大肠杆菌(菌群)在线分析仪

大肠杆菌的名词解释大肠杆菌（Escherichia coli）是一种常见的细菌，是一种革兰氏阴性杆菌，属于肠道菌群中的重要成员。

大肠杆菌在人和动物的肠道内普遍存在，并且一般情况下对人体是无害的。

然而，某些菌株的感染会导致一系列疾病，从轻微的腹泻到严重的泌尿系统感染和败血症。

大肠杆菌具有多种不同的菌株，其中一些菌株与人体健康密切相关，如肠毒素型大肠杆菌（Enterotoxigenic Escherichia coli，简称ETEC），会引起旅游者腹泻；而其他菌株则与食物中的致病性大肠杆菌（Enteropathogenic E. coli，简称EPEC）或与泌尿系统感染相关的大肠杆菌（Uropathogenic E. coli，简称UPEC）有关。

大肠杆菌的名称源自于奥地利医生Theodor Escherich，在1885年首次发现这种菌株，并以自己的名字命名。

这种菌株最初是通过研究婴儿粪便发现的。

大肠杆菌的特点是它能够在温和而富含养分的环境中生长，并且以产生酪氨酸酶为特征，这种酶能够分解乳糖，使得大肠杆菌能够利用乳糖作为碳源。

大肠杆菌在人和动物的肠道中起着非常重要的生态角色。

它帮助消化食物，促进维生素和蛋白质的合成，还可以保护宿主免受一些致病菌的侵害。

此外，大肠杆菌还可以产生维生素K，这是一种重要的血凝促进剂。

大肠杆菌对肠道内细菌群的平衡具有重要影响，一旦肠道菌群失衡，可能会导致各种健康问题。

然而，一些大肠杆菌的菌株会导致感染。

这通常发生在摄入了被污染的食物或水后。

一旦这些致病性大肠杆菌进入人体，它们可以通过附着于肠道上皮细胞而引发感染。

常见的症状包括腹泻、恶心、呕吐、腹痛和发热。

一般情况下，这些症状是轻微的，可以在几天内自愈。

然而，对于免疫系统较弱或消化系统异常的人群，感染可能导致严重并发症，如血尿和溶血性尿毒症综合征。

因为大肠杆菌感染的常见途径是通过食物和饮用水，所以正确的食品和卫生处理对于预防感染非常重要。

大肠杆菌及大肠菌群计数方法大肠杆菌和大肠菌群计数方法Enumeration of Escherichia coli and the coliform章节内容：传统检测大肠菌群和大肠杆菌的方法LST-MUG法检测冷藏和冷冻食品中的大肠杆菌（除双壳类软体动物制品外）瓶装水检测方法贝类和贝类肉制品检测方法柑桔类水果汁中大肠杆菌检测方法大肠菌群和大肠杆菌计数的其他方法参考文件大肠埃希氏菌，以前常称大肠杆菌，于1885年由德国儿科医生Theodor Escherich 发现，广泛存在于人类和温血动物的肠道中，是人类和动物肠道中需氧性共生菌的优势菌群，维持宿主健康部分生理功能必需的肠道菌。

大肠埃希氏菌属肠杆菌科，肠杆菌科包括许多种细菌，致病菌有沙门氏菌、志贺氏菌、和耶尔森氏菌。

虽然大多数的大肠埃希氏菌为非致病菌，但是当宿主免疫力降低或细菌侵入肠道的外组织或器官时，可引起肠外感染。

某些血清型可产生毒素，为致病性大肠埃希氏菌，可引起人类腹泻。

1892年，Shardinger建议把大肠杆菌作为粪便污染的指标。

由于大肠杆菌广泛存在于人类和动物中，而在其他地方少见。

再者，大肠杆菌能发酵葡萄糖（以后改为为乳糖）产生气体。

与已知的非产气致病菌容易区别开来。

因此，大肠杆菌的检测已成为水和食品的近期粪便污染指标，表明可能含有致病菌。

肠道中柠檬酸盐菌，克雷伯氏菌和肠杆菌能发酵乳糖，与大肠杆菌的生物型非常相似，使得把大肠杆菌作为健康威胁的指标，在实际应用中很复杂。

于是，大肠菌群这个术语用来描述这类肠道菌，大肠菌群不是一个分类学上的定义，而是一个工作定义，指的是一群在35℃培养48h，产酸产气的，革兰氏阴性的芽孢杆菌。

1914年，每国公共健康协会把大肠菌群作为一个重要的卫生标准。

虽然大肠菌群很容易检测到，但不一定与粪便污染有关系，因为在自然环境样品中也常存在。

于是，粪大肠菌群就作为粪便污染的指标。

首先由Eijkman提出，指的是在高温下发酵乳糖，是总大肠菌群的亚群，同时也称为耐热大肠菌群。

2、实验结果与分析2.1、细菌总数检测结果2.1.2、细菌总数的计算与报告根据菌落总数的计算方法：1、若只有一个稀释度平板上的菌落术在适宜计数范围内，计算两个平板菌落数的平均值，再将平均值乘以相应稀释倍数，作为每克（或毫升）中菌落总数结果。

2、若有两个连续稀释度的平均菌落数载适宜计数范围内时，按下式计算：N=∑c/[(n1+0.1n2)d]式中：N—样品中菌落数；∑C—平板（含适宜范围菌落数的平板）菌落数之和；n1—第一个适宜稀释度平板上的菌落数；n2—第二个适宜稀释度平板上的菌落数；d—稀释因子（第一稀释度）为1.75x107；在浓度10—6(g/ml)的时候，大肠杆菌的细菌总数约为1.60x107；在浓度10—7(g/ml)的时候，大肠杆菌的细菌总数约为2.01x107。

分析数据可知，在浓度10—7(g/ml)的时候，细菌总数远大于其他两个梯度，这与常理不符。

那么有可能是实验过程中的错误导致，可能是稀释不够、密封不紧、没有进行无菌操作等因素有关。

2.2、大肠菌群检测结果2.1.1、初发酵各浓度梯度阳性管数统计附：检验原始记录检验原始记录检测记录与结果培养基配制：样品配制：1、 固体样品，无菌称取25g 样品加225ml 生理盐水，均质。

2、 液体样品，需稀释的，吸取25ml 于225生理盐水，混匀。

菌落总数：检验依据：GB/T4789.2-2008大肠杆菌：检验一句GB/T4789.3-2003大肠杆菌：检验一句GB/T4789.3-2003注：“P ”表示阳性结果，“N ”表示阴性结果检验起止时间：2011年09月25日至2011年09月27日检测人:复核人：。

简述食品中大肠杆菌的快速检测方法相关研究进展摘要：大肠菌群的快速检测是食品、药品卫生监督检验迫切需求，本文从免疫学技术，酶学的技术，分子生物学技术，传统检测方法改进技术，物理化学技术，其它技术方面对大肠菌群快速检测方法研究进展进行综述，并对其存在问题及应用前景进行分析。

这些方法各有优缺点，免疫学技术和分子生物学技术灵敏度高，但假阳性率高，无法区分死活菌；酶学的技术和物理化学技术特异性好，省时省力，但这些方法成本较高，不适合基层实验室使用；传统检测方法改进技术结果准确，但费时费力。

因此，仍需要发展一种新的方法解决所存在的问题。

要真正实现大肠菌群的快速检测还需要不断进行科学研究，以寻找一种能够真正实现成本低、灵敏度好、准确性高并且检测速度快的更合适的方法。

关键词：食品；大肠菌群；快速检测；研究1引言大肠菌群为一群在37C、24h能发酵乳糖，产酸、产气，需氧和兼性厌氧的革兰阴性无芽胞杆菌的统称。

这些细菌多存在于温血动物粪便中，人、畜粪便对外界环境的污染是大肠菌群在自然存在的主要原因。

因此，大肠菌群被国际上公认为检测各种水质、医药及食品在流行病学上安全性的指示菌。

如果检测到大肠菌群呈阳性结果，那么便表明食品、药品或者水质存在大肠菌群，已经被粪便污染。

大肠菌群的数量与受到的污染程度成正比，数量越多，受污染越严重。

目前我国国家标准主要用多管发酵法来检测大肠菌群多管发酵法作为一种传统的检测方法已沿用多年，其准确性、权威性无可质疑，但该方法费时费力，而且检测所需的费用较高，已无法满足人们对食品、药品安全现场监测的要求，因此，现在食品、药品卫生监督检验迫切需要一种更加有效、快速的大肠菌群检测方法。

近年来，世界各国针对大肠菌群的快速、定量检测技术都进行了专门的研究，本文综述了大肠菌群快速检测技术的研究进展，并对其存在问题及应用前景进行分析。

2大肠菌群主要的快速检测方法2.1免疫学技术免疫学方法检测原理是依据抗原和抗体特异性反应。

MEL/MF（膜过滤法）总大肠杆菌便携式实验室仪器操作说明（简）注：此操作说明由福州福光水务科技有限公司整理，如与制造厂家说明书不符，请以制造厂家说明书为准。

2.1 大肠杆菌概述很多微生物可以导致不同的疾病。

如伤寒，霍乱，痢疾等等疾病都可能是由于受污染的水而引起的。

这种由排泄物产生的微生物和病原体有可能会在饮用水中，游泳池中，河流中和溪流等地被检测到。

.总大肠杆菌的测试：适合饮用水测量，可用于检测消毒的效果.粪大肠杆菌的测试：经常用于检测未处理的水、污水、游泳池水等。

对于检测由人或动物排泄物产生的大肠杆菌类的微生物，最好的测量参数是Escherichia coli (E. coli).（埃希氏大肠杆菌）2.2 测量技术好的实验室的技术对确保测量的准确是最基本的，包括样品收集和准备，干净的实验室，正确的消毒和接种以及温度的控制。

2.3 准备样品容器在细菌的测试过程注意要防止样品被污染。

与样品接触的所有容器和物品都要被消毒。

收集样品采用一次性的塑料袋，一次性的瓶子，能经受住压热器作用的玻璃瓶或塑料瓶。

一次性的容器一次性的塑料袋，带脱氯剂包括在微生物的便携式实验室中和试剂包内。

塑料袋，包括带脱氯剂的或不带脱氯剂（硫代硫酸钠）的，可以被一次性的使用。

一次性的瓶子带100ml的刻度线。

注：脱氯剂用于饮用水或其他氯化水的样品测量。

对于没有采用氯消毒的水可以不需要。

不过，脱氯剂对于不含氯的样品的测量也不会带来干扰，所以方便起见，脱氯剂可以适用于所有的样品。

能经受住压热器作用的容器玻璃或塑料瓶（至少125ml）可以取代塑料带或瓶子使用。

预备能经受住压热器作用的容器1. 放在热水中用清洁剂清洗2. 用水龙头的水彻底冲洗瓶子，然后用蒸馏水清洗，确保瓶子里的清洁剂完全被洗掉。

3.如果需要脱氯剂（对于用氯消毒的水），每125ml样品容器加入1包的脱氯剂。

对于250mL的瓶子需要加入2包的的脱氯剂。

4. 在121°C的温度下用蒸汽消毒这种塑料或玻璃容器 15分钟。

1大肠杆菌/大肠菌群测试片使用说明书【产品名称】通用名称：大肠杆菌/大肠菌群测试片英文名称：Handy plate TM E.coli &Coliform(ECC)Detetction Plate 【产品编号】HP 004【包装规格】20片/包【产品简介】Handy plate TM 大肠杆菌/大肠菌群测试片为预制备的即用型培养基产品，含有标准的培养基、冷水凝胶和显色指示剂。

本产品可用于食品和饮料中大肠杆菌/大肠菌群的测定。

【使用说明】1.样品制备取样品25g(mL)放入含有225mL 磷酸缓冲液（或生理盐水）的无菌均质杯或均质袋内，均质器混匀1min ～2min 制成1:10的样品匀液，必要时用无菌1mol/L NaOH 或1mol/L HCl 溶液调节样品匀液pH 至6.8～7.2。

用1mL 无菌吸管或移液器吸取1:10均液1mL ，注入含有9mL 稀释液的试管内，振摇后成为1:100的样品匀液，以此类推制备10倍系列稀释的样品匀液，每次换一支吸管。

2.接种根据对样品污染状况的估计，选择2～3个稀释度进行检测。

将大肠杆菌/大肠菌群测试片置于平坦实验台面，揭开上层膜，用无菌吸管吸取1mL 样品匀液滴加到测试片中央，缓缓盖上上层膜，避免产生气泡，静置3～5min 使样液扩散并重新形成凝胶。

3.培养将测试片正面向上水平放置36℃±1℃，培养18h ～24h 。

24.判读大肠杆菌为蓝绿色菌落，其它大肠菌群为品红色菌落。

合适的计数范围在20CFU ～200CFU 。

若整个培养区域呈蓝绿、蓝紫或品红色，可能是菌浓度过高，需对样品进一步稀释以获得确切的计数。

如需分离菌落进行进一步分析，揭开上层膜用接种针将菌落挑出使用即可。

【操作图解】1.用剪刀沿虚线剪开，2.将测试片放在水平台面上，3.缓慢盖上覆膜，取出测试片盒揭开覆膜，将1mL 样品液静置3-5分钟。

滴加在纸片中心。

4.将测试片正面朝上，放置于5.根据判读手册判读测试片恒温培养箱中，36±1℃培上是否有目标菌生长，或养24±2h。

大肠杆菌鉴别培养基及菌落特点大肠杆菌（Escherichia coli）是一种常见的肠道菌群中的细菌。

它是一种革兰氏阴性、非芽孢杆菌，可以通过合适的培养基进行鉴别和分离。

本文将介绍大肠杆菌的鉴别培养基及菌落特点，并对其进行详细解释。

一、鉴别培养基1. 麦康凯氏培养基（MacConkey agar）：麦康凯氏培养基是一种选择性和区分性培养基，通常用于分离和鉴别肠道革兰氏阴性菌。

它含有麦康凯氏紫（crystal violet）和牛胆盐（bile salts）等抑制革兰氏阳性菌生长的成分，同时含有乳糖和中性红等成分，能够区分能够利用乳糖的细菌和不能利用乳糖的细菌。

大肠杆菌在麦康凯氏培养基上生长良好，形成红色或粉红色的菌落，说明它可以利用乳糖产生酸性代谢产物。

2. EMB培养基（eosin methylene blue agar）：EMB培养基是一种选择性和区分性培养基，常用于分离和鉴定肠道革兰氏阴性菌。

它含有嗜酸染料亚甲蓝（methylene blue）和伊美司粉（eosin Y）等成分，能够抑制革兰氏阳性菌的生长。

大肠杆菌在EMB培养基上形成绿色或金属光泽的菌落，说明它可以产生酸性代谢产物。

3. XLD培养基（xylose lysine deoxycholate agar）：XLD培养基是一种选择性和区分性培养基，主要用于分离和鉴定肠道沙门氏菌属（Salmonella）和伤寒沙门氏菌（Shigella）。

大肠杆菌在XLD培养基上形成黄色的菌落，与其他肠道致病菌如沙门氏菌和伤寒沙门氏菌形成明显的区别。

二、菌落特点大肠杆菌在以上鉴别培养基上的菌落特点如下：1. 麦康凯氏培养基上的大肠杆菌菌落为红色或粉红色，直径约为2-3毫米，呈圆形或不规则形状。

2. EMB培养基上的大肠杆菌菌落为绿色或金属光泽的菌落，直径约为2-3毫米，边缘清晰。

3. XLD培养基上的大肠杆菌菌落为黄色的菌落，直径约为2-3毫米，表面平整。

大肠菌群及大肠杆菌检测方法简介大肠菌群是指人和动物肠道中存在的一群细菌的总称，其中大肠杆菌是大肠菌群中的一种重要成员。

大肠杆菌是一种革兰阴性杆菌，属于肠道的常见菌群，对人体有益，并且在环境和食品中也常见。

然而，大肠杆菌也有一些致病的菌株，如致泻性大肠杆菌，会导致食物中毒和胃肠道感染。

大肠菌群检测方法大肠菌群的检测方法主要分为培养法和分子生物学方法两大类。

培养法：传统的大肠菌群检测方法是基于培养菌株的数量来进行评估。

这种方法通过将样品培养在选择性培养基上，利用大肠杆菌产生的特殊代谢产物来进行鉴定。

这一方法简单易行，成本较低，但存在一些局限性，如培养时间长，只能检测活菌，对于非培养性细菌较为困难。

分子生物学方法：分子生物学方法包括PCR和实时荧光定量PCR等技术，不依赖细菌的生长特性，能够快速准确地检测大肠菌群。

PCR是通过扩增大肠菌群的16SrRNA基因，然后通过电泳等方法进行检测和定量。

实时荧光定量PCR是一种更快速、灵敏和准确的检测方法，利用荧光探针技术可以实时监测扩增反应的过程，并定量测定大肠菌群的数量。

这种方法具有高度特异性和灵敏性，可以检测非活菌和少量菌。

大肠杆菌的检测方法主要分为传统培养法和分子生物学方法两种。

传统培养法：大肠杆菌的传统培养方法是将样品在选择性培养基上进行培养，利用大肠杆菌产生的代谢产物进行鉴定，并通过菌落数进行定量。

这种方法操作简单，成本较低，但存在一些问题，如需要较长时间培养（通常需要24-48小时），偶尔出现培养落阳性假阳性结果。

此外，该方法只能检测到特定培养条件下的大肠杆菌，并不能检测到非培养性或者少量存在的大肠杆菌。

分子生物学方法：分子生物学方法是通过扩增大肠杆菌特异基因或基因片段来进行检测。

常见的方法有PCR和实时荧光定量PCR。

PCR方法通过扩增大肠杆菌特异基因（如uidA基因）来进行检测，并通过电泳等方法进行鉴定。

实时荧光定量PCR是一种更快速灵敏准确的方法，可以实时监测扩增反应的过程，并定量测定大肠杆菌的数量。

大肠杆菌总大肠菌群粪大肠菌群区别与联系相互关系大肠菌群（总大肠菌群） > 粪大肠菌群&耐热大肠菌群 > 大肠杆菌一、大肠菌群介绍大肠菌群并非细菌学分类命名，而是卫生细菌领域的用语，它不代表某一个或某一属细菌，而指的是具有某些特性的一组与粪便污染有关的细菌，这些细菌在生化及血清学方面并非完全一致，其定义为：需氧及兼性厌氧、在37℃能分解乳糖产酸产气的革兰氏阴性无芽胞杆菌。

一般认为该菌群细菌可包括大肠埃希氏菌、柠檬酸杆菌、产气克雷白氏菌和阴沟肠杆菌等。

大肠菌群分布较广，在温血动物粪便和自然界广泛存在。

调查研究表明，大肠菌群细菌多存在于温血动物粪便、人类经常活动的场所以及有粪便污染的地方，人、畜粪便对外界环境的污染是大肠菌群在自然界存在的主要原因。

粪便中多以典型大肠杆菌为主，而外界环境中则以大肠菌群其他型别较多。

大肠菌群是作为粪便污染指标菌提出来的，主要是以该菌群的检出情况来表示食品中有否粪便污染。

大肠菌群数的高低，表明了粪便污染的程度，也反映了对人体健康危害性的大小。

粪便是人类肠道排泄物，其中有健康人粪便，也有肠道患者或带菌者的粪便，所以粪便内除一般正常细菌外，同时也会有一些肠道致病菌存在（如沙门氏菌、志贺氏菌等），因而食品中有粪便污染，则可以推测该食品中存在着肠道致病菌污染的可能性，潜伏着食物中毒和流行病的威胁，必须看作对人体健康具有潜在的危险性。

大肠菌群是评价食品卫生质量的重要指标之一，目前已被国内外广泛应用于食品卫生工作中。

二、总大肠菌群所谓总大肠菌群系指一群在37℃培养24小时能发酵乳酸、产酸产气、需氧和兼性厌氧的革兰氏阴性无芽胞杆菌。

三、耐热大肠菌群与粪大肠菌群的比较北美国家一般使用“粪大肠菌群”概念，如AOAC、FDA。

SN中的“粪大肠菌群”概念为等同采用AOAC方法，故而使用粪大肠菌群概念；而欧洲使用“耐热大肠菌群”概念，较少使用“粪大肠菌群”。

一般欧洲学者认为，“粪大肠菌群”的提法不太科学，耐热大肠菌群的范围比粪大肠菌群范围大。