生物：1.1《微生物的培养与应用》江苏专用课件(苏教版选修1)

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探究点一 探究点二 探究点三 探究点四
探究点一 探究点二 探究点三 探究点四
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探究点一 探究点二 探究点三 探究点四
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第一章 无菌操作技术实践
第一节 微生物的分离和培养
一二三四
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一二三四
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探究点一 探究点二 探究点三 探究点四
探究点一 探究点二 探究点三 探究点四
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探究点一 探究点二 探究点三 探究点四
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探究点一 探究点二 探究点三 探究点四

微生物产生纤维素酶，将纤维素分解 为纤维二糖或葡萄糖，使纤维素—刚 果红复合物降解而出现透明圈
土壤取样―→制备培养基 ―→样品梯度稀释―→涂布 平板―→培养观察
土壤取样―→制备培养基―→选择培 养―→梯度稀释―→涂布培养―→刚 果红染色―→挑取菌落―→进一步鉴 定
第二页，共34页。
饲养动物常用的植物饲料中含有难溶的植酸钙 等物质，很难被动物吸收利用，还影响对其他营养物质的利 用。若在饲料中添加植酸酶，则能催化其水解成为可以吸收 利用的磷酸盐等。以下是科研人员从作物根部土壤中分离产 植酸酶的菌株的过程示意图。请分析作答。
第十页，共34页。
3．到相应环境条件中或创造相应环境条件来筛选希望得 到的目的菌株。如在高温热泉或海底火山口、或高温后沸水 中寻找耐热菌(或酶)，冰层中或冰箱冷冻条件中寻找抗寒菌 (或酶)；在缺氧的条件下选择培养厌氧微生物；在盐碱条件 下寻找耐盐碱抗高渗透压的微生物；在不同 pH 下筛选嗜酸 碱微生物等。
第十二页，共34页。
氯苯化合物是重要的有机化工原料，因其不易 降解，会污染环境。某研究小组依照下列实验方案(如图甲) 筛选出能高效降解氯苯的微生物 SP1 菌。培养基配方如下表。
第十三页，共34页。
图甲
液体 培养 基
Ⅰ号
Ⅱ号
蛋白 胨
10 g －
牛肉 膏
5g －

Ⅲ号 － －
氯苯
氯化 硝酸 无机盐 钠 铵 (无碳)
第二十三页，共34页。
2．(2013·大同高二检测)下列关于配制培养基的叙述中， 正确的是( )
A．制作固体培养基必须加入琼脂 B．加入青霉素可得到放线菌 C．培养自生固氮菌不需氮源 D．发酵工程一般用半固体培养基
第二十四页，共34页。

营养要素
来源
功能
碳源
无机碳源 CO2、NaHCO3等无机碳源
有机碳源
糖有类机、石油、花生粉饼等
__________碳源
能为微生物的代谢提供碳元素 的物质
无机氮源 N2、NH3、NO3-、NH4+等
氮源
牛肉膏 蛋白胨
有机氮源
维蛋白生质素、氨基酸、碱尿基素、
________、________等
能为微生物的代谢提供氮元素 的物质
2．培养基分类和应用
划分标准 培养基种类
特点
用途
液体培养基 不加凝固剂
物理
琼脂
性质 半固体培养基 加凝固剂，如__________
固体培养基
工业生产
观察微生物的运 动、分类、鉴定
微生活物分菌离计、数鉴
定、________
化学 成分
天然培养基 合成培养基
用途
选择培养基
含化学成分不明确的天然物质
工业生产
管号 苯酚浓度(mg/L)
1
2
3
4
5
6
1
一轮复习之专题：
考纲要求：1.微生物的分离与培养（B）
考查内容：1.培养基的制备 2.微生物的接种技术 3.微生物的分离
考查形式：多结合微生物代谢的 特点,考查微生物的分离 与培养的相关内容
活动一：培养基
1.培养基的营养要素：碳源、氮源、无机盐、水、生长因子等。
（4）分离培养酵母菌通常使用_麦___芽__汁__琼_ 脂（填“牛肉膏蛋白胨”“MS”或 “程麦中无无芽需汁保琼证脂充”）足培的养营基养，和步氧骤__⑤气_中__，_为__使_酵供母应数。量迅速增加，培养过
中，对环境有严

如草履虫、单细胞藻类等
答：平板冷凝后，皿盖上会凝结水珠，凝固后的培养基表面的湿度也比较高，将平板倒置，既可以使培养基表面的水分更好地挥发，又
可答以：防 通高止过压皿灼盖烧蒸上灭的菌汽水，灭珠防落止菌入瓶培口锅养的基微的，生使造物成污用污染染培步。养骤基。：
依Na配cl方1计、算5g各加成分水的：用量使用前加人适量的水
请你判断以下材料或用具是否需要消毒或灭 f、试管口和接种环过火灭菌
f、试管口和接种环过火灭菌
菌。如果需要，请选择合适的方法。 你用什么办法来估计培养基的温度？
分离
鉴定
吸管头不要接触任何其他物体、
（1） 培养细菌用的培养基与培养皿 70~75℃、30min
稀释涂布法是将菌液进行一系列梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。
6.搁置斜面或倒平板：
温度冷却至50℃左右将试管枕在1cm的木条上，斜面长度不超 过试管总长的1/2
约50℃
倒平板
灼烧灭菌，
防止瓶口的微生物污染培养基
防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染
1.培养基灭菌后，需要冷却到50 ℃左右时，才 能用来倒平板。你用什么办法来估计培养基的温度？
答：可以用手触摸盛有培养基的锥形瓶， 感觉锥形瓶的温度下降到刚刚不烫手时，就可 以进行倒平板了。
盖与皿底之间的部位，这个平板还能用来培养微生 物吗？为什么？
答：空气中的微生物可能在皿盖与皿底之间的
培养基上滋生，因此最好不要用这个平板培养微
生物。
二.斜面接种和培养大肠杆菌：
1、斜面接种大肠杆菌的目的： 菌种转移、扩大培养、保存纯净菌种等
2、步骤： a、点燃酒精灯
b、灭菌接种环

一、培养基
2.类型
液体培养基
据物理性质分 加琼脂
固体培养基
天然培养基 据化学成分分 合成培养基
选择培养基 据用途分
鉴别培养基
一、培养基ຫໍສະໝຸດ 3.营养要素碳源 氮源 无机盐 水
凡能提供所需碳元素的物质 凡能提供所需氮元素的物质
还需满足微生物生长对pH、特殊营养物质 以及氧气的要求。 维生素
二、无菌技术
自主学习： 1.获得纯净培养物的关键： 防止外来杂菌的入侵 2.无菌技术包括： 3.消毒与灭菌： 定义、区别、方法
灼烧灭菌
干热灭菌箱
高压蒸汽灭菌箱
高压蒸汽灭菌法的基本步骤
加水
装锅
加热排气 保温保压 高压蒸汽灭菌箱 出锅
19世纪中期，法国酿酒业遭受毁灭 性打击，葡萄糖酒在生产过程中变 酸。
巴斯德发现其根源在于发酵 物中混入了杂菌。
基础知识
一、培养基 1.何为培养基？ 2.按照物理形态、化学成分、用途分，培养基的种类有哪 些？ 3.各种培养基的具体配方不同，但其基本成分都相同，都 包括哪些营养成分？
一、培养基
1.概念： 人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长 繁殖的营养基质。 2.类型：

根据细胞生存所需物质的 种类和数量，用人工方法模 拟合成的。
合成培养基主要成分是 氨基酸、维生素、碳水化合 物、无机盐和其它一些辅助 物质。
优点：标准化生产，组分 和含量相对固定;成本低
缺点： 缺少某些成分，不 能完全满足体外细胞生长需 要。
天然培养基：
天然培养基有血清、 血浆、和组织提取液 （如鸡胚和牛胚浸 液）。 优点：营养成分丰富， 培养效果好 缺点：来源受限;成分 复杂，影响对某些实 验产物的提取和实验 结果的分析;易发生支 原体污染;
操作步骤
1．计算 2．称量 3．溶化 4．灭菌 5．倒平板
倒平板技术
1.培养基灭菌后，需要冷却到50 ℃左右时， 才能用来倒平板。你用什么办法来估计培养基的 温度？
答：可以用手触摸盛有培养基的锥形瓶， 感觉锥形瓶的温度下降到刚刚不烫手时，就可 以进行倒平板了。
2.为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰？
菌落
单个或少数 细菌在固体 培养基上大 量繁殖时， 就会形成一 个肉眼可见 的，具有一 定形态结构 的子细胞群 体。
放线菌
1、结构： ➢单细胞原核 ➢分支状的菌丝（基内菌丝、气生菌丝）
应用:
链霉素、土霉素、四环素、 氯霉素、红霉素、庆大霉素
微生物中发现了几千种抗生素， 其中2/3是由放线菌产生的
碳源:
凡能为微生物提供生长繁殖所需碳元素的营养物质 来源：周围环境中的有机物质，常用的有糖类等
氮源：凡能为微生物提供所必需氮元素的营养物质
来源：周围环境中得有机无机含氮物质 作用:主要用于合成蛋白质，核酸以及含氮的代谢产物
能源:
能为微生物生命活动提供最初能源来源的营养物质 或辐射能
生长因子：微生物生长不可缺少的微量有机物