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DOI:10.16498/ki.hnnykx.2016.07.020灵芝（Ganoderma Lucidum），又名灵芝草、神芝、仙草、瑞草等，是一类大型真菌，属担子菌亚门、多孔菌属、灵芝科，因富含灵芝多糖、三萜类、蛋白质等活性成分而具有抗肿瘤、调节免疫、抗病毒、抗衰老、保肝、促进睡眠、提高耐缺氧能力等多种功效[1-4]，具有很高的经济价值。
灵芝多糖等活性成分的形成与品种、气候、土壤、生态环境等有密切关系，不同产地的灵芝子实体活性成分含量不同。
仿野生态栽培灵芝因其投入成本低、利润回报率高，备受广大种植户的青睐，但由于缺乏统一标准的技术指导，广西灵芝主产区的灵芝子实体品质参差不齐，严重影响灵芝及其加工产业的可持续发展。
近年来，随着高品质灵芝子实体产品的供不应求，行业学者对灵芝子实体的主要活性成分进行了较广泛的研究。
张舒峰等[5]比较了普通人工栽培、林下仿野生栽培、野生灵芝3种不同来源的灵芝子实体的活性成分，结果表明，3种灵芝子实体的灵芝多糖含量分别为8.17、11.85、12.68 mg/g，总灵芝酸含量分别为6.21、10.78、14.75 mg/g，林下仿野生栽培灵芝子实体的灵芝多糖和灵芝酸均显著高于普通人工栽培灵芝。
路娟等[6]比较了6种不同产地人工栽培灵芝子实体的灵芝多糖、灵芝总三萜、灵芝酸的含量差异，结果显示，受不同的栽培条件、地理气候条件等因素影响，不同产地人工栽培的灵芝子实体主要活性成分含量存在明显差异。
齐川等[7]对人工栽培的11个灵芝品种子实体的总多糖、总三萜、蛋白质、麦角甾醇等活性成分进行分析测定，结果表明，不同品种灵芝子实体总多糖、总三萜、蛋白质均为含量较高的主要成分，但麦不同产地仿野生态栽培灵芝主要活性成分比较 覃晓娟1，何 忠1，仇惠君1，王灿琴2，韦仕岩2 （1.广西农业科学院，广西南宁 530007；2.广西农业科学院微生物研究所，广西南宁530007）摘 要：以广西田林、西林、融水等5个产地的仿野生栽培灵芝子实体为材料，采用紫外分光光度法测定灵芝样品中的总多糖、总三萜、总蛋白质含量。
HPLC测定不同产地灵芝中9种三萜酸目的：建立HPLC测定灵芝子实体中9种三萜酸的方法。
方法：采用Alltima C18色谱柱（4.6 mm×150 mm，5 μm），流动相为乙腈-0.04%甲酸溶液，检测波长254 nm，流速1.0 mL·min-1，柱温15 ℃。
结果：灵芝酸C2、灵芝酸G、灵芝烯酸B、灵芝酸B、灵芝烯酸A、灵芝酸A、赤芝酸A、灵芝烯酸D、灵芝酸C1的线性范围分别为6.81～40.88，6.38～38.25，6.75～40.50，6.38～38.25，5.95～35.65，5.90～35.25，7.00～42.00，6.20～37.15，6.05～36.4 mg·L-1（r=0.999 4，0.999 2，0.999 4，0.999 2，0.999 2，0.994 5，0.999 0，0.999 2，0.998 4），加样回收率分别为102.1%，102.3%，100.6%，103.3%，104.1%，103.2%，96.42%，102.5%，101.5%，RSD为1.5%，0.96%，1.9%，1.3%，1.7%，2.5%，0.62%，2.9%，1.3%。
测定了31个不同地区、不同栽培条件下灵芝样品的三萜含量。
结论：该方法可行、重复性好，可定量测定灵芝中三萜酸的含量。
标签： HPLC； 灵芝； 三萜酸灵芝为担子菌纲，多孔菌科（Polyproraceae）灵芝属（Ganoderma）真菌赤芝Ganoderma lucidum和紫芝G.japonicum的干燥子实体。
始载于《神农本草经》，具有补中益气、滋外强壮、扶正固本等功效。
《中国药典》2000年版开始将赤芝、紫芝收为药用正品。
灵芝现在多为栽培品种且大多为赤芝，具有明显生物活性的主要有效成分是三萜类化合物，现已分离得到160多种[1]，马林等[2-6]测定了灵芝中三萜酸总含量，建立了灵芝三萜指纹图谱测定方法。
不同产地灵芝孢子粉中多糖＼总三萜皂苷含量测定目的建立灵芝孢子粉中灵芝多糖、总三萜皂苷的含量测定方法。
方法采用紫外分光光度法，苯酚-浓硫酸比色法于波长492nm处测定灵芝多糖吸光度；以香草醛∶高氯酸∶冰乙酸（2∶8∶50）为显色剂，于波长555nm处测定总三萜皂苷的吸光度。
结果多糖、总三萜皂苷的标准曲线的线性范围分别为0.0100~0.0300mg（r=0.9982）；0.025~0.125mg（r=0.9996），多糖、總三萜皂苷的平均加样回收率分别为101.17%、100.74%，RSD分别为1.84%、1.29%。
结论该方法简便、快速、准确，可用于灵芝孢子粉中多糖、总三萜皂苷的含量测定。
Abstract：Objective To establish a method for content determination of total polysaccharides and triterpenoid saponin in the GLS.Methods UV Spectrophotometry,phenol-sulfuric acid;vanillin-glacial acetic acid-sulphuric acid-perchloric acid mixture at the wavelength of 492nm and 555nm absorbance.Results The linear range of total ginseng polysaccharides was 0.0100~0.0300mg(r=0.9982);0.025~0.125mg(r=0.9996).The recovery rate of the study was 101.17%、100.74%,RSD=1.84%、1.29%.Conclusion The results of simulation indicate that this method was accurate,reliable and reproducible.It was suggested that this method can be used to determine the content of total polysaccharides and triterpenoid saponin in the GLS.Key words：GLS;Polysaccharides;Triterpenoid saponin;Determination;Ultraviolet spectrophotometry灵芝，为担子菌纲多孔菌科灵芝属真菌赤芝（Ganoderma lucidum（Leyss.ex Fr.）Karst）、紫芝（Ganoderma sinense Zhao，Xu et Zhang）的干燥子实体。
灵芝总三萜的含量测定侯敏娜【摘要】本文以熊果酸为对照品,用紫外-可见分光光度法,对灵芝总三萜含量进行了测定,测得该品种中灵芝总三萜含量为7.63％.【期刊名称】《黑龙江科技信息》【年(卷),期】2013(000)008【总页数】1页(P20)【关键词】灵芝总三萜;分光光度法;含量测定【作者】侯敏娜【作者单位】陕西国际商贸学院,陕西咸阳712046【正文语种】中文灵芝又称灵芝草、神芝、芝草、仙草、瑞草，是多孔菌科植物赤芝（Ganoderma lucidum （Leyss.ex.Fr.）Karst.）或紫芝（Ganoderma japonicum（Fr.）Lloyd）的全株。
灵芝原产于亚洲东部，始载于〈神农本草经〉，具有补中益气、滋阴强壮、扶正固本、延年益寿等功效。
灵芝三萜（GanodermaTriterpene，GT）是灵芝的主要成分之一，目前各种灵芝中分离到的三萜类化合物已达100多种[1]，林志彬等[1]研究认为灵芝三萜具有抗HIV-1及HIV-1蛋白酶活性、保肝、抗肿瘤和抗艾滋病毒[2，3]等药理活性。
现对灵芝总三萜的含量测定进行以下阐述。
旋转蒸发仪（RE-52A，上海安亭实验仪器有限公司）；752N电子天平（奥多利斯科学仪器北京有限公司）；紫外-可见分光光度计（上海精密科学仪器有限公司）。
灵芝（西安盛兴中药饮片有限公司）；熊果酸对照品（中国食品药品检定研究院，批号：110742-200518）；氯仿（天津市巴斯夫有限公司）；石油醚（60～90℃，天津市富宇精细化工有限公司）；乙酸乙酯（分析纯，成都市科龙化工试剂厂）；甲醇（分析纯，天津市津北精细化工有限公司）；5%香草醛-浓硫酸。
灵芝总三萜含量测定方法有两种，即高效液相色谱法和紫外分光光度法。
本实验采用常规的最简单的紫外分光光度法，测定总三萜的含量。
精密称取熊果酸对照品1.00mg，溶于10.00ml乙酸乙酯中，混合均匀可得熊果酸标准溶液。
灵芝三萜及甾醇含量检测计算公式什么是灵芝三萜及甾醇含量检测？灵芝三萜及甾醇含量检测，也称“三萜及甾醇检测”，是针对特定药材中的三萜及其甾醇内容进行测定的一种检测方法。
其目的是评估三萜及其甾醇在植物体内的含量，以便判断植物的质量和有效成分的含量。
三萜是植物性化合物的一类，它们为植物生存及繁殖所必需，是多种重要植物激素的原料，能够影响植物的生长发育、开花结果等重要生理功能，具有重要的生物学功能。
甾醇是一类生物化合物，可用于改变植物体内激素平衡，促进器官发育、调节植物生长发育，抗氧化、抗病、抗虫和抗逆性等，在食品、药物及化妆品中具有很高的应用价值。
灵芝三萜及甾醇含量检测主要分为室温振荡法和高效液相色谱法。
室温振荡法是在室温条件下通过振荡液体体系来测定药材中三萜及甾醇的含量，因其测定过程简单、检测时间短，已经成为大多数实验室常用的检测方法。
而高效液相色谱法则是通过将样品中三萜及甾醇经过溶剂萃取后，然后在HPLC上进行检测，它可以检测到比室温振荡法更小的三萜及甾醇浓度，因此被用于检测植物体内非常低浓度的三萜及甾醇含量。
灵芝三萜及甾醇含量检测计算公式：1、室温振荡法：三萜含量 = (A-B)/V×1000其中，A为振荡后测得的含量，B为振荡前测得的含量，V为振荡液的体积，单位为μg/mL。
甾醇含量 = (C-D)/V×1000其中，C为振荡后测得的含量，D为振荡前测得的含量，V为振荡液的体积，单位为μg/mL。
2、高效液相色谱法：三萜含量 = (A-B)/V×1000其中，A为样品测得的含量，B为对照品测得的含量，V为检测样品的体积，单位为μg/mL。
甾醇含量 = (C-D)/V×1000其中，C为样品测得的含量，D为对照品测得的含量，V为检测样品的体积，单位为μg/mL。
在灵芝三萜及甾醇含量检测的操作中，有几点需要注意：1.样品的收集要及时，防止样品中的三萜及甾醇失活。
不同部位灵芝及子实体提取物中总三萜酸含量测定冯慧琴;杨明俊;杨晓彤;杨庆尧【摘要】建立不同部位灵芝及子实体提取物中总三萜酸含量测定方法.灵芝样品用乙醇提取,依次经氯仿、5％碳酸氢钠萃取,酸化后再用氯仿萃取、浓缩至干,称重,即得灵芝总三萜酸量.结果:灵芝子实体总三萜酸为(8.58±0.25) mg/g,孢子粉为(3.48 ±0.03) mg/g,菌丝体仅为(1.75±0.09) mg/g；菌盖总三萜酸含量为(12.62 ±0.22) mg/g,菌柄为(7.66±0.08) mg/g.10批次灵芝子实体的总三萜酸含量范围为4.34～ 16.39 mg/g.灵芝子实体提取物中的总三萜酸含量以醇-水提取物的最高为(208.70±5.54) mg/g；碱水提取物的最低,仅为(123.07±4.99) mg/g.HPLC初步分析子实体和孢子及子实体提取物间三萜酸成分大部分相同.本法适用于灵芝子实体及其提取物、灵芝孢子和菌丝体总三萜酸的含量测定,结果可靠,可为灵芝产品质量指标提供依据.【期刊名称】《上海师范大学学报（自然科学版）》【年(卷),期】2013(042)002【总页数】5页(P192-196)【关键词】灵芝;总三萜酸;子实体;孢子;菌丝体;提取物【作者】冯慧琴;杨明俊;杨晓彤;杨庆尧【作者单位】上海师范大学生命与环境科学学院,上海200234;上海师范大学生命与环境科学学院,上海200234;上海师范大学生命与环境科学学院,上海200234;上海芝草生物技术有限公司,上海200234【正文语种】中文【中图分类】Q949.329+.7灵芝Ganoderma lucidum(Leyss ex Fr.）Karst是我国著名的药用真菌，其中三萜化合物是灵芝的主要活性成分，据报导从灵芝子实体、孢子及菌丝体中分离的三萜化合物已约160种［1-5］，它们具有抑制肿瘤、保护肝脏、抗氧化、免疫调节、抑制胆固醇合成、抗菌、抗炎、抗病毒等广泛的药理活性［ 2，6-7］，因此三萜化合物的含量是灵芝产品品质鉴定的重要指标.用HPLC方法定量分析灵芝三萜酸成分，丁平［8］测定了灵芝不同部位中灵芝酸B的含量，马林［9］测定灵芝中孢子酸A、赤芝酸A、灵芝酸B、灵芝酸C的含量，马利金［10］分析红芝中灵芝酸A～C 3种成分的含量.本实验参照Tsuyoshi Nishitoba［11］分离灵芝酸和赤芝酸方法，测定了不同部位灵芝及子实体提取物的总三萜酸含量，而非三萜酸中某一或几个成分.1.1材料灵芝子实体(GL-F）和孢子(GL-S）产自金寨；另10批灵芝子实体市购；灵芝菌丝体：液体培养，本所提供；灵芝水提取物(GL-WW）；灵芝水醇提取物(GL-WA）；灵芝醇水提取物(GL-AW）；灵芝碱水提取物(GL-LW），本所提供；氯仿、碳酸氢钠、乙醇、氢氧化钠、盐酸均为国产分析纯.1.2 灵芝总三萜酸的制备取灵芝子实体粉末或孢子或菌丝体10g，或灵芝子实体提取物2g，精确称重，加100 mL水超声5min，加95%乙醇100 mL，30℃磁力搅拌30 min，过滤，获醇提取液1；残渣加200 mL 50%乙醇，30℃磁力搅拌30 min，过滤，得醇提取液 2，合并醇提取液1、2并浓缩，浓缩液加50 mL氯仿萃取，重复3次，氯仿萃取液中加50ml5%NaHCO3萃取，重复3次，NaHCO3液用2mol／LHCl调pH至 3，在酸性溶液中加氯仿50 mL进行萃取，重复3次，酸性氯仿萃取液合并浓缩至干，放置干燥器内24 h，即得灵芝总三萜酸，精确称重，计算：灵芝总三萜酸含量＝灵芝总三萜化酸重量(mg）／样品重量(g）.1.3 灵芝总三萜酸的HPLC条件采用Bechman System Gold高效液相色谱系统，包括125液相泵和168 DAD检测器.色谱柱：Hypersil Gold C18(250 mm×4.6 mm，5μm）；流动相：2%乙酸∶乙腈＝2∶1；流速：1.0 mL／min；检测波长：252 nm；进样体积：20μL；柱温：27℃.2.1 灵芝不同部位的总三萜酸含量比较分别取灵芝子实体(GL-F）、孢子(GL-S）、液体培养菌丝体(GL-M）、子实体中的菌盖(GL-P）和菌柄(GL-ST），粉碎后按1.2方法制备，计算灵芝总三萜酸含量.结果显示GL-F含总三萜酸(8.58±0.25）mg／g，GL-S的总三萜酸含量为(3.48±0.03）mg／g，而GL-M的总三萜酸含量最少，仅有(1.75±0.09）mg／g(图1）.经t检验，GL-F、GL-S、GLM三者两两比较差异达极显著水平(p＜0.01）.GL-P总三萜酸含量为(12.62±0.22）mg／g，GL-ST的含量为(7.66±0.08）mg／g(图1），t检验两者差异极显著(p＜0.01）.2.2 市售灵芝子实体总三萜酸含量比较将市售10批灵芝子实体分别粉碎后按1.2方法制备，计算灵芝总三萜酸含量.结果表明10批灵芝子实体中总三萜酸含量最高达(16.39±0.58）mg／g，最低仅为(4.34±0.21）mg／g；有4批灵芝总三萜酸含量高于10 mg／g，3批次的含量却低于5 mg／g，不同灵芝子实体的总三萜酸含量差异大(表1）.2.3 子实体提取物中灵芝总三萜酸含量的比较将各提取物按1.2方法制备，计算灵芝三萜酸含量.结果由高至低如下：GL-AW∶(208.70±5.54），GL-WA∶(184.46± 3.75）mg／g，GL-WW∶(134.42±5.85）mg／g，GL-CW∶(123.07 ±4.99）mg／g.t检验，GL-AW和GL-WA两者总三萜酸差异显著(p＜0.05）；而GL-WW和GL-CW总三萜酸含量无统计差异(p＞0.05），但两者分别与GL-WA或GLAW比较总三萜酸含量均差异极显著(p＜0.01）.灵芝子实体提取物所含的灵芝总三萜酸含量因提取方法不同而异，但总三萜酸含量均远高于未经提取的灵芝子实体(GL-F）中的含量，GL-F的总三萜酸为(12.62±0.22）mg／g，其提取物总三萜酸含量则是它的9～16倍(图2）.2.4 灵芝总三萜酸的HPLC的初步分析HPLC图谱峰显示，灵芝子实体和孢子有23个共有峰，两者所含的三萜酸74%的成分相同，而菌丝体的三萜酸的成分较前两者差异大(表2、图3）.以GL-F序号7峰的峰面积为参照，计算各峰的相对峰面积，从相对峰面积中可推断子实体的总三萜酸含量明显高于孢子和菌丝体(表2）.HPLC图谱分析结果表明4种子实体提取物间有25个共有峰(表3、图4），它们的总三萜酸成分相同部分近80%；以GL-CW的序号8的峰面积为参照，计算各峰的相对峰面积，从中可认定AW总三萜酸含量最高，CW最低(表3）.灵芝不同部位其灵芝总三萜酸含量不同.马林等［9］检测了灵芝子实体、孢子粉、发酵菌丝体中灵芝酸B及C、赤芝酸A和赤芝孢子酸A 4种三萜酸含量，结果子实体占最多，其次为孢子粉，菌丝体最少，只检出灵芝酸B；丁平［8］测定的不同部位灵芝酸B含量顺序为菌盖表皮＞菌盖子实体＞菌柄＞木栓层＞孢子粉，菌丝体未检出；本实验不同部位灵芝中总三萜酸含量与前述文献有相似结果，菌盖、子实体、菌柄、孢子粉、菌丝体的灵芝总三萜酸含量依次递减，且菌丝体的三萜酸成分比子实体和孢子的少很多.实验中子实体提取物的总三萜酸含量远远高于子实体，提取物中GL-AW和GL-WA的总三萜酸含量明显超过GL-WW和GL-CW，用乙醇做溶剂提取灵芝子实体，可大大提高灵芝产品中的总三萜酸含量，提升产品质量.按照1.4方法测定灵芝总三萜酸含量，6次重复实验RSD为4.38%，重现性好.本法适用于灵芝子实体、孢子、菌丝体和子实体提取物的总三萜酸含量测定，结果可靠，可为灵芝产品质量指标提供依据.【相关文献】［1］陈若芸，于德泉.灵芝三萜化学成分研究进展［J］.药学学报， 1990，25（12）：940-953. ［2］罗俊，林志彬.灵芝三萜类化合物药理作用研究进展［J］.药学学报， 2002，37（7）：574-578.［3］ ZHOU Y Q，YANG X T，YANGQ Y.Recentadvances on triterpenes from Ganodermamushroom［J］.Food Reviews International， 2006，22（3）：259-273.［4］郝瑞霞，张劲松，唐庆九，等.灵芝子实体中两个新的天然三萜类化学成分的分离，纯化和鉴定［J］.菌物学报， 2006，25（4）：599-602.［5］陈曼，张敉，孙视，等.赤芝子实体中一个新的三萜化合物［J］.药学学报， 2009，44（7）：768-770.［6］ SMINA T P，MATHEW J，JANARDHANAN K K，etal.Antioxidant activity and toxicity profile of total triterpenes isolated from Ganoderma lucidum（Fr.）P.Karst occurring in South India.［J］.Environmental toxicology and pharmacology， 2011，32：438-446. ［7］ SHAILESH D，ANITA T，DANIEL S.Suppression of the inflammatory response by triterpenes isolated from themushroom Ganoderma lucidum［J］.International Immunopharmacology， 2009，9：1272-1280.［8］丁平，张丹雁，徐鸿华.RP-HPLC法测定不同部位灵芝中灵芝酸B含量［J］.中草药， 2001，3（4）：310-312.［9］马林，吴丰，陈若芸.灵芝三萜成分分析［J］.药学学报， 2003，38（1）：50-52.［10］马利金，姚汝华.红芝酸性物质的HPLC和薄层层析分析［J］.中国食用菌， 1998，17（1）：3-4.［11］ TSUYOSHIN，HIROJIS，TAKANORIK，etal.New bitter C27 and C30 Terpenoids from the Fungus Ganoderma luicidum（Reishi）［J］.Agric Boi，Chem，1985，49（6）：1793-1798.FENG Huiqin1，YANG Mingjun1，YANG Xiaotong1，YANG Qingyao2*(1.College of Life and Environment Sciences Shanghai Normal University，Shanghai 200234，China；2.Shanghai Zhi-herb Bio-tech.LTD，Shanghai 200234，China）。
三种灵芝不同部位的活性成分含量差异性分析目的比较三种灵芝（霍芝1号、韩芝、日芝）不同药用部位的总多糖、总三萜、灵芝酸A及灵芝酸B的含量差异，为全面评价灵芝药材及孢子粉的质量及其药用成分的合理利用提供依据。
方法采用苯酚-硫酸法测定总多糖含量；香草醛-冰乙酸-高氯酸显色法测定总三萜的含量；HPLC法测定灵芝酸A、B的含量。
结果每种灵芝不同药用部位的总多糖含量由高到低依次为：孢子粉>菌盖>菌柄；每种灵芝不同药用部位的总三萜含量由高到低依次为：菌盖>菌柄>孢子粉；每种灵芝不同药用部位的灵芝酸A和灵芝酸B含量由高到低依次为：菌盖>菌柄>孢子粉，且灵芝酸A的含量均明显高于灵芝酸B。
结论该研究为全面评价灵芝子实体及孢子粉的质量及其药用成分的合理利用提供依据。
标签：灵芝；药用部位；总多糖；总三萜；灵芝酸灵芝（Ganoderma lucidium）属担子菌门多孔菌科真菌赤芝或紫芝的干燥子实体，是常用的滋补强壮、扶正固本中药，在中国有着悠久的药用历史。
多糖和三萜类化合物是灵芝子实体及孢子粉的主要活性成分[1]。
其中，灵芝多糖具有提高机体免疫能力、抗肿瘤[2]、抗癌症、抗衰老、调节血脂等药理活性，灵芝三萜类化合物具有抗肿瘤、抗HIV-1型病毒、护肝、解毒和改善记忆等活性[3-6]。
从药学的角度来看，多糖和三萜类化合物含量的高低可以作为评价灵芝药用价值和品质的重要依据。
灵芝由菌盖、菌柄和孢子组成，这3个部位在灵芝不同的生长阶段起着不同的功能作用，其活性成分含量也必然存在一定的差异。
因此，本研究对3种灵芝不同药用部位的总多糖、总三萜及主要三萜酸类成分灵芝酸A 和灵芝酸B进行含量测定，为灵芝质量评价及开发利用提供科学的依据。
1 材料、仪器及试剂霍芝1号、韩芝和日芝子实体及孢子粉采自安徽霍山县（位于北纬31°03′-31°33′，东经115°52′-116°32′之间）灵芝种植基地，由安徽衡济堂灵芝产业开发有限公司提供。
灵芝三萜含量标准
目前，灵芝三萜的含量标准主要是根据国际标准和国家标准来制
定的。
根据国际标准，灵芝三萜的含量指标主要是根据其中一种三萜成分—青酸灵芝酸（Ganoderic acid）来衡量。
根据国际标准，灵芝产
品中青酸灵芝酸的含量应达到一定的标准才能被认定为优质产品。
同时，不同国家也有制定自己的灵芝三萜含量标准。
以中国为例，中国国家标准规定了灵芝产品中灵芝酸总量的含量标准。
根据这个标准，灵芝产品中灵芝酸总量的含量应达到一定的标准才能被认定为合
格产品。
需要注意的是，虽然灵芝三萜含量标准存在，但不同的制剂和提
取工艺可能会导致灵芝产品的三萜含量不同。
因此，选购灵芝产品时，建议选择正规渠道购买，并且查看产品的检测报告，以确保产品符合
相应的标准。
不同栽培土壤种植灵芝中主要成分的比较分析
汪戎锦;张鸿旭;武家杰;于晓风;睢大筼;门丽慧
【期刊名称】《人参研究》
【年(卷),期】2022(34)2
【摘要】目的检测并比较不同栽培土壤条件下种植的灵芝经济性状、三萜及甾醇类成分、多糖类成分以及水分和浸出物含量,探讨山核桃壳、山沙土、玉米芯及玉米秸秆4种栽培土壤对灵芝质量的影响。
方法采用《中国药典》(2020版)方法,对山核桃壳、山沙土、玉米芯及玉米秸秆栽培土壤培育的灵芝中灵芝三萜及甾醇、多糖、水分及浸出物含量进行分析测定。
结果 4种栽培土壤所种植的灵芝三萜及甾醇、多糖、水分及浸出物含量均符合药典要求。
其中,玉米秸秆土壤栽培的灵芝样本中检测到的灵芝三萜及甾醇、多糖成分比其他三组较高,且具有较高的浸出物含量及较低的含水量。
结论山核桃壳、玉米芯及玉米秸秆土壤均可代替山沙土培育灵芝。
【总页数】4页(P2-5)
【作者】汪戎锦;张鸿旭;武家杰;于晓风;睢大筼;门丽慧
【作者单位】吉林大学药学院;吉林大学基础医学院
【正文语种】中文
【中图分类】R28
【相关文献】
1.不同栽培方式沾化冬枣果实主要成分变化的比较研究
2.人工栽培灵芝与野生灵芝活性成分的比较分析
3.不同栽培基质灵芝与不同灵芝菌株活性差异及相关性分析
4.野生灵芝与栽培灵芝主要成分和功效的比较分析
5.不同灵芝品种对种植地土壤物理性质的影响
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不同品种灵芝中三萜类化合物的比较研究邢增涛1 郁琼花2 张劲松1 潘迎捷1(1 上海市农科院食用菌研究所,上海201106; 2 通标标准技术服务有限公司,上海200233)摘要 本研究利用HPLC对同一灵芝菌种不同生长阶段及不同品种灵芝子实体中三萜类化合物的含量和图谱进行了分析。
结果表明在液体发酵7天左右的灵芝菌丝体中灵芝三萜类化合物的含量极低,而不同生长阶段的灵芝子实体中的三萜类化合物的变化较小,孢子粉中三萜类化合物的含量较子实体中低。
不同品种的灵芝子实体中三萜类化合物的种类和含量存在差异,黑芝中几乎不含三萜类化合物。
关键词 灵芝 HP LC 三萜类化合物 菌丝体 子实体灵芝三萜类化合物是灵芝中的主要活性物质之一,也是现代灵芝化学和灵芝药理研究的重点。
目前,国内外的研究者已经从灵芝中分离纯化出100多个三萜类化合物。
另外,在真菌和高等植物的许多次生代谢产物中,三萜类化合物、黄酮类化合物及多酚类化合物等均被用作形态上比较接近的真菌或高等植物鉴别和分类的特征性化合物。
国外学者对灵芝做过类似的研究。
本文利用HPLC对同一菌种发酵菌丝体、不同生长阶段的灵芝子实体、孢子粉,以及在我国商业化栽培的几种灵芝子实体中的三萜类化合物的种类和含量进行分析。
为更合理地开发利用灵芝子实体和发酵菌丝体,以及分类和鉴定等提供科学的依据。
1 材料、仪器与试剂灵芝发酵菌丝体、芝蕾期子实体、成熟期子实体、老化期子实体、孢子粉,菌种均为Ganoder ma lucidum0819,由上海农科院食用菌研究所药用真菌研究室选育。
不同品种的灵芝子实体由上海市农科院食用菌研究所育种室王南博士提供。
HPLC:Waters2690;检测器,Waters2487;色谱柱,Nova-Pak-C18,3 9mm 150mm(Waters)。
95%乙醇(分析纯),甲醇(光谱纯),冰醋酸(分析纯),乙腈(光谱纯),实验用水为重蒸馏水。
2 方法2 1 供试样品的处理 分别准确称取经粉碎的灵芝样品各1克,加入适量95%的乙醇,超声提取1h,过滤,收集滤液。
不同产地灵芝中三萜及甾醇的含量考察发表时间：2016-05-22T15:57:30.080Z 来源：《医药前沿》2016年2月第4期作者：林绍瑜胡晓文[导读] 广东省农垦中心医院药剂科灵芝是担子菌纲多孔菌科灵芝属真菌赤芝、紫芝的干燥子实体。
林绍瑜胡晓文(广东省农垦中心医院药剂科广东湛江 524000) 【摘要】目的：分析测定山东、安徽、浙江不同产地灵芝的三萜及甾醇含量。
方法：以齐墩果酸为对照品，用紫外-可见分光光度法测定三萜及甾醇含量。
结果：三萜及甾醇含量最高的为山东灵芝，其次为浙江灵芝，再次为安徽灵芝。
结论：山东、安徽、浙江三产地灵芝中三萜及甾醇含量存在明显的差异。
【关键词】灵芝；三萜及甾醇；含量考察【中图分类号】R24 【文献标识码】B 【文章编号】2095-1752（2016）04-0330-03 Determination of Triterpenoids and Sterol Content of Glossy ganoderma of different origin Lin Shaoyu , Hu Xiaowen.Department of pharmacy, Guangdong Nongken Central Hospital, Guangdong Zhanjiang 524000, China.【Abstract】Objective To analyse the triterpenoids and sterol content of Glossy ganoderma of different origin,such as Shandong, Anhui, Zhejiang and so on. Methods Oleanolic acid was used as a reference substance and ultraviolet-visible spec trophotometry was used to determine the triterpenoids and sterol content of Glossy ganoderma. Results The highest triterpenoids and sterol content of Glossy ganoderma is Shandong, next is Zhejiang and next is Anhui. Conclusion There are significant differences in the contents of triterpenoids and sterol of Glossy ganoderma in Shandong,Anhui and Zhejiang.【Key words】Glossy ganoderma; Triterpenoids and Sterol; determination of content 灵芝是担子菌纲多孔菌科灵芝属真菌赤芝、紫芝的干燥子实体。
不同生长期的灵芝三萜含量测定及变化规律研究黄生权;姚松君;刘翠玲;魏刚【期刊名称】《现代食品科技》【年(卷),期】2011(027)008【摘要】本试验研究了不同生长期的灵芝三萜含量变化规律.流动相为乙腈-2%的冰醋酸(梯度洗脱)；检测波长为252 nm;流速为1 mL/min;柱温为35℃.高效液相指纹图谱研究表明紫芝亦含有三萜酸成分,但三萜酸含量明显偏低,且紫芝的主要特征单位生药峰面积只有赤芝的1/10～1/20左右.不同入土时间的赤芝三萜指纹图谱差异明显,部分三萜酸特征峰以入土30d的峰面积为最大,部分特征峰以入土50～60 d的峰面积为最大.紫芝则是入土60～70 d时其大部分三萜酸特征峰面积最大.总三萜含量测定结果表明赤芝在入土30 d与入土50 d时总三萜含量较高,70d时含量最低.紫芝在入土70 d时总三萜含量最高,50 d后增加趋于平缓.总三萜含量测定与三萜指纹图谱结果类似,研究结果为灵芝的采栽期提供了一定参考,提示对于灵芝的质量评价应采用指纹图谱与含量测定相结合为宜.【总页数】5页(P1015-1019)【作者】黄生权;姚松君;刘翠玲;魏刚【作者单位】无限极(中国)有限公司广东江门529156;无限极(中国)有限公司广东江门529156;广州中医药大学广东广州510006;广州中医药大学广东广州510006【正文语种】中文【相关文献】1.灵芝三萜的提取分离及总三萜的含量测定 [J], 侯敏娜;刘剑2.不同生长期灵芝子实体三萜酸和多糖含量测定 [J], 李保明;华正根;王洪庆;刘超;李晔;陈若芸;3.不同部位灵芝及子实体提取物中总三萜酸含量测定 [J], 冯慧琴;杨明俊;杨晓彤;杨庆尧4.不同产地灵芝孢子粉中多糖、总三萜皂苷含量测定 [J], 邓桂球;苏振宁;张健润;吴茂勇;吴依娜5.栽培灵芝不同生长阶段多糖和三萜类化合物的含量测定 [J], 宝萍萍;图力古尔;包海鹰因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
不同产地灵芝中三萜及甾醇的含量考察
发表时间：2016-05-22T15:57:30.080Z 来源：《医药前沿》2016年2月第4期作者：林绍瑜胡晓文[导读] 广东省农垦中心医院药剂科灵芝是担子菌纲多孔菌科灵芝属真菌赤芝、紫芝的干燥子实体。
林绍瑜胡晓文
(广东省农垦中心医院药剂科广东湛江 524000) 【摘要】目的：分析测定山东、安徽、浙江不同产地灵芝的三萜及甾醇含量。
方法：以齐墩果酸为对照品，用紫外-可见分光光度法测定三萜及甾醇含量。
结果：三萜及甾醇含量最高的为山东灵芝，其次为浙江灵芝，再次为安徽灵芝。
结论：山东、安徽、浙江三产地灵芝中三萜及甾醇含量存在明显的差异。
【关键词】灵芝；三萜及甾醇；含量考察【中图分类号】R24 【文献标识码】B 【文章编号】2095-1752（2016）04-0330-03 Determination of Triterpenoids and Sterol Content of Glossy ganoderma of different origin Lin Shaoyu , Hu Xiaowen.
Department of pharmacy, Guangdong Nongken Central Hospital, Guangdong Zhanjiang 524000, China.
【Abstract】Objective To analyse the triterpenoids and sterol content of Glossy ganoderma of different origin,such as Shandong, Anhui, Zhejiang and so on. Methods Oleanolic acid was used as a reference substance and ultraviolet-visible spec trophotometry was used to determine the triterpenoids and sterol content of Glossy ganoderma. Results The highest triterpenoids and sterol content of Glossy ganoderma is Shandong, next is Zhejiang and next is Anhui. Conclusion There are significant differences in the contents of triterpenoids and sterol of Glossy ganoderma in Shandong,Anhui and Zhejiang.
【Key words】Glossy ganoderma; Triterpenoids and Sterol; determination of content 灵芝是担子菌纲多孔菌科灵芝属真菌赤芝、紫芝的干燥子实体。
灵芝主产于山东、安徽、浙江、吉林等地，具有扶正固本、健脾和胃、补益精气功能，能够调节和增强人体免疫力和预防心脑血管病[1-3]。
三萜及甾醇是灵芝的主要有效成分，灵芝三萜具有抗HIV-1及HIV-1蛋白酶活性、保肝、抗肿瘤和抗艾滋病毒等药理活性[4-5]。
不同来源的样品，其三萜甾醇的含量存在较大差异，本文测定三大主产地山东、安徽和浙江的灵芝三萜及甾醇含量，为评判不同产地灵芝品质及合理用药提供科学依据。
1.仪器、试药
1.1 仪器
BS210S型电子天平(德国赛多利斯)，UV-2550型紫外分光光度计（日本岛津），HHS型电热恒温水浴锅（上海博迅实业有限公司医疗设备厂），SB-5200超声波清洗机（宁波新芝生物科技股份有限公司）。
1.2 试药
赤灵芝子实体（产地安徽），赤灵芝子实体（产地山东），赤灵芝子实体（产地浙江），齐墩果酸对照品（中国食品药品检定研究院，110709-201206），乙酸乙酯、氯仿（天津市科密欧化学试剂有限公司），乙醇、冰醋酸、石油醚60～90℃（天津市致远化学试剂有限公司），香草醛（上海乙基化工有限公司），高氯酸（天津市光复化工研究所），蒸馏水。
2.方法与结果
2.1 对照品溶液的制备
取齐墩果酸对照品适量,精密称定,加甲醇制成每1ml含0.214mg的溶液，即得。
2.2 标准曲线的制备
精密量取齐墩果酸对照品溶液0.1、0.2、0.3、0.4、0.5mL，分别置25mL具塞试管中，挥干，放冷，精密加入新配制的香草醛冰醋酸溶液（精密称取香草醛0.5g，加冰醋酸使溶解成10mL，即得）0.2mL和高氯酸0.8mL，摇匀，在70℃水浴中加热15分钟，立即置冰浴中冷却5分钟，取出，精密加入乙酸乙酯4mL，摇匀，以相应试剂为空白，照紫外-可见分光光度法（附录VA），在546nm波长处测定吸光度，以吸光度为纵坐标，浓度为横坐标绘制标准曲线[6]。
结果表明，齐墩果酸对照品在质量为0.0214～0.1070mg范围内呈良好的线性关系。
结果见表1。
2.3 供试品溶液的制备
取灵芝粉末2g,精密称定,置具塞锥形瓶中，加乙醇50ml,超声处理（功率140W，频率42kHZ)45分钟，滤过，滤液置100ml量瓶中，用适量乙醇，分次洗涤滤器和滤渣，洗液并入同一量瓶中，加乙醇至刻度，摇匀，即得。
2.4 不同产地灵芝的三萜及甾醇含量测定
称取三个产地灵芝粉末各2g，精密称定，分别置具塞锥形瓶中，加乙醇50ml,超声处理（功率140W，频率42kHZ)45分钟，滤过，滤液置100ml量瓶中，用适量乙醇，分次洗涤滤器和滤渣，洗液并入同一量瓶中，加乙醇至刻度，摇匀，得供试品溶液。
精密量取供试品溶液0.2mL置25mL具塞试管中，照标准曲线制备项下的方法，自“挥干”起，同法操作，测定吸光度，从标准曲线上读取供试品溶液中齐墩果酸的含量，计算，即得。
结果见表2。
表3结果表明，回收率均在95％～105％之内，RSD=2.31%
<3%，符合方法学要求。
3.讨论
本文考察了不同产地灵芝药材三萜及甾醇含量的差异性，为能更全面地认识和利用灵芝这一珍贵的药材资源，同时也为探讨三萜及甾醇与功能的关系，以期为灵芝三萜甾醇的进一步开发利用提供参考。
本研究结论山东、安徽和浙江产地灵芝中三萜甾醇含量存在明显的差异，为评判不同产地灵芝品质及合理用药提供科学依据。
【参考文献】
[1]王红梅，刘海燕，林淼等.灵芝孢子粉中总三萜含量标准测定方法改进[J].食用菌学报，2013，20(2):42-45.
[2]江绍琳，江绍玫，曾令聪.分光光度法快速测定灵芝中总三萜含量[J].江西农业大学学报，2006，28(4):634-636.
[3]邓桂球，苏振宁，张健润等.不同产地灵芝孢子粉中多糖、总三萜皂苷含量测定[J].医学信息，2014，27(7):48-49.
[4]黄生权，姚松君，刘翠玲等.不同生长期的灵芝三萜含量测定及变化规律研究[J].现代食品科技，2011，27(8):1015-1019.
[5]侯敏娜.灵芝总三萜的含量测定[J].黑龙江科技信息，2013(8):20。
[6]国家药典委员会.中华人民共和国药典[S].一部.北京：中国医药科技出版社，2010:175.。
