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碧云天生物技术/Beyotime Biotechnology 订货热线: 400-1683301或800-8283301 订货e-mail :****************** 技术咨询: ***************** 网址: 碧云天网站 微信公众号RNAeasy ™动物RNA 抽提试剂盒(离心柱式)(试用装)产品简介：碧云天的离心柱式RNAeasy ™动物RNA 抽提试剂盒(RNAeasy ™ Animal RNA Isolation Kit with Spin Column)是一种基于离心柱法从动物组织或培养的动物细胞中安全、快速、便捷、稳定、高效、高质量地抽提长度大于200个核苷酸(nucleotide, nt)的RNA 的试剂盒。
抽提获得的大于200个核苷酸的RNA(也常被称为总RNA)可以用于各种常规用途。
本试剂盒抽提得到的RNA 可用于反转录、RT-PCR 、qPCR 、Northern 、点杂交(Dot Blot)、纯化mRNA 、体外翻译、RNase protection assay 、cDNA 克隆等下游实验；也可用于基因表达芯片分析(microarray)、高通量测序(high throughput sequencing)等对RNA 质量要求较高的情况。
碧云天的三款离心柱式及Trizol 法RNA 抽提试剂盒的主要特点和差异如下：动物组织或细胞中的RNA 按照长度可以分为长链RNA(long RNA)和小RNA(small RNA)，长链RNA 通常大于200nt ，而小RNA 通常小于200nt 。
长链RNA 按照是否编码蛋白或多肽可以分为长链非编码RNA(long noncoding RNA, lncRNA)和mRNA 。
小RNA 主要包括非编码的5.8S rRNA(ribosomal RNA)、5S rRNA 、tRNA(transfer RNA)、microRNA(miRNA)、siRNA(small interfering RNA)、piRNA(Piwi-associated small RNA)、tsRNA(tRNA-derived small RNA)、srRNA(small rDNA-derived RNA)等。
杭州昊鑫生物科技股份有限公司 htpp://DNase I 柱上消化试剂盒（RNase free ）使 用 说 明 书包装量：产品储存： DNase Buffer -20 ℃保存， 去蛋白液RW1常温或者4 ℃保存，RNase free DNase －20 ℃保存，避免反复冻融。
注意：DNase Buffer 含Mn 2+，可能有轻度发黄发黑，甚至黑色沉淀为正常现象，颠倒混匀后正常使用即可。
产品介绍：任何总RNA 提取试剂在提取过程中无法完全避免DNA 的微量残留，本公司的EASYspin 系列RNA 提取产品，由于采取了本公司独特的缓冲体系和特殊硅胶吸附膜，可以去除绝大多数的DNA 污染，所以一般不用进行DNase I 消化。
但是对于一些敏感的下游实验，需要去除微量的DNA 残留，可以购买本公司DNase I 柱上消化试剂盒（RNase free ），直接在离心吸附柱上面消化残留的DNA ，然后纯净RNA 可以洗脱下来直接使用。
本产品兼容所有硅胶膜离心柱式RNA 提取试剂盒。
产品特点： 1.简单快速，条件经过优化，一般15分钟可以消化清除硅胶膜上残留DNA 。
2.确保RNase free ， 可以保证RNA 分子完整性。
3.兼容性广，可整合进所有硅胶膜离心柱式RNA 提取试剂盒柱上消化，不需要提取到总RNA 后再单独去除里面的残留DNA 。
注意事项：DNase 是非常敏感，易物理损坏变性丧失活性，所以不要漩涡混匀DNase I 和工作液。
轻轻吹打或者上下颠倒混匀混合液。
每次在抽提RNA 抽提前配置新鲜的工作液。
DNase I buffer 是和RNase-free DNase I 配套专门用于柱上消化，一般的10 x DNase buffer 并不能用于膜上的DNase 消化，不能替代。
操作步骤： 1.按照正常RNA 提取步骤操作，裂解混合物过柱离心完全后（RNA 包括残留DNA 吸附到离心柱硅胶膜上），加入去蛋白液RW1步骤前按照以下步骤操作。
EASYspin 组织/细胞RNA快速提取试剂盒目录号：RN07目录编号包装单位RN0702 50次适用范围：适用于快速提取各种细胞组织总RNA试剂盒组成、储存、稳定性：试剂盒组成保存50次裂解液RLT 室温50 ml 去蛋白液RW1 室温40 ml漂洗液RW 室温10ml第一次使用前按说明加指定量乙醇RNase-free H2O 室温10 ml70%乙醇室温9ml RNase-free H2O第一次使用前按说明加指定量乙醇RNase-free吸附柱RA和收集管室温50套本试剂盒在室温储存12个月不影响使用效果。
储存事项：1.所有的溶液应该是澄清的，如果环境温度低时溶液可能形成沉淀，此时不应该直接使用，可在37℃水浴加热几分钟，即可恢复澄清。
2.不合适的储存于低温（4℃或者－20℃）会造成溶液沉淀，影响使用效果，因此运输和储存均在室温下（15℃－25℃）进行。
3.避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、PH值变化，各溶液使用后应及时盖紧盖子。
注意事项1.所有的离心步骤均在室温完成，使用转速可以达到13,000 rpm的传统台式离心机，如Eppendorf 5415C 或者类似离心机。
2.需要自备乙醇，一次性注射器，研钵。
3.裂解液RLT 和去蛋白液RW1中含有刺激性化合物，操作时要戴乳胶手套，避免沾染皮肤，眼睛和衣服。
若沾染皮肤、眼睛时，要用大量清水或者生理盐水冲洗。
4.预防RNase 污染，应注意以下几方面：1)经常更换新手套。
因为皮肤经常带有细菌，可能导致RNase 污染。
2)使用无RNase 的塑料制品和枪头避免交叉污染。
3)RNA 在裂解液RLT 中时不会被RNase 降解。
但提取后继续处理过程中应使用不含RNase 的塑料和玻璃器皿。
玻璃器皿可在150℃烘烤4 小时，塑料器皿可在0.5 M NaOH 中浸泡10 分钟，然后用水彻底清洗，再灭菌，即可去除RNase。
4)配制溶液应使用无RNase 的水。
EASYspin Plus Complex Plant RNA KitEASYspin Plus多糖多酚/复杂植物RNA快速提取试剂盒目录号：RN53适用范围：适用于快速提取植物组织细胞总RNA，使用独有基因组DNA清除柱技术可有效清除电泳可见gDNA残留，RNA可用于反转录PCR，荧光定量PCR等。
试剂盒组成、储存、稳定性：试剂盒组成保存50次(RN5301)裂解液CLB 室温50 ml裂解液RLT Plus 室温25 ml去蛋白液RW1 室温40 ml漂洗液RW 室温10 ml第一次使用前按说明加指定量乙醇RNase-free H2O 室温10 ml基因组DNA清除柱和收集管室温50套RNase-free吸附柱RA和收集管室温50套本试剂盒在室温储存12个月不影响使用效果。
储存事项：1.不合适的储存于低温（4℃或者－20℃）会造成溶液沉淀，影响使用效果，因此运输和储存均在室温下（15℃－25℃）进行。
2.避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、PH值变化，各溶液使用后应及时盖紧盖子。
注意事项1.所有的离心步骤均可在室温完成（4℃离心也可以），使用转速可以达到13,000 rpm的传统台式离心机，如Eppendorf 5415C 或者类似离心机。
2.需要自备β-巯基乙醇，乙醇，研钵(可选)。
3.样品处理量绝对不要超过基因组清除柱DA和和RNA吸附柱RA处理能力，否则造成DNA残留或产量降低。
开始摸索实验条件时，如果不清楚样品DNA/RNA含量时可使用较少的样品处理量，将来根据样品试验情况增加或者减少处理量。
4.裂解液CLB和RLT Plus 和去蛋白液RW1中含有刺激性化合物，操作时戴乳胶手套，避免沾染皮肤，眼睛和衣服。
若沾染皮肤、眼睛时，要用大量清水或者生理盐水冲洗。
5.关于DNA 的微量残留:一般说来任何总RNA提取试剂在提取过程中无法完全避免DNA的微量残留（DNase消化也无法做到100%无残留），本公司的EASYspin Plus RNA提取产品，由于采取了本公司独特的缓冲体系和基因组DNA清除柱技术，绝大多数DNA已经被清除，不需要DNase消化，可直接用于反转录PCR和荧光定量PCR。
EASYspin Plus 细菌RNA快速提取试剂盒目录号：RN43目录编号包装单位RN4302 50次适用范围：适用于快速提取细菌总RNA，使用独有基因组DNA清除柱技术确保有效清除gDNA残留，不需要使用DNase消化，RNA可直接用于反转录PCR，荧光定量PCR.。
试剂盒组成、储存、稳定性：试剂盒组成保存50次TE (PH8.0) 室温 6 ml溶菌酶4℃20 mg裂解液RLT Plus 室温25 ml去蛋白液RW1 室温40 ml漂洗液RW 室温10ml第一次使用前按说明加指定量乙醇70%乙醇室温9ml RNase-free H2O第一次使用前按说明加指定量乙醇RNase-free H2O 室温10 ml 基因组DNA清除柱和收集管室温50套RNase-free吸附柱RA和收集管室温50套本试剂盒在室温储存6个月不影响使用效果。
储存事项：1.所有的溶液应该是澄清的，如果环境温度低时溶液可能形成沉淀，此时不应该直接使用，可在37℃水浴加热几分钟，即可恢复澄清。
2.不合适的储存于低温（4℃或者－20℃）会造成溶液沉淀，影响使用效果，因此运输和储存均在室温下（15℃－25℃）进行。
3.避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、PH值变化，各溶液使用后应及时盖紧盖子。
注意事项1.所有的离心步骤均在室温完成，使用转速可以达到13,000 rpm的传统台式离心机，如Eppendorf 5415C 或者类似离心机。
2.样品处理量绝对不要超过基因组吸附柱DA和和RNA吸附柱RA处理能力，否则造成DNA残留或产量降低。
开始摸索实验条件时，如果不清楚样品DNA/RNA含量时宁可使用较少的样品处理量，将来根据样品试验情况增加或者减少处理量。
3.裂解液RLT Plus 和去蛋白液RW1中含有刺激性化合物，操作时戴乳胶手套，避免沾染皮肤，眼睛和衣服。
若沾染皮肤、眼睛时，要用大量清水或者生理盐水冲洗。
4.关于DNA 的微量残留:一般说来任何总RNA提取试剂在提取过程中无法完全避免DNA的微量残留（DNase消化也无法做到100%无残留），本公司的EASYspin Plus RNA提取产品，由于采取了本公司独特的缓冲体系和基因组DNA清除柱技术，绝大多数DNA已经被清除，不需要DNase消化，可直接用于反转录PCR和荧光定量PCR。
EASYspin Plus组织/细胞RNA快速提取试剂盒目录号：RN28目录编号包装单位RN2802 50次适用范围：适用于快速提取动物细胞和易裂解动物组织总RNA，使用独有基因组DNA清除柱技术确保有效清除gDNA残留，不需要使用DNase消化，RNA可直接用于PCR，荧光定量PCR.。
试剂盒组成、储存、稳定性：试剂盒组成保存50次裂解液RLT Plus 室温50 ml去蛋白液RW1 室温40 ml漂洗液RW 室温10ml第一次使用前按说明加指定量乙醇RNase-free H2O 室温10 ml70%乙醇室温9ml RNase-free H2O第一次使用前按说明加指定量乙醇基因组DNA清除柱和收集管室温50套RNase-free吸附柱RA和收集管室温50套本试剂盒在室温储存12个月不影响使用效果。
储存事项：1.所有的溶液应该是澄清的，如果环境温度低时溶液可能形成沉淀，此时不应该直接使用，可在37℃水浴加热几分钟，即可恢复澄清。
2.不合适的储存于低温（4℃或者－20℃）会造成溶液沉淀，影响使用效果，因此运输和储存均在室温下（15℃－25℃）进行。
3.避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、PH值变化，各溶液使用后应及时盖紧盖子。
注意事项1.所有的离心步骤均在室温完成，使用转速可以达到13,000 rpm的传统台式离心机，如Eppendorf 5415C 或者类似离心机。
2.样品处理量绝对不要超过基因组吸附柱DA和和RNA吸附柱RA处理能力，否则造成DNA残留或者产量降低。
不同组织细胞种类RNA/DNA相差极大，例如胸腺脾脏DNA含量丰富，超过5mg就会超过柱子处理能力。
COS细胞RNA含量丰富，超过3x106细胞就会超过柱子吸附能力。
所以开始摸索实验条件时，如果不清楚样品DNA/RNA含量时宁可使用较少的样品处理量，如细胞不超过3-4x106，组织不超过10mg。
将来根据样品试验情况增加或者减少处理量。
下面是为提取小麦叶片客户专门推荐的操作步骤和方案，其它更多内容可以参考原始说明书，货号RN09 EASYspin 植物RNA提取试剂盒；RN38 EASYspin Plus植物RNA提取试剂盒；RN34DNase I 柱上消化试剂盒（RNase free）1、小麦叶片提取RNA做下游反转录荧光定量PCR按照如下步骤操作：采用RN09 EASYspin 植物RNA提取试剂盒+RN34 DNA酶柱上消化试剂盒的操作步骤(和天根的完全一样，也是加了DNA酶柱上消化的步骤)。
具体整合操作步骤如下：操作步骤：（实验前请先阅读注意事项）提示：⇨第一次使用前请先在漂洗液RW瓶加入指定量无水乙醇!1.直接研磨法（推荐）:a. 新鲜植物组织称重后取100mg迅速剪成小块放入研钵（冰冻保存或者液氮保存样品可直接称重后取100mg放入研钵），加入10体积（1ml）RLT和1体积（100μl）PLANTaid 室温下充分研磨成匀浆，注意应该迅速研磨让组织和裂解液RLT立刻充分接触以抑制RNA酶活性。
注：PLANTaid是提取多糖多酚次级代谢产物色素含量丰富的困难样品不可缺少成分。
提取普通植物组织可以不加PLANTaid，RNA产量可能会提高一些。
b. 将裂解物转入离心管，剧烈摇晃振荡15秒，13,000rpm离心5-10分钟,沉淀不能裂解的碎片和结合有多糖多酚的PLANTaid。
c. 取480μl裂解物上清（在不超过RNA吸附柱能力的情况下可以取更多或者全部上清，这样可以提高产量）转到一个新离心管。
加入上清体积一半的无水乙醇(0.5体积)，此时可能出现沉淀,但是不影响提取过程，立即吹打混匀,不要离心。
d. 立刻接操作步骤的步骤3。
2.液氮研磨法（提取复杂，易降解样品时推荐此法）:a. 取500μl裂解液RLT，转入1.5ml离心管中，加入50μl PLANTaid混匀备用。
b. 液氮中研磨适量植物组织成细粉后，取50mg细粉转入上述装有RLT和PLANTaid的离心管, 立即用手剧烈振荡20秒，充分裂解。
總RNA提取試劑盒產品編號：TR01/TR01-150產品包裝：50/150反應請儲存於室溫僅供研究用途使用產品敘述:總RNA提取試劑盒(Total RNA Purification Kit) 提供了簡便快速的方法，提取各種動植物組織、培養細胞和細菌之總量RNA(total RNA)。
本產品以離心管柱(spin column)方式，配合使用guanidium thiocyanate使組織細胞裂解及均質化，並加入酒精使RNA選擇性地與二氧化矽膜(silica membrane)結合。
試劑盒中附有DNase I，操作過程中加入管柱可將基因體DNA降解。
經過多次“清洗及離心”的步驟去除汙染雜質，再以無核酸酶水(Nuclease-free water)回收(elute)結合在二氧化矽膜上的RNA。
注意若RNA小於200 nt，例如：5S RNA, tRNA和microRNA，無法在此系統中被有效地回收。
Kit包裝內容物：*將DNase I Solution儲存於-20℃，將其他套組內容物儲存於室溫。
使用者需自備:●2-Mercaptoethanol (2-ME)：製備RNA lysis solution用。
●小型組織均質器(Small homogenizer (如. Polytron))。
或研缽及研杵(mortarand pestle)或20G針頭的針筒。
●70％酒精(用於動物組織和培養之細胞)。
●100％酒精(製備RNA Wash Solution II用；純化動物纖維組織，例如：心臟、肌肉和皮膚；RNA清洗用)。
●Proteinase K (只用在動物纖維組織，例如，心臟、肌肉和皮膚)●PBS buffer (選擇性地用在貼附性培養之細胞)●Lysozyme (用於細菌樣品)實驗前注意事項:●將350 μl (TR01)或1.05 ml (TR01-150) 的2-Mercaptoethanol加入RNA LysisSolution中，將RNA Lysis/2-ME Solution儲存於4°C。
