专题2课题1 微生物的实验室培养(导学案)
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专题2课题1 微生物的实验室培养一基础知识1.培养基(1)培养基的种类包括培养基和培养基等。
(2)培养基的化学成分一般都含有、、、四类营养成分,(3)在提供上述几种主要营养物质的基础上,培养基还需要满足微生物生长对、以及等的要求。
例如:培养乳酸杆菌时需要在培养基中添加;培养霉菌时需要将培养基的PH调至;培养细菌时需要将培养基的PH调至;培养厌氧微生物时需要提供无氧的条件【思考】为什么各种营养基的具体配方不同,但一般都有水、无机盐、碳源和氮源?2.无菌技术(1)获得纯净培养物的关键是。
避免杂菌污染的方法主要包括以下四个内容:①②③④(2)消毒是指灭菌是指【思考】消毒与灭菌的相同点与区别分别是什么?(3)实验室常用的消毒方法是,此外,人们也常使用化学药剂进行消毒,如用、等。
常用的灭菌方法有、、,此外,实验室里还用或进行消毒。
二实验操作1.制备牛肉膏蛋白胨固体培养基(1)制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的方法步骤:→→→→倒平板【思考】⑴培养基灭菌后,需要冷却到50左右,才能用来倒平板。
你用什么方法来估计培养基的温度?⑵为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰?⑶平板冷凝后,为什么要将平板倒置?⑷在倒平板的过程中,如果不小心瘵培养基溅在皿盖与皿底之间的部位,这个平板还能用来培养微生物吗?为什么?2.纯化大肠杆菌(1)微生物接种的方法中最常用的是和。
平板划线法是指。
稀释涂布平板法是指。
【思考】①为什么在操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环?在划线操作结束时,仍然需要灼烧接种环吗?为什么?②在灼烧接种环之后,为什么要等其冷却后再进行划线?③在作第二次以及其后的划线操作是赤什么总是从上一次划线的末端开始划线?(3)平板划线法和稀释涂布平板法的优缺点:(4)平板划线法和稀释涂布平板法的适用范围:1.菌种的保存为了保持菌种的纯净,需对菌种进行保藏。
对于频繁使用的菌种,我们可以采用法;对于需要长期保存的菌种,可以采用法。
专题2课题1 微生物的实验室培养一基础知识1.培养基(1)培养基的种类包括培养基和培养基等。
(2)培养基的化学成分一般都含有、、、四类营养成分,(3)在提供上述几种主要营养物质的基础上,培养基还需要满足微生物生长对、以及等的要求。
例如:培养乳酸杆菌时需要在培养基中添加;培养霉菌时需要将培养基的PH调至;培养细菌时需要将培养基的PH调至;培养厌氧微生物时需要提供无氧的条件【思考】为什么各种营养基的具体配方不同,但一般都有水、无机盐、碳源和氮源?2.无菌技术(1)获得纯净培养物的关键是。
避免杂菌污染的方法主要包括以下四个内容:①②③④(2)消毒是指灭菌是指【思考】消毒与灭菌的相同点与区别分别是什么?(3)实验室常用的消毒方法是,此外,人们也常使用化学药剂进行消毒,如用、等。
常用的灭菌方法有、、,此外,实验室里还用或进行消毒。
二实验操作1.制备牛肉膏蛋白胨固体培养基(1)制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的方法步骤:→→→→倒平板【思考】⑴培养基灭菌后,需要冷却到50左右,才能用来倒平板。
你用什么方法来估计培养基的温度?⑵为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰?⑶平板冷凝后,为什么要将平板倒置?⑷在倒平板的过程中,如果不小心瘵培养基溅在皿盖与皿底之间的部位,这个平板还能用来培养微生物吗?为什么?2.纯化大肠杆菌(1)微生物接种的方法中最常用的是和。
平板划线法是指。
稀释涂布平板法是指。
【思考】①为什么在操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环?在划线操作结束时,仍然需要灼烧接种环吗?为什么?②在灼烧接种环之后,为什么要等其冷却后再进行划线?③在作第二次以及其后的划线操作是赤什么总是从上一次划线的末端开始划线?(3)平板划线法和稀释涂布平板法的优缺点:(4)平板划线法和稀释涂布平板法的适用范围:1.菌种的保存为了保持菌种的纯净,需对菌种进行保藏。
对于频繁使用的菌种,我们可以采用法;对于需要长期保存的菌种,可以采用法。
专题 2 微生物的培养与应用课题 1 微生物的实验室培养预习目标培养基的基础知识,进行微生物培养和无菌技术的操作;测定某种微生物的数量;研究培养基对微生物的选择作用预习重点微生物培养和无菌技术的操作预习难点无菌技术的操作一、教材导读一、培养基1.概念:人们按照微生物对的不同需求,配制出供其的营养基质叫培养基。
可分为培养基和培养基。
2.营养构成:各种培养基一般都含有、、和,此外还要满足微生物生长对、以及的要求。
3.培养乳酸杆菌时需在培养基中添加、培养霉菌时需将培养基PH 调至、培养细菌时需将PH 调至、培养厌氧微生物则需提供条件。
〖思考1〗从细胞的化学元素组成来看,培养基中为什么都含有这些营养成分?【补充1】碳源:如CO2、糖类、脂肪酸等有机物,构成微生物的结构物质和分泌物,并提供能量。
氮源:如N2、氨盐、硝酸盐、牛肉膏、蛋白胨等,主要用来合成蛋白质、核酸及含氮代谢物等。
含有C、H、 O、 N 的化合物既可以作为碳源,又可以作为氮源,如氨基酸等。
二、无菌技术:阅读“无菌技术”,讨论回答下列问题:3一)获得纯净培养物的关键是,具体操作如下:1.对实验操作的、操作者的和进行。
2.将用于微生物培养的、和等器具进行。
3.为避免周围环境中微生物的污染,实验操作应在附近进行。
4.实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与相接触。
(二)消毒和灭菌1.消毒是指。
常用的方法有、、消毒法。
2.灭菌是指。
常用的方法有:、、灭菌。
分别适用于那些用具?〖思考2〗无菌技术除了防止培养物被污染外,还具有的目的是什么?〖思考3〗利用干热灭菌箱对玻璃器皿灭菌时物品不能摆得太挤,目的是什么?〖思考4〗物品装入高压蒸汽灭菌锅灭菌后,要首先打开排气阀,煮沸并排除锅内冷空气,其目的是;随后关闭排气阀继续加热,气压升至,温度为,并维持min ;最后切断热源,使温度自然降温,气压务必降至时打开锅盖,其目的是防止二、疑问存档请你将预习中未解决的问题和有疑问的问题写下来,等待课堂上与老师和同学共同探究解决。
专题2 微生物的培养与应用课题1 微生物的实验室培养(第一课时)一、基础知识1.培养基(1)概念:人们按照微生物对__营养物质___的不同需求,配制出供其_生长和繁殖__的营养基质__。
(2)成分:一般含有__水__、__碳源_、__氮源__、_无机盐__,此外还要满足微生物对特殊营养物质(即生长因子)、____PH____以及氧气的需求。
常用于培养病毒的是活鸡胚。
⑭培养基配置原则:(1)目的要明确_(根据微生物的种类、培养目的等),如培养基可由简单的无机物组成;生产用培养基内可加入化学成分不明确的天然物质,而分类鉴定用培养基内必须加入已知化学成分的物质。
(2)营养要协调_,注意各种营养物质的浓度和比例。
(3)pH要适宜_,各种微生物适宜生长的pH范围不同,细菌6.5~7.5、放线菌7.5~8.5、真菌5.0~6.0。
2.无菌技术(1)概念:防止一切外来杂菌的侵入,并保持灭菌物品及无菌区域不再被污染的方法,称为无菌技术。
注意在微生物的实验室培养中,无菌技术的核心是防止外来杂菌的入侵。
(2)无菌技术的具体内容①对实验操作的_空间、操作者的__衣着和手__进行清洁和消毒。
②将用于微生物培养的__器皿、接种用具和培养基等进行_灭菌_。
③为避免周围环境中微生物的污染,实验操作应在_酒精灯火焰附近_进行。
④实验操作时应避免已___灭菌_处理的材料用具与周围的物品相接触。
(3)消毒和灭菌的概念①消毒:消毒是指使用较为温和的物理或化学方法杀死物体表面或内部的_对人体有害的微生物_(不包括芽孢和孢子)。
②灭菌:灭菌是指使用_强烈_的理化因素杀死物体内外_所有的微生物,包括_不包括芽孢和孢子_。
③消毒与灭菌的区别:两者最大的区别是__是否能杀死芽孢和孢子__。
拓展深化某些细菌在其生长发育后期,可在细胞内形成一个圆形的抗逆性休眠体,称为芽孢。
每个细菌细胞仅形成一个芽孢,故它无繁殖功能。
芽孢有极强的抗热、抗辐射、抗化学药物和抗静水压的能力。
微生物的实验室培养“微生物的实验室培养”是研究和应用微生物的前提,其中包含的基本操作技术有培养基的制备、无菌技术操作以及纯化培养微生物,是生物科学、医学等领域最基本的实验技术,也是高中生必须掌握的实验操作技术。
因此,“微生物的实验室培养”是高中选修教材中一个非常重要的内容,本文从实验原理、实验操作和实验结果评价等方面提出相应的教学建议。
一、教材分析“微生物的实验室培养”是高中生物选修Ⅰ专题2“微生物的培养与应用”中的第1个课题,旨在为学生实践其他的关于微生物技术的实验做好铺垫,又由于本节内容位于传统的发酵技术之后,所以它是在传统的微生物实践技术的基础上发展起来的,同时又为微生物的应用奠定了基础,因此,可用“承前启后”这个词语来概括本课题的地位。
依据课程标准及教学要求确立本课题教学目标如下:(1)知识目标:列举培养基的种类,说明培养基配方及作用;概述无菌技术。
(2)能力目标:尝试培养基的制备、高压蒸汽灭菌和平板划线法等基本操作技术。
熟练规范地进行无菌操作,成功地培养微生物。
(3)情感态度价值观方面:体验制作牛肉膏蛋白胨培养基,培养纯化大肠杆菌的方法;参与实验过程,体验实验操作领悟实验原理,交流实验体会;形成勇于实践、严谨求实的科学态度和科学精神。
3.教学重难点:无菌技术的操作由于微生物在自然界分布广泛,在实验室培养微生物除了要为微生物提供合适的营养和环境条件外,还需要确保其他微生物无法混入。
因此,实验时针对培养基、操作者、用于培养的器皿、接种工具等使用不同的方法进行消毒灭菌处理。
在“无菌”的条件下接种和培养,获得纯净培养物,才能成功培养微生物。
可见无菌技术是微生物培养过程的关键。
教学中可联系医疗和生活实际深入理解无菌技术。
二、学情分析授课对象为高二理科普通班的学生,在学习完必修内容之后,已对生物知识有足够的理解和掌握,并对于微生物的认知已达到相关要求。
在学习完选修Ⅰ专题1“传统发酵技术的应用”之后,对于微生物的许多生物学特征等掌握更加透彻,也具有相应的逻辑思维以及解决问题的能力,对于本节课内容绝大部分学生可以掌握很透彻。
微生物的实验室培养学案课题1:微生物的实验室培养(导学案)高二生物组目标制导1、通过学习知道培养基的种类、营养要素及如何配制培养基2、通过学习知道消毒灭菌的原理和方法3、通过自学你将晓得如何用牛肉膏蛋白胨液态培养基展开大肠杆菌的提纯培育问题导学一、培养基:写作课本培养基的有关内容,顺利完成以下问题:(1)培养基分为哪两类?二者的区别?培养基有何用途?(2)相同的微生物所须要的培养基配方相同吗?培养基的基本成分(主要营养物质)存有哪些?为什么大多数培养基都需要具备这些基本成分?(3)培养基巴戟为微生物生长提供更多几种主要营养物质外,培养基还须要满足用户微生物生长的哪些建议?(4)你知道牛肉膏、蛋白胨可以为微生物的生长提供哪些营养物质吗?二、无菌技术:写作无菌技术的有关内容,顺利完成以下问题:(1)获得纯净培养物的关键是什么?无菌技术围绕什么而展开?主要包括哪几个方面?(2)什么就是消毒与杀菌?二者的区别?实验室常用的消毒方法、杀菌方法存有哪些?分别适用于于那些用具?(3)利用干热灭菌箱对玻璃器皿灭菌时物品不能摆得太挤,目的是什么?(4)恳请你推论以下材料或用具与否须要消毒或杀菌。
如果须要,请选择最合适的方法。
①培养细菌用的培养基与培养皿。
②玻棒、试管、烧瓶和吸管。
③实验操作者的双手。
④注射环路、注射针和其他金属用具。
⑤接种室、接种箱、超净工作台⑥牛奶、啤酒、果酒等(5)无菌技术除了用以避免实验室的培育物被其他外来微生物污染外,除了什么目的?(6)使用后的培养基丢弃前要怎样处理?为什么?三、实验操作方式----大肠杆菌的提纯培育:(一)阅读课本制备牛肉膏蛋白胨固体培养基相关内容,思考回答以下问题:(1)用牛肉膏蛋白胨固体培养基进行大肠杆菌的纯化培养分哪两个阶段?(2)制取牛肉膏蛋白胨液态培养基的步骤?(3)称取牛肉膏和蛋白胨时要注意什么?(4)在展开熔化的操作方式时,重新加入水、牛肉膏、蛋白胨、氯化钠、琼脂的顺序就是?为什么在琼脂熔融的过程中要不断用玻棒烘烤?(5)阅读倒平板操作的具体步骤,思考以下问题:①培养基杀菌后,须要加热至50℃左右时,就可以用以好像平板。
《微生物的实验室培养》教学设计方案(第一课时)一、教学目标1. 知识与技能:理解微生物的观点,掌握实验室培养微生物的基本步骤和方法。
2. 过程与方法:通过实验操作,培养观察、分析和解决问题的能力。
3. 情感态度与价值观:培养对生物科学的兴趣,树立科学精神。
二、教学重难点1. 教学重点:实验室培养微生物的基本步骤,如接种、培养、观察等。
2. 教学难点:微生物的观察和识别,以及实验过程中的安全操作。
三、教学准备1. 实验器械:无菌实验室、培养皿、接种针、牛肉膏培养基等。
2. 实验试剂:牛肉膏培养基的制备,以及无菌水的制备。
3. 实验服装:实验服、口罩、橡胶手套等。
4. 参考教材:高中生物教材及实验室培养微生物的参考书籍。
四、教学过程:本节课是《微生物的实验室培养》的第一课时,教学过程将包括理论教学和实践教学两个部分。
1. 理论教学(1)导入:起首,我会简要介绍微生物的基本观点和其在生物科学中的重要性,让学生对微生物有一个初步的了解。
(2)微生物的分类和特点:进一步讲解不同类型的微生物,包括细菌、真菌、病毒等,以及它们的特点和分类依据。
(3)实验室培养微生物的基本步骤:详细介绍实验室培养微生物的基本步骤,包括样品的采集、处理、接种、培养、观察等。
(4)实验室培养微生物的环境条件:讲解影响微生物发展和繁殖的环境因素,如温度、湿度、光照等。
(5)微生物实验室的安全与防护:强调微生物实验室的安全与防护的重要性,介绍实验室的消毒、个人防护等措施。
2. 实践教学(1)实验目标:让学生明确实验的目标,了解实验的意义。
(2)实验材料和设备:介绍实验所需的各种材料和设备,如试管、培养皿、接种针、恒温箱等。
(3)实验步骤:详细讲解实验的步骤和方法,确保学生能够正确操作。
(4)实验结果观察与记录:引导学生观察实验结果,记录实验数据和现象,加深对理论知识的理解。
(5)实验总结:分析实验结果,总结实验成功或失败的原因,进一步稳固理论知识。
微生物的实验室培养导学案(含答案)课题1 微生物的实验室培养基础知识一、培养基1.概念:人们按照微生物对__营养物质_的不同需求,配制出的供其___生长繁殖___的营养基质。
2.种类:按照培养基的物理性质划分(1)___液体____培养基:配制成的____液体___状态的基质。
(2)__固体______培养基:在_____液体___培养基中加入___凝固剂__,如琼脂后,配制成的____固体___状态的基质,是实验室中最常用的培养基之一,微生物在其上面生长,可形成肉眼可见的_____菌落____。
3.组成成分:各种培养基的具体配方_不同____,但一般都有_____水______、_____碳源______、_____氮源______、____无机盐_______,此外培养基还需要满足微生物生长对___PH________、_ ___特殊营养物质_______ 以及____氧气_______的需求。
二、无菌技术获得纯净培养物的关键是_____防止外来杂菌的入侵________。
1.消毒是指使用____较为温和_____的物理方法或化学方法仅杀死物体表面或内部一部分__ __对人体有害______的微生物(不包括__芽孢__和__孢子____)。
实验室常用的消毒方法有____煮沸消毒法______、____巴氏消毒法_____、____化学药剂消毒法____。
2.灭菌是指使用____强烈_____的理化因素杀死___物体内外所有_____的微生物,包括_____芽孢_____和_____孢子_____。
常用的灭菌方法有____灼烧灭菌___、__干热灭菌__、___高压蒸汽灭菌____。
3.实验操作中避免杂菌的污染,主要包括四方面的内容:(1)对实验操作的__空间____、操作者的___衣着和手_____进行清洁和消毒。
(2)将用于微生物培养的__器皿__、___接种用具____和___培养基____等进行灭菌。
中学高效课堂高二生物选修1导学案课题专题2 课题1 微生物的实验室培养导学案备课时间授课时间编号备课教师备课组长课型学习目标1.了解培养基的用途、种类及一般成分,2.掌握培养基制作的一般的步骤,3.掌握微生物分离中的划线法和涂布法。
4.学会一般的消毒、灭毒的方法,进行无菌技术的操作。
德育渗透通过本节学习,了解和掌握生物技术在日常生活中的应用,所以要认真学好生物知识。
学习重点培养基的制备、微生物的培养的操作。
学习难点培养基的制备和微生物的分离。
学法指导课前预习,完成自主学习内容。
课前阅读教材,完成自主学习部分,为课上合作探究作好准备。
自主学习内容教师活动(一)培养基1.概念:人们按照微生物对的不同需求,配制出供其营养基质称为培养基。
可分为培养基和培养基。
2.营养构成:各种培养基一般都含有水、、和无机盐,此外还要满足微生物生长对、特殊营养物质以及氧气的要求。
3.培养乳酸杆菌时需在培养基中添加、培养霉菌时需将培养基PH调至、培养细菌时需将PH调至、培养厌氧微生物则需提供条件。
(二)无菌技术A、获得纯净培养物的关键是防止外来的人侵,具体操作如下:1.对实验操作的、操作者的和进行清洁和消毒。
2.将用于微生物培养的、接种用具和培养基等器具进行。
3.为避免周围环境中微生物的污染,实验操作应在附近进行。
4.实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与相接触。
B、消毒和灭菌1.消毒是指使用较为的物理或化学方法仅杀死物体表面或内部对人体有害的微生物(不包括芽孢和孢子)。
常用的方法有消毒法和消毒法。
2.灭菌是指使用的理化因素杀死物体内外的微生物。
常用的方法有:灭菌、灭菌、灭菌。
(三)制备牛肉膏蛋白胨固体培养基步骤:计算→称量→溶化→灭菌→倒平板1.计算:根据比例,计算100mL培养基各成分用量。
2.称量:牛肉膏较黏稠,可用玻棒挑取,同一同称量。
称取牛肉膏和蛋白胨时动作要迅速,目的是防止牛肉膏吸收空气中水分。
3.溶化:加水加热熔化牛肉膏与称量纸→取出称量纸→加入蛋白胨和氯化钠继续加热→加入→用蒸馏水定容到100mL(整个过程不断用玻棒搅拌,目的是防止琼脂糊底而导致烧杯破裂)。
课题1微生物的实验室培养导学案(第1课时)学习目标知识体系1.阐述培养基的种类和成分。
(重点)2.说出无菌操作技术的方法。
(识记)一培养基1).概念:人们按照微生物对的不同需求,配制出供其的营养基质2)营养组成:各种培养基一般都含有、、和无机盐,此外还需要满足微生物生长对、特殊营养物质以及的要求。
二、无菌技术1.关键:防止的入侵。
2.具体操作(1)对实验操作的、操作者的衣着和手,进行清洁和。
(2)将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等进行。
(3)为避免周围环境中微生物的污染,实验操作应在附近进行。
(4)实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与相接触。
消毒灭菌概念使用较为的物理或化学方法杀死物体或内部的部分微生物(不包括)使用的理化因素杀死物体内外的微生物(常用方法消毒法、巴氏消毒法、消毒法、紫外线消毒法灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌消毒方法:(1)日常生活经常用到的是消毒法,如生活用品。
(2)对一些不耐高温的液体,则使用消毒法如牛奶(3)对接种室、接种箱或超净工作台首先喷洒等溶液以增强消毒效果,然后使用进行物理消毒。
(4)实验操作者的双手使用进行消毒;(5)饮水水源用进行消毒。
[问题情境] 1.消毒和灭菌的原理是什么?消毒和灭菌都能杀死所有的微生物吗?是否适用于所有的生物和物品?提示:(1)消毒和灭菌的原理都是使微生物的蛋白质变性,借此杀死微生物。
(2)灭菌可杀死处理材料中的全部微生物(包括芽孢和孢子),而消毒仅能杀死物体表面或内部的部分微生物(一般不包括芽孢和孢子)。
(3)不是,无菌技术既要考虑效果,又要考虑操作对象的承受能力。
例如,活体生物材料、操作者的双手等只能消毒,而不能灭菌。
2.无菌技术除了用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染外,还有什么目的?提示:还能有效避免污染环境以及操作者自身被微生物感染【拓展】有关培养基营养物质的四点提醒(1)培养不同的微生物所需要的营养物质可能不同①自养型微生物的培养基主要以无机营养为主。
专题2 微生物的培养与应用课题1 微生物的实验室培养培养基的基础知识,进行微生物培养和无菌技术的操作;测定某种微生物的数量;研究培养基对微生物的选择作用微生物培养和无菌技术的操作无菌技术的操作一、教材导读一、培养基1.概念:人们按照微生物对 的不同需求,配制出供其 的营养基质叫培养基。
可分为 培养基和 培养基。
2.营养构成:各种培养基一般都含有 、 、 和 ,此外还要满足微生物生长对 、 以及 的要求。
3.培养乳酸杆菌时需在培养基中添加 、培养霉菌时需将培养基PH 调至 、培养细菌时需将PH 调至 、培养厌氧微生物则需提供 条件。
〖思考1〗从细胞的化学元素组成来看,培养基中为什么都含有这些营养成分?【补充1】碳源:如CO2、糖类、脂肪酸等有机物,构成微生物的结构物质和分泌物,并提供能量。
氮源:如N2、氨盐、硝酸盐、牛肉膏、蛋白胨等,主要用来合成蛋白质、核酸及含氮代谢物等。
含有C 、H 、O 、N 的化合物既可以作为碳源,又可以作为氮源,如氨基酸等。
二、无菌技术:阅读“无菌技术”,讨论回答下列问题:(一)获得纯净培养物的关键是 ,具体操作如下:1.对实验操作的 、操作者的 和 进行 。
2.将用于微生物培养的 、 和 等器具进行 。
3.为避免周围环境中微生物的污染,实验操作应在 附近进行。
4.实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与 相接触。
(二)消毒和灭菌1.消毒是指 。
常用的方法有 、 、 消毒法。
2.灭菌是指 。
常用的方法有: 、 、 灭菌。
分别适用于那些用具?〖思考2〗无菌技术除了防止培养物被污染外,还具有的目的是什么?〖思考3〗利用干热灭菌箱对玻璃器皿灭菌时物品不能摆得太挤,目的是什么?〖思考4〗物品装入高压蒸汽灭菌锅灭菌后,要首先打开排气阀,煮沸并排除锅内冷空气,其目的是;随后关闭排气阀继续加热,气压升至,温度为,并维持min;最后切断热源,使温度自然降温,气压务必降至时打开锅盖,其目的是防止二、疑问存档请你将预习中未解决的问题和有疑问的问题写下来,等待课堂上与老师和同学共同探究解决。
三、预习自测1.关于制备牛肉膏蛋白胨固体培养基,叙述错误的是( )A.操作顺序为计算、称量、溶化、倒平板、灭菌B.将称好的牛肉膏连同称量纸一同放入烧杯C.待培养基冷却至50℃左右时进行倒平板D.待平板冷却凝固约5~10 min后,将平板倒过来放置2.金黄色葡萄球菌有很强的致病力,常引起骨髓炎等,还可能引起食物中毒,下述实验结束后的做法错误的是( )A.对接种环进行灼烧处理B.带菌培养基必须经高压蒸汽灭菌锅灭菌后才能倒掉C.带菌培养基必须经加热后才能倒掉D.接种后双手必须经肥皂洗净,再用75%的酒精棉球擦拭3.防止杂菌入侵,获得纯净的培养物,是研究和应用微生物的前提。
下列叙述错误的是( ) A.实验室里可以用紫外线或化学药物进行消毒B.接种环、接种针等金属用具,直接在酒精灯火焰的内焰部位灼烧灭菌C.在实验室中,切不可吃东西、喝水,离开实验室时一定要洗手,以防止被微生物感染D.使用后的培养基丢弃前一定要进行灭菌处理,以免污染环境4.下列叙述错误的是( )A.右手拿装有培养基的锥形瓶,左手拔出棉塞,为避免污染需放在酒精灯火焰附近B.倒平板整个过程应在火焰旁进行C.打开培养皿盖,右手将锥形瓶中的培养基倒入培养皿,左手立即盖上培养皿的皿盖D.为避免水滴滴入培养基,平板应倒过来放置专题2 微生物的培养与应用课题1 微生物的实验室培养一、课堂互动实验操作----大肠杆菌的纯化培养:本实验所用的培养基是,本实验可分成和两个阶段进行。
一制备牛肉膏蛋白胨固体培养基1制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的操作步骤是:、、、、。
〖思考5〗在制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的称量操作中,动作要迅速,原因是什么?溶化操作中需要不断用玻璃棒搅拌的目的是什么?〖思考6〗牛肉膏和蛋白胨主要为微生物提供什么等营养物质?2.倒平板:待培养基冷却至℃左右时在酒精灯火焰附近操作进行。
其过程是:①在火焰旁右手拿,左手;②使锥形瓶的瓶口;③左手将培养皿,右手,立刻盖上皿盖。
④待平板冷却凝固后,将平板。
〖思考7〗锥形瓶的瓶口通过火焰的目的是什么?〖思考8〗倒平板的目的是什么?〖思考9〗若皿盖和皿底之间粘有培养基,则该平板能否培养微生物?为什么?〖思考10〗配制斜面培养基作用是什么?,试管为什么要加塞棉塞?纯化大肠杆菌微生物接种:最常用的是法和法。
另外还有穿刺接种和斜面接种等。
1.平板划线法是的操作,将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。
其操作步骤是:①将在酒精灯火焰上灼烧直至。
②在酒精灯火焰旁冷却接种环,并打开大肠杆菌的菌种试管的棉塞。
③将菌种试管口通过火焰达到的目的。
④将冷却的接种环伸入到。
⑤将菌种试管口再次通过火焰后塞上棉塞。
⑥将皿盖打开一条缝隙,把接种环,盖上皿盖,不要划破培养基。
⑦灼烧接种环,冷却后从划线。
重复上述过程,完成三、四、五区域内划线。
注意不要将相连。
⑧将平板培养。
〖思考11〗取菌种前灼烧接种环的目的是什么?为什么除第一次划线外,其余划线前都要灼烧接种环?取菌种和划线前都要求接种环冷却后进行,其目的是?最后灼烧接种环的目的是?在第1次划线后都从上次划线末端开始的目的是?2.稀释涂布平板法则是将菌液进行一系列的梯度稀释,然后将 进行培养。
当稀释倍数足够高时,即可获得单个细菌形成的标准菌落。
系列稀释操作:①取盛有 mL 水的无菌试管6支 ,编号101、102、103、104、105、106。
②用灼烧冷却的移液管吸取 mL 菌液注入编号为101试管中,并吹打3次使之混匀。
③从101倍液中吸取 mL 菌液注入到编号为102试管内吹打均匀,获得102倍液。
依此类推。
〖思考12〗系列稀释操作的注意事项是什么?〖思考13〗涂布平板操作的步骤是什么?结果分析与评价1 培养未接种培养基的作用是什么?,若有菌落形成,说明什么?2 在肉汤培养基上,大肠杆菌菌落颜色?形态?3 培养12h 和24h 后的菌落大小?;菌落分布位置?原因?〖思考14〗在某培养基上出现了3种特征不同的菌落是什么原因?〖思考15〗频繁使用的菌种利用什么法保存?长期保存菌种的方法是什么?【例1】下列关于微生物营养的说法,正确的是……………………………………( )A .同一种物质不可能既作碳源又作氮源B .凡是碳源都能提供能量c .除水以外的无机物仅提供无机盐 D .无机氮源也能提供能量解析:此题考查学生对微生物的营养和能源的理解。
对异养微生物来说,含C 、H 、O 、N 的化合物既是碳源,又是氮源。
CO 2是光能自养细菌的碳源,但不能提供能量。
CO 2和N 。
是无机物,也是微生物的碳源和氮源。
硝化细菌所利用的氮源是无机氮源氨,同时氨也为硝化细菌提供用以化能合成作用的能源。
答案:D【例2】细菌培养过程中分别采用了高压蒸气、酒精、火焰灼烧等几种不同的处理,这些方法依次用于杀灭哪些部位的杂菌………( )A .接种针、手、培养基B .高压锅、手、接种针C .培养基、手、接种针D .接种针、手、高压锅解析:此题考查学生对无菌技术的掌握。
高压蒸气灭菌锅是灭菌的一个设备,通常用于培养基的灭菌。
用酒精擦拭双手是消毒的一种方法。
火焰灼烧,可以迅速彻底地灭菌,适用于微生物的接种工具,如接种环。
答案:C【例3】以下关于制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的叙述错误的是………………………( )A.操作顺序为计算、称量、溶化、倒平板、灭菌B.将称好的牛肉膏连同称量纸一同放人烧杯C.待培养基冷却至50℃左右时进行倒平板D.待平板冷却凝固约5~10 min后将平板倒过来放置解析:制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的步骤是计算、称量、溶化、灭菌、倒平板,不能颠倒。
牛肉膏容易吸潮,所以当牛肉膏溶化并与称量纸分离后,用玻棒取出称量纸。
待培养基冷却至50℃,用手触摸锥形瓶刚刚不烫手,并且培养基处于溶化状态。
平板冷却几分钟后还需倒置。
答案:A【例4】下面对发酵工程中灭菌的理解不正确的是A.防止杂菌污染B.消灭杂菌C.培养基和发酵设备都必须灭菌D.灭菌必须在接种前解析:灭菌是微生物发酵过程的一个重要环节。
A说的是灭菌的目的,因为发酵所用的菌种大多是单一的纯种,整个发酵过程不能混入其他微生物(杂菌),所以是正确的;B是错误的,因为灭菌的目的是防止杂菌污染,但实际操作中不可能只消灭杂菌,而是消灭全部微生物。
C是正确的,因为与发酵有关的所有设备和物质都要灭菌;发酵所用的微生物是灭菌后专门接种的,灭菌必须在接种前,如果接种后再灭菌就会把所接菌种也杀死。
答案:B三、随堂训练1.有关稀释涂布平板法的说法中,错误的是( )A.用移液管把菌液从一支试管转移到下一支试管后,要用手指轻压移液管的橡皮头,吹吸三次,目的是使菌液与水充分混匀B.移液管需经过灭菌C.试管口与移液管应在离火焰1~2 cm处D.涂布时可转动涂布器,使菌液涂布均匀2.以下关于制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的操作顺序正确的是( )A.计算→称量→倒平板→溶化→灭菌B.计算→称量→溶化→倒平板→灭菌C.计算→称量→溶化→灭菌→倒平板D.计算→称量→灭菌→溶化→倒平板3.为了保持菌种的纯净,需要进行菌种的保藏,下列有关叙述不正确的是( )A.对于频繁使用的菌种,可以采用临时保藏的方法B.临时保藏的菌种一般是接种到试管的斜面培养基上C.临时保藏的菌种容易被污染或产生变异D.对于需要长期保存的菌种,可以采用低温-4℃保藏的方法4.有关平板划线操作的叙述,正确的是( )A.使用已灭菌的接种环、培养皿,操作过程中不再灭菌B.打开含菌种的试管需通过火焰灭菌,取出菌种后需马上塞上棉塞C.把皿盖打开,将沾有菌种的接种环迅速伸入平板内,划三至五条平行线即可D.最后将平板倒置,放入培养箱中培养参考答案基础知识:一、1.营养物质生长繁殖液体固体2水.碳源氮源无机盐 PH 特殊营养物质氧气3维生素,酸性,中性或微碱性,无氧〖思考1〗:C、H、O、N、P、S是构成细胞原生质的基本元素,约占原生质总量的97%以上。
二(一)杂菌 1.空间衣着手,清洁和消毒 2.器皿接种用具,培养基,灭菌 3. 酒精灯火焰 4.周围的物品(二)1.略巴氏消酒精 2.略灼烧干热高压蒸气〖思考2〗:防止感染实验操作者。
〖思考3〗避免妨碍热空气流通。
〖思考4〗有利于锅内温度升高,100k Pa,121℃,15~30,零,容器中的液体暴沸,实验操作:一1计算→称量→溶化→灭菌→倒平板思考5:防止牛肉膏吸收空气中水分。
防止琼脂糊底而导致烧杯破裂。
〖思考6〗糖维生素和有机氮2:50,锥形瓶,拔出棉塞,迅速通过火焰,打开一条缝隙,将培养基倒入培养皿,倒过来放置〖思考7〗消灭瓶口的杂菌,防止杂菌感染培养基。
〖思考8〗防止培养基冷却过程中形成的水滴落到培养基表面。