不规则抗体筛查试验（SOP）
【产品名称】
通用名称：不规则抗体检测试剂（人血红细胞）
英文名称：Red Blood Cells Reagent for Irregular Antibody Test
【包装规格】每盒有O
Ⅰ、O
Ⅱ
、O
Ⅲ
红细胞各1瓶，5ml/瓶，浓度4%。
【生产企业】
企业名称：长春博迅生物技术有限责任公司
【预期用途】
有临床意义的不规则抗体会导致溶血性输血反应，破坏输入的红细胞或缩短其寿命，轻则影响治疗效果，重则危及病人生命；对于孕妇而言，不规则抗体会引起新生儿溶血病，影响新生儿脏器及智力发育，严重者则会危及新生儿的生命。对受血者和献血者进行不规则抗体检测，能够发现有临床意义的抗体，从而减少溶血性输血反应。本品采用凝聚胺方法检测待检血浆（血清）是否存在不规则抗体，只用于临床检测，不用于血源筛查。
【检验原理】
本实验原理为血凝试验。红细胞上含有D、C、E、c、e、Jk a、Jk b、M、N、s、Fy a、Fy b、k、Le a、Le b、P
1
，该实验用已知抗原的红细胞与待检血浆（血清）孵育，以发现待检血浆（血清）中是否存在不规则抗体。
【主要组成成份】
本品由3人份（单人份/瓶）直接抗人球蛋白试验阴性的O型健康成人红细胞组成，红细胞上含有能引起溶血性输血反应的抗原，抗原谱至少包括Rh系统的D、C、E、c、e抗原，Kidd系统的Jk a、Jk b抗原，MNS系统的M、N、s抗原，Kell系统的k抗原，Duffy系统的Fy a、
Fy b抗原，Lewis系统的Le a、Le b抗原，P系统的P
1
抗原。每套试剂红细胞中至少有2人份红细胞含有D、C、c、e、s、Fy a、k抗原，至少1人份红细胞含有E、Jk a、Jk b、M、N、Fy b、Le a、
Le b、P
1
抗原。
O
Ⅰ
红细胞5ml×1
O
Ⅱ
红细胞5ml×1
O
Ⅲ
红细胞5ml×1
不同批号的红细胞试剂不可以互换。
【储存条件及有效期】
2~8℃保存。有效期自检定合格之日起90天，试剂开瓶后在2~8℃下可保存60天。
【样本要求】
EDTA抗凝的血浆标本或血清。溶血、严重脂血或污染的样本不得用于本实验。
【参与试剂】
试剂名称：凝聚胺介质试剂
试剂生产公司：珠海贝索生物技术有限公司
【检验方法】
1、取试管4支，标明Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、自身对照，并往各管加病人血清（血浆）2滴，
2、再分别向Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ管对应加入4%筛选细胞（Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ）各1滴；自身对照管加入病
人3%-5%红细胞悬液1滴。
3、各管加BaSO试剂LIM0.65ml，混合均匀，室温放置1分钟。
4、再向各管加BaSO试剂Polybrene溶液2滴，混合均匀，放置15秒。
5、离心机1000g离心力，离心10秒，然后把上清液倒掉，不要沥干，让管底残留约0.1ml 液体。
6、轻轻摇动试管，目测红细胞有无凝集，如无凝集，则必须重作。
7、最后加入BaSO试剂Resuspending 2滴，轻轻转动试管混合并同时观察结果。如果在1分钟内凝集散开，表示是由Polybrene引起的非特异性聚集，抗体筛检结果为阴性；如凝集不散开，则为红细胞抗原抗体结合的特异性反应，抗体筛检结果为阳性，应进一步作抗体鉴定。【检验结果的解释】
1、红细胞与相应抗体发生凝集为阳性反应，红细胞不发生凝集为阴性反应。
2、实验结果为阳性反应，表明含有不规则抗体，可对照试剂红细胞抗原谱推测抗体种类或用谱细胞进行鉴定。
【检验方法的局限性】
1、本产品只作为不规则抗体检测使用，如果血浆（血清）中的不规则抗体需进一步鉴定，请使用谱细胞试剂。
2、不规则抗体检测试验不一定能检出所有有意义的抗体，一些低频率抗原的抗体可能被漏检。
3、凝聚胺法可漏检抗-K抗体。
【产品性能指标】
红细胞表达的抗原与随试剂所提供的红细胞抗原谱一致。
【注意事项】
1、细胞严禁在室温长期存放。建议每日取出所用量，然后将剩余试剂放在2~8℃，效期内使用。如细胞开启后在室温长期放置，建议用该细胞做阴性对照试验，以确定该细胞是否可以做本实验。
2、如红细胞试剂发生凝集，出现菌落或严重溶血，请不要使用。
3、严重溶血现象，强烈提示为红细胞抗原抗体阳性反应，也不排除其他原因所致溶血，故对此标本一定认真分析，并向上级主管技术人员报告并讨论。
4、所用红细胞来源于人血，试剂所接触的容器具按医疗垃圾进行处理。
【参考文献】
1.李勇,杨贵贞.人类红细胞血型学实用理论与实验技术[M].北京:中国科学技术出版
社,1999.
2.李勇,马学严.实用血液免疫学—血液理论和实验技术[M].北京:科学出版社,2006.
3.叶应妩,王毓三,申子瑜.全国临床检验操作规程第3版[M].南京:东南大学出版社,2006.
