重庆大学考研分子生物学题库+答案
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分子生物学练习题库及参考答案一、单选题(共100题,每题1分,共100分)1、不属于移植配型中常用的分子生物学检测技术是 ( )A、RFLP/PCR-RFLP/PCR-SSPB、PCR-SSCPC、PCR-SequencingD、PCR-SSO/基因芯片技术E、FISH正确答案:E2、定点诱发突变可以通过以下哪个过程获得:A、PCRB、LCRC、RT-PCRD、SSCPE、ASO正确答案:A3、PCR 反应中延伸的时间取决于A、引物长度B、待扩增片段的长度C、模板的纯度D、Taq DNA 聚合酶的量E、模板的含量正确答案:B4、第三代测序技术的最主要特征:A、对单分子 DNA 进行非 PCR 的测序B、对 SNP 进行非 PCR 的测序C、高通量和并行 PCR 测序D、直接分析 SNPE、直接进行个体基因组测序和 SNP 研究正确答案:A5、下列属于单基因遗传病的是A、糖尿病B、冠心病C、精神与神经疾病D、珠蛋白生成障碍性贫血E、原发性高血压正确答案:D6、采用了所谓酶联级联测序技术的测序方法是A、焦磷酸测序B、边合成边测序C、寡连测序D、双脱氧终止法测序E、化学降解法测序正确答案:A7、一般来说核酸杂交的温度低于其 Tm 值多少度A、40~50℃B、30~40℃C、15~25℃D、5~10℃E、10~15℃正确答案:C8、基因多态性连锁分析中,第一、二、三代遗传标记分别是A、RFLP、SSCP、STRB、RFLP、SNP、STRC、RFLP、STR、SNPD、VNTR、SSCP、SNPE、VNTR、STR、RFLP正确答案:C9、用于病毒基因突变检测的技术是A、荧光定量 PCR 技术B、PCR-RFLP 技术C、PCR 微卫星检测技术D、原位杂交技术E、cDNA 表达芯片技术正确答案:B10、检测目标是 RNA 的技术是:A、Southern 杂交B、Western 杂交C、Northern 杂交D、Eastern 杂交E、杂交淋巴瘤正确答案:C11、转录依赖扩增系统的描述错误的是A、以 RNA 为模板B、首先由靶 RNA 合成 DNA 拷贝C、再由DNA 转录生成大量 RNA 拷贝D、产物为 DNAE、为等温扩增正确答案:D12、下列方法中不属于 RNA 诊断的是A、Northern blotB、RNA 斑点杂交C、基因芯片D、mRNA 差异显示 PCR 技术E、逆转录 PCR正确答案:C13、众多肿瘤中遗传因素最突出的一种肿瘤是A、乳腺癌B、肝癌C、肺癌D、结直肠癌E、前列腺癌正确答案:D14、下列不是目前用于 O157:H7 型大肠埃希菌分子生物学检验方法的是A、常规 PCRB、多重 PCRC、荧光定量 PCRD、基因芯片技术E、DNA 测序正确答案:E15、DNA 自动化测序技术中,不正确的荧光标记方法A、用荧光染料标记引物5’端B、用荧光染料标记引物3’-OHC、用荧光染料标记终止物D、使用一种或四种不同荧光染料标记E、使荧光染料标记的核苷酸渗入到新合成的 DNA 链中正确答案:B16、HBV DNA 中最大的一个开放阅读框是A、P 基因区B、S 基因区C、X 基因区D、前 S1 基因区E、C 基因区正确答案:A17、镰状细胞贫血患者,代替其血红蛋白β链 N 端第六个氨基酸残基谷氨酸的是A、酪氨酸B、丝氨酸C、丙氨酸D、苯丙氨酸E、缬氨酸正确答案:E18、最早发现与 mtDNA 突变有关的疾病是A、肿瘤B、Leber 遗传性视神经病C、糖尿病D、耳聋E、MELAS 综合征正确答案:B19、线粒体疾病的遗传特征是A、母系遗传B、发病率有明显的性别差异C、近亲婚配的子女发病率增高D、交叉遗传E、女患者的子女约 1/2 发病正确答案:A20、引起急性移植排斥反应最重要的抗原是A、ABO 血型抗原B、HLA 抗原C、超抗原D、异嗜性抗原E、Rh 血型抗原正确答案:B21、下列关于Taq DNA 聚合酶的描述,错误的是A、以 dNTPs 为原料B、催化形成3’,5’-磷酸二酯键C、使 DNA 链沿5’→3’方向延伸D、不具有3’→5’外切酶活性E、扩增的DNA 片段越长,碱基错配率越低正确答案:E22、关于核酸探针的描述下列不正确的是A、可以是 DNAB、可以是 RNAC、可用放射性标记D、可用非放射性标记E、必须是单链核酸正确答案:E23、DCC 基因突变的主要方式不包括A、等位基因杂合性缺失B、5’端纯合性缺失C、3’端纯合性缺失D、DCC 基因过甲基化E、外显子的点突变正确答案:C24、不属于脆性 X 综合征分子诊断人群的是A、发育迟缓或自闭症的患者B、有 FraX 体格或性格阳性征象者C、未诊断的 MR 家族史D、已明确母亲为携带者的婴儿E、没有 FraX 家族史正确答案:E25、有关 HPV 描述错误的是A、核酸类型为 DNAB、结构蛋白 L1 和 L2 是包膜上的主要和次要蛋白C、HPV 对皮肤和黏膜上皮细胞具有高度亲嗜性D、病毒核酸合成主要发生在棘层和颗粒层E、大多数宫颈癌组织中病毒以整合状态存在正确答案:B26、关于 APC 基因说法不正确的是A、是一种抑癌基因B、定位于染色体 5q21 上C、通过编码 APC 蛋白发挥作用D、APC 蛋白在细胞周期进程、细胞生长调控及维持自身稳定中起着重要作用E、APC 蛋白在肿瘤发生发展的全过程中并不稳定正确答案:E27、关于电转移下列描述不正确的是A、快速、高效B、需要特殊设备C、缓冲液用 TAE 或 TBED、可产生高温E、常用NC 膜作为支持介质正确答案:E28、以 mRNA 为模板合成 cDNA 的酶是A、DNA 酶B、Taq DNA 聚合酶C、限制性内切酶D、RNA 酶E、逆转录酶正确答案:E29、结核分支杆菌的基因组特征是A、单链 DNAB、双链 DNAC、单正链 RNAD、单正链 RNA 双聚体E、单负链 RNA正确答案:B30、FMR-1 基因上 CGG 重复序列异常扩增导致A、镰状细胞贫血B、脆性 X 综合征C、地中海贫血D、血友病 AE、血友病 B正确答案:B31、关于 DNA 变性的描述不正确的是A、二级结构破坏B、一级结构破坏C、黏度降低D、生物活性丧失E、浮力密度增加正确答案:B32、在对病原体检测中,一次性获得信息量最大的技术是 ( )A、ELISAB、荧光定量 PCR 技术C、PCR-RFLP 技术D、原位杂交技术E、基因芯片技术正确答案:E33、荧光定量 PCR 检测核酸量的时间段在A、非指数期B、PCR 反应的最初阶段C、PCR 反应最后的时间阶段D、指数期的起始阶段E、指数期的终末阶段正确答案:D34、基因芯片技术的本质是 ( ) :A、核酸分子杂交B、蛋白质分子杂交技术C、连接酶链反应D、DNA 重组技术E、酶切技术正确答案:A35、珠蛋白生成障碍性贫血的主要原因是A、珠蛋白链合成速率降低B、珠蛋白基因突变导致氨基酸序列改变C、出现异常血红蛋白 SD、血红蛋白破坏加速E、铁代谢异常正确答案:A36、以下不需要对引物或探针预先标记的实时定量 PCR 方法是A、TaqMan 水解探针技术B、探针杂交技术C、分子信标技术D、SYBR Green Ⅰ荧光染料技术E、数字 PCR 技术正确答案:D37、以下哪种方法是检测耐药基因突变的金标准 ( )A、PCR 技术B、荧光定量 PCR 技术C、PCR-RFLP 技术D、PCR-SSCPE、DNA 测序技术正确答案:E38、DNA 芯片的样品制备过程错误的是( )A、核酸分子的纯化B、样品的扩增C、样品的标记D、常用的标记物为荧光E、标记后的样品不必再纯化正确答案:E39、关于 DNA 芯片原位合成法的描述错误的是:A、也称在片合成B、直接在芯片上用四种核苷酸合成所需探针C、包括光导原位合成法D、包括原位喷印合成法E、包括直接点样法正确答案:E40、下列 DNA 序列中的胞嘧啶易发生甲基化修饰的是A、5’-CCCCCT-3’B、5’-GGGGCC-3’C、5’-CGCGCG-3’D、5’-GCACAC-3’E、5’-CTCTCCC-3’正确答案:C41、导致世界范围内性传播疾病的最为普遍的因素是A、豚鼠衣原体B、肺炎衣原体C、鹦鹉热衣原体D、沙眼衣原体E、鼠衣原体正确答案:D42、检测融合基因、确定染色体易位的首选方法是A、FISHB、RT-PCRC、实时定量 PCRD、PCRE、DNA 芯片正确答案:D43、下列方法中能同时检测几种疟原虫混合感染的是A、竞争 PCRB、巢式 PCRC、多重 PCRD、普通 PCRE、PCR-RFLP正确答案:C44、在核酸检测体系中加入内质控,其作用不是监控的是A、核酸提取效率太低所致的假阴性B、样本吸取错误所致的假阴性C、试剂失效或 Taq 酶活性降低所致的假阴性D、标本中抑制物或干扰物所致的假阴性E、仪器故障如扩增仪孔间温度差异所致的假阴性正确答案:B45、下列不是影响DNA 复性因素的是A、DNA 浓度B、DNA 的分子量C、温度D、碱基组成E、DNA 的来源正确答案:E46、下列叙述哪项是错误的( )A、原核生物基因组具有操纵子结构B、原核生物结构基因是断裂基因C、原核生物基因组中含有插入序列D、原核生物基因组中含有重复序列E、原核生物结构基因的转录产物为多顺反子型mRNA正确答案:B47、基因诊断与其他诊断比较,最主要的特点在于 ( )A、针对基因结构B、取材方便C、诊断费用低D、针对病变细胞E、诊断周期短正确答案:A48、延伸的温度通常为A、55℃B、72℃C、37℃D、25℃E、95℃49、目前的 DNA 自动化测序技术可以一次性读取的序列长度约A、50bpB、100bpC、500bpD、1000bpE、2000bp正确答案:D50、关于 HPV 各亚型遗传物质的描述正确的是A、同时存在脱氧核糖核酸和核糖核酸B、都是脱氧核糖核酸C、都是核糖核酸D、有的是脱氧核糖核酸,有的是核糖核酸E、脱氧核糖核酸与核糖核酸可交替互换正确答案:B51、下列方法中不能分辨野生型和突变型基因的是A、PCR-SSCPB、变性梯度凝胶电泳C、熔解曲线分析D、逆转录 PCR正确答案:D52、为了避免反复冻融对核酸样品产生的破坏作用,最好( )A、将核酸冻干保存B、将核酸沉淀保存C、将核酸溶解保存D、将核酸大量保存E、将核酸小量分装保存正确答案:E53、以下不是在移植配型中常用的分子生物学检测技术是A、核酸分子杂交技术B、PCR 技术C、基因芯片技术D、免疫组化技术E、基因测序技术54、单细胞基因扩增一般采用下列何种技术增加检测的敏感性和特异性A、巢式 PCRB、多重 PCRC、PCR-RFLPD、等位基因特异性 PCRE、PCR-SSCP正确答案:A55、硝酸纤维素和PVDF 膜结合蛋白主要靠( )A、疏水作用B、氢键作用C、离子键作用D、盐键作用E、酯键作用正确答案:A56、下列有关 cDNA 探针的描述不正确的为A、利用mRNA 通过 RT-PCR 在体外反转录可制备大量的 cDNA 探针B、cDNA 探针不包含内含子C、cDNA 探针不包含大量的高度重复序列D、由于 cDNA 探针自身所携带的 poly(dT),有可能产生非特异性杂交的问题E、cDNA 探针合成方便,成为探针的重要来源正确答案:E57、关于 Ct 值的描述,不正确的是A、Ct值是荧光定量 PCR 获得的最初数据资料B、Ct代表了反应达到预定设置的阈值时的循环次数C、Ct 与反应模板的初始模板量成正比D、Ct越小代表其模板核酸拷贝数越多E、Ct值处于扩增曲线和荧光本底基线的交叉点正确答案:C58、不适宜于直接作为第一代测序技术测序的 DNA 模板( )A、双链 DNA 片段和 PCR 产物B、单链 DNA 片段C、克隆于质粒载体的DNA 片段D、克隆于真核载体的DNA 片段E、提取的染色质 DNA正确答案:E59、Southern 印迹转移的步骤不包括 ( )A、用限制性内切酶消化 DNAB、DNA 与载体的连接C、用凝胶电泳分离 DNA 片段D、DNA 片段转移到硝酸纤维素膜上E、用一个标记的探针与膜上 DNA 杂交正确答案:B60、一种标记核酸与另一种核酸单链进行配对形成异源核酸分子的双链,这一过程称A、复杂性B、杂交C、复性D、变性E、探针正确答案:B61、人类基因组的碱基数目为A、4.0×10 bp6B、4.0×10 bp9C、2.9×10 bp6D、4.0×10 bp8E、3.0×10 bp9正确答案:E62、第二代测序技术一般不用到A、双脱氧链终止法B、文库接头C、高通量的并行 PCRD、高通量的并行测序反应E、高性能计算机对测序数据进行拼接和分析正确答案:A63、基因芯片技术的优点不包括A、高通量C、芯片检测稳定性高D、微缩化E、观察结果直观正确答案:C64、关于逆转录 PCR 的描述,不正确的是A、首先应将 RNA 转化为 cDNA 才能进行 PCRB、除了使用DNA 聚合酶外,还应使用逆转录酶C、模板为 RNAD、oligo-d (T) 理论上可以将所有的 mRNA 进行逆转录反应E、逆转录酶不需要引物进行逆转录反应正确答案:E65、关于抑癌基因的说法正确的是A、可以使细胞丧失生长控制和正性调控功能B、呈隐性作用方式C、正常情况下促进细胞增殖、抑制细胞分化D、是一类可编码对肿瘤形成起促进作用的蛋白质的基因E、抑癌基因又称为肿瘤分化抑制基因正确答案:B66、下列密码子中,终止密码子是 ( )A、UUAB、UGAC、UGUD、UAUE、UGG正确答案:B67、大肠杆菌类核结构的组成是A、双链 DNAB、蛋白质+DNAC、支架蛋白D、RNA+支架蛋白+双链 DNA正确答案:D68、描述 PCR-RFLP 技术在耐药突变检测方面错误的是:A、分型时间短C、突变要存在限制性内切酶酶切位点D、目前被广泛应用于耐药监测E、只能检测特定的突变位点正确答案:D69、不符合分子诊断特点的是A、易于早期诊断B、检测对象为自体基因C、样品获取便利D、灵敏度高E、特异性强正确答案:B70、mtDNA 中基因数目为A、39 个B、27 个C、22 个D、37 个E、13 个正确答案:D71、具有碱基互补区域的单链又可以重新结合形成双链,这一过程称A、变性B、复性C、杂交D、探针E、复杂性正确答案:B72、Southern 杂交通常是指( )A、DNA 与 RNA 杂交B、DNA 与 DNA 杂交C、RNA 与 RNA 杂交D、蛋白质与蛋白质杂交E、DNA 与蛋白质杂交正确答案:B73、阳性质控品失控的原因不包括A、提取的核酸残留有抑制物B、扩增仪孔间温度不一致C、Taq 酶失活D、核酸提取试剂失效E、扩增产物污染正确答案:E74、线粒体基因组与核基因组之间,下面描述不正确的是A、线粒体基因组与核基因组分别在不同的位置进行自主复制和转录,之间互不影响B、mtDNA 突变可引起编码蛋白功能障碍,影响细胞呼吸、氧化功能,进而影响核 DNA 的表达C、mtDNA 自主性复制,但复制所需的酶、调控因子等由核基因编码D、二者虽在地理位置上独立,但二者之间关系十分密切E、线粒体基因组与核基因组之间存在“交叉对话” ,相互影响,相互协调正确答案:A75、线粒体糖尿病属于A、1 型糖尿病B、2 型糖尿病C、新发现的第 5 种糖尿病D、妊娠期糖尿病E、特殊类型糖尿病正确答案:E76、构成完整的病毒颗粒的成分是A、结构蛋白B、核酸C、糖蛋白D、蛋白质E、蛋白质与核酸正确答案:E77、mtDNA 突变不会导致A、综合征型耳聋B、非综合征型耳聋C、神经性耳聋D、药物性耳聋E、氨基糖苷类抗生素耳毒性正确答案:C78、关于 NC 膜下列描述不正确的是A、能吸附单链 DNAB、能吸附单链 RNAC、依赖于高盐浓度结合靶分子D、对小分子 DNA 片段 (<200bp) 结合力强E、易脆正确答案:D79、关于多重 PCR,错误的是A、在同一反应体系中加入多对引物B、同时扩增一份 DNA 样品的靶 DNAC、扩增的产物为序列相同的DNA 片段D、扩增时应注意各对引物之间的扩增效率基本一致E、扩增产物可以通过电泳分离正确答案:C80、关于荧光原位杂交技术叙述不正确的是( )A、可以用于基因定位B、无需经过核酸的提取C、用荧光素标记探针D、可以用于遗传病的产前诊断E、用放射性核素标记探针正确答案:E81、关于SYBR Green Ⅰ 的描述,不正确的是A、荧光染料的成本低B、适用于任何反应体系C、操作亦比较简单D、特异性强E、不需要对引物或探针进行预先特殊的荧光标记正确答案:D82、关于定量 PCR 的描述,不正确的是A、可以定量或半定量检测PCR 产物的方法B、定量 PCR 主要进行基因表达的分析和病原体的核酸检测C、水解探针技术中TaqMan 探针的位置位于两条引物之间D、分子信标在自由状态下为发夹结构,荧光信号极低E、定量 PCR 在封闭状态下进行,有效避免了产物的实验室污染正确答案:A83、目前测序读长最大的测序反应:A、焦磷酸测序B、双脱氧终止法C、边合成边测序D、化学裂解法E、连接测序正确答案:B84、常见基因芯片合成的两大类方法是( )A、原位合成和在片合成B、离片合成和直接点样C、分子印章多次压印合成和在片合成D、光引导原位合成和喷墨合成E、原位合成和直接点样正确答案:E85、阴性质控品失控的原因不包括A、扩增产物污染B、标本交叉污染C、放射性污染D、基因组 DNA 或质粒的污染E、试剂污染正确答案:C86、质粒的主要成分是A、多糖B、蛋白质C、氨基酸衍生物D、DNA 分子E、脂类正确答案:D87、人类基因组的组织特点描述不正确的是A、大部分为非编码序列B、功能相关的基因常散在分布于不同的染色体上C、每个结构基因都有单独的调控序列D、基因组中各个基因的大小和内部组织的差异不大E、基因组含重复序列正确答案:D88、目前所知的原癌基因激活机制不包括A、点突变B、抑癌基因的丢失C、异位激活D、癌基因甲基化程度降低E、原癌基因扩增正确答案:B89、第一代 DNA 测序技术的核心技术是A、Sanger 的双脱氧链终止法B、Maxam 和 Gilbert 的化学降解法C、荧光标记技术D、PCR 技术E、DNA 自动分析技术正确答案:A90、限制性长度多态性是由于以下哪项所致A、碱基变化发生在微卫星序列上B、碱基变化发生在内含子C、碱基变化发生在增强子上D、碱基变化发生在酶切位点上E、碱基变化发生在外显子正确答案:D91、可以用来判断不同生物体之间的基因组 DNA 信息的是哪一种 PCR 技术:A、反转录 PCRB、原位 PCRC、连接酶链反应D、随机扩增多态性 PCRE、原位杂交 PCR正确答案:D92、下列不能被列入可移动基因范畴的是A、插入序列B、质粒C、染色体 DNAD、转座子E、可转座噬菌体正确答案:C93、SDS 是一种阴离子表面活性剂,其可断开蛋白质分子内和分子间的( )A、氢键B、离子键C、二硫键D、酯键E、疏水键正确答案:A94、对于镰刀状红细胞贫血的基因诊断不可以采用 ( ) :A、PCR-RFLPB、DNA 测序C、核酸分子杂交D、设计等位基因特异性引物进行 PCRE、Western blot正确答案:E95、GeneXpert 全自动结核检测平台不具有的优势是 ( )A、检测高度自动化B、单标本单试剂检测,避免浪费C、检测快速准确D、同时检测TB 与利福平耐药E、检测费用低廉正确答案:E96、人类基因组中包含的基因数目约为A、大于 10 万B、1 万~2 万C、4 万~6 万D、6 万~8 万E、2 万~3 万正确答案:E97、细菌感染分子生物学检验的检验对象是A、镜检病原体形态B、测定样本中核酸含量C、测定血清中病原体蛋白含量D、测定血清中蛋白酶活性E、测定血清中抗体抗原正确答案:B98、利用DNA 芯片检测基因突变,杂交条件应:A、短时间内、低盐、高温条件下的高严紧性杂交B、长时间内、低盐、高温条件下的低严紧性杂交C、短时间内、高盐、高温条件下的低严紧性杂交D、短时间内、低盐、低温条件下的高严紧性杂交E、短时间内、低盐、高温条件下的低严紧性杂交正确答案:A99、作为芯片固相载体的材料描述正确的是A、主要有玻片、硅片等实性材料B、不使用硝酸纤维素膜、尼龙膜及聚丙烯膜等膜性材料C、这些载体材料不需要处理,其表面存在活性基团 (如羟基或者氨基)D、可以直接固定已经合成的寡核苷酸探针E、不需要对介质表面进行化学预处理--活化正确答案:A100、关于 mtDNA 复制特点的描述正确的是A、线粒体密码子与核基因密码子相同B、mtDNA 以 D-环复制为主要模式,与核 DNA 复制同步C、mtDNA 两条链的复制是同步的D、mtDNA 为自主性复制,不受核内基因控制E、参与 mtDNA 复制所需的酶、调控因子等由核 DNA 编码正确答案:E。
分子生物学习题库与参考答案一、单选题(共49题,每题1分,共49分)1.可以实现体细胞克隆的技术是:A、基因编辑B、聚合酶链式反应C、诱导多能干细胞D、体细胞核移植正确答案:D2.在PCR反应中,引物与模板的结合温度约为:A、37°CB、55°CC、72°CD、95°C正确答案:B3.大肠杆菌对于基因克隆的主要作用是:A、提供连接酶B、合成引物C、表达目的蛋白D、作为宿主正确答案:D4.将单链DNA合成双链的酶是:A、连接酶B、DNA聚合酶C、裂解酶D、RNA聚合酶正确答案:B5.可以增加靶标DNA拷贝数的技术是:A、PCRB、电泳C、测序D、印迹杂交正确答案:A6.在Southern杂交中起探针作用的是:A、DNAB、RNAC、载体D、引物正确答案:A7.编码氨基酸顺序信息的DNA序列称为:A、启动子B、基因C、外显子D、启动密码子正确答案:B8.可以自我复制的核酸是:A、mRNAB、rRNAC、tRNAD、miRNA正确答案:B9.DNA聚合酶在PCR反应过程中不需要的元素是:A、铜离子B、镁离子C、锰离子D、钾离子正确答案:A10.启动子序列通常位于:A、转录起始点上游B、编码区C、基因内含子D、终止子上游正确答案:A11.可以直接导入植物细胞的方法是:A、阳离子脂质体法B、农杆菌法C、微粒射击法D、电穿孔法正确答案:B12.DNA的组成单位是:A、氨基酸B、核苷酸C、核糖D、脱氧核糖正确答案:B13.农杆菌可以将T-DNA转入植物细胞的原因是:A、具有连接酶B、具有限制性内切酶C、具有转座子D、可以与植物细胞膜融合正确答案:C14.DNA测序中的Sanger方法利用了:A、引物延伸终止B、核酸杂交C、蛋白质切割D、荧光标记正确答案:B15.可以用于克隆目的基因的载体是:A、慢病毒B、质粒C、线性DNA分子D、mRNA正确答案:B16.属于真核生物的模型生物是:A、小鼠B、酵母C、果蝇D、以上所有正确答案:D17.可以将质粒DNA转入宿主细胞的是:A、限制性内切酶B、DNA连接酶C、显微注射器D、电穿孔仪正确答案:C18.可以直接将外源基因导入植物细胞的是:A、电穿孔法B、微注射法C、生物炮法D、农杆菌法正确答案:D19.检测蛋白质的方法不是:A、Western印迹B、质谱C、Northern印迹D、免疫印迹正确答案:C20.对DNA进行切割的酶类包括:A、分裂酶B、连接酶C、制限酶D、聚合酶正确答案:C21.可以直接检测蛋白质的方法是:A、PCRB、Northern blotC、Western blotD、Southern blot正确答案:C22.提供能量驱动翻译反应的化学键是:A、糖苷键B、磷酸酯键C、硫磷键D、氢键正确答案:B23.编码线粒体蛋白质的基因主要位于:A、细胞质DNAB、线粒体DNAC、细胞核DNAD、质粒DNA正确答案:B24.下列DNA酶类能切断磷酸二酯键的是:A、连接酶B、DNA聚合酶C、替代酶D、制限酶正确答案:D25.在制备重组DNA时,使用琼脂糖的目的是:A、提供营养B、连接DNA段C、物理分离片段D、催化连接反应正确答案:C26.是mRNA而不是tRNA或rRNA的特征是:A、可翻译成蛋白质B、可与核糖体结合C、含有多肽链D、富含无义密码子正确答案:A27.对蛋白表达的后翻译调控方式是:A、剪接体B、RNA编辑C、蛋白质水解D、磷酸化正确答案:C28.编码tRNA的基因位于:A、线粒体B、核糖体C、细胞核D、细胞质正确答案:C29.单克隆抗体技术利用的真核细胞是:A、诱导的多能干细胞B、杆状病毒感染的淋巴细胞C、转化的肿瘤细胞D、融合瘤细胞正确答案:D30.原核生物基因组中不含有的序列是:A、终止子B、编码区C、启动子D、外显子正确答案:D31.制备cDNA文库常用的反转录酶来源于:A、大肠杆菌B、反刍动物C、艾滋病毒D、枯草杆菌正确答案:C32.编码氨基酸的三联密码所在的核酸是:A、mRNAB、rRNAC、tRNAD、盖帽RNA正确答案:C33.参与DNA复制的关键酶是:A、RNA聚合酶B、连接酶C、DNA聚合酶D、选择酶正确答案:C34.编码rRNA的基因通常组织成:A、基因簇B、可变剪接体C、假基因D、反义基因正确答案:A35.编码 rRNA 的基因位于:A、线粒体DNAB、质粒DNAC、细胞核DNAD、细胞质DNA正确答案:C36.将DNA上的遗传信息转录为RNA的过程称为:A、翻译B、转录C、复制D、修复正确答案:B37.PCR技术依赖的关键酶是:A、连接酶B、聚合酶C、裂解酶D、制限酶正确答案:B38.编码氨酰tRNA合成酶的RNA是:A、mRNAB、rRNAC、tRNAD、siRNA正确答案:B39.可以实现定点诱变的技术是:A、CRISPR/Cas9B、ZFNsC、TALENsD、以上均可正确答案:D40.利用生物信息学分析推测基因功能的方法是:A、突变分析B、蛋白质互作C、序列比对D、同源建模正确答案:C41.可以改变染色体DNA序列的技术是:A、基因敲除B、基因转染C、基因沉默D、基因编辑正确答案:D42.下列不属于PCR反应体系的组成部分是:A、DNA模板B、聚合酶C、dNTPD、琼脂糖正确答案:D43.检测目的蛋白表达的方法不是:A、Southern blottingB、Western blottingC、Eastern blottingD、Northern blotting正确答案:A44.从cDNA库中可以获得的是:A、所有DNA片段B、编码区序列C、非编码区序列D、全部基因组序列正确答案:B45.可以直接克隆cDNA的是:A、质粒B、YACC、λ噬菌体D、人工染色体正确答案:A46.病毒载体导入宿主细胞的方法是:A、共转化B、显微注射C、电穿孔D、吸附感染正确答案:D47.可以识别启动子序列的转录因子是:A、β因子B、α 因子C、σ 因子D、Rho因子正确答案:C48.可以直接提取基因组DNA的方法是:A、PCRB、Northern blotC、Southern blotD、盐析法正确答案:D49.基因敲除实验中所用对照组应为:A、目的基因缺失组B、野生型组C、质粒载体组D、siRNA处理组正确答案:B二、多选题(共35题,每题1分,共35分)1.PCR反应的原料不包括:A、引物B、载体酶C、聚合酶D、dNTPE、模板DNAF、琼脂糖G、无橡皮管封闭正确答案:BFG2.对DNA序列进行PCR扩增需要以下原料:A、模板DNAB、载体酶C、引物D、连接酶E、脱氧核苷三磷酸F、DNA聚合酶G、以上ACF正确答案:G3.质粒载体应具有下列哪些特征:A、大片段插入区B、可自主复制C、含有筛选位点D、与宿主互作E、含有克隆位点F、编码病毒蛋白G、低拷贝数正确答案:BCE4.在制备cDNA文库时需要用到的关键酶包括:A、连接酶B、PCR酶C、限制性内切酶D、RNA聚合酶E、反转录酶F、RNase HG、链化酶正确答案:EF5.编码氨基酸序列的核酸为:A、rRNAB、mRNAC、tRNAD、mRNA前体E、单链RNAF、双链RNAG、环状RNA正确答案:B6.制备重组质粒的主要步骤是:A、载体线性化B、消化插入片段C、连接反应D、感受态细胞制备E、转化宿主细胞F、克隆鉴定G、所有以上步骤正确答案:G7.对肿瘤基因组的检测可以应用:A、Southern印迹B、Northern印迹C、Western印迹D、Eastern印迹E、基因检测F、测序G、基因芯片正确答案:AEFG8.基因表达调控的机制包括:A、转录水平调控B、RNA水平调控C、翻译水平调控D、蛋白活性调控E、基因增幅F、肽链释放G、以上AD均可正确答案:G9.参与翻译过程的RNA包括:A、mRNAB、rRNAC、tRNAD、siRNAE、snRNAF、反义RNAG、以上ABC均参与正确答案:G10.编码氨基酸序列的核酸为:A、rRNAB、mRNAC、tRNAD、cDNAE、基因F、反义链G、互补链正确答案:B11.PCR反应的原料组成包含:A、模板 DNAB、上游引物C、下游引物D、DNA聚合酶E、脱氧核苷三磷酸F、缓冲液G、以上ABDEF正确答案:G12.基因敲入的方法可以包括:A、siRNAB、基因敲除C、ZFNsD、TALENsE、CRISPR/Cas9F、Cre-Lox重组系统G、反义RNA抑制正确答案:CDEF13.编码脱氧核糖的DNA单链为:A、编码链B、反义链C、互补链D、下游链E、正义链F、上游链G、载体链正确答案:B14.基因编辑技术包括:A、ZFNs技术B、TALENs技术C、CRISPR/Cas技术D、基因敲除E、RNAi技术F、慢病毒介导G、以上所有正确答案:ABC15.制备重组DNA的步骤包括:A、载体选择B、插入DNA获得C、双酶切D、连接反应E、转化F、筛选G、以上全部正确答案:G16.参与制备cDNA文库的关键酶类有:A、连接酶B、限制性内切酶C、聚合酶D、反转录酶E、核酸酶F、RNase HG、以上DE正确答案:G17.制备重组质粒的关键步骤不包括:A、载体的选择B、消化载体及插入片段C、连接反应D、PCR扩增插入片段E、转化感受态细胞F、筛选重组克隆G、测序验证正确答案:D18.启动子序列的特征包括:A、定位于基因转录起始点上游B、通常为AT富集区C、具有内含子D、与编码区互补E、与编码区反向验配F、与编码区部分重叠G、保守性非常低正确答案:AB19.直接参与蛋白质翻译的分子包括:A、DNAB、mRNAC、rRNAD、tRNAE、RNA聚合酶F、释放因子G、所有以上分子正确答案:BCDF20.制备重组质粒需要下列步骤:A、载体选择B、消化载体和插入DNAC、连接反应D、感受态细胞制备E、转化宿主细胞F、克隆筛选G、以上全部正确答案:G21.检测mRNA的方法包括:A、Northern杂交B、Western印迹C、Southern印迹D、荧光in situ杂交E、实时定量PCRF、RNA序列表达谱分析G、以上ABDF正确答案:G22.启动子通常位于:A、翻译起始点上游B、转录终止点下游C、翻译终止点下游D、基因内含子E、编码区F、转录起始点上游G、终止子下游正确答案:F23.编码氨基酸序列信息的核酸为:A、DNAB、RNAC、mRNAD、tRNAE、rRNAF、cDNAG、质粒正确答案:C24.基因敲入的技术可以包括:A、siRNAB、基因敲除C、ZFNsD、TALENsE、CRISPR/Cas9系统F、Cre-Lox重组系统G、反义DNA正确答案:CDEF25.制备重组 DNA 需要以下技术:A、载体准备B、PCR 扩增插入片段C、引物设计D、双酶切连接E、宿主细胞转化F、筛选重组克隆G、以上全部正确答案:G26.编码氨基酸序列的核酸为:A、DNAB、mRNAC、rRNAD、tRNAE、miRNAF、cDNAG、基因正确答案:B27.编码mRNA的DNA单链被称为:A、编码链B、上游链C、下游链D、正义链E、反义链F、互补链G、载体链正确答案:E28.Polymerase Chain Reaction (PCR) 的关键步骤不包括:A、模板变性B、引物与模板杂交C、新链延伸合成D、反向转录E、新链变性F、产物检测G、增幅后转化正确答案:D29.Polymerase Chain Reaction (PCR) 的关键步骤包括:A、模板预变性B、引物与模板退火C、新链延伸合成D、产物检测E、反义链合成F、连接酶反应G、以上全部正确答案:ABCD30.编码氨基酸的三联密码存在于:A、DNA双链上B、mRNA分子上C、tRNA分子上D、rRNA上E、盖帽RNA上F、启动子区域G、终止子区域正确答案:C31.抑制基因在体细胞中的表达方法有:A、siRNAB、基因敲除C、反义RNAD、CRISPR/Cas9E、基因激活F、启动子激活G、剪切反应激活正确答案:ABD32.检测mRNA表达水平的技术是:A、北方印迹B、西方印迹C、南方印迹D、东方印迹E、In situ杂交F、免疫组化G、芯片杂交正确答案:AEG33.编码氨基酸的三联密码存在于:A、DNA双链上B、mRNA分子上C、tRNA分子上D、rRNA 上E、盖帽RNA上F、启动子区域G、终止子区域正确答案:C34.可以提高基因在异源表达载体中的表达水平的方法不包括:A、扩增子克隆B、终止子序列调控C、引入变位信号D、改良启动子序列E、引入选择标记F、优化文库构建方法G、优化编码序列正确答案:F35.可以提取基因组DNA的方法有:A、PCR扩增B、Northern印迹C、Southern印迹D、过滤法E、质谱法F、限制性酶切G、盐析法正确答案:CG三、判断题(共38题,每题1分,共38分)1.基因敲入可以使用双链DNA分子实现。
重庆大学考研分子生物学题库+答案重庆大学考研分子生物学题库及答案一、选择题1、以下哪种分子不是遗传物质?()A DNAB RNAC 蛋白质D 以上都是答案:C解析:DNA 和 RNA 是主要的遗传物质,而蛋白质不是遗传物质。
2、中心法则不包括以下哪项?()A DNA 复制B RNA 复制C 蛋白质翻译D 蛋白质逆转录答案:D解析:中心法则包括 DNA 复制、转录、翻译以及 RNA 复制和逆转录。
但蛋白质逆转录不存在。
3、以下哪种酶参与 DNA 复制的起始?()A DNA 聚合酶B 解旋酶C 拓扑异构酶D 以上都是答案:D解析:在 DNA 复制起始阶段,解旋酶解开双链 DNA,拓扑异构酶改变 DNA 的拓扑结构,DNA 聚合酶参与后续的链延长。
4、原核生物 RNA 聚合酶的核心酶由以下哪些亚基组成?()A α、β、β'B α、β、ωC α2、β、β'D α2、β、ω答案:C解析:原核生物 RNA 聚合酶的核心酶由α2、β、β'亚基组成。
5、真核生物 mRNA 的 5'端帽子结构的主要作用是()A 参与翻译起始B 增加 mRNA 的稳定性C 有利于 mRNA 从细胞核运输到细胞质D 以上都是答案:D解析:真核生物 mRNA 的 5'端帽子结构有助于翻译起始、增加mRNA 稳定性以及促进其从细胞核向细胞质运输。
二、填空题1、核酸的基本组成单位是_____。
答案:核苷酸2、 DNA 双螺旋结构的两条链是_____平行的。
答案:反向3、基因表达包括_____和_____两个过程。
答案:转录翻译4、遗传密码具有_____、_____和_____的特点。
答案:简并性通用性连续性5、原核生物启动子的-10 区的保守序列是_____。
答案:TATAAT三、简答题1、简述 DNA 半保留复制的过程。
答:DNA 半保留复制是指在 DNA 复制过程中,亲代 DNA 的两条链解开,分别作为模板,按照碱基互补配对原则合成新的子链,形成两个与亲代 DNA 完全相同的子代 DNA 分子,每个子代 DNA 分子都包含一条亲代链和一条新合成的链。
分子生物学考研试题及答案# 分子生物学考研试题及答案## 一、选择题(每题2分,共20分)1. 以下哪个不是DNA聚合酶的功能?A. 校对功能B. 催化DNA链的延伸C. 催化RNA链的合成D. 催化DNA链的复制2. 真核生物的基因表达调控主要发生在哪个阶段?A. 转录前B. 转录后C. 翻译D. 翻译后3. 以下哪个是真核生物mRNA的5'端帽子结构?A. 甲基化鸟苷B. 磷酸化鸟苷C. 乙酰化鸟苷D. 腺苷4. 以下哪个不是蛋白质合成过程中的元件?A. 核糖体B. tRNAC. mRNAD. 内质网5. 基因克隆中,常用的载体是:A. 质粒B. 病毒C. 线粒体DNAD. 染色体DNA6. 以下哪个是限制性内切酶识别的序列?A. ATGB. GGTACCC. TATAAAD. CTTGAC7. 以下哪个是基因表达的负调控因子?A. 转录激活因子B. 转录抑制因子C. 转录因子D. RNA聚合酶8. 以下哪个是RNA干扰的机制?A. 降解mRNAB. 促进mRNA翻译C. 抑制蛋白质合成D. 促进DNA复制9. 以下哪个是基因组编辑技术CRISPR-Cas9的组成部分?A. 单链RNAB. 双链RNAC. 三链RNAD. 四链RNA10. 以下哪个是真核生物细胞周期的阶段?A. G0期B. G1期C. S期D. 所有选项都是## 二、简答题(每题10分,共30分)1. 简述PCR技术的原理及其在分子生物学中的应用。
2. 解释什么是转录后修饰,并举例说明其在蛋白质功能中的作用。
3. 描述基因敲除技术的原理,并简述其在生物医学研究中的重要性。
## 三、论述题(每题25分,共50分)1. 论述基因表达调控的多层次机制,并举例说明其在疾病发生中的作用。
2. 讨论CRISPR-Cas9基因编辑技术的优势、局限性以及未来可能的发展方向。
## 参考答案### 一、选择题1. C2. A3. A4. D5. A6. B7. B8. A9. B10. D### 二、简答题1. PCR技术,即聚合酶链反应,是一种分子生物学中用于快速制备大量特定DNA片段的方法。
重庆大学考研分子生物学题库+答案一、选择题1、以下哪种不是核酸分子杂交的类型?()A Southern 杂交B Northern 杂交C Western 杂交D 原位杂交答案:C解析:Western 杂交是用于检测蛋白质的技术,不是核酸分子杂交。
Southern 杂交用于检测 DNA,Northern 杂交用于检测 RNA,原位杂交则是在细胞或组织切片上进行的核酸杂交。
2、原核生物启动子中-10 区的保守序列是()A TATAATB TTGACAC CCAATD GGGCCC答案:A解析:原核生物启动子中-10 区的保守序列是 TATAAT,也称为Pribnow 盒。
3、以下哪种酶在 DNA 复制过程中负责解开双螺旋?()A DNA 聚合酶B 拓扑异构酶C 解旋酶D 引物酶答案:C解析:解旋酶的作用是解开 DNA 双螺旋结构,使复制得以进行。
DNA 聚合酶负责合成新的 DNA 链,拓扑异构酶主要解决 DNA 超螺旋问题,引物酶合成引物。
4、真核生物 mRNA 的 5'端帽子结构是()A m7GpppNmpNB m7ApppNmpNC m7CpppNmpND m7UpppNmpN答案:A解析:真核生物 mRNA 的 5'端帽子结构是 m7GpppNmpN,对mRNA 的稳定性和翻译起始等具有重要作用。
5、基因表达调控的主要环节是()A 转录起始B 转录后加工C 翻译起始D 翻译后加工答案:A解析:转录起始是基因表达调控的关键环节,通过调控转录起始复合物的形成来控制基因表达的水平。
二、填空题1、核酸的基本组成单位是_____。
答案:核苷酸2、 DNA 双螺旋结构的稳定因素主要有_____、_____和_____。
答案:碱基堆积力、氢键、离子键3、蛋白质生物合成的模板是_____,场所是_____。
答案:mRNA、核糖体4、操纵子包括_____、_____和_____。
答案:调节基因、操纵基因、结构基因5、基因突变的类型有_____、_____、_____和_____。
分子生物学试题及答案一、单项选择题(每题2分,共20分)1. DNA分子的双螺旋结构是由谁提出的?A. 沃森和克里克B. 达尔文C. 孟德尔D. 摩尔根答案:A2. 以下哪个不是DNA聚合酶的功能?A. 合成DNA链B. 修复DNA损伤C. 催化RNA转录D. 校对新合成的DNA链答案:C3. 真核生物的mRNA帽子结构位于其5'端,其主要功能是什么?A. 促进翻译B. 保护mRNA不被降解C. 促进mRNA的剪接D. 促进mRNA的运输答案:B4. 以下哪种RNA分子在蛋白质合成中不直接参与?A. mRNAB. tRNAC. rRNAD. snRNA5. 基因表达调控中,转录因子的作用是什么?A. 提供转录所需的能量B. 识别并结合到特定的DNA序列上C. 催化DNA复制D. 促进DNA修复答案:B6. 以下哪种技术用于研究基因功能?A. PCRB. DNA测序C. 基因敲除D. DNA指纹分析答案:C7. 以下哪个不是DNA复制的特点?A. 半保留复制B. 需要引物C. 双向复制D. 需要逆转录酶答案:D8. 以下哪个不是RNA干扰(RNAi)的作用机制?A. 降解特定的mRNAB. 抑制基因表达C. 促进基因突变D. 沉默特定基因答案:C9. 以下哪个是真核生物中常见的非编码RNA?B. siRNAC. tRNAD. rRNA答案:A10. 以下哪个是原核生物和真核生物共有的基因表达调控机制?A. 转录后修饰B. 转录因子调控C. mRNA剪接D. 核糖体结合位点调控答案:B二、填空题(每空1分,共20分)1. DNA分子的基本组成单位是_______,而RNA分子的基本组成单位是_______。
答案:脱氧核苷酸;核糖核苷酸2. 在DNA复制过程中,_______酶负责解开双链DNA,而_______酶负责合成新的DNA链。
答案:解旋酶;DNA聚合酶3. 真核生物的基因表达调控主要发生在_______水平,而原核生物的基因表达调控主要发生在_______水平。
分子生物学试题及答案2一、单项选择题(每题2分,共10分)1. DNA分子的双螺旋结构是由哪位科学家提出的?A. 牛顿B. 达尔文C. 沃森和克里克D. 孟德尔答案:C2. 以下哪个不是DNA聚合酶的功能?A. 复制DNAB. 修复DNA损伤C. 转录mRNAD. 合成DNA答案:C3. 在中心法则中,信息流的方向是什么?A. DNA→DNAB. DNA→RNA→蛋白质C. RNA→DNAD. 蛋白质→RNA答案:B4. 以下哪种分子不是RNA分子?A. mRNAB. tRNAC. rRNAD. DNA答案:D5. 基因编辑技术CRISPR-Cas9中,Cas9蛋白的作用是什么?A. 识别并结合到目标DNA序列B. 切割RNA分子C. 转录mRNAD. 翻译蛋白质答案:A二、多项选择题(每题3分,共15分)1. 下列哪些是真核生物mRNA的加工过程?A. 加帽B. 剪接C. 多聚腺苷酸化D. 甲基化答案:ABC2. DNA复制过程中涉及的酶有哪些?A. DNA聚合酶B. DNA连接酶C. DNA解旋酶D. DNA修复酶答案:AC3. 以下哪些是基因表达调控的机制?A. 转录因子的结合B. DNA甲基化C. 组蛋白修饰D. RNA干扰答案:ABCD4. 以下哪些是RNA分子的功能?A. 作为蛋白质合成的模板B. 催化生化反应C. 作为遗传物质D. 参与基因表达调控答案:ABD5. CRISPR-Cas9技术可以用于哪些应用?A. 基因敲除B. 基因插入C. 基因编辑D. 基因表达分析答案:ABC三、填空题(每空1分,共20分)1. DNA分子的双螺旋结构由两条反向平行的_________链组成。
答案:多脱氧核苷酸2. 在转录过程中,RNA聚合酶识别的DNA序列是_________序列。
答案:启动子3. 真核生物的mRNA在细胞核中经过剪接后,会加上一个_________结构。
答案:5'端帽子4. 在蛋白质合成过程中,tRNA分子的_________端携带氨基酸。
分子生物学试题及答案一、选择题(每题2分,共10分)1. DNA双螺旋结构是由谁提出的?A. 沃森和克里克B. 孟德尔C. 达尔文D. 牛顿答案:A2. 下列哪一项不是DNA聚合酶的功能?A. 合成DNA链B. 修复DNA损伤C. 转录mRNAD. 校对错误答案:C3. RNA聚合酶催化的转录过程发生在细胞的哪个部位?A. 细胞核B. 细胞质C. 线粒体D. 叶绿体答案:A4. 下列哪种RNA不参与蛋白质合成?A. mRNAB. tRNAC. rRNAD. snRNA答案:D5. 真核生物mRNA的5'端通常具有哪种修饰?A. 帽子结构B. 多聚腺苷酸尾巴C. 磷酸基团D. 甲基化答案:A二、填空题(每题2分,共10分)1. DNA的基本组成单位是_______。
答案:脱氧核苷酸2. 转录过程中,RNA聚合酶识别的DNA序列是_______。
答案:启动子3. 真核生物的mRNA在翻译过程中需要_______的参与。
答案:核糖体4. 在蛋白质合成中,tRNA的反密码子与mRNA上的密码子通过_______配对。
答案:碱基互补配对5. 基因表达调控中,转录因子可以结合到DNA上的_______序列。
答案:调控元件三、简答题(每题5分,共20分)1. 简述DNA复制的基本过程。
答案:DNA复制是一个精确的过程,包括解旋、合成引物、合成互补链、合成滞后链和连接冈崎片段等步骤。
2. 描述RNA干扰(RNAi)的基本原理。
答案:RNAi是一种基因沉默机制,通过小RNA分子引导的复合体降解或抑制特定mRNA,从而抑制基因表达。
3. 什么是CRISPR-Cas9系统?它在基因编辑中的应用是什么?答案:CRISPR-Cas9系统是一种细菌的免疫系统,可以被改造用于基因编辑,通过导向RNA(gRNA)和Cas9酶识别并切割特定DNA序列,实现基因的敲除、插入或替换。
4. 阐述基因表达调控的主要层次。
答案:基因表达调控的主要层次包括转录水平调控、转录后水平调控、翻译水平调控和翻译后水平调控。
分子生物学试题库及答案一、单选题(共100题,每题1分,共100分)1、DNA双链状态下属于完全回文结构的序列是A、CGTGGTGCB、CGTGCGTGC、CGTGCACGD、GACTCTGAE、CTGAGATC正确答案:C2、目前使用最广的将外源基因注入动物受精卵的方法是A、胚胎干细胞法B、显微注射法C、逆转录病毒载体法D、精子载体法E、脂质体包裹法正确答案:B3、转录起始生成RNA的第一位核苷酸最常见的是A、ATPB、AMPC、GTPD、GMPE、CMP正确答案:C4、DNA分子上特异识别和结合RNA聚合酶的部位是A、启动子B、终止子C、操纵子D、衰减子E、外显子正确答案:A5、下列对大肠杆菌DNA聚合酶的叙述不正确的是A、DNA 聚合酶 I可被酶切产生大小两个片段B、DNA 聚合酶Ⅱ具有3’→5’外切酶活性C、DNA 聚合酶Ⅲ在复制链延长中起主要作用D、DNA聚合酶Ⅱ可切除引物E、以四种脱氧核糖核苷酸作为底物正确答案:D6、当要了解某一基因在某组织细胞中的mRNA表达水平时,采用哪种方法最合适A、Southern blottingB、Northern blottingC、Western blottingD、免疫组化分析E、Dot blotting正确答案:B7、基因有两条链,与mRNA序列相同(T代替U)的链叫做A、有义链B、反义链C、重链D、cDNA链E、模板链正确答案:A8、关于色氨酸操纵子错误的描述是A、核蛋白体参与转录终止B、衰减子是关键的调控元件C、色氨酸不足时,转录提前终止D、转录与翻译偶联是其转录调控的分子基础E、色氨酸存在与否不影响先导mRNA的转录正确答案:C9、cDNA文库的建立需要A、逆转录酶、DNA模板B、依赖DNA的DNA聚合酶、mRNA模板C、逆转录酶、mRNA模板D、依赖RNA的DNA聚合酶、tRNA模板E、逆转录酶、rRNA模板正确答案:C10、关于加帽修饰,说法正确的是A、snRNA不能被加帽B、由加帽酶催化5' 端加入7甲基鸟苷酸C、加帽酶可以与RNA聚合酶I、II、III相结合D、hnRNA转录终止后才开始加帽E、RNA聚合酶发生磷酸化后,使加帽酶与之脱离正确答案:B11、eIF-2对翻译起始具有重要的调控作用,下列哪项是它的活性形式A、磷酸化B、脱乙酰化C、乙酰化D、脱磷酸化E、ADP-核糖基化正确答案:D12、下列哪项不是原核生物DNA复制是所必需的A、单链结合蛋白B、DNA聚合酶ⅢC、DNA聚合酶ⅡD、Dna G蛋白E、ATP正确答案:C13、核酸分子杂交试验不能用于A、单链DNA分子之间的杂交B、单链DNA分子与RNA之间的杂交C、抗原与抗体分子之间的杂交D、基因组DNA与PCR产物之间的杂交E、RNA与RNA之间的杂交正确答案:C14、关于cDNA的最正确的叙述是A、与mRNA互补的单链DNAB、与mRNA互补的双链DNAC、以mRNA为模板合成的双链DNAD、以单链DNA为模板合成的双链DNAE、与mRNA互补的单链RNA正确答案:C15、关于分解物阻遏的作用机制,说法正确的是A、葡萄糖缺乏时,cAMP浓度低B、葡萄糖缺乏时,CAP浓度低C、葡萄糖缺乏时,cAMP不能与CAP形成复合物D、葡萄糖缺乏时,cAMP-CAP复合物浓度高E、葡萄糖缺乏时,cAMP-CAP复合物失去DNA结合能力正确答案:D16、采用翻译后转运机制的蛋白质是A、免疫球蛋白B、肽类激素C、核DNA编码的线粒体蛋白D、凝血因子E、水解酶正确答案:C17、IPTG诱导乳糖操纵子表达的机制是A、使乳糖-阻遏蛋白复合物解离B、与阻遏蛋白结合,使之丧失DNA结合能力C、与乳糖竞争结合阻遏蛋白D、与RNA聚合酶结合,使之通过操纵序列E、变构修饰RNA聚合酶,提高其活性正确答案:B18、下列哪种染色质结构的变化不利于基因表达A、组蛋白乙酰化B、核小体解聚C、CpG岛甲基化D、基因扩增E、染色质结构松散,对DNA酶I敏感正确答案:C19、大肠杆菌DNA经过复制得到的两个环状DNA分子,需经哪种酶分环A、拓扑异构酶ⅠB、拓扑异构酶ⅡC、单链结合蛋白D、解螺旋酶E、核酸内切酶正确答案:B20、关于大肠杆菌DNA复制终止,正确说法是A、两个复制叉同时终止前进B、两个复制叉终止于同一位点或附近C、复制叉停止时,DNA所有碱基均已被复制D、不需要蛋白质因子参与E、复制叉有可能通过终止区继续复制正确答案:B21、下列哪项不是信号肽的特点A、N端一小段富含亲水氨基酸的序列B、与细胞质中的信号识别颗粒结合C、SRP受体是蛋白进入内质网所必须的D、翻译的同时引导新生多肽链穿过内质网膜E、N端一小段富含疏水氨基酸的序列正确答案:A22、DNA半保留复制不涉及A、冈崎片段B、引物酶C、DNA聚合酶D、氨基酰tRNA合成酶E、DNA连接酶正确答案:D23、真核生物染色体基因组是A、线性双链DNA分子B、环状双链DNA分子C、线性单链DNA分子D、线性单链RNA分子E、环状单链DNA分子正确答案:A24、E,coli RNA聚合酶的核心酶含有的亚基是A、α、β、β'、σB、α、β、σ 、ωC、α、β'、σ 、ωD、α、β、β' 、ωE、β、β'、σ 、ω正确答案:D25、关于Northern印迹的描述,哪一项是不正确的A、DNA-RNA杂交B、将RNA逆转录为cDNAC、探针与靶RNA杂交D、将细胞中提取的总RNA经电泳分离转移到膜上E、杂交后放射自显影观察RNA的大小与表达量正确答案:B26、复制起点被甲基化修饰的序列是A、TTAGGGB、A/TTTTARTTTA/TC、GATCD、ATE、TTGGGG正确答案:C27、实验证实DNA的半保留复制的学者是A、Meselson和StahlB、KornbergC、Vinograd和LebowitzD、Watson和CrickE、Cairns正确答案:A28、大肠杆菌DNA聚合酶Ⅲ全酶是A、对称的二聚体B、不对称的二聚体C、一条多肽D、对称的三聚体E、不对称的三聚体正确答案:B29、端粒酶是一种A、依赖DNA的DNA聚合酶B、RNA聚合酶C、DNA连接酶D、逆转录酶E、拓扑异构酶正确答案:D30、无性繁殖依赖DNA载体的哪种结构A、筛选标记B、启动子C、复制起始点D、多克隆位点E、反应元件正确答案:C31、复制叉前进时,其前方的DNA双螺旋会形成哪种结构A、负超螺旋B、正超螺旋C、右手螺旋D、左手螺旋E、松弛状态正确答案:B32、哪一项不属于基因表达的范畴A、哈哈哈哈哈哈B、DNA模板指导的hnRNA合成C、DNA模板指导的DNA合成D、DNA模板指导的rRNA合成E、DNA模板指导的snRNA合成正确答案:C33、DNA延伸时,不包括哪种过程A、DNA双链解链B、复制叉前进C、释放拓扑张力D、dNTP聚合E、RNA引物消除正确答案:E34、RNA编辑发生在哪一个层次A、复制水平B、转录水平C、转录后水平D、翻译水平E、翻译后水平正确答案:C35、乳糖操纵子的调控方式是A、CAP的正调控B、阻遏蛋白的负调控C、正、负调控机制不可能同时发挥作用D、CAP拮抗阻遏蛋白的转录封闭作用E、阻遏作用解除时,仍需CAP加强转录活性正确答案:E36、真核生物染色质中的组蛋白是A、碱性蛋白质B、酸性蛋白质C、一种转录因子D、带负电荷E、不带电荷正确答案:A37、大肠杆菌中催化mRNA链延长的酶是A、Klenow fragmentB、α2ββ'σ ωC、DNA-pol IIID、α2ββ'ωE、RNA-pol II正确答案:D38、下列哪一项不属于核酸A、操纵子B、复制子C、转录因子D、顺反子E、转录子正确答案:C39、关于加尾修饰,说法错误的是A、组蛋白的成熟mRNA无需加poly A尾B、加尾信号包括AAUAAA和富含GU的序列C、剪切过程需要多种蛋白质因子的辅助D、加尾不需模板E、多聚A形成的过程是缓慢、匀速的反应正确答案:E40、细菌优先利用葡萄糖作为碳源,葡萄糖耗尽后才会诱导产生代谢其他糖的酶类,这种现象称为A、协调调节作用B、衰减作用C、诱导作用D、分解物阻遏作用E、阻遏作用正确答案:D41、不属于特异转录因子的是A、TF II DB、HSFC、AP1D、类固醇激素受体E、NF-κB正确答案:A42、下列有关真核生物结构基因的说法不正确的是A、结构基因大都为断裂基因B、结构基因的转录是不连续的C、含有大量的重复序列D、结构基因在基因组中所占比例较小E、产物多为单顺反子RNA正确答案:B43、下述序列中,在双链状态下属于完全回文结构的序列是A、TGTAATGTB、TGTATGTAC、GGTCGACCD、TACGCTGAE、GTGAGATG正确答案:C44、下列哪种因素对原核生物的翻译没有影响A、microRNAB、稀有密码子所占的比例C、mRNA的稳定性D、反义RNAE、调节蛋白结合mRNA正确答案:A45、RNA引物位于A、前导链和随后链的5’端B、前导链和随后链的3’端C、仅冈崎片段的5’端D、仅冈崎片段的3’端E、前导链和冈崎片段的5’端正确答案:E46、大肠杆菌复制起始点发生最先解链的是A、20~30 bp的片段B、9 bp的短重复序列C、13 bp的短重复序列D、40 bp的片段E、200 bp的片段正确答案:C47、下列有关原核生物的说法不正确的是A、基因组中只存在一个复制起点B、在一个操纵子内,几个结构基因共用一个启动子C、原核生物的结构基因与调控序列以操纵子的形式存在D、操纵元件也是结构基因E、在操纵子中,功能上关联的结构基因串联在一起正确答案:D48、关于限制性内切酶的叙述错误的是A、它能识别DNA特定的碱基顺序,并在特定的位点切断DNAB、切割点附近的碱基顺序一般呈回文结构C、它能专一降解经甲基修饰的DNAD、是DNA重组的重要工具酶E、主要从细菌中获得正确答案:C49、在DNA复制中,RNA引物的作用是A、使DNA聚合酶Ⅲ活化B、使DNA 链解开C、提供5’-磷酸末端作合成新DNA链起点D、提供3’-OH末端作合成新DNA链起点E、提供3’-OH末端作合成新RNA链起点正确答案:D50、E,coli RNA聚合酶的全酶与核心酶的差别在于A、α亚基B、β亚基C、β'亚基D、σ亚基E、以上都包括正确答案:D51、酵母基因组复制时,DNA双螺旋最先解链的是A、区段B1B、区段B2C、区段B3D、ORCE、ORS正确答案:B52、乳糖操纵子中,能结合别位乳糖(诱导剂)的物质是A、AraCB、cAMPC、阻遏蛋白D、转录因子E、CAP正确答案:C53、DNA复制错误较少的原因中,解释正确的是A、DNA聚合酶Ⅰ具有5’ →3’外切酶活性B、DNA聚合酶Ⅱ具有3’→5’外切酶活性C、DNA聚合酶Ⅰ具有3’ →5’外切酶活性D、DNA聚合酶Ⅲ具有3’ → 5’外切酶活性E、以上说法都对正确答案:E54、质粒DNA导入细菌的过程称为A、转化B、转染C、感染D、传染E、连接正确答案:A55、关于真核生物的翻译起始,不正确的说法是A、翻译起始的过程较原核生物复杂B、eIF-2是调节真核翻译起始的关键因子C、起始氨基酰-tRNA进入核糖体的P位D、mRNA的SD序列与其在核糖体上就位有关E、由80S核糖体、mRNA和Met-tRNAiMet组成翻译起始复合物正确答案:D56、下列关于cDNA文库的叙述中,错误的是A、从特定组织或细胞中提取DNAB、从特定组织或细胞中提取RNAC、由反转录酶催化合成与mRNA互补的单链DNAD、以新合成的单链DNA为模板合成双链DNAE、双链DNA与合适载体连接后转入受体菌正确答案:A57、原核生物的基因组主要存在于A、质粒B、线粒体C、类核D、高尔基体E、核糖体正确答案:C58、RNA通常是A、线性双链分子B、环状单链分子C、线性单链分子D、环状双链分子E、以上都不对正确答案:C59、15N标记的大肠杆菌在14N培养基中生长3代,那么由单个大肠杆菌产生的14N-DNA纯合分子是几个A、4B、6C、8D、10E、2正确答案:B60、在上题所述条件下,若要以此DNA片段为模板通过PCR合成新的DNA 分子,需要哪些成分A、dNTP、限制性内切酶、去离子水B、Taq DNA聚合酶、NTP、引物C、dNTP、Taq DNA聚合酶、引物、反应缓冲液D、DNA模板、dNTP、DNA连接酶E、DNA模板、dNTP、Taq DNA聚合酶、引物、反应缓冲液、Mg2+正确答案:E61、合成DNA的原料是A、dAMP、dGMP、dCMP、dTMPB、dADP、dGDP、dCDP、dTDPC、dATP、dGTP、dCTP、dTTPD、AMP、GMP、CMP、TMPE、ATP、GTP、CTP、TTP正确答案:C62、mRNA在蛋白质合成中的功能是A、运输遗传密码所对应的氨基酸B、与蛋白质结合,提供合成场所C、与帽子结合蛋白结合启动翻译D、由三联体密码指引氨基酸的排列顺序E、通过剪切因子切除poly A尾调控翻译效率正确答案:D63、已知一段DNA的序列为有意义链5’-ATGTTGGAGACAGGAG-------TCTCAAGGAAGC-3’反义链3’-TACAACCTCTGTCCTC--------AGAGTTCCTTCG-5’----------------------------------------> 箭头表明DNA复制时的复制叉移动方向,哪条链是合成随后链的模板A、有意义链B、反义链C、两条链均可D、模板链E、负链正确答案:A64、DNA复制时,子代DNA的合成是A、一条链以5’→3’合成,另一条链以3’→5’合成B、两条链均以3’→5’合成C、两条链均以5’→3’合成D、两条链先以3’→5’生成冈崎片段,再连接成长链E、两条链先以5’→3’生成冈崎片段,再连接成长链正确答案:C65、关于端粒的说法,错误的有A、位于真核生物染色体末端B、由RNA和蛋白质组成C、端粒酶催化端粒DNA延长D、在决定细胞寿命中起重要作用E、含短的高度重复序列正确答案:B66、关于大肠杆菌基因组DNA的复制,错误的说法是A、大肠杆菌DNA复制为双向复制B、大肠杆菌DNA复制为滚环复制C、只有一个复制起点D、链的延伸主要靠DNA聚合酶ⅢE、复制依靠碱基配对原则聚合生成子代DNA链正确答案:B67、电子显微镜下观察到原核生物的基因表达呈现羽毛状结构,其根本原因在于A、多聚核蛋白体形成B、转录与翻译偶联进行C、新生的多肽链不脱落D、多个转录过程同时进行E、多个翻译过程同时进行正确答案:C68、真核生物的转录不需要A、依赖DNA的RNA聚合酶B、三磷酸核苷C、DNAD、RNAE、蛋白质正确答案:D69、关于转录和复制的区别,说法正确的是A、DNA双链均复制和转录B、复制的原料是一磷酸脱氧核苷,转录的原料是一磷酸核苷C、复制需要引物,转录不需要引物D、复制酶是依赖DNA的DNA聚合酶,转录酶是依赖RNA的DNA聚合酶E、均遵守碱基配对规律,模板中A对应的产物是T正确答案:C70、作为克隆载体的最基本条件是A、DNA相对分子质量较小B、环状双链DNA分子C、有自我复制功能D、有多克隆位点E、有一定遗传标志正确答案:C71、参与蛋白质合成的蛋白质因子不包括A、反式作用因子B、延长因子C、转肽酶D、起始因子E、释放因子正确答案:A72、原核生物的RNA聚合酶有几种A、1B、2C、3D、4E、5正确答案:A73、酵母基因组DNA复制时,起始识别复合物的结合位点是A、ARSB、ORCC、ORSD、CACE、TBP正确答案:C74、重组DNA技术中实现目的基因与载体DNA拼接的酶是A、DNA聚合酶B、RNA聚合酶C、DNA连接酶D、RNA连接酶E、限制性核酸内切酶正确答案:C75、DNA重组体的构建是指A、对目的DNA片段作选择性扩增和表达的检测B、选择目的基因和表达载体C、将目的基因和载体在体外重组D、用一定方法转移目的基因到宿主细胞E、从细胞中提取DNA,在体外切割所需要的DNA片段正确答案:C76、以DNA为模板合成RNA的过程称为A、DNA replicationB、transcriptionC、reverse transcriptionD、translationE、RNA replication正确答案:B77、下列哪一项是真核生物可调节基因的表达调控特有的机制A、基础转录因子B、衰减子C、RNA聚合酶D、增强子E、阻遏蛋白正确答案:D78、下列哪一项不是蛋白质的分拣信号A、SD sequenceB、signal peptideC、MLSD、KDELE、NLS正确答案:A79、乳糖操纵子模型是在哪个环节上调节基因表达A、转录水平B、翻译水平C、转录后水平D、翻译后水平E、复制水平正确答案:A80、遗传信息在DNA水平的传递是由于A、DNA的半保留复制B、DNA的双向复制C、DNA的连续复制D、DNA可转录生成mRNAE、DNA可表达成蛋白质正确答案:A81、下列哪项不属于真核生物基因的顺式作用元件A、增强子B、衰减子C、激素反应元件D、沉默子E、启动子正确答案:B82、关于大肠杆菌基因组DNA复制,以下说法中错误的是A、在新一轮的复制中会出现有两个以上复制叉的现象B、大肠杆菌的复制尚未完成就可发生分裂C、复制起点可连续发动复制D、复制过程中染色体形成θ形状E、复制起始点两侧分别同时进行复制正确答案:B83、与RNA聚合酶相识别和结合的DNA片段是A、增强子B、衰减子C、沉默子D、操纵子E、启动子正确答案:E84、真核生物的RNA聚合酶发生哪种修饰后,进入转录延长阶段A、磷酸化B、去磷酸化C、甲基化D、去甲基化E、乙酰化正确答案:A85、有关原核生物结构基因的转录,叙述正确的是A、产物多为多顺反子RNAB、产物多为单顺反子RNAC、不连续转录D、对称转录E、逆转录正确答案:A86、复制起点富含哪种碱基时易被与复制有关的酶和蛋白质识别A、GCB、ATC、AGD、CTE、TG正确答案:B87、关于真核生物染色体DNA复制起点,正确说法是A、每条染色体上有一个复制起点B、每条染色体上有多个复制起点C、每条染色单体上有一个复制起点D、每条DNA链上有两个复制起点E、以上都不对正确答案:B88、大肠杆菌基因组DNA复制的起始与哪种碱基的修饰有关A、AB、GC、TD、CE、U正确答案:A89、不符合基因工程中理想载体条件的是A、具有自主复制能力B、分子量很大C、具有限制性内切酶的单一切点D、有一个或多个筛选标志E、易与染色体DNA分离正确答案:B90、原核生物的70S 翻译起始复合物不包括A、50S 亚基B、IF-2C、fMet-tRNAD、mRNAE、30S 亚基正确答案:B91、真核生物的基因组一般比较庞大,但所含基因总数却很少,究其原因下列说法不正确的是A、产物多为单顺反子RNAB、存在大量的重复序列C、非编码区所占比例较大D、存在大量的内含子E、编码区所占比例很小正确答案:A92、原核生物mRNA中的哪种结构与核糖体相结合A、AUGB、SD序列C、ORFD、5' 端非翻译区E、3' 端非翻译区正确答案:B93、逆转录酶催化A、以RNA为模板的DNA合成B、以DNA为模板的RNA合成C、以mRNA为模板的蛋白质合成D、以DNA为模板的DNA合成E、以RNA为模板的RNA合成正确答案:A94、转基因动物是指A、把某基因整合入动物的受精卵中,再导入子宫,从而发育成新个体B、把某基因转入动物某组织细胞C、把某基因从一个动物转移到另一动物D、把致病基因从动物细胞内转走E、把某基因转入动物的受精卵中正确答案:A95、下列哪种氨基酸在转录因子的转录激活结构域中含量丰富A、LysB、ArgC、AspD、HisE、Trp正确答案:C96、蛋白质的生物合成不直接需要A、RNAB、RNA剪切因子C、分子伴侣D、帽子结合蛋白E、GTP正确答案:B97、关于起始tRNA说法错误的是A、在肽链延长阶段,起始tRNA不能继续运输蛋氨酸B、原核与真核起始tRNA所携带的氨基酸不同C、真核生物中识别AUG的tRNA至少有两种D、原核生物的起始tRNA可以辨认AUG、GUG和UUGE、原核生物的起始tRNA可以运输N-甲酰甲硫氨酸、缬氨酸和亮氨酸正确答案:E98、有关基础转录因子的叙述,正确的是A、与非转录核心序列相结合B、决定基因表达的特异性C、其种类和数量在不同组织中差别很大D、辅助RNA聚合酶结合启动子E、在原核生物中的种类比真核生物少正确答案:D99、DNA克隆过程不包括以下步骤A、获取目的基因B、选择与修饰载体C、筛选转化子D、获得重组DNA分子E、合成探针检测基因正确答案:E100、克隆某一目的DNA的过程不包括A、基因载体的选择B、外源基因与载体的拼接C、重组DNA分子导入细菌D、筛选并无性繁殖含重组分子的细菌E、表达目的基因编码的蛋白质正确答案:E。
重庆大学考研分子生物学题库+答案重庆大学考研分子生物学题库+答案一、选择题(每题1分,共40分)1. 下列哪个不是细胞核的主要功能?A. 存储细胞的遗传信息B. 控制细胞的生物合成C. 产生细胞的能量D. 调控细胞的代谢活动2. DNA双链断裂修复的机制通常包括下列哪几种?A. 直接粘连B. 非同源末端连接C. 同源重组D. 缺失修复3. 哪个细胞器负责细胞呼吸?A. 高尔基体B. 细胞核C. 线粒体D. 液泡4. 下列哪个涉及基因的修饰?A. 转录B. 翻译C. 反转录D. 修复5. 哪种细胞分裂方式能够产生四个不同的子细胞?A. 有丝分裂B. 红糖核酸分裂C. 线粒体分裂D. 减数分裂......40. 以下关于DNA复制的说法中,不正确的是:A. DNA复制是一个半保持的过程B. DNA复制是一个半保守的过程C. DNA复制是从3'端到5'端进行的D. DNA复制依赖于DNA聚合酶二、简答题(共10题,每题5分,共50分)1. 请简要描述DNA的双链结构。
2. 简述RNA合成过程中的启动子和终止子的功能。
3. 请解释核糖体是如何进行蛋白质合成的?4. 请简要介绍细胞凋亡的过程。
5. 简述DNA损伤修复的三种主要机制。
6. 请解释克隆的概念。
7. 简述细胞周期的四个主要阶段。
8. 请解释转录过程中的前转录复合物和转录泡的作用。
9. 简要描述RNA干扰的机制。
10. 请解释蛋白质后修饰的作用。
三、论述题(共3题,每题15分,共45分)1. 请论述细胞分裂的重要性以及其不同类型之间的区别。
2. 请详细说明DNA复制的过程,并阐述其重要性。
3. 在细胞分裂过程中,细胞骨架起到了重要的支持和调控作用,请描述细胞骨架的结构和功能。
答案解析:选择题答案:1-10 DCACA 11-20 BBAAC 21-30 BADCB 31-40 CBAAD简答题答案:1. DNA双链结构由两条互补的核苷酸链组成,通过氢键连接在一起。
高级分子生物学1.试述利用基因工程的技术调控基因表达的主要方法原位杂交技术原位杂交(In Situ Hybridization,ISH)是用标记的核酸探针,经放射自显影或非放射检测体系,在组织、细胞、间期核及染色体上对核酸进行定位和相对定量研究的一种手段。
通常可以分为两大类:1、RNA原位杂交:用放射性或非放射性(如地高辛、生物素等)标记的特异性探针与被固定的组织切片反应,若细胞中存在与探针互补的mRNA分子,两者杂交产生双链RNA,就可以通过检测放射性标记或经酶促免疫显色,对该基因的表达产物在细胞水平上作出定性定量分析;2、荧光原位杂交(Fluorescence In Situ Hybridization,FISH):首先对于寡核苷酸探针做特殊修饰和标记,然后用原位杂交法与靶染色体或DNA上特定的序列结合,再通过与荧光素分子相偶联的单克隆抗体来确定该DNA序列在染色体的位置。
定点突变技术定点突变是重组DNA进化的基础,该方法通过改变基因特定位点核苷酸序列来改变所编码的氨基酸序列,常用于研究某个氨基酸残基对蛋白质的结构、催化活性以及结合配体能力的影响,也可用于改造DNA调控元件特征序列、修饰表达载体、引入新的酶切位点等。
RNAi技术RNA干扰(RNA interference,RNAi)技术利用双链小RNA高效、特异性降解细胞内同源mRNA,从而阻断体内靶基因表达,使细胞出现靶基因缺失的表型。
其过程一般为:1、在Dicer的参与下,细胞中的双链RNA首先被降解形成21-25个核苷酸的小片段双链RNA(siRNA);2、siRNA中的反义链指导合成一种被称为RNA诱导的沉默复合体(RISC)的核蛋白体;3、RISC再介导切割目的mRNA分子中与siRNA反义链互补的区域,从而实现干扰基因表达的功能。
2.论述原核生物和真核生物基因表达调控的异同答:1、真核生物基因组大,染色体数量多,且结构复杂,存在基因家族和断裂基因;原核生物基因组小,染色体数量少,结构简单,有重叠基因和操纵子结构,基因表达调控可以在复制、扩增、基因激活、转录、转录后、翻译和翻译后等多级水平上进行,但转录水平调控是主要的。
真核生物基因表达调控机制发生在染色体活化、基因转录激活、转录后加工、翻译及翻译后加工等多水平的调节,事件也复杂的多。
2、真核生物基因表达以正调控为主,基因的转录与染色质的结构变化相关,真核基因转录发生在细胞核(线粒体基因的转录在线粒体内),需对内含子精确剪接加工,翻译则多在胞浆,两个过程是分开的。
基因表达调控的环节比原核生物更多。
原核生物中,营养条件和环境因素对基因表达调控起举足轻重的作用,mRNA在形成过程中与核糖体混合在一起,即转录和翻译过程相耦联。
3.简述α互补筛选(蓝白斑筛选)适用于含有半乳糖苷酶基因(LacZ)的载体,如 pUC系列等,其原理是:载体含有LacZ的调控序列和N端146个氨基酸的编码信息。
在这个编码区中插入了一个多克隆位点。
当这种载体进入可编码β-半乳糖苷酶C端部分序列的宿主细胞后(质粒和宿主细胞编码的片段各自都没有酶活性),它们可以融为一体,形成具有酶学活性的蛋白质,这种现象叫α互补。
由α互补而产生的 Lac+ 细菌在呈色底物 X-gal和诱导剂IPTG存在下形成蓝色菌落。
当外源DNA插入到质粒的多克隆位点后,导致产生无α互补能力的氨基端片段。
因此,带有重组质粒的细菌形成白色菌落。
通过呈色反应即可初步识别可能带有重组质粒的菌落。
通过小量制备质粒DNA进行限制酶切分析,即可确定这些质粒的结构。
4.简述菌落PCR筛选该方法是以转化菌单个克隆为模板,采用特异性引物或通用引物对目的基因进行PCR扩增,然后通过凝胶电泳等手段来鉴定筛选阳性转化子,最后可以经提取质粒DNA进行酶切和质粒PCR双重鉴定以及测序分析进一步确认菌落PCR的结果。
5.简述杂交探针技术的原理和方法在制备好合适的基因文库后,如果用可获得目的基因的互补DNA或RNA做探针,就可以利用核酸杂交技术鉴定出特定的重组体克隆。
原理:任两条单链核酸分子都有相互形成碱基对的趋势,但形成的大多数分子对由于只有少数链间氢键形成,杂交结构并不稳定,如果多聚核苷酸链是互补的,碱基对的大量形成使双链分子稳定。
步骤:1、把菌落或噬菌斑转移到硝酸纤维膜上,处理除去杂质,只留下DNA,使DNA分子变性,双螺旋之间的氢键断裂2、短时间的加热会使这些单链DNA分子牢固结合到膜上。
DNA分子与膜结合其碱基是自由的,可以自由配对。
3、然后把探针加上标签,加热变性,再加到适宜核酸退火的化学溶液中与膜结合。
经过一段时间,等杂交发生后,洗去没有结合的探针,干燥,检测结合的探针的位置,从而筛选出想要获得阳性克隆。
6.对天然质粒的人工构建、改造通常需要对质粒哪些方面进行操作、改进?答:对于天然质粒应该做以下几方面的操作、改进:1.删除一些非必要的区段及对宿主有不良影响的区段2.削减载体的分子量,是载体具有更大的容纳外源片段的能力3.加上易于选择或检测的标记,以便筛选出阳性克隆4.限制性内切酶的酶切位点的改造,便于外源基因插入到载体的特定位置5.加上一些调控元件,有利于基因的表达6.安全性改造(因为是简答题,以下四点可以不要,但建议最好要):(1)非传递性和不被带动转移。
在基因工程操作中,不希望载体能够进行自主传递,也不希望被带动转移;(2)具有条件致死突变。
如温度敏感时就丧失复制能力,可防止克隆基因扩散,只存在于限定的宿主细胞中;(3)一般情况下不希望与宿主染色体发生重组,因为重组后可能给宿主带来突变;(4)有较小的宿主范围。
7. 大肠杆菌乳糖操纵子的主要结构,调节机制。
答:大肠杆菌的乳糖操纵子(LAC操纵子)含Z、Y及A三个结构基因,分别编码β—半乳糖苷酶、透酶、乙酰基转移酶,此外还有一个操纵基因O、一个启动子P及一个调节基因I。
I基因编码一种与O基因结合的阻遏蛋白,使操纵子受阻遏而处于转录失活状态。
在P上游还有一个分解(代谢)物基因激活蛋白CAP结合位点。
由P序列、O序列和CAP结合位点共同构成LAC操纵子的调控区,三个酶的编码基因由同一调控区调节,实现基因产物的协调表达。
调节机制:分阻遏蛋白的负调控与CAP的正调控两种机制,互相协调、互相制约。
1、阻遏蛋白的负调节:在没有乳糖存在时,I基因表达的乳糖阻遏蛋白与O序列结合,阻断转录启动;当有乳糖存在时,经透酶催化、转运进入细胞,再经原先存在于细胞中的少数β-半乳糖苷酶催化,转变为别乳糖,与阻遏蛋白结合,导致阻遏蛋白与O序列解离、发生转录,使β-半乳糖苷酶分子急剧增加。
2、CAP的正调节:当没有葡萄糖及cAMP浓度较高时,cAMP与CAP结合,这时CAP结合在乳糖启动序列附近的CAP位点,可刺激RNA转录活性;当葡萄糖存在时,cAMP浓度降低,cAMP与CAP 结合受阻,因此乳糖操纵子表达下降。
8. 试说明真核细胞与原核细胞在基因转录,翻译及DNA的空间结构方面存在的主要差异,表现在哪些方面?比较原核、真核基因组异同(1)染色体方面:原核生物为环状DNA分子,且DNA裸露或结合少量蛋白质,只有一个基因连锁群;真核生物为线性双链DNA分子,且DNA同组蛋白和非组蛋白结合,有2个以上基因连锁群。
(2)染色体遗传物质:原核生物为质粒,真核生物为细胞器基因组。
(3)转录单元:原核生物为多顺反子,真核生物为单顺反子,基因家族。
(4)DNA序列:原核生物无或很少有重复序列,真核生物有重复序列。
(5)基因表达:原核生物RNA和蛋白质在同一区间合成,有重叠基因;真核生物RNA在核中合成和加工,蛋白质在细胞中合成,有断裂基因。
比较原核、真核生物的转录过程异同答:原核生物:①起始过程需RNA聚合酶核心酶,由σ亚基辨认起始点(-35bp区)。
在这一区段酶与模板的结合松弛,酶移向-10区并跨入转录起始点。
②延长过程的核苷酸聚合仅需核心酶催化。
③终止分依赖ρ因子的和不依赖ρ因子的转录终止。
真核生物:①转录起始前的-25bp区段有启动子的核心序列TATAbox。
此外DNA分子上还具有其他可影响转录的顺式作用元件,以及能辨认和结合转录上游区段的反式作用因子。
真核生物RNA聚合酶不与DNA分子直接结合,而需依靠众多的转录因子。
②真核生物的转录延长过程与原核生物大致相似。
③真核生物mRNA有polyA尾结构,是转录后才加进去的。
转录不是在polyA位置上终止,而是超过数百甚至上千核苷酸后才停顿。
比较原核、真核生物的翻译异同1、原核生物与真核生物核蛋白体的组成不同。
2、真核生物肽链合成起始过程与原核生物相似但更复杂。
真核生物有不同的翻译起始成分,起始因子种类更多,起始甲硫氨酸不需甲基化等。
成熟的真核mRNA有5'帽子和3'polyA尾结构。
3、真核生物肽链合成的延长过程与原核生物基本相似,只是有不同的反应体系和延长因子。
4、真核生物的翻译终止过程与原核生物相似。
9.试说明色氨酸操纵子(Trp operon)在原核基因表达调控中的调控机制和重要作用。
色氨酸操纵子结构系:(1)含有5种结构基因:TrpE, D, C, B, A;(2)它的调控结构:启动子,操纵子,前导序列,弱化子。
(3)阻遏物Trp基因:它与Trp操纵子相距较远。
大量Trp存在时,大肠杆菌的5种酶的转录同时受到抑制,Trp不足时,这5酶基因开始转录。
前导序列中含有衰减子区域,在前导序列中第10位和第11位有相邻两个色氨酸密码子,参与转录弱化机制,弱化子对RNA聚合酶的影响依赖于前导肽翻译中核糖体所处的位置:(1)当Trp浓度高时,可完整翻译成短肽,核糖体可顺利通过两个相邻的色氨酸密码子,在4区被转录前,核糖体就到达2区,这样使2-3区不能配对,3-4区可自由配对形成茎-环状终止子结构,转录停止。
Trp操纵子中的结构基因被关闭而不再合成色氨酸。
(2)当Trp浓度低时,负载有Trp的转运RNA也少,这样翻译通过两个相邻色氨酸密码子的速度就会很慢,当4区被转录完成时,核糖体才到达1区,这时的前导区结构是2-3区配对,不形成3-4区配对的终止结构,故转录可继续进行,直到将Trp操纵子的结构基因全部转录。
11. 阐述酵母转录激活因子GAL4的调控方式及其在酵母双杂合系统(yeast two hybrid system)中的应用。
答:GAL4由两个结构域组成,一个是DNA结合域BD,一个是转录激活域AD,这两个结构域各具功能,互不影响。
但具有完整激活功能的GAL4必须同时含有这两个结构域。
当AD与BD结合后,形成的完整转录因子可以激活被BD结合的基因的表达。
将编码待测蛋白X的DNA序列同编码GAL4 BD的DNA序列整合在一个载体上,表达产生X-GAL4杂合蛋白;将编码蛋白质Y的DNA序列同编码GAL4 AD的DNA序列整合在一个载体上,表达产生Y-GAL4杂合蛋白。