PDA培养基的配制方法和注意事项
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PDA培养基的配制方法PDA(Potato Dextrose Agar)是一种富含淀粉和葡萄糖的琼脂培养基,广泛用于真菌和霉菌的培养和鉴定。
下面是PDA培养基的精确配制方法:原料准备:-250克马铃薯-20克葡萄糖-15克琼脂工具准备:-秤-剪刀-玻璃容器或烧杯-培养瓶或琼脂培养皿-灭菌器或压力锅-pH计或pH试纸-搅拌棒或吹球步骤:1.清洁工具:将玻璃容器、培养瓶、搅拌棒等工具用肥皂水洗净,并用自来水冲洗干净。
2.马铃薯的制备:先用清洁的剪刀将250克马铃薯去皮,然后切成均匀的小块。
3.煮马铃薯:将马铃薯块放入玻璃容器或烧杯中,并加入足够的自来水,使其覆盖马铃薯。
然后将容器放入灭菌器或压力锅中,煮沸30分钟杀灭马铃薯中的微生物。
4.过滤溶液:将煮熟的马铃薯溶液用细网过滤器过滤出来,以去除固体残渣。
5.加入琼脂:将过滤后的马铃薯溶液重新倒回玻璃容器或烧杯中,随后加入15克的琼脂。
将容器放入微波炉中,加热溶解至琼脂完全溶解为止。
6.加入葡萄糖:将20克葡萄糖加入琼脂溶液中,搅拌均匀。
7.均匀分配:将培养基溶液分装到培养瓶或琼脂培养皿中。
每瓶或皿中的溶液量应根据需要进行调整,一般为20-25毫升。
8.pH调节:使用pH计或pH试纸检测培养基的酸碱度。
PDA培养基的理想pH值为5.6、如果pH值高于或低于此值,则使用盐酸或碳酸氢钠溶液进行调节,直到达到理想的pH值。
9. 灭菌:将装有培养基的瓶或皿盖好,然后放入灭菌器或压力锅,进行高温高压灭菌。
通常在121℃下压力为15磅(或1.05kg/cm²)下灭菌20分钟。
10.存储:在灭菌后的培养基冷却到接近室温后,将其存储在冰箱中,以防止微生物生长。
注意事项:-所有使用的工具和培养基都必须经过彻底的消毒。
-在煮马铃薯时,要确保马铃薯块完全煮熟,以确保有效杀灭微生物。
-在加入琼脂和葡萄糖时,要确保琼脂完全溶解,葡萄糖均匀分散。
-在调节pH时要小心,因为pH调节对微生物的生长有重要影响。
PDA培养基的配制方法和注意事项PDA培养基是马铃薯葡萄糖琼脂培养基的简称,即Potato Dextrose Agar (Medium),分别对应马铃薯、葡萄糖、琼脂的英文。
它属于固体培养基、半合成培养基。
PDA培养基宜于微生物生长发育、节省原料等优势,一般在培养酵母菌、霉菌、蘑菇等真菌方面应用广泛。
PDA培养基的配制(1)称量和熬煮按培养基配方逐一称取去皮土豆。
土豆切成小块放入锅中,加水1000ml,在加热器上加热至沸腾,维持20-30min,用可用2层纱布趁热在量杯上过滤,滤渣弃取。
滤液补充水分到1000ml。
(2)加热溶解把滤液放入锅中,加入葡萄糖20g,琼脂15~20g(提前搞碎),然后放在石棉网上,小火加热,并用玻棒不断搅拌,以防琼脂糊底或溢出,待琼脂完全溶解后,再补充水分至所需量。
(3)分装按实训要求,将配制的培养基分装入试管或500ml三角瓶内。
分装时可用三角漏斗以免使培养基沾在管口或瓶口上造成污染。
分装量:固体培养基约为试管高度的1/5,灭菌后制成斜面,分装入三角瓶内以不超过其容积的一半为宜;半固体培养基以试管高度的1/3为宜,灭菌后垂直待凝。
(4)加棉塞培养基分装完毕后,在试管口或三角烧瓶口上塞上棉塞(或泡沫塑料塞或试管帽等),以阻止外界微生物进入培养基内造成污染,并保证有良好的通气性能。
(5)包扎加塞后,将全部试管用麻绳或橡皮筋捆好,再在棉塞外包一层牛皮纸,以防止灭菌时冷凝水润湿棉塞,其外再用一道线绳或橡皮筋扎好,用记号笔注明培养基名称、组别、配制日期。
PDA培养基配制注意事项1.培养基经灭菌后,必须放在37C温箱培养24h,无菌生长者方可使用。
2.PDA培养基一般不需要调pH。
对于要调节pH的培养基,一般用pH试纸测定其pH。
如果培养基偏酸或偏碱时,可用lmol/LNaOH或lmol/LHCL溶液进行调节。
调节时应逐滴加入NaOH或HCl溶液,防止局部过酸或过碱破坏培养基成分。
pda培养基
PDA(Potato Dextrose Agar)是一种常用的培养基,以马铃薯和葡萄糖为主要成分。
它适用于真菌和霉菌的培养和鉴定。
PDA培养基的配方如下:
- 马铃薯提取物:200 g/L
- 葡萄糖:20 g/L
- 洋葱提取液:1 g/L
- 干酪膜素:0.1 g/L
- 硫酸镁:0.5 g/L
- 琼脂:15 g/L
- 蒸馏水:1000 mL
1
制备PDA培养基的步骤如下:
1. 将马铃薯洗净去皮,切成小块。
2. 将马铃薯块放入大容器中,加入适量的蒸馏水,煮沸1
小时,然后离心取得汁液。
3. 将马铃薯汁液过滤。
过滤液为马铃薯提取物。
4. 在一烧瓶中加入马铃薯提取物和葡萄糖,搅拌溶解。
5. 在另一烧瓶中加入洋葱提取液和硫酸镁,搅拌溶解。
6. 将两个烧瓶中的溶液混合在一起,调整pH值为5.6-6.2。
7. 在溶液中加入干酪膜素和琼脂,搅拌溶解。
8. 将培养基加热至沸腾,然后倒入培养瓶中。
9. 灭菌培养瓶,通常以121°C高压蒸汽灭菌20-30分钟。
PDA培养基可以用于分离和培养真菌,如酵母菌、霉菌和
子囊菌等。
它提供了合适的营养物质和适宜的条件,促进
真菌的生长和繁殖。
2。
PDA培养基的配方及配制方法PDA培养基是马铃薯葡萄糖琼脂培养基的简称,即Potato Dextrose Agar (Medium),分别对应马铃薯、葡萄糖、琼脂的英文。
它属于固体培养基、半合成培养基。
PDA培养基宜于微生物生长发育、节省原料等优势,一般在培养酵母菌、霉菌、蘑菇等真菌方面应用广泛。
PDA培养基的配方土豆 200g葡萄糖 20g琼脂 15~20g水 1000mLpH值自然PDA培养基的配制(1)称量和熬煮按培养基配方逐一称取去皮土豆。
土豆切成小块放入锅中,加水1000ml,在加热器上加热至沸腾,维持20-30min,用可用2层纱布趁热在量杯上过滤,滤渣弃取。
滤液补充水分到1000ml。
(2)加热溶解把滤液放入锅中,加入葡萄糖20g,琼脂15~20g(提前搞碎),然后放在石棉网上,小火加热,并用玻棒不断搅拌,以防琼脂糊底或溢出,待琼脂完全溶解后,再补充水分至所需量。
(3)分装按实训要求,将配制的培养基分装入试管或500ml三角瓶内。
分装时可用三角漏斗以免使培养基沾在管口或瓶口上造成污染。
分装量:固体培养基约为试管高度的1/5,灭菌后制成斜面,分装入三角瓶内以不超过其容积的一半为宜;半固体培养基以试管高度的1/3为宜,灭菌后垂直待凝。
(4)加棉塞培养基分装完毕后,在试管口或三角烧瓶口上塞上棉塞(或泡沫塑料塞或试管帽等),以阻止外界微生物进入培养基内造成污染,并保证有良好的通气性能。
(5)包扎加塞后,将全部试管用麻绳或橡皮筋捆好,再在棉塞外包一层牛皮纸,以防止灭菌时冷凝水润湿棉塞,其外再用一道线绳或橡皮筋扎好,用记号笔注明培养基名称、组别、配制日期。
PDA培养基的配制及试管斜面制作PDA(Potato Dextrose Agar)是一种常用的培养基,用于微生物的培养和鉴定。
下面将详细介绍PDA培养基的配制方法以及试管斜面的制作步骤。
一、PDA培养基的配制方法:-马铃薯提取物:200g-葡萄糖:20g-琼脂:15g- 蒸馏水:1000ml1.将马铃薯削皮并切成小块,然后放入锅中加入足够的蒸馏水,煮沸30分钟,使马铃薯溶解。
2. 用纱布或过滤纸过滤烧开的马铃薯,收集滤液,将滤液浓缩至1000ml。
3.将浓缩后的马铃薯提取物与葡萄糖混合,搅拌均匀。
4.将琼脂加入马铃薯提取物和葡萄糖混合物中,加入足够的蒸馏水。
5.在烧杯中加热混合物,使琼脂完全溶解。
6.用自动调节器调节pH值为7.0-7.27.将混合物分装至试管或琼脂培养皿中。
8.将试管或琼脂培养皿密封并高压灭菌,高压灭菌时间为121°C,15-20分钟。
二、试管斜面的制作步骤:1.配制好的PDA培养基倒入装有试管的架子中,大约倒满1/3左右。
2.将试管架放入预热至沸腾状态的水浴中。
3.等待试管内的培养基开始沸腾,并保持沸腾状态2-3分钟。
4.将试管架从水浴中取出,让试管内的培养基冷却至接近凝固的状态。
5.倾斜试管架,使试管内的培养基斜倒在试管壁上,形成斜面。
6.等待培养基凝固完全。
7.使用无菌的环针或棉签,在斜面上划线隔离待培养的微生物。
8.将试管密封,高压灭菌。
PDA培养基配制和试管斜面制作之后,可以用于各种微生物的培养和鉴定。
在使用PDA培养基时,要注意严格无菌操作,避免外界的污染。
在制作试管斜面时,也要确保试管和培养基的完全无菌,以保证培养的准确性和可靠性。
简述pda培养基的配方及制作方法PDA(Potato Dextrose Agar)培养基是一种常用的微生物培养基,适用于真菌和细菌的培养和研究。
下面将简要介绍PDA培养基的配方及制作方法。
一、配方:PDA培养基的基本配方包括土豆提取物、葡萄糖和琼脂。
具体配方如下:- 土豆提取物:200克- 葡萄糖:20克- 琼脂:15克- 蒸馏水:1000毫升二、制作方法:1. 准备土豆提取物:将200克土豆削皮,切成小块,放入锅中加水煮沸,煮至土豆变软烂。
2. 过滤土豆提取物:将煮熟的土豆块取出,将土豆提取物过滤获得澄清的液体。
3. 加入葡萄糖和琼脂:将土豆提取物倒入烧杯中,加入20克葡萄糖,搅拌均匀。
然后加入15克琼脂,再次搅拌均匀。
4. 煮沸溶解:将烧杯放入加热板上,加热煮沸溶解琼脂和葡萄糖,搅拌均匀。
5. 装瓶和灭菌:将溶解后的培养基倒入培养瓶中,每瓶约20毫升。
然后用高压灭菌器将瓶内培养基加压灭菌,保持121摄氏度,压力为15磅,时间为15-20分钟。
6. 结果:冷却后,PDA培养基凝固并变成琼脂状,可用于微生物培养。
PDA培养基的配方中土豆提取物富含碳水化合物、蛋白质和维生素,提供了真菌和细菌所需的营养物质。
葡萄糖作为碳源供能,琼脂则使培养基凝固,便于微生物的生长和观察。
制作PDA培养基的过程中需要注意以下几点:- 严格按照配方和比例加入各种原料,确保培养基的质量。
- 加热溶解琼脂和葡萄糖时要充分搅拌,以免结块或糊底。
- 灭菌时要控制好温度、压力和时间,确保杀灭所有的细菌和真菌。
- 倒入培养瓶时要注意卫生,避免污染和外界微生物的侵入。
PDA培养基是一种常用的通用培养基,适用于各种细菌和真菌的培养和研究。
制作PDA培养基的方法简单易行,成本低廉,因此被广泛应用于微生物学实验室和工业生产中。
通过培养基上微生物的生长情况,可以判断其形态、生理特性和代谢活性等,为微生物的研究提供了重要的基础。
简述pda培养基的配方及制作方法
PDA(Potato Dextrose Agar)是一种常用的培养基,适用于许多真菌和霉菌的培养。
PDA培养基的配方通常包括以下成分:
1. 马铃薯浆(土豆):200克
2. 葡萄糖:20克
3. 琼脂:15克
4. 葡萄糖酸钠:2克
5. pH值调整至5.6-5.8的蒸馏水:1000毫升
制作方法如下:
1. 将马铃薯洗净削皮切块,加入适量的蒸馏水中,煮至变软。
2. 将煮熟的马铃薯放在纱布上,挤出浆汁,过滤收集。
3. 将收集到的土豆浆汁与葡萄糖、葡萄糖酸钠一起加入适量的蒸馏水中,调整pH值至5.6-5.8。
4. 加热溶解琼脂,在水浴中加热至完全溶解。
5. 将溶解后的琼脂加入到马铃薯浆汁中,充分混合。
6. 用自动称量系统将培养基分装到培养器中,或将培养基倒入无菌培养皿中。
7. 用高压灭菌器对培养基进行高压灭菌,常压下灭菌20分钟或121摄氏度下高压灭菌15分钟。
8. 灭菌后培养基在室温下冷却,凝固后即可使用。
制备好的PDA培养基可用于真菌和霉菌的分离和培养,在无菌条件下进行操作,避免细菌和其它污染物的污染。
pda培养基的制备
关于PDA培养基的制备,本文将为您做出详细介绍。
PDA培养基全称为Potato Dextrose Agar,是一种以马铃薯粉、葡萄糖以及抗菌剂组成的培养基,用于细菌的培养及细菌的药敏试验实验。
首先,准备和整理所需要的相关药物和原料。
注意避免杂质和外来污染物的污染。
其次,熔融马铃薯粉,并将葡萄糖以及其他要求的干粉类药物加入到熔融后的马铃薯粉中去,同时缓慢调整其PH值至7点左右,然后封闭容器,等待其充分的松散溶解。
最后,将熔融与调节过PH值的混合液进行灭菌处理,然后将灭菌后的混合液进行滴定至一定的浓度,最后在有条件的情况下放置一定的时间,待其完全软化,即可取出即可使用。
以上就是关于PDA培养基制备的处理过程,该培养基有非常出色的抗菌特性,广泛应用于微生物实验室,能够有效地保护实验样件,便于科学实验的精准完成。
PDA培养基的配方及配制方法PDA培养基是马铃薯葡萄糖琼脂培养基的简称,即Potato Dextrose Agar (Medium),分别对应马铃薯、葡萄糖、琼脂的英文。
它属于固体培养基、半合成培养基.PDA培养基宜于微生物生长发育、节省原料等优势,一般在培养酵母菌、霉菌、蘑菇等真菌方面应用广泛.PDA培养基的配方土豆 200g葡萄糖 20g琼脂 15~20g水 1000mLpH值自然PDA培养基的配制(1)称量和熬煮按培养基配方逐一称取去皮土豆。
土豆切成小块放入锅中,加水1000ml,在加热器上加热至沸腾,维持20—30min,用可用2层纱布趁热在量杯上过滤,滤渣弃取。
滤液补充水分到1000ml。
(2)加热溶解把滤液放入锅中,加入葡萄糖20g,琼脂15~20g(提前搞碎),然后放在石棉网上,小火加热,并用玻棒不断搅拌,以防琼脂糊底或溢出,待琼脂完全溶解后,再补充水分至所需量。
(3)分装按实训要求,将配制的培养基分装入试管或500ml三角瓶内。
分装时可用三角漏斗以免使培养基沾在管口或瓶口上造成污染。
分装量:固体培养基约为试管高度的1/5,灭菌后制成斜面,分装入三角瓶内以不超过其容积的一半为宜;半固体培养基以试管高度的1/3为宜,灭菌后垂直待凝.(4)加棉塞培养基分装完毕后,在试管口或三角烧瓶口上塞上棉塞(或泡沫塑料塞或试管帽等),以阻止外界微生物进入培养基内造成污染,并保证有良好的通气性能。
(5)包扎加塞后,将全部试管用麻绳或橡皮筋捆好,再在棉塞外包一层牛皮纸,以防止灭菌时冷凝水润湿棉塞,其外再用一道线绳或橡皮筋扎好,用记号笔注明培养基名称、组别、配制日期。
PDA培养基的配制方法PDA(Potato Dextrose Agar)是一种常用的培养基,广泛用于真菌和霉菌的培养及鉴定。
以下是用于制备PDA培养基的配制方法。
1.准备所需材料和设备-马铃薯:5个中等大小的马铃薯-葡萄糖:20克-洁净水:1升- 环境灭菌器(autoclave)-秤和容器-酸性pH试纸-移液管-培养皿或试管-实验室纸2.前期准备-将马铃薯洗净并削去外皮。
然后切成薄片,约0.5-1厘米的厚度。
-将锅中的水煮沸,将准备好的马铃薯片放入沸水中煮10分钟。
煮熟的马铃薯要输送到室温。
-将煮熟的马铃薯捣碎,以去除固体残渣。
3.配制PDA培养基-在一个用适量的水洗净和灭菌的容器中称取适量的煮熟马铃薯制得的马铃薯糊。
-摄取10%的葡萄糖。
-将容器放在烧杯中,并在烧杯中添加适量的洁净水,直到容器中的总容积为1升。
-使用酸性pH试纸检查pH值,并将其调整至5.6-5.8的范围内,通过加入少量的1MHCl或1MNaOH。
-用实验室纸过滤培养基,以去除留在溶液中的固体残渣碎片。
-用环境灭菌器将培养基装在培养皿或试管中。
对于培养皿,约20-25毫升的培养基足够;对于试管,约为10毫升。
4.灭菌-将装有培养基的容器放入环境灭菌器中。
-设置灭菌温度为121°C,灭菌时间为15分钟。
-等待完全冷却后,取出培养基容器。
5.储存-将已灭菌和冷却的培养基存放在冰箱中,以避免细菌和真菌的污染。
-培养基通常可以储存在2-4°C的冰箱中,可保持约1-2个月。
注意事项:-在配制PDA培养基的过程中,需要严格遵守无菌技术和操作规范,以避免污染。
-培养基pH值的准确控制对于真菌和霉菌的生长至关重要。
-灭菌温度和时间需要根据实验室设备的不同进行调整,以确保完全灭菌。
-培养基的储存条件是保证其质量和无菌性的关键,需要避免高温、阳光暴露以及其他潜在的污染源。
总结:配制PDA培养基需要用到马铃薯、葡萄糖和水,通过煮马铃薯、制取马铃薯糊、加入葡萄糖并调整pH值,最后经过灭菌和储存,制得一种适用于真菌和霉菌培养的PDA培养基。
PDA培养基马铃薯葡萄糖琼脂(PDA)培养基是分离菌物和细菌的常用培养基,其做法是称取200g马铃薯,洗净去皮切成小块,加水1000ml煮沸半个小时或高压蒸煮20分钟,纱布过滤,再加10-20g葡萄糖和17-20g琼脂,充分溶解后趁热纱布过滤,分装试管,每试管约5-10ml(视试管大小而定),15磅蒸气(121℃)灭菌20分钟左右后取出试管摆斜面,冷却后贮存备用。
PDA培养基在使用时也可以做成不含琼脂的液体培养基,用于菌类的震荡培养。
小技巧:1、做PDA培养基用土豆应去皮,避免带入杂质,产生泡沫,影响通气。
PDA培养基是人们对马铃薯葡萄糖琼脂培养基的简称,即Potato Dextrose Agar (Medium),依次对应马铃薯、葡萄糖、琼脂的英文。
一种常用的培养基,宜培养酵母菌、霉菌、蘑菇等真菌。
分装于试管按物理性状划分:固体培养基按培养基成分划分:半合成培养基配方马铃薯200克葡萄糖20克琼脂15~20克自来水1000毫升自然PH配制步骤其做法是先洗净去皮,再称取200g马铃薯切成小块,加水煮烂(煮沸20~30分钟,能被玻璃棒戳破即可),用四层纱布过滤,再据实际实验需要加葡萄糖和琼脂,继续加热搅拌混匀,稍冷却后再补足水分至1000毫升,分装试管或者锥形瓶,加塞、包扎,(121℃)灭菌20分钟左右后取出试管摆斜面或者摇匀,冷却后贮存备用。
其他事项1.培养基经灭菌后,必须放在37C温箱培养24h,无菌生长者方可使用。
2.PDA培养基一般不需要调pH。
对于要调节pH的培养基,一般用pH 试纸测定其pH。
如果培养基偏酸或偏碱时,可用lmol/LNaOH或lmol/LHCL溶液进行调节。
调节时应逐滴加入NaOH或HCl溶液,防止局部过酸或过碱破坏培养基成分。
3.培养基在使用时也可以做成不含琼脂的液体培养基,用于菌类的震荡培养。
4.培养基也可以加入氯霉素或土霉素,加入量为0.1g/L培养基,主要是为了抑制细菌的生长,减少干扰性LB培养基LB一般被解释为Luria-Bertani培养基,其发明人为贝尔塔尼(Giuseppe Bertani),这个名字来源於英语的lysogeny broth,即溶菌肉汤。
pda培养基高中PDA培养基在高中生物实验中的应用随着科技的不断发展,现代生物实验中出现了许多新的实验技术和工具。
其中,细菌培养基是生物实验中非常重要的一部分。
PDA培养基作为一种常用的培养基,在高中生物实验中有着广泛的应用。
本文将介绍PDA培养基的制备方法、原理及其在高中生物实验中的应用。
一、PDA培养基的制备方法PDA培养基的制备需要以下材料:马铃薯、琼脂、葡萄糖和蒸馏水。
具体的制备方法如下:1. 将马铃薯去皮切块,并煮沸30分钟,直到变软。
2. 过滤出马铃薯汁,将其与葡萄糖按一定比例混合。
3. 将琼脂加入蒸馏水中,用加热的方法使其溶解。
4. 将马铃薯汁和葡萄糖混合液与琼脂溶液混合,搅拌均匀后倒入培养皿中。
5. 等待培养基凝固后,用铝箔包好,放入高压灭菌锅中灭菌。
二、PDA培养基的原理PDA培养基是一种富含碳水化合物、维生素和氮源的培养基,适用于真菌和细菌的培养。
其中,马铃薯提供了碳水化合物和维生素,葡萄糖为碳源,琼脂起到凝固剂的作用。
培养基中的各种成分为微生物的生长和繁殖提供了所需的营养物质和环境。
三、PDA培养基在高中生物实验中的应用1. 真菌培养实验PDA培养基适用于真菌的培养和观察。
在高中生物实验中,学生可以利用PDA培养基培养和观察真菌的生长情况。
他们可以将不同来源的土壤样本或食物样品均匀涂抹在PDA培养基上,通过观察不同真菌的生长形态和颜色,了解真菌的生长习性和分类特征。
2. 细菌培养实验除了真菌,PDA培养基也适用于细菌的培养。
高中生物实验中,学生可以利用PDA培养基培养并观察细菌的生长。
他们可以将不同环境中采集的细菌样本接种到PDA培养基上,通过观察细菌的菌落形态、颜色和生长速度,了解细菌的生长特点和影响因素。
3. 抗菌剂敏感性实验PDA培养基可以用于评价抗菌剂对细菌和真菌的敏感性。
在高中生物实验中,学生可以在PDA培养基中加入不同浓度的抗菌剂,然后将不同细菌或真菌种子涂抹在培养基上。
pda培养基配方比例PDA培养基是人们对马铃薯葡萄糖琼脂培养基的简称。
宜培养酵母菌、霉菌、蘑菇等真菌。
下面就详细介绍了pda培养基的配方及配制方法及步骤。
1.PDA培养基的配方:马铃薯200克葡萄糖20克琼脂20克蛋白胨5克磷酸二氢钾3克硫酸镁1.5克水1000ml PH自然。
2.PDA培养基的制作工艺流程:设计培养基配方→材料煮汁→补水→琼脂溶解→再次补水→药品溶解→调PH值→分装→灭菌→摆斜面3.PDA培养基的制作步骤a 材料煮汁:1000ml水置于锅中,待烧开后加入200克去皮、切片的马铃薯煮20到30分钟,至薯片软而不烂,用八层纱布过滤,取滤液。
b 琼脂溶解和补水:将马铃薯滤液重新加入到锅中,补水至1000ml,继续加热沸腾而后加入琼脂,继续文火煮沸至琼脂完全溶解,再次补水至1000ml。
c 药品溶解:在琼脂溶解后加入葡萄糖20克,磷酸二氢钾3克,硫酸镁1.5克,蛋白胨5克。
14 分装:a.试管培养基的分装分装所用的容器事先一定要清洗干燥,新购的试管内一般都残留烧碱,应先用稀硫酸在烧杯中煮沸,然后用清水洗干净,口朝下晾干后备用。
不能现洗现用,以免因管壁附有水膜导致培养基在试管口滑动。
分装试管时尽量避免培养液黏附试管口,以免培养基粘附棉塞,增加污染几率。
试管装量:制斜面培养基一般为试管高度的1/4—1/3。
b.平板培养基的分装将配制好的培养基倒入三角瓶,(三角瓶也一定要清洗干净),体积不要超过三角瓶的1/3(否则加热时液体沸腾易把棉塞冲开)5 加棉塞:棉塞要用普通棉花制作,不能用脱脂棉。
棉塞的大小,松紧要适度,过松达不到滤菌的目的,过紧妨碍空气流通,松紧度以于抓棉塞整个试管提起为宜。
标准的棉塞应是塞头略大,不易变形,一般塞入试管口2—3厘米。
占塞总长的2/3—1/3裸露在试管口外,比管口略大。
三角瓶棉塞同样松紧适中,一般塞入三角瓶3~4cm.6 装锅灭菌:将塞好棉塞的试管或三角瓶装进置物桶内,桶未装满用空试管填满以免试管倾倒,2即可放入手提式高压灭菌锅中,盖好报纸,防止灭菌时棉塞被冷凝水淋湿,扭紧锅盖,排净锅内冷空气,待温度升至122—124℃之间开始计时30min,灭菌结束。
PDA培养基的配方及配制方法
配方:
- 马铃薯提取液(Potato extract):200g/L
- 葡萄糖(Glucose):20g/L
- Agar-agar:20g/L
- 蒸馏水(Distilled water)
配制方法:
1.称取所需质量的马铃薯,并将其切成小块。
2.将切好的马铃薯放入锅中,加入足够的蒸馏水浸泡,并将其煮沸。
3.将马铃薯煮沸后,搅拌一段时间,使其完全糊化。
4.将煮沸过的糊状物过滤,使其去除固体物质,获得马铃薯提取液。
5.将过滤得到的马铃薯提取液与葡萄糖混合,并加热溶解。
6. 在混合物中加入平衡后的Agar,并搅拌均匀。
7.将得到的混合物加入培养瓶中,每瓶约装入18-20mL。
8.将培养瓶封口并放入高压锅中,进行高压灭菌(121°C,15-20分钟)。
9.高压灭菌后,冷却到室温并检查培养基是否凝固。
10.检查凝固状态后,将培养瓶储存在2-8°C的冰箱中。
PDA培养基常用于真菌的生长与培养,在分离纯菌和培养真菌菌落时发挥重要作用。
PDA培养基配方简单易行,制备方便,培养基质地透明透亮,适用于各类真菌的培养,并具有良好的菌落形态表现。
同时,PDA培养基适用于许多真菌的生长和检测,因此在菌类学研究和实验室应用中具有广泛的用途。
值得注意的是,在实验过程中严格遵守消毒和操作规范,避免细菌和其他微生物的污染。
pda培养基的配方及制作过程
PDA培养基的配方:
土豆200g、葡萄糖20g、琼脂15-20g、水1000mL、pH值自然。
PDA培养基的配制:
1、称量和熬煮。
按培养基配方逐一称取去皮土豆。
土豆切成小块放入锅中,加水1000m1,在加热器上加热至沸腾,维持20-30min,用可用2层纱布趁热在量杯上过滤,滤渣弃取。
滤液补充水分到1000ml。
2、加热溶解。
把滤液放入锅中,加入葡萄糖20g,琼脂15-20g(提前搞碎),然后放在石棉网上,小火加热,并用玻棒不断搅拌,以防琼脂糊底或溢出,待琼脂完全溶解后,再补充水分至所需量。
3、分装。
按实训要求,将配制的培养基分装入试管或500m1三角瓶内。
分装时可用三角漏斗以免使培养基沾在管口或瓶口上造成污染。
分装量:固体培养基约为试管高度的5分之1,灭菌后制成斜面,分装入三角瓶内以不超过其容积的一半为宜;半固体培养基以试管高度的3分之1为宜,灭菌后垂直待凝。
4、加棉塞。
培养基分装完毕后,在试管口或三角烧瓶口上塞上棉塞(或泡沫塑料塞或试管帽等),以阻止外界微生物进入培养基内造成污染,并
保证有良好的通气性能。
5、包扎。
加塞后,将全部试管用麻绳或橡皮筋捆好,再在棉塞外包一层牛皮纸,以防止灭菌时冷凝水润湿棉塞,其外再用一道线绳或橡皮筋扎好,用记号笔注明培养基名称、组别、配制日期。
PDA培养基的配制方法和注意事项PDA(Potato Dextrose Agar)是一种常用的真菌培养基,适用于培养和生长多种真菌菌株。
下面将介绍PDA培养基的配制方法以及注意事项。
配制方法:1. 准备所需材料:马铃薯(200g)、葡萄糖(20g)、琼脂(15g)、蒸馏水(1000ml)。
2.将马铃薯洗净,并切成块状。
3.将切好的马铃薯放入一个大锅中,加入足够的蒸馏水,使其完全浸泡。
4.使用中小火煮沸约30分钟,直到马铃薯变得软烂。
5.用纱布过滤掉马铃薯块,收集到的液体称为马铃薯提取液。
6.将马铃薯提取液加热到煮沸,并添加葡萄糖,搅拌使其充分溶解。
7.加入琼脂,搅拌溶解。
8.继续加热并保持搅拌,直到琼脂完全溶解。
9.关火冷却到40-45°C,搅拌均匀。
10.倒入培养皿或试管中,使其充分凝固。
11.将培养基容器包装好,使用锡箔纸和胶带封口,避免杂菌污染。
12.PDA培养基可以根据需要分装成适当大小的琼脂平板或斜面管,以供后续使用。
注意事项:1.所有试剂和仪器应尽可能消毒和无菌处理,以确保制备的PDA培养基无菌。
2.马铃薯切成块状是为了加速煮沸的过程,但切的过小可能导致提取液中的杂质过多,影响培养基质量。
3.煮沸的时间不宜过短,马铃薯需要彻底煮熟才能提取足够的营养物质。
4.搅拌是为了使葡萄糖和琼脂均匀溶解,并避免极度热区出现。
5.琼脂的溶解需要一定的时间和温度,不可急于冷却和使用。
6.冷却到40-45°C是为了防止高温对培养基中微生物的损害,也是为了避免由于过度冷却导致琼脂凝固太快。
7.封装培养基容器是为了防止杂菌和空气中的孢子进入培养基,避免细菌和真菌污染。
8.在分装培养基前,应将工作台面和器皿用酒精消毒,防止培养基受到外界污染。
9.PDA培养基在20-25°C的常温下可保存2-4周,或在4°C冰箱中保存2-3个月。
保存时不可直接暴露在光线下,避免褪色和干燥。
PDA培养基的配制方法和注意事项
PDA培养基是马铃薯葡萄糖琼脂培养基的简称,即Potato Dextrose Agar (Medium),分别对应马铃薯、葡萄糖、琼脂的英文。
它属于固体培养基、半合成培养基。
PDA培养基宜于微生物生长发育、节省原料等优势,一般在培养酵母菌、霉菌、蘑菇等真菌方面应用广泛。
PDA培养基的配制
(1)称量和熬煮
按培养基配方逐一称取去皮土豆。
土豆切成小块放入锅中,加水1000ml,在加热器上加热至沸腾,维持20-30min,用可用2层纱布趁热在量杯上过滤,滤渣弃取。
滤液补充水分到1000ml。
(2)加热溶解
把滤液放入锅中,加入葡萄糖20g,琼脂15~20g(提前搞碎),然后放在石棉网上,小火加热,并用玻棒不断搅拌,以防琼脂糊底或溢出,待琼脂完全溶解后,再补充水分至所需量。
(3)分装
按实训要求,将配制的培养基分装入试管或500ml三角瓶内。
分装时可用三角漏斗以免使培养基沾在管口或瓶口上造成污染。
分装量:固体培养基约为试管高度的1/5,灭菌后制成斜面,分装入三角瓶内以不超过其容积的一半为宜;半固体培养基以试管高度的1/3为宜,灭菌后垂直待凝。
(4)加棉塞
培养基分装完毕后,在试管口或三角烧瓶口上塞上棉塞(或泡沫塑料塞或试管帽等),以阻止外界微生物进入培养基内造成污染,并保证有良好的通气性能。
(5)包扎
加塞后,将全部试管用麻绳或橡皮筋捆好,再在棉塞外包一层牛皮纸,以防止灭菌时冷凝水润湿棉塞,其外再用一道线绳或橡皮筋扎好,用记号笔注明培养基名称、组别、配制日期。
PDA培养基配制注意事项
1.培养基经灭菌后,必须放在37C温箱培养24h,无菌生长者方可使用。
2.PDA培养基一般不需要调pH。
对于要调节pH的培养基,一般用pH试纸测定其pH。
如果培养基偏酸或偏碱时,可用lmol/LNaOH或lmol/LHCL溶液进行调节。
调节时应逐滴加入NaOH或HCl溶液,防止局部过酸或过碱破坏培养基成分。
3.培养基在使用时也可以做成不含琼脂的液体培养基,用于菌类的震荡培养。
4.培养基也可以加入氯霉素或土霉素,加入量为0.2g/L培养基,主要是为了抑制细菌的生长,减少干扰性。