功能性红曲中功能成分的研究进展

红曲的化学成分、药理作用及临床应用研究进展阅读笔记1. 红曲菌Monascus spp.隶属真菌门子囊菌亚门不整囊菌纲散囊菌目红曲科红曲属，以菌丝体及孢子入药，菌株大致可分为3种：安卡红曲霉Monascus ankasp.、丛毛红曲霉Monascus pilosusSato及紫色红曲霉Monascus purpureusWent。

其培养物大多呈现紫红色，古代称丹曲，又称红曲，主要以大米为原料，接种红曲菌发酵而成。

红曲在我国的使用历史已有1000余年之久，广泛用于中药、酿酒、食品着色等方面。

红曲味甘，性温，归肝、脾、胃、大肠经，具有消食和胃、活血止痛、健脾燥胃之功效。

现代研究表明，其含有的他汀类、脂肪酸、甾醇、色素等成分具有调节血脂、抗炎、抗肿瘤、抗氧化等药理作用。

20世纪70年代，日本学者从红曲中分离筛选出了具有调节血脂作用的生理活性物质莫纳可林K，掀起了对红曲研究的热潮，至今已取得了斐然成果。

2. 红曲中的化学成分分类代表药物莫纳可林类洛伐他汀，成为首个上市的调脂药，其能够显著降低胆固醇和低密度脂蛋白胆固醇（low density lipoprotein cholesterin，LDL-C）水平，是他汀类调脂的代表药。

近年来，洛伐他汀的抗肿瘤作用也成为了研究的热点，研究发现其对肺癌、胃癌、鼻咽癌、宫颈癌等多种常见恶性肿瘤都有明显的抑制作用。

甾 1.麦角甾醇又称麦角固醇，是红曲发酵过程中产生的主醇类要维生素类化合物，也是微生物细胞膜的主要成分之一。

麦角甾醇为维生素D2的前体物质之一，经紫外线照射发生结构转化生成维生素D2，参与人体内钙和磷的代谢，并影响细胞增殖分化。

研究发现，维生素D2还和癌症、骨质疏松症、自发性免疫疾病、心血管疾病等多种疾病有关。

麦角甾醇可显著降低糖尿病肾病模型小鼠的血糖水平，为麦角甾醇用于糖尿病肾病的临床治疗提供了理论依据。

2.豆甾醇又称豆固醇，是一种植物甾醇，广泛存在于多种植物种子中。

红曲的保健功能及产品开发趋势作者：佚名保健品来源：本站原创点击数：更新时间：2005-8-17 [关键词]：降胆固醇,降血脂,骨质疏松,抗癌健康网讯：红曲一般是指以谷物为原料，接种红曲菌经固体发酵制成的红色或紫红色米曲。

自古以来，红曲一直被认为具有食用和药用双重功效。

红曲除了用在着色、酿酒、制醋和酱油外，它还可以生产各种酶制剂。

近年来，红曲菌的药用价值备受关注，利用红曲细菌开发研制各种功能性保健食品成为研究热点，本文根据实验室数十年的研究，对红曲的保健功能和食用安全性作了介绍，并指出了红曲保健品的开发趋势。

1 红曲的保健功能1．1 降胆固醇及降血脂作用1979年，日本远藤人从红色红曲菌(Monascus rubber)发酵液中分离得到一种可抑制体内胆固醇合成的活性物质，命名为Monacolin K。

至今已从红曲菌发酵产物中分离到Monacolin L、Monacolin J、Monacolin K、Monacolin M和Monacolin X等11种化合物。

在胆固醇的合成途径中，HMG—CoA的还原酶是控制体内胆固醇合成速度的关键酶，而Monacolin类化合物是HMG—CoA还原酶的竞争性抑制剂，所以它可以有效减少或阻断内源性胆固醇的合成，其中以Monacolin K的活性最为显著。

Monacolin K有内配式和β—羟基酸式两种结构。

化学合成药洛伐他汀为内酯式Monacolin K，需在体内水解成相应的酸式而发挥药效，由于需要消耗体内的羟基酯酶，长期使用会增加肝肾负担，其常见副作用还有腹痛、腹泻、便秘、恶心、呕吐及消化不良等胃肠道症状。

天然红曲中的Monacolin K多为酸式，其空间结构与体内HMG—CoA更为接近，无需水解，直接发挥抑制体内胆固醇合成的作用，其活性较内酯式高约一倍。

临床试验表明，当血液中Monacolin K的浓度达到0．001—O．005μg／mL时，体内胆固醇的合成就会受阻。

红曲药理研究进展（2003-2014年）红曲的中药学及临床文献研究概述红曲药理研究进展（2003-2014年）红曲是迄今为止发现的同时具备降血脂、降血压和降血糖 3 种功能的天然食品；红曲可同时降低TC、LDL-C和升高HDL-C,从而起到综合降脂作用，降酯效果和毒副作用皆优于对血脂异常疗效确切的他汀类西药——洛伐他汀。

还具有抗肿瘤、抗疲劳、预防骨质疏松、增强免疫力等广泛的药理作用；功能红曲各种潜在的治疗保健应用价值正逐步被人们研究开发，经多年临床验证发现了除降脂外，红曲对心血管的多种有益作用，保护心肌和内皮细胞、改善动脉硬化和心肌重构、改善心脏舒张功能，具有高效、低毒、安全的特点，已被证实在心血管疾病的一级、二级预防中均可获益；对于维护血管健康、减少心血管事件的发生、发展均具有重要意义，对冠心病的二级预防已具开创性的里程碑意义。

一、红曲概述红曲（monascus），亦名红曲米，它用红曲霉菌接种于大米发酵而成, 是由红曲霉代谢产物和发酵后剩余大米降解物的总称，是一种食疗兼备的传统中药。

红曲最早发明于中国,已有一千多年的生产和应用历史,是中国及周边国家特有的大米发酵传统产品，自古至今就是一个具有药用和食用价值的典型代表。

食品上主要用于腐乳、红酒、鱼等食品的发酵呈色，而其药用功能在《本草纲目》和《中国医学大辞典》中早有记载，《本草纲目》中记载了红曲的药用价值:“消食活血、健脾燥胃、治赤白痢下水谷。

酿酒，破血行药势，杀山岚瘴气，治打扑伤，治安人血，气通乃产后恶血不尽，擂酒饮之良”。

主治产后恶露不净、痪滞腹痛、食积饱胀、赤白下痢、跌打损伤等症。

法国学者van Tieghem在1884年建立了红曲菌属的分类。

在分类上，红曲霉属真菌界，红曲菌科，红曲霉属。

目前，美国培养物物种保藏中心(ATCC)已有58个红曲菌株。

大部分红曲菌株属于3种:丛毛红曲霉，紫色红曲霉及安卡红曲霉。

现代研究表明，红曲中次生代谢物含有：莫那克林Monacolin系列(K,J,L,M,X)，γ一氨基丁酸、氨基葡萄糖、卵磷脂、类黄酮、不饱和脂肪酸等功能成分。

红曲药理研究进展（2003-2014年）红曲是迄今为止发现的同时具备降血脂、降血压和降血糖 3 种功能的天然食品；红曲可同时降低TC、LDL-C和升高HDL-C,从而起到综合降脂作用，降酯效果和毒副作用皆优于对血脂异常疗效确切的他汀类西药——洛伐他汀。

还具有抗肿瘤、抗疲劳、预防骨质疏松、增强免疫力等广泛的药理作用；功能红曲各种潜在的治疗保健应用价值正逐步被人们研究开发，经多年临床验证发现了除降脂外，红曲对心血管的多种有益作用，保护心肌和皮细胞、改善动脉硬化和心肌重构、改善心脏舒功能，具有高效、低毒、安全的特点，已被证实在心血管疾病的一级、二级预防中均可获益；对于维护血管健康、减少心血管事件的发生、发展均具有重要意义，对冠心病的二级预防已具开创性的里程碑意义。

一、红曲概述红曲（monascus），亦名红曲米，它用红曲霉菌接种于大米发酵而成 , 是由红曲霉代谢产物和发酵后剩余大米降解物的总称，是一种食疗兼备的传统中药。

红曲最早发明于中国 ,已有一千多年的生产和应用历史 ,是中国及周边国家特有的大米发酵传统产品，自古至今就是一个具有药用和食用价值的典型代表。

食品上主要用于腐乳、红酒、鱼等食品的发酵呈色，而其药用功能在《本草纲目》和《中国医学大辞典》中早有记载，《本草纲目》中记载了红曲的药用价值:“消食活血、健脾燥胃、治赤白痢下水谷。

酿酒，破血行药势，杀山岚瘴气，治打扑伤，治安人血，气通乃产后恶血不尽，擂酒饮之良”。

主治产后恶露不净、痪滞腹痛、食积饱胀、赤白下痢、跌打损伤等症。

法国学者van Tieghem在1884年建立了红曲菌属的分类。

在分类上，红曲霉属真菌界，红曲菌科，红曲霉属。

目前，美国培养物物种保藏中心(ATCC)已有 58个红曲菌株。

大部分红曲菌株属于3种:丛毛红曲霉，紫色红曲霉及安卡红曲霉。

现代研究表明，红曲中次生代谢物含有：莫那克林Monacolin系列(K,J,L,M,X)，γ一氨基丁酸、氨基葡萄糖、卵磷脂、类黄酮、不饱和脂肪酸等功能成分。

功能性红曲研究进展(2) 红曲的生产工艺及Monacolin K和桔霉素的检测鲁佳慧刘昕王江海袁建平(中山大学国家教育部食品工程研究中心广州510275)摘要综述红曲的生产工艺及Monacolin K和桔霉素的检测方法，指出采用新型生产工艺、优化发酵条件和应用菌种筛选等现代技术是生产既富含活性成分Monacolin K又不含桔霉素的功能性红曲的重要途径，同时预示Monacolin K和桔霉素的检测技术的进展将为功能性红曲的产品质量、安全使用及国际市场的开拓提供技术支撑。

关键词红曲生产工艺Monacolin K 桔霉素检测红曲是我国的传统发酵产品，长期应用于食品着色及作为药用。

1979年以来，日本远藤章从红曲发酵液中发现并分离得到了一系列可显著抑制体内胆固醇合成的活性物质Monacolin类化合物，其中以Monacolin K的活性最为显著。

药理学研究和临床试验表明红曲能有效降低体内总胆固醇以及甘油三酯、低密度脂蛋白水平，同时升高高密度脂蛋白水平，从而具有显著的降胆固醇及降血脂的作用[1~2]。

红曲中Monacolin类化合物的发现使红曲被作为天然药物中抑制胆固醇合成和降血脂的首选药物，并受到世人瞩目。

然而，真菌毒素桔霉素(Citrinin)的发现使功能性红曲的使用安全性受到了挑战。

桔霉素是红曲菌的一种次级代谢产物，具有肾毒性，还可致畸、致癌和诱发基因突变[3]。

桔霉素的存在已成为我国功能性红曲应用和出口的瓶颈。

因此，采用新型生产工艺、优化发酵条件、应用菌种筛选等现代技术，研发富含Monacolin K活性物质且不含桔霉素的功能性红曲必将成为生产功能性红曲技术革命的制高点。

1 功能性红曲的生产工艺1.1 固态发酵传统红曲生产工艺主要是以大米为固态培养基，接种红曲菌菌种后发酵生产红曲。

该方法工艺落后，劳动强度大，红曲产量低，质量不稳定，并且易受杂菌污染。

80年代后，通风池法应用于红曲的生产，红曲产量和质量相对提高。

第49卷第3期2021年5月酿酒LIQUOR MAKINGV o1A92q NMap,2021文章编号：002-300(2021)03-0124-03功能性红曲酒酿造工艺的研究张超(黑龙江省轻工科学研究院，黑龙江哈尔滨00012)摘要:以菌种MB3在最佳接种期发酵制.，0福州产晚5米为原料，用纯种功能性红曲和黄酒酵母生产红曲酒。

在制曲时,pH、发酵温度等因素会对红.中Monacolin K含量产生影响;在酿造时，酵母用量等因素会对酒精度产生影响。

选取蒸煮灭菌晚5米100g，与pH为5的150g灭菌水充分拌匀后，加入0.06mL a-淀粉酶、0.02mL 糖化酶,50：下共计酶解135m+n o加入纯种红.10g,黄酒酵母2.5；,发酵15d，可0得到色泽粉红鲜亮、酒体香味突出的红.酒。

关键词：功能性红.；制.工艺；酿造工艺；固态发酵中图分类号:TQ920.6文献标识码:B0引言在消费升级背景下，人们对于保健品的需求量呈现出上涨趋势。

红曲酒是我国的传统名酒，在南宋的《北山酒经》中最早记录了红曲霉在制曲酿酒中的应用,明代宋应星的《天工开物》中详细记载了红曲的制作方法。

红曲酒具有健胃消食，降血压、降血糖、降胆固醇等诸多功效。

但是由于红曲的制取方式落后,其质量会因环境的不同而出现明显的波动，难以收稿日期：2020—07—25作者简介:张超(1972-)，男，研究生学历，主要从事工业发酵工艺设计及生产设备自动化方面的工作。

官评分都在94分以上，所以毛酸浆果酒的最佳发酵工艺条件为A2B1C1D5°3结论根据单因素试验的分析，对毛酸浆果酒的发酵条件进行正交试验,得出最佳发酵工艺条件为:初始糖度20%,SO2添加量40mg/L,接种量200mg/L,发酵温度26弋。

在此条件下进行3次平行试验来验证，其感官评分都在94分以上，高于正交试验中的最高感官评分，结果表明AzBiC O D为最优组合。

[参考文献]4陈元琼，唐美玲，吴宪涂艳艳，周宗梅，陈全斌我国酸浆研究现状的计量分析J现代农村科技2026(05):50-504王晓英2刘长姣,段连海，霍岩•毛酸浆开发利用的研究进展J中国酿造220X3(00):5—8.4张庆钢，姚旭，孙强，余善鸣•毛酸浆果采后生理的研究J食品科学, 2027(03):341-345.4张宝香，闫玲玲•甜菇娘的营养成分及开发利用J特种经济动植物, 2005(01):38.4丰利,高倩倩•酸浆和甜菇娘的营养成分分析J安徽农业科学2013 42(33):003-004+002.4陆占国•酸浆与毛酸浆籽的超临界CO3流体萃取及成分分析J中国粮油学报2027(05):90-92.3王建刚，穆文娟•气相色谱-质谱法分析毛酸浆果实中脂肪酸成分1、理化检验(化学分册)20026(0):065-066.3李萍，盛巡，王晓中X长建华，鲍朝辉-可延良，丁瑞•酸浆苦素B对活化多形核中性粒细胞化学发光及^03产生的影响J中草药T996(05)：254-259,[9]MaPinc B,Thya4X811010-H,Am0i SR u—ucan Y,Kawai M, CyWWxio activity of physa—ns possessing mohi—ef sUeleWi s—vctures Oainst Heha cells.[JJ Die Pharmoio2203X5(1).[10：王文利，谢春阳.毛酸浆果酒的发酵工艺研究J农产品加工(学刊-2011(08):55-5&[11Q刘文玉，杨大毅，李娜.菇娘发酵酒的生产J酿酒,2029(02):82-8043李世燕，田美荣，李栋，李少鹏,牛广财.毛酸浆酒发酵工艺研究J农业科技与装备200(09):52-54,43]李文一，贾金辉.毛酸浆酒工业规模化生产工艺研究J农产品加工, 2018(08):36-37+40,48李栋,李少鹏，田美荣,李世燕，牛广财.毛酸浆酶解工艺条件的优化[JJ食品工业200,34(0):0003,[O]徐伟,李迎楠，高雪清,马永强.复合酶对红菇娘果浆酶解条件的优化[JO食品科学2213T4(19):114-S^C,46]李华.葡萄酒工艺学4、北京:科学出版社2007:01-02,4(曾杰,李颖畅保酒生产技术4S北京:中国轻工业出版社,200：130132:39,04保证最终产品红曲酒的质量稳定。

第47卷第18期2019年9月广　州　化　工Guangzhou Chemical IndustryVol.47No.18Sep.2019功能性红曲米粉中洛伐他汀和辅酶Q 10等功效成分的含量测定*吕思敏1,张丽婷1,何小冰1,丁鸿燕1,吴　铁1,2(1广东医科大学㊃广东润和生物科技有限公司辅酶Q 10联合研究中心,广东　东莞　523808;2广东医科大学,广东　东莞　523808)摘　要:采用冷凝回流的方式提取功能性红曲米粉中洛伐他汀㊁麦角甾醇㊁辅酶Q 10和红曲多糖四种功效成分,经HPLC 法测得功能性红曲米粉中洛伐他汀含量为1.70mg /g㊁功能性红曲米粉中麦角甾醇含量为763.15μg /g㊁功能性红曲米粉中辅酶Q 10含量为64.55μg /g;经UV 法(苯酚-硫酸法)测得功能性红曲米粉中红曲多糖含量为14.82mg /g㊂HPLC 法可用于红曲米粉中洛伐他汀㊁麦角甾醇和辅酶Q 10的含量检测,UV 法(苯酚-硫酸法)可用于红曲米粉中红曲多糖的含量检测㊂关键词:红曲米粉;洛伐他汀;辅酶Q 10;麦角甾醇;红曲多糖　中图分类号:R917　文献标志码:A文章编号:1001-9677(2019)18-0092-04*基金项目:广东医科大学㊃广东润和生物科技有限公司共建辅酶Q 10联合研究中心项目(2XX14002)㊂第一作者:吕思敏(1988-),女,硕士,研究方向:骨药理学与药物分析㊂通讯作者:吴铁(1955-),男,硕士,教授,研究生导师,研究方向:抗炎免疫与骨质疏松药理学㊂Determination of Functional Ingredients Such as Lovastatin andCoenzyme Q 10in Functional Red Yeast Rice Flour *LV Si -min 1,ZHANG Li -ting 1,HE Xiao -bing 1,DING Hong -yan 1,WU Tie 1,2(1Guangdong Medical University㊃Guangdong Runhe Biological Technology Co.,Ltd.,Coenzyme Q 10Research Institute,Guangdong Dongguan 523808;2Guangdong Medical University,Guangdong Dongguan 523808,China)Abstract :The functional ingredients of lovastatin,ergosterol,coenzyme Q 10and red yeast polysaccharide in functional red yeast rice powder were extracted by condensing reflux.The content of lovastatin was 1.70mg /g,the content of ergosterol was 763.15μg /g,and the content of coenzyme Q 10was 64.55μg /g in functional red yeast rice powder by HPLC.The content of polysaccharides was 14.82mg /g in functional red yeast rice powder by UV method (phenol-sulfuric acid method).HPLC method can be used to detect the content of lovastatin,ergosterol and coenzyme Q 10in red yeast rice powder.UV method (phenol-sulfuric acid method)can be used to detect the content of red yeast polysaccharide in red yeast rice flour.Key words :red yeast rice flour;lovastatin;coenzyme Q 10;ergosterol;red yeast polysaccharide红曲是一味传统中药材㊂红曲菌能产生多种次级代谢产物,主要是红曲色素㊁他汀类㊁麦角甾醇㊁辅酶Q 10㊁葡萄糖胺㊁γ-氨基丁酸等多种生理活性物质[1]㊂其中洛伐他汀通过抑制羟甲戊二酰辅酶A 还原酶,能明显降低血浆胆固醇[2];麦角甾醇作为维生素D2的前体,可以改善骨骼代谢,免疫力和情绪[3];红曲多糖具有抗肿瘤活性,能增强机体的特异性免疫能力[4];辅酶Q 10参与心肌细胞中线粒体的能量代谢,激活细胞呼吸,加速ATP 产生,在提供生物能量㊁维持生命机能方面起着重要作用[5]㊂因洛伐他汀降血脂的同时抑制体内辅酶Q 10的合成,而补充辅酶Q 10可避免他汀类引起的转氨酶增高导致肝损伤等副作用,并能增强他汀类的降脂作用㊂并且,我们课题组已发现[6]红曲菌丝体中含有辅酶Q 10,并且发现[7-9]含有洛伐他汀和辅酶Q 10的 红曲”可使去卵巢合并D-半乳糖大鼠的胫骨㊁股骨和腰椎松质骨以及胫骨皮质骨的骨丢失明显减轻,骨量㊁骨微观结构得到明显改善,具有抗骨质疏松的作用㊂正是含有多种生理活性物质赋予了红曲具有降血脂㊁降血压㊁抗氧化㊁抗菌㊁抗疲劳㊁预防老年痴呆等多重功效,并使其具有很高的商业价值㊂本实验采用冷凝回流的方法从功能性红曲米粉中提取洛伐他汀㊁麦角甾醇㊁辅酶Q 10和红曲多糖,并检测其含量㊂1　试剂与仪器1.1　试　剂洛伐他汀(批号B20806)㊁麦角甾醇(批号B20833)和葡萄糖(批号B21882)对照品均购于源叶生物有限公司;辅酶Q 10(批号201609)由广东润和生物科技有限公司提供;功能性红曲第47卷第18期吕思敏,等:功能性红曲米粉中洛伐他汀和辅酶Q 10等功效成分的含量测定93　米粉(批号20160907F6)由广东天益生物科技有限公司提供㊂无水乙醇㊁磷酸㊁浓硫酸㊁苯酚均为分析纯,购于天津市大茂化学试剂厂;甲醇㊁乙腈㊁无水乙醇均为色谱纯,购于天津市科密欧化学试剂有限公司㊂1.2　仪　器Agilent1200高效液相色谱仪,美国Agilent 公司;色谱柱Eclipse Plus C 18(4.6×250mm,5mm);FR223CN 型电子天平,奥豪斯仪器(常州)有限公司;UV-3200型紫外分光光度计,上海美谱达仪器有限公司;EYELA OSB-2100型油浴锅,上海爱郎仪器有限公司;EYELA N-1100型旋转蒸发仪,上海爱郎仪器有限公司;SK5200HP 型超声清洗器,上海科导超声仪器有限公司㊂2　方法与结果2.1　洛伐他汀的测定方法与结果2.1.1　供试品的制备称取功能性红曲米粉1.000g 于100mL 圆底烧瓶中,加上30mL 无水乙醇,于80℃下回流70min,然后抽滤;取滤液于60℃下旋蒸至干,待冷却后加入2mL 无水乙醇溶解,超声10s,超声时圆底烧瓶360°旋转,转移至10mL 容量瓶中,再加入4mL 无水乙醇溶解(2次),均转入10mL 容量瓶中,定容,摇匀,得红曲米粉提取液;4℃保存待测,测前用0.22μm 滤膜过滤㊂2.1.2　对照品溶液的制备称取0.020g 洛伐他汀至10mL 容量瓶中,加入8mL 无水乙醇,超声5min,放冷后加入无水乙醇稀释至刻度,摇匀得2000μg /mL 的洛伐他汀标准储备溶液㊂2.1.3　洛伐他汀的色谱条件Agilent 1200高效液相色谱仪,色谱柱Eclipse Plus C 18(4.6×250mm,5mm),流动相:甲醇︓0.02%磷酸(V︓V)=75︓25,流速:1.0mL /min,柱温30℃,波长:237nm,进样量:20μL,检测时间:40min㊂2.1.4　洛伐他汀标准曲线的绘制取储备溶液适量,用无水乙醇溶解制成一系列浓度标准溶液(7.8125μg/mL㊁15.625μg/mL㊁31.25μg/mL㊁62.5μg/mL㊁125μg /mL)依次进样,以洛伐他汀浓度为横坐标,峰面积为纵坐标,做回归曲线,见图1㊂回归方程为:y =51.017x+82.405,R 2=0.9999,洛伐他汀质量浓度在7.8125~125μg/mL 范围内与吸收度呈良好的线性关系㊂图1　洛伐他汀标准曲线Fig.1　Lovastatin standard curve2.1.5　洛伐他汀的含量测定样品制备供试品溶液,将红曲米粉提取液从4℃冰箱取出,超声1min,取0.1mL 加0.4mL 无水乙醇,即稀释5倍,经0.22μm 滤膜过滤,再按色谱条件进样20μL (色谱图见图2),测得红曲米粉提取物中洛伐他汀的含量为1.70mg /g㊂结果见表1㊂表1　HPLC 测定洛伐他汀的含量Table 1　HPLC determination of lovastatin编号峰面积/(mAU*s)洛伐他汀浓度/(μg /mL)洛伐他汀含量/(mg /g)洛伐他汀平均含量/(mg /g)11820.8634.081.7021818.3734.031.701.70图2　洛伐他汀对照品(a)和红曲米粉提取液(b)的色谱图Fig.2　Chromatogram of lovastatin control (a)andred yeast rice extract (b)2.2　麦角甾醇的测定方法与结果2.2.1　供试品的制备称取功能性红曲米粉1.000g 于100mL 圆底烧瓶中,加上30mL 无水乙醇,于80℃下回流70min,然后抽滤;取滤液于60℃下旋蒸至干,待冷却后加入2mL 无水乙醇溶解,超声10s,超声时圆底烧瓶360°旋转,转移至10mL 容量瓶中,再加入4mL 无水乙醇溶解(2次),均转入10mL 容量瓶中,定容,摇匀,得红曲米粉提取液;4℃保存待测,测前用0.22μm 滤膜过滤㊂2.2.2　对照品溶液的制备称取0.020g 麦角甾醇至25mL 容量瓶中,加入10mL 无水乙醇,超声5min,放冷后加入无水乙醇稀释至刻度,摇匀得800μg /mL 的麦角甾醇标准储备溶液㊂2.2.3　麦角甾醇的色谱条件Agilent 1200高效液相色谱仪,色谱柱Eclipse Plus C 18(4.6mm×250mm,5mm),流动相:乙腈︓无水乙醇(V︓V)=60︓40,流速:1.0mL /min,柱温30℃,波长:284nm,进样94　广　州　化　工2019年9月量:20μL,检测时间:15min㊂2.2.4　麦角甾醇标准曲线的绘制取储备溶液适量,用无水乙醇溶解制成一系列浓度标准溶液(25μg/mL㊁50μg/mL㊁100μg/mL㊁200μg/mL㊁400μg/mL)依次进样,以麦角甾醇浓度为横坐标,峰面积为纵坐标,做回归曲线,见图3㊂回归方程为:y =20.393x+37.229,R 2=1,麦角甾醇质量浓度在25~400μg /mL 范围内与吸收度呈良好的线性关系㊂图3　麦角甾醇标准曲线Fig.3　Ergosterol standard curve2.2.5　麦角甾醇的含量测定表2　HPLC 测定麦角甾醇的含量Table 2　HPLC determination of ergosterol content编号峰面积/(mAU*s)麦角甾醇浓度/(μg /mL)麦角甾醇含量/(μg /g)麦角甾醇平均含量/(μg /g)11585.6975.93759.3021601.3376.70767.00763.15图4　麦角甾醇对照品(a)和红曲米粉提取液(b)的色谱图Fig.4　Chromatogram of ergosterol reference substance (a)andred yeast rice powder extract (b)样品按方法制备供试品溶液,将红曲米粉提取液从4℃冰箱取出,超声1min,经0.22μm 滤膜过滤,再按色谱条件进样20μL(色谱图见图4),测得红曲米粉提取物中麦角甾醇的平均含量为763.15μg /g㊂结果见表2㊂2.3　辅酶Q 10的测定方法与结果2.3.1　供试品的制备称取功能性红曲米粉1.000g 于100mL 圆底烧瓶中,加上30mL 无水乙醇,于80℃下回流70min,然后抽滤;取滤液于60℃下旋蒸至干,待冷却后加入2mL 无水乙醇溶解,超声10s,超声时圆底烧瓶360°旋转,转移至10mL 容量瓶中,再加入4mL 无水乙醇溶解(2次),均转入10mL 容量瓶中,定容,摇匀,得红曲米粉提取液;4℃保存待测,测前用0.22μm 滤膜过滤㊂2.3.2　对照品溶液的制备称取0.008g 辅酶Q 10至10mL 容量瓶中,加入8mL 无水乙醇,超声5min,定容至10mL,摇匀得800μg /mL 的辅酶Q 10标准储备溶液㊂2.3.3　辅酶Q 10的色谱条件Agilent 1200高效液相色谱仪,色谱柱Eclipse Plus C 18(4.6mm×250mm,5mm),流动相:甲醇︓乙醇(V ︓V)=20︓80,流速:1.0mL /min,柱温30℃,波长:275nm,进样量:20μL,检测时间:30min㊂2.3.4　辅酶Q 10标准曲线的绘制取储备溶液适量,用无水乙醇溶解制成一系列浓度标准溶液(1.5625g /mL㊁3.125μg /mL㊁6.25μg /mL㊁12.5μg /mL㊁25μg /mL)依次进样,以辅酶Q 10浓度为横坐标,峰面积为纵坐标,做回归曲线,见图5㊂回归方程为:y =18.393x +1.223,R 2=1,辅酶Q 10质量浓度在1.5625~25μg /mL 范围内与吸收度呈良好的线性关系㊂图5　辅酶Q 10标准曲线Fig.5　Coenzyme Q 10standard curve2.3.5　辅酶Q 10的含量测定表3　HPLC 测定辅酶Q 10的含量Table 3　HPLC determination of coenzyme Q 10content编号峰面积/(mAU*s)辅酶Q 10浓度/(μg /mL)辅酶Q 10含量/(μg /g)辅酶Q 10平均含量/(μg /g)1126.476.8168.102113.516.1061.0064.55样品按方法制备供试品溶液,将红曲米粉提取液从4℃冰箱取出,超声1min,经0.22μm 滤膜过滤,再按色谱条件进样20μL(色谱图见图6),测得红曲米粉提取物中辅酶Q 10的平均含量为64.55μg /g㊂结果见表3㊂第47卷第18期吕思敏,等:功能性红曲米粉中洛伐他汀和辅酶Q 10等功效成分的含量测定95图6　辅酶Q 10对照品(A)和红曲米粉提取液(B)的色谱图Fig.6　Chromatogram of coenzyme Q 10reference (A)andred yeast rice extract (B)2.4　多糖的测定方法与结果2.4.1　供试品溶液的制备取功能性红曲米粉3g,加入10倍量95%乙醇,回流提取1h,趁热过滤,残渣用5mL 95%乙醇洗涤三次,将残渣与滤纸置于烧杯中,加水50mL,在80℃水浴中加热溶解35min,趁热过滤,残渣用5mL 热水洗涤3次,洗液并入滤液中,移至100mL 容量瓶,冷却至室温,稀释至刻度,得红曲米粉提取液,室温静置㊂2.4.2　对照品溶液的制备称取105℃下干燥至恒重的葡萄糖0.010g,溶于水并定容至100mL,摇匀得100μg /mL 的葡萄糖糖标准储备溶液㊂2.4.3　标准曲线的制备图7　葡萄糖标准曲线Fig.7　Glucose standard curve量取葡萄糖储备溶液(100μg /mL)0.4㊁0.6㊁0.8㊁1.0㊁1.2mL,置于EP 管中,编号,并同时用蒸馏水补至2mL,各加入5%苯酚溶液1mL,摇匀,迅速加入浓硫酸5mL,室温放置5min,在沸水浴中加热20min,冷却至室温,于490nm 处测定吸光度㊂以吸光值为纵坐标,以葡萄糖含量为横坐标,绘制标准曲线,见图7㊂回归方程为:y =0.0124x -0.01,R 2=0.9983,葡萄糖质量浓度在20~60μg /mL 范围内与吸收度呈良好的线性关系㊂2.4.4　多糖的含量测定样品按方法制备供试品溶液,吸取0.1mL 红曲米粉提取液,加水2.4mL,混匀,得稀释25倍后的样品,取稀释后样品2mL,加入5%苯酚溶液1mL,摇匀,迅速加入浓硫酸5mL,室温放置5min,在沸水浴中加热20min,冷却至室温,于490nm 处测定吸光度㊂样品测定结果均应乘以校正因素0.9[10],计算红曲米粉提取物中红曲多糖的平均含量为14.82mg /g㊂结果见表4㊂表4　UV 测定红曲多糖的含量Table 4　UV determination of monascus polysaccharide content编号吸光度值A 红曲多糖浓度/(μg /mL)红曲多糖含量/(mg /g)红曲多糖校正含量/(mg /g)红曲多糖平均含量/(mg /g)10.2319.3516.1214.5120.2420.1616.8015.1214.823　结　论本实验采用冷凝回流的方法提取功能性红曲米粉中洛伐他汀㊁麦角甾醇㊁辅酶Q 10和多糖,并通过HPLC 法测定其中洛伐他汀㊁麦角甾醇和辅酶Q 10的含量,以及通过UV 法(苯酚-硫酸法)测定红曲多糖的含量㊂经检测,每100g 的功能性红曲米粉含洛伐他汀170mg,麦角甾醇76.315mg,辅酶Q 106.455mg,红曲多糖的含量为1.482g㊂洛伐他汀用于预防冠心病等适应症的用量是口服剂量20mg /日,与12g 的功能性红曲米粉相当,且功能性红曲米粉还含有辅酶Q 10,可以对抗洛伐他汀的不良反应,是一个很好的保健食品㊂参考文献[1]　王铁军.水溶性功能红曲粉的制备㊁稳定性及应用研究[D].江南大学,2008.[2]　莫永川,王亚茹,卢俊明.保健食品中洛伐他汀含量测定的研究[J].广东化工,2017,44(13):61-63.[3]　Corrêa,Rúbia C G,Peralta R M,et al.The emerging use ofmycosterols in food industry along with the current trend of extended use of bioactive phytosterols[J].Trends in Food Science &Technology,2017,67:19-35.[4]　张建峰,陈光,周金萍,等.红曲多糖的提取与发酵工艺的优化[J].吉林农业大学学报,2005,27(5):97-100.[5]　丁喜生,吴铁.辅酶Q 10在辅助治疗心力衰竭方面的应用进展[J].广东化工,2014,41(12):99-100.[6]　吴铁,吕思敏,丁喜生,等.以红曲菌丝体为原料提取辅酶Q 10的工艺及生产方法[P].中国:CN201310577271.9,2016-02-03.[7]　吕思敏,于琼,司徒永立,等.含辅酶Q 10和洛伐他汀的红曲提取物对大鼠胫骨形态的骨计量学观察[J].中国骨质疏松杂志,2016,22(11):1469-1476.[8]　吕思敏,于琼,司徒永立,等.含辅酶Q 10的红曲胶囊对去卵巢合并D-半乳糖大鼠股骨的影响[J].中国药理学通报,2016,32(9):1253-1259.[9]　吕思敏,于琼,司徒永立,等.含辅酶Q 10和洛伐他汀的红曲胶囊对老年性骨质疏松大鼠腰椎骨丢失的改善作用[J].中国医药导报,2017,14(31):31-35.[10]李松林,任延军,崔熙.猪苓多糖测定计算方法的探讨[J].中成药,1994(2):57.。

红曲米功能成分的提取与活性评价红曲米是一种被广泛应用于中国传统食品和中药的天然色素，主要产自由红曲霉（Monascus purpureus）发酵的稻谷或其他谷物中。

近年来，人们对红曲米的研究重点从其色素逐渐转向其功能性成分。

本文将探讨如何提取红曲米的功能成分，并对其活性进行评价。

1. 红曲米的功能成分红曲米中含有多种功能性成分，其中最重要的是单宁酸类、多酚类、黄酮类、生物碱类化合物和酶类等。

这些成分对人体有多种保健功效，如降低血脂、降低血压、抗氧化、抗肿瘤等。

2. 红曲米功能成分的提取方法目前，常用的提取方法有乙醇提取、水提取和超临界流体提取。

其中，乙醇提取是目前应用最广泛的方法。

乙醇提取法操作简单，提取效率高，且提取产物的稳定性和纯度较高。

以80%乙醇为提取溶剂，提取温度为60℃，提取时间为2h，可获得较理想的红曲米提取物。

3. 红曲米功能成分的活性评价红曲米中的功能性成分对人体有多种保健功效，但这些功效是否真实存在，需要通过活性评价来验证。

目前，常用的活性评价方法有体外抗氧化活性评价、体外抗炎活性评价、体外抗菌活性评价、血脂调节功能评价和临床型研究等。

在体外抗氧化活性评价中，DPPH自由基清除实验是最常用的方法。

该方法在非酶促条件下，利用DPPH自由基的紫色溶液和受测样品产生反应，通过比较样品的清除能力和维生素C标准溶液的清除能力，来评价样品的抗氧化能力。

结果表明，红曲米提取物对DPPH自由基的清除能力较强。

在体外抗炎活性评价中，最常用的方法是通过检测白细胞介素（IL）和肿瘤坏死因子（TNF）等分泌物的浓度来评价样品的抗炎能力。

结果显示，红曲米提取物对IL-1β、IL-6、TNF-α等炎症因子的分泌具有明显的抑制作用。

在体外抗菌活性评价中，红曲米提取物对多种细菌和真菌具有较强的抑制作用，尤其是对金黄色葡萄球菌和白色念珠菌的抑制作用最强。

在血脂调节功能评价中，通过对实验动物进行高脂饲料和高胆固醇饲料诱导，同时口服不同剂量的红曲米提取物，来观察红曲米对血脂的影响。

HPLC测定红曲中7种核苷类成分的含量引言红曲是一种传统的食用发酵食品，具有丰富的营养和独特的风味，被广泛应用于食品加工和药品制备领域。

红曲中含有丰富的核苷类成分，这些核苷类成分对人体健康具有重要的生理功能。

对红曲中核苷类成分的含量进行准确测定具有重要的意义。

HPLC（高效液相色谱）是一种高效、快速、准确的分析技朧，已被广泛应用于食品、药品等领域。

本文旨在利用HPLC技朧对红曲中7种核苷类成分的含量进行测定，为红曲的质量控制和功能性研究提供科学数据支持。

材料与方法1.实验仪器与试剂- HPLC系统- 色谱柱：C18色谱柱- 针筒滤膜：0.45μm- 紫外检测器：254nm- 甲醇、乙腈、磷酸盐缓冲液等2.样品处理将红曲样品研磨成粉末，加入适量的甲醇进行超声提取，离心后取上清液，经过滤膜过滤，以得到待测样品溶液。

3.色谱条件- 流动相：甲醇-磷酸盐缓冲液（75:25）- 流速：1.0ml/min- 注射体积：10μl- 柱温：25℃- 检测波长：254nm4.标准曲线制备选取腺苷、鸟嘌呤、肌苷、尿苷、胞苷、胸苷、腰氨酸为标准品，分别称取不同浓度的标准溶液，进行色谱测定，得到标准曲线。

5.含量测定将待测红曲样品溶液进行HPLC色谱测定，根据标准曲线计算出各核苷类成分的含量。

结果与讨论通过HPLC测定，得到红曲中腺苷、鸟嘌呤、肌苷、尿苷、胞苷、胸苷、腰氨酸的含量分别为XXX，XXX，XXX，XXX，XXX，XXX，XXX。

通过对测定结果的统计分析，发现红曲中腺苷和尿苷含量较高，而鸟嘌呤和腰氨酸的含量较低。

红曲中核苷类成分的含量与红曲的品种、生长地点、发酵工艺等因素密切相关。

本研究结果为红曲的质量控制和功能性研究提供了重要的数据支持。

在今后的研究中，可以进一步探究红曲中核苷类成分与其营养保健功能之间的关系，为红曲的深加工和开发提供更加科学的指导。

红曲胶囊研究研究者：陈吉顺王芳2010年4月8日杭州三才健康科技有限公司让我们拥有健康、享受生活请上或拨打热线电话*************E-mail：scjk100＠三才健康科技首推的产品——“奔马”牌圣曲系列红曲胶囊。

该产品的批准文号：国食健字G2*******号。

产品上市以来，销量一直在上升，目前已经有两百多家经销店在经销该产品。

(蓝帽子图片)红曲是寄生在红曲米上，发酵提取的活性生物菌。

（冯董和远藤章照片）上世纪七十年代，日本学者远藤章根据《本草纲目》上记载红曲的“活血”功效的启示，从红曲霉菌的次生级代谢产物中发现了能够降低人体血清胆固醇的物质莫纳可林K（Monacolin-K），从而引起世界的关注。

此后30多年来，各国的研究人员，尤其是中国和日本的研究人员对红曲进行了大量的研究和开发。

与此同时，美国默克公司的研究人员也从土曲霉的代谢物中分离出了具有降胆固醇作用的莫维诺林（Movinolin），并申请了专利，被命名为洛伐他汀（Lov astatin）。

（洛伐他汀图片）1987年世界上第一只洛伐他汀类的药品经美国食品和药品管理局（FDA）批准上市，他汀类药物的出现大大降低了心脑血管疾病患者的死亡率，威胁人类生命健康的第一杀手遭到前所未有的阻击。

到目前为止，他汀类药被临床证明是用于治疗高胆固醇血症和混合型高血脂症最有效的药品，在世界药品销售世上跃居第二位，仅次于青霉素。

目前在我国临床应用于治疗高胆固醇血症和混合型高血脂症的药品，主要还是这一类他汀药品。

市场上常见的包括洛伐他汀(来适可）、普伐他汀（普拉固、美百乐镇）、辛伐他汀（舒降之辛可新达苏）、阿托伐他汀（立普妥阿乐）、瑞舒伐他汀（可定）等，都是以洛伐他汀（Lovastatin）为主原料制成的。

他汀类药物共有六大功能：1、稳定斑块预防其破裂；2、降低血浆纤维蛋白原含量、减少血小板活性、抑制血小板活动物质的释放；3、通过自身充当抗凝物而改善血液的高凝状态，尤其是对高纤维蛋白原、高胆固醇血症所导致的血液粘稠度增高、血栓危险性大的病人可能更有意义；4、通过降低血液粘稠度而预防血栓的形成；5、降低低密度脂蛋白胆固醇（坏胆固醇）在体内的氧化；6抑制血管平滑肌细胞的增值。