HPLC测定养血固冲丸中芍药苷的含量

中药制剂工程与技术　ＨＰＬＣ测定养血固冲丸中芍药苷的含量　李秀红　（山西省阳泉市中医医院，山西阳泉０４５０００）　≯　峁匿　黼缮骺　２０１１年第１２卷第４期　

摘要目的：建立以高效液相色谱法测定养血固冲丸中芍药苷含量的方法。方法：色谱柱为ｋｒｏｍａｓｉｌ　Ｃ　流动相为乙腈一　０．１％磷酸溶液，检测波长为２３０　ｎｍ。结果：芍药苷在１０　Ｉｘｇ／ｍＬ￣２ＯＯＩｘｇ／ｍＬ范围内线ｌ陧关系良好（ｒ＝０．９９９　５），平均加样回　收率为９６．１％，ＲＳＤ为２．４％，ｎ＝５。结论：本方法简便、灵敏、准确，可用于养血固冲丸的质量控制。　关键词高效液相色谱法；养血固冲丸；芍药苷　中图分类号：Ｒ２８４．２　文献标识码：Ａ　文章编号：１６７１—０２５８（２０１１）０４—００１５—０２　Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｐａｅｏｎｉｆｌｏｒｉｎ　Ｃｏｎｔｅｎｔ　ｉｎ　Ｙａｎｇｘｕｅ　Ｇｕｃｈｏｎｇ　Ｐｉｌｌ　ｂｙ　ＨＰＬＣ　ＬｉＸｉｕｈｏｎｇ　（Ｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌ　Ｃｈｉｎｅｓｅ　Ｍｅｄｉｃｉｎｅ　Ｈｏｓｐｉｔａｌ　ｏｆ　Ｙａｎｇｑｕａｎ　Ｃｉｔｙ，Ｙａｎｇｑｕａｎ　Ｓｈａｎｘｉ　０４５０００）　Ａｂｓｔｒａｃｔ　Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：Ｔｏ　ｅｓｔａｂｌｉｓｈ　ａ　ｍｅｔｈｏｄ　ｆｏｒ　ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｐａｅｏｎｉｆｌｏｒｉｎ　ｃｏｎｔｅｎｔ　ｉｎ　Ｙａｎｇｘｕｅ　Ｇｕｃｈｏｎｇ　ｐｉｌ１．Ｍｅｔｈｏｄ：　ＨＰＬＣ　ｗａｓ　ｐｅｒｆｏｒｍｅｄ　ｏｎ　Ｋｒｏｍａｓｉｌ　Ｃ１８　ｃｏｌｕｍｎ　ｗｉｔｈ　ａｃｅｔｏｎｉｔｒｉｌｅ一０．１％ｐｈｏｓｐｈｏｒｉｃ　ａｃｉｄ　ａｓ　ｍｏｂｉｌｅ　ｐｈａｓｅ，ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ　ｗａｖｅ—　ｌｅｎｇｔｈ　ｗａｓ　ｓｅｔ　ａｔ　２３０　ｎｍ．Ｒｅｓｕｌｔ：Ｔｈｅ　ｌｉｎｅａｒ　ｒａｎｇｅ　ｏｆｐａｅｏｎｉｆｌｏｒｉｎ　ｗａｓ　１０　Ｉｘｇ／ｍＬ￣２００　Ｉｘｇ／ｍＬ（ｒ＝Ｏ．９９９　５），ａｖｅｒａｇｅ　ｒｅｃｏｖｅｒｙ　ｗａｓ　９６．１％，ＲＳＤ　ｗａｓ　２．４％（ｎ＝５）．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：Ｔｈｉｓ　ｍｅｔｈｏｄ　ｉｓ　ｓｉｍｐｌｅ，ｓｅｎｓｉｔｉｖｅ，ａｃｃｕｒａｔｅ，ａｎｄ　ｃａｎ　ｂｅ　ｕｓｅｄ　ｆｏｒ　ｑｕａｌｉｔｙ　ｃｏｎ—　ｔｒｏｌ　ｏｆ　Ｙａｎｇｘｕｅ　Ｇｕｃｈｏｎｇ　ｐｉｌ１．　Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ　ＨＰＬＣ；Ｙａｎｇｘｕｅ　Ｇｕｃｈｏｎｇ　ｐｉｌｌ；ｐａｅｏｎｉｆｌｏｒｉｎ　养血固冲丸是阳泉市中医院名老专家根据多年　的临床经验经总结研制而成的纯中药制剂，具有益气　养血、固冲止崩的功效，用于治疗气血两虚、冲任失调　所致的月经先期、月经过多、经期延长、崩漏等证。养　血固冲丸由党参、白芍、黄芪、阿胶、白术、地榆等药　组成，白芍是方中的君药，味苦、酸，归肝脾经，有养　血调经、敛阴止汗、柔肝止痛的功效。其化学成分较　复杂，有少量的挥发油、羟基芍药苷、芍药内酯苷、苯　甲酰芍药苷及苯甲酸、鞣质等，其中主要是芍药苷。　故此，我们采用高效液相色谱法对养血固冲丸中芍　药苷进行含量测定，为药品质量评价提供依据。　１实验材料　１．１实验仪器　ＳＳＩ—ｓｅｒｉｅｓ　ｌＶ　ｐｕｍｐ泵，ＳＳＩ　Ｍｏｄｅｌ　５００一ＤＥＴＥＣ—　ＴＯＲ单元液相色谱仪，ＰＣ一３０００系统检测仪，ＴＬ一　９０００色谱工作站，超声处理器（ＬＣ一３５０Ａ），电子天　平（ＭＥＴＹＬＥＲ　ＡＥ一２００）。　１．２药品与试剂　乙腈为国产色谱纯溶剂，天津市威晨化学试剂科　［作者简介］李秀红，女，主管中药师，从事中药制剂工作　［收稿日期］２０１１－０４—２１　贸有限公司出产；磷酸为国产分析纯试剂，天津市永　大化学试剂开发中心；水为实验室专用纯水机ＸＹＤ—　ｌ０一Ｈ处理超纯水。芍药苷对照品（中国生物制品检验　所，批号：１１０７３６—２００６２９）；养血固冲丸３批，原药材　为本院药库提供。　２方法与结果　２．１色谱条件　色谱柱（４．６　ｎｍｘ２５０　ｎｍ），十八烷基键合硅胶为　填充剂，柱温检测为常温（２２℃），检测波长为２３０　ｎｍ，以乙腈一０．１％磷酸溶液为流动相，流速１．０　Ｌ／　ｍｉｎ。样品及对照品的液相色谱图见图１。　２．２对照品溶液制备　精密称取芍药苷对照品适量，加５０％的甲醇制　成每１　ｍＬ含５Ｏ　ｇ的溶液，摇匀，作为对照品溶液　备用。　２．３供试品溶液制备　取不同批次的养血固冲丸各４丸剪碎混匀，精　密称定２　ｇ，置具塞三角瓶中，加５０％的甲醇２５　ｍＬ，　精密称定重量，超声处理２０　ｍｉ

ｎ，放冷，用５０％的甲　瘁屠璧滋学诼　２ｏ１　１　Ｖｏ１．１２　ＮＯ．４　中药制剂－１－程与技术　

ｊ　６　９　１２　ｍｉｎ　３　Ｏ　ｌｚｍｌｎ　对照品　样品　图１对照品及样品的ＨＰＬＣ图　醇补足所减失重量，过滤，取滤液作为供试品溶液。　２．４阴性对照品溶液制备　按本品处方去除白芍，按照制备工艺制成阴性样　品，并按照供试品溶液制备方法制成阴性样品溶液。　２．５线性关系学考察　分别精密称取芍药苷对照品０．００１　０６　ｇ，０．００２　２３　ｇ，０．００４　６５　ｇ，０．００９　００　ｇ，０．０１７　６１　ｇ，分别置１００　ｍＬ　容量瓶中加５０％的甲醇制成每１　ｍＬ含１０　２５　ｇ、５０　Ｉ，ｚｇ、１００　ｇ、２００　ｇ的溶液，各取２０　ｕＬ注入　色谱仪中测定，按色谱条件测得峰面积积分值，以浓　度为横坐标，峰面积为纵坐标，绘制标准曲线，回归　方程为Ｙ＝２０４　６２１　１５２　７００Ｘ＋２　１５５　９９３．３２９，ｒ－＇－０．９９９　５，　芍药苷在１０　ｔｘｇ／ｍＬ￣２０　Ｉｘｇ／ｍＬ呈良好的线性关系。　２．６精密度实验　精密吸取对照品溶液（５０　ｐ￣ｇ／ｍＬ）２０　ＩｘＬ连续进　样５次，测芍药苷峰面积，结果分别为１４　８３１　３２１、　１５　０６２　４８６、１４　９０６　５７２、１５　０９７　８１７、１４　７７４　３２５，　ＲＳＤ为０．８％。表明仪器进样精密度良好。　２．７稳定性实验　取供试样品溶液分别在０　ｈ、２　ｈ，４　ｈ、８　ｈ、２０　ｈ　进样２０　Ｌ，测得芍药苷的峰面积分别为１４　８９８　６８３、　１４　８１８　５３８、１４　９６２　９８２、１４　９３８　４９０、１４　２１０　６２８，　ＲＳＤ为２．０％。表明供试品溶液在室温下２０　ｈ内基　本稳定。　２．８重现性实验　相同批次的养血固冲丸，按供试品溶液制备方　法制备５份，分别进样２Ｏ　，测峰面积，结果分别　为：１４　８１８　５３８、１４　９３８　４９０、１４　７６２　９８２、１４　８９２　２６３、　１４　２１０　６２８。测定ＲＳＤ为２．３％，表明测定方法重现　性良好。　２．９加样回收率试验　取已知含量的供试品溶液５份，各１　ｍＬ，分别　加入每毫升含芍药苷５０　ｇ的芍药苷对照品溶液１　ｍＬ，混匀，测定结果见表１。　表１药品加样回收率试验结果　（ｎ＝５）　２．１０样品含量测定　取不同批次的养血固冲丸，照上述方法制备供　试品溶液，测定芍药苷含量，见表２。　表２不同批次芍药苷含量测定结果　２．１１含量测定限度　根据表２，芍药苷测得的结果，将本品中芍药苷　含量限度定为本品每丸含芍药苷（Ｃ∞Ｈ船０　）不得少　于４．０　ｍｇ。　３讨论　ＨＰＬＣ测定养血固冲丸中芍药苷的含量结果准　确，精密度、重现性良好，平均回收率为９６．１５％，ＲＳＤ　为２　，故芍药苷可作为养血固冲丸的质量控制指标。　参考文献　［１］国家药典委员会．中华人民共和国药典［ｓ］．北京：化学工业出版　社，２０１０．　（上接第１４页）以用于瑞香狼毒组织鉴别。此外，木　间木栓的颜色较深，是否说明植物生长过程中在木间　木栓中积累了特殊的化学成分，还有待进一步研究。　参考文献　［１］赵奎君，徐国钧，金蓉鸾，等．常用中药材品种整理和质量研究　（南方协助组第２册）［Ｍ］．福州：福建科学技术出版社，１９９７：　１８４．　［２］赵奎君．中药狼毒及　昆淆品间茹的木草考证［Ｊ］＿中草药，１９９６，２７　（９）：５５４．　［３］杨宝印．瑞香狼毒对小鼠移植肿瘤的抑制作用［Ｊｊ＿中两医结合杂　志，１９８６，６（９）：５３２．