。

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基因工程名词解释

1、基因工程：

对不同的遗传物质在体外进行剪切、组合和拼接，使遗传物质重新组合，然后通过载体转入微生物、植物和动物细胞内，进行无性繁殖，并使所需的基因在细胞中表达，产生人类所需的产物或新生物类型。

2、重组DNA技术：

是指将一种生物体（供体）的基因与载体在体外进行拼接重组，然后再转入另一个生物体（受体）内，按照人们的意愿稳定遗传并表达新产物或新性状的DNA体外操作程序，也称为分子克隆技术。

3、基因xx：

经无性繁殖获得基因许多相同拷贝的过程。通常是将单个基因导入宿主细胞中复制而成。（包括把来自不同生物的基因同有自主复制能力的载体DNA在体外人工连接，构建成新的重组的DNA，然后送入受体生物中去表达。从而产生遗传物质和状态的转移和重新组合。）

4、限制性内切核酸酶：

一类能够识别双链DNA分子中的某种特定核苷酸序列，并由此切割DNA双链结构的核酸水解酶。

5、修饰酶：

体内有些酶可在其他酶的作用下，将酶的结构进行共价修饰，使该酶活性发生改变，这种调节称为共价修饰调节(covalentmodificationregulation)，这类酶称为修饰酶(prosessing enzyme)。

6、同裂酶：

识别相同序列的限制酶称同裂酶，但它们的切割位点可能不同。（同序同切酶、同序异切酶、“同功多位”等）

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7、同尾酶：

切割不同的DNA片段但产生相同的粘性末端的一类限制性内切酶。

8、位点偏爱：

某些限制酶对同一底物中的有些位点表现出偏爱性切割，即对不同位置的同一个识别序列表现出不同切割效率。

9、星星活性：

极端非标准反应条件下，限制酶能够切割与识别序列相似的序列，这个改变的特殊性称星星活性。

10、甲基化酶：

原核生物甲基化酶是作为限制与修饰系统中的一员，用于保护宿主DNA不被相应的限制酶所切割。

11、DNA聚合酶：

以DNA为复制模板，从将DNA由5'端点开始复制到3'端的酶。

分子生物学实验考试预测题

作者：haiwen 第 1 页 共 2 页 创建时间：2012/6/19 11:40:00 一、名词解释

1、感受态细胞：是指受体细胞处于容易吸收外源DNA 的一种生理状态。

2、限制性内切酶：是一类能识别双链DNA分子特异性核酸序列的 DNA 水解酶。

3、转化子总数：等于菌落数乘以转化反应原液总体积与涂板菌液体积的比值。

4、转化效率：等于转化子总数与加入质粒DNA的量的比值。

5、1U：指在建议缓冲液及温度下，在20µL反应液中反应1h，使1µgDNA完全消化所需的酶量。

6、PCR（多聚酶链式反应）：是以模板、引物和4种dNTP存在的条件下依赖于DNA聚合酶的酶促和反应，是一种扩增DNA的自动化技术。

7、Taq酶：是从嗜热杆菌中提取的一种耐热性DNA聚合酶。

8、Northern Blot ：是一种通过检测RNA的表达水平来检测基因表达的方法。

9、探针：分子生物学和生物化学实验中用于指示特定物质(如核酸、蛋白质、细胞结构等)的性质或物理状态的一类标记分子。

二、填空题

1、在基因工程技术中通常采用 诱导 的方法获得感受态细胞。

2、碱裂解法是基于线性大分子染色体DNA与小分子环形质粒DNA 变性复性 的差异达到分离目的。

3、限制酶可分为 Ⅰ、Ⅱ 、Ⅲ 型三大类。

4、影响核酸限制性内切酶的活性的因素是①DNA 的纯度；②DNA 的甲基化程度；

③酶切消化反应的温度；④DNA的分子结构；⑤溶液中离子浓度及种类；⑥缓冲液pH值。

5、琼脂糖溶化再凝固后能形成带具有一定形状、大小与孔隙度的固体基质 (密度与琼脂糖浓度相关)，可以起到 分子筛 的作用；

6、等长度的单链DNA和双链DNA在中性或碱性凝胶中的迁移率 大致相等 。

7、影响琼脂糖凝胶电泳DNA迁移率的因素： ① DNA的分子大小； ② 琼脂糖浓度；