招财鱼诺卡氏菌病的组织病理学研究

乌鳢诺卡氏菌病的组织病理和超微病理观察王桢;葛明峰;徐益军;王国良【摘要】采用组织学方法，获得患诺卡氏菌病乌鳢的脾、肾、肝、肌、鳃、肠6种组织，利用组织切片及超薄切片电镜技术对患病组织的病理变化进行观察分析，探究该病的致病机制。

解剖病理症状为：体表充血有溃疡，腹部膨大有腹水，脾、肾、肝等内脏有大量白色结节。

组织病理显示：病鱼各器官组织普遍存在慢性肉芽肿，中心由坏死的组织碎片和聚生菌体组成，外围有大量的炎性细胞浸润，结节周围的实质组织主要表现为肿胀、萎缩、增生和坏死脱落现象。

超微病理显示：宿主器官组织细胞扩张，细胞质内溶酶体增多，核肿大或固缩溶解，细胞器缺失溶解，线粒体嵴断裂消失呈坏死性病变，肾脏及肝脏细胞中有大量病原菌寄生，细胞发生脂肪、空泡及纤维样变。

实验结果表明：乌鳢诺卡氏菌病的组织细胞结构发生明显的病理变化，肾脏、肝脏和脾脏等主要组织器官受到严重的损伤病变，从而影响鱼体的正常生理机能，最终导致死亡。

%The spleen, kidney, liver, muscle, intestine and gill obtained from Ophicephalus argus infected with Nocardiosis are pathologically analyzed using tissue slices and ultramicrocut electron microscopy techniques. The pathogenic mechanism of this disease is then discussed. The anatomical symptoms show ulceration hemorrhage on surface, abdomen intumescence with ascites. Spleen, liver, kidney and other visceras show abundent white nodules. The histopathology indicate that chronic granulomatous is widespread in the organs and tissues of the infected fish, and its center consists of necrotic tissue fragments and poly wild type strain surrounded by a large number of inflammatory cell infiltration. In addition, parenchyma surroundingnodules reveal swelling, atrophy, hyperplasia and necrosis. The findings in ultrastructure indicate the expansion in host tissue cell, the increasing lysosomes in the cytoplasm and nuclear enlargement or condensation dissolved. Organelles are missed or dissolved, mitochondrial cristae are disappeared and become necrotic lesions. Kidney and liver cells carry abundent parasitic pathogens and fat, vacuoles and fiber degeneration occurred. The results manifest that pathological changes of Nocardiosis are widely found in the tissue cells, causing serious damage to body organs such as spleen, kidney and liver. The loss of the normal physiological metabolism is the major cause leading to their eventual death.【期刊名称】《宁波大学学报（理工版）》【年(卷),期】2015(000)002【总页数】6页(P13-18)【关键词】乌鳢;诺卡氏菌病;组织病理;超微病理【作者】王桢;葛明峰;徐益军;王国良【作者单位】宁波大学应用海洋生物技术教育部重点实验室，浙江宁波 315211;宁波大学应用海洋生物技术教育部重点实验室，浙江宁波 315211;宁波大学应用海洋生物技术教育部重点实验室，浙江宁波 315211;宁波大学应用海洋生物技术教育部重点实验室，浙江宁波 315211【正文语种】中文【中图分类】S941.42乌鳢(Ophiocephalus argus, Cantor)俗称黑鱼、乌鱼、蛇头, 隶属于鲈形目鳢科, 在我国分布广泛,为凶猛的肉食性经济鱼类. 随着养殖规模的快速扩大, 养殖面积和密度的不断增加, 加上养殖环境污染的日趋严重, 管理技术的落后, 使得乌鳢病害发生的频率与规模亦呈逐年上升趋势. 近年来流行的乌鳢诺卡氏菌病在浙江、江苏、江西、安徽、广东等省份危害甚大, 因防治难度大而造成的经济损失亦很大, 并已引起高度重视. 该病的病原菌为鱼诺卡氏菌(Nocardia seriolae), 可导致鱼体表充血、溃烂, 脾、肾、肝等内脏肿大, 以脏器呈现大量乳白色结节为主要病症[1]. 浙江省的杭州、余杭、萧山和绍兴等地危害尤为严重, 平均发病率达35%～45%, 发病死亡率高达100%. 目前尚无有效治疗方法.组织病理观察是病理学研究的重要手段之一,相关学者已对黄尾(Seriola quinqueradiata)[2-3]、大口黑鲈(Micropterus salmoides)[4]、大西洋鲑(Sal-mo salar)[5]、花鲈(Lateolabrax japonicus)[6]等鱼类诺卡氏菌病进行了组织病理学研究. 本研究从组织病理和超微病理层面对患诺卡氏菌病乌鳢主要病变器官的病理变化进行了观察分析, 以期探讨该病的病变过程及发生机理, 为临床诊断和防控研究提供理论基础和科学依据.1.1 实验用鱼患病乌鳢于2006年6月及2007年5月分别采自浙江萧山和余杭乌鳢养殖池塘, 体长30～35cm,体重250～400g. 健康乌鳢采自同一地区的乌鳢养殖池塘, 经检查确认无病后作为对照使用.1.2 实验方法1.2.1 解剖观察常规显微镜检查病鱼体内外有无寄生虫. 活体解剖具典型症状的濒死乌鳢, 观察病鱼体表与内脏组织病变情况, 并与健康鱼进行比较, 以确定该病主要病变情况及病变部位, 并以此为依据合理选择组织切片的病理材料.1.2.2 组织病理样品制备及观察取患病乌鳢与健康乌鳢的脾、肾、肝、肌、鳃、肠6种组织, 用Bouin’s液固定24h, 直接用70%酒精洗数次, 用70%～100%酒精逐级脱水45～60 min, 二甲苯透明, 石蜡包埋, KD-202切片机切片, H-E染色, 中性树胶封片, T2-7E03680型Olympus显微镜下观察拍照.1.2.3 超微病理样品制备及观察取患病乌鳢与健康乌鳢的脾、肾、肝3种组织,切成0.5～1.0 mm3的小块, 用2.5%戊二醛和1%锇酸双固定(戊二醛和锇酸均用pH 7.4的0.2mol·L-1磷酸缓冲液, 按照体积比配制), 4%醋酸铀染色30 min. 酒精逐级脱水后, 用100%丙酮脱水. 无水丙酮与包埋剂渗透组织, 震荡, 包埋, 并置烘箱内于37℃、45℃和60℃逐级聚合.修块, 用RMC超薄切片机制备100～120nm切片, 醋酸铀和柠檬酸铅染色, TECNAI 10型透射电子显微镜观察拍照.2.1 病鱼症状与解剖观察病鱼体表溃烂, 鳍条充血, 部分病鱼眼球突出,腹部膨大, 腹水严重. 解剖观察, 内脏有明显的病变, 脾、肾、肝等内脏稍有肿大, 且有大量乳白色结节(图1), 直径1～5mm. 取结节内物质作涂片,镜检发现大量长杆状、短杆状或分枝状的革兰氏阳性菌体. 病鱼的体表及内脏器官经常规显微镜检测, 未见有寄生虫.2.2 组织病理变化与健康乌鳢比较, 患病乌鳢脾脏、肾脏、肝脏、肌肉、鳃、肠道组织均表现有明显的病理变化. 肉芽肿炎症普遍存在于患病乌鳢各器官, 炎症中心滋生大量菌体, 组织、细胞变性或坏死.2.2.1 脾脏健康乌鳢脾脏组织内部有脾髓, 除淋巴细胞外, 还含有大量红细胞及结缔组织的原纤维(图2-1). 病鱼脾脏组织有大量结节(即肉芽肿), 中心由坏死的组织碎片和聚生菌体组成, 外包数层类上皮细胞和成纤维细胞; 脾窦和脾索结构不清晰,脾内血管充血, 可见大量渗出性红细胞(图2-2).2.2.2 肾脏健康乌鳢肾脏实质均匀, 结构完整. 肾小管上皮细胞排列整齐, 界线清晰, 管腔明显(图2-3). 病鱼肾脏组织充满大量大小不等肉芽肿病灶, 外层成纤维细胞增生并包围病变组织, 其结构致密、分界清楚, 且明显地压迫肾实质组织(图2-4及2-5).2.2.3 肝脏健康乌鳢肝脏组织结构清晰, 肝索由中央静脉向四周呈放射状, 肝细胞呈多角状, 排列均匀规则. 同大多数鱼类一样, 乌鳢胰腺组织分散地位于肝组织之间(图2-6). 病鱼肝脏组织有肉芽肿病灶,中心成纤维细胞转化为由胶原纤维组成的瘢痕,肝实质细胞病变严重, 呈空泡样坏死, 大量炎症细胞浸润, 肝组织脂肪变性(图2-7).2.2.4 肌肉健康乌鳢肌纤维排列紧密有秩, 横纹清晰, 肌浆均匀充斥于肌纤维间质中(图2-8). 病变肌肉组织中肌纤维肿胀变性、断裂和不规则聚集, 整个肌纤维束呈团块状, 横纹模糊不清或消失, 肌间隙增宽, 水肿(图2-9).2.2.5 鳃健康乌鳢的鳃小片由上皮组织、结缔组织、毛细血管等构成, 其上皮组织中扁平细胞单层有序排列, 细胞核圆形或椭圆形. 软骨组织细胞排列致密, 核清晰可见(图2-10). 病鱼结缔组织纤维化,细胞空泡样变性, 出现大量肉芽肿病灶(图2-11);鳃小片水肿, 与软骨组织间隙增宽, 上皮细胞肿胀、变性及脱落(图2-12).2.2.6 肠健康乌鳢肠道组织可以分为黏膜、肌层和浆膜三层. 黏膜层表面衬裱着单层柱状上皮细胞, 杯状细胞分布其中, 细胞界限清晰, 核靠近细胞基部(图2-13). 病鱼肠道黏膜下层明显增厚, 可见较大的肉芽肿炎症病灶, 边界清楚, 纤维外膜较厚, 结缔组织空泡样变性严重(图2-14); 黏膜上皮细胞肿胀, 大多坏死脱落, 细胞界限不明显, 核聚生, 杯状细胞消失; 肌层增厚, 肌纤维排列松散(图2-15).2.3 超微病理变化电镜观察结果显示, 在病鱼的脾、肾、肝等组织未见病毒颗粒、类立克次体等其它原核生物体,但组织细胞病理变化明显, 观察到的菌体细胞形态结构与所分离的鱼诺卡氏菌相同.2.3.1 脾脏正常乌鳢脾脏内淋巴细胞相对较多, 呈圆形或椭圆形, 核质比例较大, 且位于细胞中央, 核内异染色质浓聚(图3-1). 病鱼脾脏组织中红细胞聚集, 细胞核空泡化甚至坏死; 淋巴细胞内核变性或消失成空泡, 核内染色质边集; 细胞界限不清, 胞质坏死, 溶解(图3-2).2.3.2 肾脏正常乌鳢肾小球上皮细胞足突清晰, 类似微绒毛; 血管球毛细血管管腔分明, 红细胞清晰可见;近曲小管管壁由单层上皮细胞构成, 游离端具刷状缘, 排列紧凑, 界限清晰(图3-3). 病鱼肾近曲小管上皮细胞颗粒变性明显, 溶酶体大量增多, 细胞内有大小不等的空泡, 细胞结构消失, 崩解(图3-4);上皮细胞空泡化, 细胞核染色质聚集, 细胞趋向坏死(图3-5); 某些细胞在胞核附近有大量菌体聚集,外围被纤维变性胞质包裹缠绕, 胞浆内线粒体结构模糊(图3-6).2.3.3 肝脏正常乌鳢的肝细胞呈多边形, 边界清楚, 核圆形位于细胞中央, 胞质含有丰富的细胞器及内含物, 线粒体多, 嵴排列规则, 内质网绕细胞核质呈环状排列(图3-7). 病鱼肝脏细胞胞膜消失, 界限不清, 出现较多合胞体结构, 脂滴大量增多, 空泡化病变, 细胞核染色质稀薄或解体(图3-8). 内质网肿胀、变性, 细胞中有大量菌体, 附生部位胞质均伴有纤维样变性(图3-9).乌鳢诺卡氏菌病典型病症是鱼体腹部膨大且充满腹水, 心脏、脾脏、肾脏、肝脏有大量乳白色结节, 与资料报道的大西洋鲑、花鲈、大黄鱼、斑鳢等水产养殖动物感染诺卡氏菌病症状相似[5-8,11].组织病理学研究表明, 乌鳢诺卡氏菌病与不同地区患诺卡氏菌病的五条[3]、大西洋鲑[5]、花鲈[6]和斑鳢[11]等组织病理学研究具有相似的病理学特征. 病鱼病变组织中的大量结节为典型的肉芽肿, 中心由坏死的组织碎片和聚生菌体组成, 外围有大量的炎性细胞浸润, 外包数层类上皮细胞和成纤维细胞(即肉芽组织). 而结节周围的实质组织主要表现为肿胀、萎缩、增生和坏死脱落现象,并伴有脂肪变性、空泡变性和纤维样变性, 另有大量炎症细胞浸润. 此外, 本研究在肉眼观察症状不典型的鳃和肠道组织中, 也出现一定数量的肉芽肿病灶. 尽管肉芽肿病灶普遍存在, 但各组织器官肉芽肿炎症病灶的多少、中心坏死区的大小和周边纤维外膜的厚薄等均有差异. 这可能跟病原菌对器官和组织的嗜性有关, 如病鱼的脾脏、肾脏、肝脏均有大量肉芽肿炎症病灶分布, 且中心坏死区较大, 某些炎症中心还包含几个大小不等的肉芽组织, 其中尤以肾脏最为典型. 但因鱼的种类不同,导致病变程度及器官亦有差异, 资料报道曾在大口黑鲈的鳔中发现结节[4], 斑鳢的卵巢和肌肉内发现肉芽肿[11]以及虹鳟鱼的脑中发现结节性坏死[10].超微病理学研究发现, 患病乌鳢主要内脏器官超微病理变化严重, 脾脏、肾脏和肝脏细胞均出现明显的病变. 肾脏和肝脏细胞中均有大量病原菌寄生, 宿主细胞明显扩张, 核肿大或固缩, 并开始溶解; 细胞器稀少, 并伴有肿胀、溶解, 如线粒体嵴断裂消失, 呈坏死性病变. 部分细胞胞质内溶酶体增多, 肾脏和肝脏细胞发生脂肪样变、空泡样变和纤维样变. 这些均是器质性、不可逆转性的超微病理变化. 该病以鱼体脏器炎性肉芽肿为主要症状, 此与资料报道养殖乌鳢类立克次氏体感染的超微病理研究结果相似[12-13]. 这反映了不同病原体可引起相似的病理变化特征, 仅从超微病理观察判定某种疾病种类是不够的, 还应准确鉴定病原体.诺卡氏菌在自然界中广泛分布, 如土壤、活性污泥和水体中. 淡水环境中诺卡氏菌的含量不明,且诺卡氏菌属内种类是否均有致病性尚无定论,但作为乌鳢诺卡氏菌病病原菌的鱼诺卡氏菌(Nocardia seriolae)对水产动物的致病性已被广泛证实[6-7]. 笔者在前期进行的人工感染试验结果显示, 病原菌可从鱼类的鳃、消化道和损伤部位进入体内, 引起脾、肾、肝等内脏器官发生严重结节性病变[14]. 因内脏器官均是与血液循环紧密相连, 组织病理观察发现病鱼鳃和肠道组织中均有大量菌体聚生的肉芽肿性炎症病灶, 由此推断病原菌可能从鳃和消化道部位进入, 通过血液循环而到达各内脏器官, 在其中寄生并大量繁殖, 形成菌丝体或菌团. 在机体免疫反应的作用下, 形成结节性的肉芽肿, 并逐步造成周围实质组织发生病变, 从而影响器官的正常生理机能.此外, 从组织病理特征和人工感染病症复制时效分析, 病原菌的毒性可能较小, 它并非依靠分泌毒素而危害宿主, 而是通过病原菌数量增殖, 造成组织器官的严重损伤. 所以, 诺卡氏菌病为慢性感染症, 病程较长, 前期无症状或症状不明显, 这给该病的早期诊断和预防带来困难, 一旦发现有病症出现, 内脏器官已经受到严重损害, 而难以治愈. 因此研究早期诊断技术对预防和控制该病的发生和发展具有重要的理论意义和实际应用价值.【相关文献】[1] 王国良, 徐益军, 金珊, 等. 养殖乌鳢诺卡氏菌病及其病原研究[J]. 水生生物学报, 2009, 33(2)：277-283.[2] Kubota S, Kariya T, Nakamura Y, et al. Nocardial infection on culture yellow tail (Seriola quinqueradiata and S.purpurescens). II. Histological study[J]. Fish Pathology, 1968(3)：24-33.[3] Kumamoto H, Horita Y, Hatai K, et al. Studies on fish nocardiosis. I. Comparison in the histopathology of both yellow tails,Seriola quinqueradiat, experimentally inoculated andthose naturally infected withNocardiakampachi[J].Bulletin of the Nippon Veterinary Zootechnical College, 1985, 34：100-118.[4] Lai K C, Chen S N, Kou G H. Studies on the infection ofNocardiasp. in cultured largemouth bass (Micropterus salmoides, Lacepede)[J]. Coa Fish Ser, 1991, 29：1-15. [5] Bransden M P, Carson J, Munday B L, et al. Nocardiosis in tank-reared Atlantic salmon,Salmo salarL[J]. Journal of Fish Diseases, 2000, 23(1)：83-85.[6] Chen S C, Lee J L, Lai C C, et al. Nocardiosis in sea bass,Lateolabrax japonicus, in Taiwan[J]. Journal of Fish Diseases, 2000, 23(5)：299-307.[7] Wang G L, Yuan S P, Jin S. Nocardiosis in large yellow croaker,Larimichthyscrocea(Richardson)[J]. Journal of Fish Diseases, 2005, 28：339-345.[8] 袁思平, 王国良, 金珊. 养殖鱼类致病诺卡氏菌研究进展[J]. 微生物学通报, 2006, 33(2)：137-139.[9] Friedman C S, Beaman B L, Chun J, et al.Nocardia crassostreaesp nov, the causal agent of nocardiosis in Pacific oysters[J]. Int J Syst Bacteriol, 1998(1)：237-246. [10] Snieszko S F, Bulloch G L, Dunbar C E, et al. Nocardial infection in hatchery-reared fingerling rainbow trout (Salmo gairdneri) [J]. Journal of bacteriology, 1964, 88：1809-1810.[11] Chen S C, Tung M C, Tsai W C. An epizootic in Formosa snake-head fish (Channa maculataLacepede), caused byNocardia asteroidesin fresh water pond in Southern Taiwan[J]. Coa Fish Ser, 1989, 15：42-48.[12] 郭琼林, 贾伟章, 孙晓凤, 等. 养殖乌鳢类立克次体感染的组织病理学研究[J]. 水生生物学报, 2007, 31(1)：45-52.[13] 郭琼林, 孙晓凤, 贾伟章, 等. 养殖乌鳢类立克次体感染的超微病理学研究[J]. 水生生物学报, 2007, 31(2)：265-271.[14] Wang G L, Xu Y J, Jin S, et al. Nocardiosis in snakehead,Ophiocephalus argusCantor[J]. Aquaculture, 2007, 271：54-60.。

水产动物诺卡氏菌病防控技术的研究进展作者：陈言峰范祖游王子涛等来源：《安徽农业科学》2015年第13期摘要综述了国内外有关水产动物诺卡氏菌病的诊断技术与防治方面的研究进展和存在的问题，并对水产养殖诺卡氏菌病提出了预防措施，旨在为该病防控的研究提供参考。

关键词水产动物；诺卡氏菌病；防控技术中图分类号 S941 文献标识码 A 文章编号 0517-6611（2015）13-170-03Abstract The research progresses on diagnosing， preventing and controling nocardiosis in cultured aquatic animals and existing problems at home and abroad were reviewed， and some prevention measures to this disease in aquaculture industry were put forward. The aim is to provide references to prevent and control nocardiosis.Key words Aquatic animals； Nocardiosis； Prevention and control technology诺卡氏菌（Nocardia）是隶属放线菌目（Actinomycetales）、诺卡氏菌科（Nocardiaceae）[1]的一类革兰氏阳性丝状杆菌，广泛分布于土壤和水体中，是人类和动物重要的条件致病菌。

近年来，诺卡氏菌病（Nocardiosis）对全球的水产养殖业造成了严重的经济损失[2]。

目前，能引起水产动物诺卡氏菌病的病原有鰤鱼诺卡氏菌（Nocardia seriolae）[3-6]、星状诺卡氏菌（N.asteroids）[7-8]、粗形诺卡氏菌（N.crassostreae）[9]与杀鲑诺卡氏菌（N.salmonicida）[10]。

警惕鱼类诺卡氏菌病 YKK standardization office【 YKK5AB- YKK08- YKK2C- YKK18】警惕鱼类诺卡氏菌病(下)文/ 中国水产科学研究院南海水产研究所徐力文诺卡氏菌（奴卡氏菌）为放线菌类微生物，革兰氏阳性，弱抗酸性，在一般培养基上生长缓慢，3-7天可形成淡黄色沙粒状菌落，形态与一般鱼类病原菌差别显着，菌体为长杆或短杆或分支状。

引起鱼类病害的为星状诺卡氏菌（Nocardia asteroides）和鰤诺卡氏菌（），前者还可感染人类，而国内从患病鱼分离到的多为鰤鱼诺卡氏菌。

鱼类诺卡氏菌病又称结节病，可在内脏各器官形成肉眼可见直径的大量白色结节（肉芽肿），以脾脏和肾脏最为显着，相当比例的鱼还可在体表皮下脂肪和肌肉形成脓疮，呈现大小不一的鼓起软包，划破有白色或淡红色脓液流出，有的鱼还在鳃上形成白色棉絮状结节。

诺卡氏菌病主要危害6个月-2龄鱼，可导致慢性死亡，或降低成鱼商品价值，一个养殖季节死亡率约10-30%，淡水鱼和海水鱼都可以被感染，就我们检测到的有卵形鲳鰺、青斑、鮸鱼、红鱼、美国红鱼、海鲈、尖吻鲈、泥鯭、加州鲈、生鱼等，国内报道的还有大黄鱼，目前实验室保存的约有20株分离自不同海区和鱼类的诺卡氏菌株，鉴定均为鰤鱼诺卡氏菌。

危害严重的有目前养殖广泛的卵形鲳鰺及淡水养殖的加州鲈和生鱼，全年都可发病，在南方以秋季水温22-28℃时流行为甚。

诺卡氏菌本是水体条件致病菌，无处不在，但在鱼类遭受寄生虫侵染后更易患病，如海水小瓜虫（刺激隐核虫）和单殖吸虫，可通过体表和鳃的伤口入侵，我们研究显示其还可以通过肠道感染，投喂含菌饲料，金鲳可在15天左右发病死亡。

近年来该病日趋严重，应与养殖环境水质恶化和虫害猖獗有关。

通过临床症状可以基本诊断该病，也可以用常见培养基分离，但该菌生长缓慢，分离过程中应注意防止污染，最好用选择性培养基如改良罗氏琼脂。

简便的诊断可用体表脓疱中脓液或内脏结节涂片，吉姆萨染色即可镜检到大量分支长杆状菌体。

关于黑鱼诺卡氏菌病防治的正确思路摘要：黑鱼诺卡氏菌病从发现到现在给黑鱼养殖业造成了重大损失，在防治上很多用药思路和控制措施是不完善的，根据疾病传播和发病特点，制定正防治措施才会事半功倍从发现诺卡氏菌病到现在，相信很多黑鱼养殖户都经历过着个难以消除的痛苦隐患！1回顾病情：诺卡氏菌子在1963年发现于欧洲挪威和阿根廷海水产鱼类养殖，在亚洲1967年发现与日本，对海水产鱼类养殖造成严重损失。

2病原：现已分离的诺卡氏菌病菌主要分，星状诺卡氏菌和鰤状诺卡氏菌，分别感染淡水和海水鱼。

3传播途径：主要通过外伤，污染的饵料传播。

4症状：感染的鱼表现的症状主要为外表症状，鱼体色发黑，体表局部会出现褪色和溃疡，有的皮肤会出现小米状结节并伴发脓肿造成穿孔，按压皮肤会流出脓血，严重的会形成局部溃烂。

采食量严重下降，溜边和漫游鱼明显增多。

陆续有零星鱼出现死亡，死亡的鱼很多是大鱼，此时不加以控制死亡率会急速上升，严重的会全军覆没！解剖症状，皮下肌肉有明显的结节肿瘤、腹腔多见血性腹水和肝破裂、在脾脏、肝脏、肾脏、肠系膜上可清晰见到小米粒状白色结节，注意（要和孢子虫病）区分开有明显的差异。

不要误诊耽误最佳治疗。

防治方法：诺卡氏菌病原本只发现与海鱼淡水鱼类特别是黑鱼的感染主要是由于喂食感染的沙丁鱼和海杂鱼所造成的，鱼塘只要发生过病情，几乎第二年的发病率在80%，目前没有彻底根除的方法，要提前做好第二年的预防准备，对病死鱼的处理一定要无害化处理，不要随便丢弃和近埋。

5治疗措施，最早的有效治疗药物有，红霉素、氟苯尼考、利福平、磺胺类药物等特别是利福平和氟苯尼考的使用成为很多养殖户的独门秘籍，但是随着药物耐药性的增加和药物本身的副作用是很多治疗出现杀敌一千自损八百的现象，利福平和氟苯尼考对肝肾有很强的毒性，大剂量长期使用严重损害肝肾，这也是为什么很多鱼在治疗后期会大量出现肝破裂和腹水的现象，诺卡氏菌本身就侵害肝肾再加上药物的副作用只能是问题加重，有的在用药后期会出现死亡量突然上升的情况，有的会说配合护肝药vc一起用不就可以缓解吗，大家其实都明白一边吃着毒药一边喝着解药，人体都受不了更何况鱼。

一例加州鲈诺卡氏菌病的诊治实例加州鲈学名大口黑鲈，是原产于北美洲的一种典型温水肉食性鱼类，在上世纪80年代引入中国。

加州鲈适应能力强、生长速度快、养殖效益高，且肉多刺少，为我国主要养殖经济鱼类之一。

近几年随着人工配合饲料技术的不断突破，加州鲈在我国的养殖面积和养殖范围逐年增加。

在引进的初期，加州鲈养殖病害较少，但随着养殖密度越来越高，加州鲈的病害也日益增多，其中诺卡氏菌病就是加州鲈的主要病害之一。

一、加州鲈引进背景及养殖现状加州鲈原产于美国密西西比河，是一种生长迅速、抗病力强、肉质鲜美的名贵鱼类。

后通过引种，现已遍布美国、加拿大等水域。

我国在上世纪70年代于台湾引种。

在1983年引入广东地区，1985年突破人工繁殖，逐渐在全国范围内推广开来。

无论是池塘单养还是混养，都能带来巨大的经济效益。

是大力推广的优良养殖品种。

加州鲈诺卡氏菌病是加州鲈养殖过程中很常见的一种疾病，诺卡氏菌是一中条件致病菌，流行季节较长，在4月至11月均有发病，发病高峰在6月至10月，水温在15至32℃均可流行，水温在25℃~28℃时发病最为严重。

诺卡氏菌感染鱼体后，会导致鱼类抵抗力进一步下降，引发多种继发性感染。

一旦感染诺卡氏菌，死亡率极高。

二、加州鲈诺卡氏菌病诊治实例2020年6月，湖北省宜昌市一加州鲈高位池塘养殖场养殖的加州鲈出现死亡病例。

一开始，加州鲈出现摄食量减少甚至不摄食的现象，病鱼离群在塘边缓慢游动，且死亡量并不大，养殖户使用过聚维酮碘等消毒，没有得到太大改善。

随后，加州鲈死亡量逐渐增多，最多时一天死亡60多尾。

笔者到现场进行了实地诊断，将病鱼带回实验室检测，提出了一套治疗方案。

经过一个疗程治疗后，疾病得到有效控制。

下面将诊治经验分享给广大养殖户，以期提供参考借鉴。

（一）养殖情况该养殖场位于湖北省宜昌市，为高位池塘养殖加州鲈。

养殖用水为抽调的水库水体，池塘配有水车式增氧机和叶轮式增氧机，池底还配有微孔增氧设施，水色呈现暗绿色，有少量浮膜。

乌鳢结节病病原－诺卡氏菌的分离与鉴定曹铮1沈锦玉1谢荣林 2 潘晓艺 1 吕伟清2郝贵杰1尹文林1吴颖蕾1(1.浙江省淡水水产研究所, 湖州313001)(2桐乡市水产工作站，嘉兴314500)摘要：2006年4月份起，浙江萧山、桐乡乌鳢养殖出现大量死亡，发病症状为肛门红肿，腹部膨大，有大量腹水，内脏有白色结节点，尤以肾脏为甚，严重的腹腔内出现肿瘤。

经罗氏培养基培养从病鱼的肾脏分离到一株细菌SH628。

人工感染证实为乌鳢的病原菌，其半数致死量（LD50）为1.7µg/尾鱼。

为了进一步确定其分类地位，测定了病原菌的16S rRNA基因部分序列，经PCR扩增获得了菌株大小约1.5Kb的16S rRNA部分基因片段，并测序，将测定的序列递交NCBI进行BLAST同源序列比对，与鰤鱼诺卡氏菌(Nacardia seriolea) 的16S rRNA具有高99%的同源性，该序列在Genbank 上的登录号为EF025583。

结合生理生化特性测定，具此鉴定结果认为该菌为鰤鱼诺卡氏菌(Nacardia seriolea)。

药敏试验结果表明该菌对红霉素、环丙沙星等抗生素敏感。

关健词：乌鳢；鰤鱼诺卡氏菌；罗氏培养基；16S rRNA基因乌鳢(Ophiocealus argus)又称黑鱼、乌鱼、才鱼,隶属于硬骨鱼、鲈形目、攀鲈亚目、鳢科、鳢属，我国分布于除新疆、西藏外的各大水系，为凶猛的肉食性鱼类，营养、药用和经济价值较高, 肉味鲜美,口感细腻,蛋白质含量高,骨刺少,在医学上具有滋补、活血、收敛等作用,对伤口的愈合有很好的效果。

且具有生长快、疾病少、适应性强、产量高等特点, 价格稳定，深受养殖户喜爱，已成为淡水名特优养殖的主导品种之一。

浙江省的乌鳢养殖业处于全国领先水平，又以余杭、桐乡、萧山为主产区。

随着养殖规模的扩大，各种病害的发生也日益频繁，严重威胁着乌鳢养殖业的健康发展。

2006年4月起浙江萧山、桐乡一些养殖户出现了大面积死鱼现象，1每天死亡4-5千斤，给养殖户造成极大的损失。

由诺卡氏菌引发的乌鱼烂身病防治一例程辉辉;贾丹;梁磊;李洪章;郭国忠;高泽成;邱昌亮【期刊名称】《科学养鱼》【年(卷),期】2014(000)008【总页数】1页(P63)【作者】程辉辉;贾丹;梁磊;李洪章;郭国忠;高泽成;邱昌亮【作者单位】西南大学荣昌校区水产系 402460;西南大学荣昌校区水产系 402460;西南大学荣昌校区水产系 402460;西南大学荣昌校区水产系 402460;西南大学荣昌校区水产系 402460;西南大学荣昌校区水产系 402460;西南大学荣昌校区水产系 402460【正文语种】中文烂身病，即流行性溃疡综合征，以烂身为主要症状，是一种高发病率、高死亡率的传染性疫病，目前尚无有效疫苗和彻底治愈的治疗手段。

而导致烂身的病因有多种，基本上可分为诺卡氏菌引起的烂身、气单胞菌引起的烂身和真菌引起烂身。

今年5月在重庆市永川利民乌鱼养殖基地发生了一起由诺卡氏菌引发的乌鱼烂身病，现对其防治措施进行总结，以期为广大养殖户提供参考和借鉴。

一、烂身发病由来4月底连续阴雨低温之后，在成鱼养殖池开始发现不同程度烂身的乌鱼，并且在池边可见少量离群独游的乌鱼。

打捞病鱼仔细观察发现：病情轻微的，背部体侧出现数目不等的斑块状充血，病灶处鳞片脱落；病情稍重的，出现大小不等、深浅不一的溃疡，有时可见外露的红色肌肉；病情严重的，可见外露的骨骼和内脏。

解剖后，可见肝、脾、肾有白色或淡黄色结节，直径0.1～0.2厘米。

此时患病成鱼吃食已大不如以前，严重一点的，开始停止吃食。

从4月初开始的一个月内，每天陆续有少量乌鱼死亡。

死鱼腹部膨胀，解剖可见腹内有少量透明或黄色液体，肾、肝、脾等内脏组织中有白色或淡黄色结节出现，直径0.1～0.2厘米。

后经西南大学荣昌校区水产系吴青教授鉴定确诊为诺卡氏菌病。

此后开始一直拌药投喂病鱼并定期消毒。

连续五六天阴雨之后，病情急剧恶化，开始发现大量烂身乌鱼，而且每天死鱼量由之前的一两尾上升至七八尾。

养殖鱼类诺卡氏菌病及其防治孟思妤;孟长明;陈昌福【期刊名称】《科学养鱼》【年(卷),期】2017(000)005【总页数】1页(P88)【作者】孟思妤;孟长明;陈昌福【作者单位】河南新乡市康大消毒剂有限公司,河南新乡 453700;河南新乡市康大消毒剂有限公司,河南新乡 453700;华中农业大学水产学院,湖北武汉430070【正文语种】中文诺卡氏菌等诺卡氏菌属的细菌能导致人工养殖的乌鳢、斑鳢、纹鳢、虹鳟、五条和卵形鲳鲹等多种养殖鱼类发生诺卡氏菌病。

诺卡氏菌属的细菌属于需氧菌，也是土壤和淤泥中的常见腐生菌，不属于鱼体和人体内的正常菌群。

在普通培养基经1周左右培养，可见白色或黄色或橙褐色的颗粒状菌落，表面干燥有褶或光滑呈蜡样。

细菌形态类似于放线菌，革兰氏染色为阳性。

对鱼类致病的主要是星形诺卡氏菌和诺卡氏菌等。

诺卡氏菌广泛分布在土壤、活性污泥、水体中(在水体中的含量并不高)。

当养殖鱼类体质虚弱、免疫力低下时，通过摄食饵料而感染。

由于病原诺卡氏菌生长比较缓慢，因此，受感染的鱼类在发病初期通常未出现外部症状或症状不明显。

但是，病情持续时间长，发病率和死亡率均较高，早期阶段很难进行疾病的诊断和防治。

从患病鱼器官来看，发病最严重的器官都是与血液循环有密切关系的器官。

病原菌通过血液循环到达各器官并固着于各器官组织，逐渐生成菌丝体导致出现结节。

在自然条件下，发病后的鱼体开始仅反应迟钝，食欲下降，上浮于水面。

随着病情的发展，部分患病鱼体表出现创伤，溃烂出血，鳍条有充血现象。

大多伴有肛门红肿、腹部膨大，少数病鱼还出现眼球突出。

解剖后观察可以发现膨大的腹腔内有少量透明或淡黄色液体，在肝、脾、肾等内脏组织中出现乳白色或淡黄色结节。

为了验证药物在野外治疗乌鳢诺卡氏菌病的效果，分别选择显示出较好抑菌效果的氨苄青霉素、硫氰酸红霉素、交沙霉素等3种药物，在江苏省射阳黄沙港和浙江菱湖等地区进行了药物治疗乌鳢诺卡氏菌病的试验。

1.对射阳人工养殖中患病乌鳢的治疗(1)射阳黄沙港庞先生的养殖池塘：选用氨苄青霉素治疗，用药量为22.0毫克/千克鱼体重，拌和在饵料鱼中并阴干后投喂，每天投喂1次药物饵料鱼，连续投喂6天。