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自来水水质的细菌学检查一、文献综述1.（1）水质细菌学检验的意义生活自来水及其水源水等水体受到生活污水、工农业废水或人和动物粪便的污染后,水中的细菌数可大量增加,其中病原菌也随之增加引发传染危害人类健康因而水中细菌总数和大肠菌数量可反映水体受微生物污染的程度水中细菌总数往往同水体受有机物污染的程度呈正相关。
故水的细菌学检验对了解水体受污染程度在流行病学和提供水质标准中有重要意义和价值它是评价水质污染程度的重要指标之一。
（2）总大肠菌群的检测意义大肠菌群系：指一群在37°C、24小时能发酵乳糖产酸产气，需氧或兼性厌氧的革兰氏阴性无芽孢杆菌。
测定的意义：大肠菌群分布较广，在温血动物粪便和自然界广泛存在。
调查研究表明，大肠菌群细菌多存在于温血动物粪便、人类经常活动的场所以及有粪便污染的地方，人、畜粪便对外界环境的污染是大肠菌群在自然界存在的主要原因。
粪便中多以典型大肠杆菌为主，而外界环境中则以大肠菌群其他型别较多。
大肠菌群是作为粪便污染指标菌提出来的，主要是以该菌群的检出情况来表示食品中有否粪便污染。
大肠菌群数的高低，表明了粪便污染的程度，也反映了对人体健康危害性的大小。
粪便是人类肠道排泄物，其中有健康人粪便，也有肠道患者或带菌者的粪便，所以粪便内除--般正常细菌外，同时也会有一些肠道致病菌存在(如沙门氏菌、志贺氏菌等)，因而食品中有粪便污染，则可以推测该食品中存在着肠道致病菌污染的可能性，潜伏着食物中毒和流行病的威胁，必须看作对人体健康具有潜在的危险性。
该菌主要来源于人畜粪便，故以此作为粪便污染指标来评价食品的卫生质量，具有广泛的卫生学意义。
它反映了水源是否被粪便污染，同时间接地指出水源是否有肠道致病菌污染的可能性。
大肠菌群数系以每1g (或mL)检样内大肠菌群近似可能数MPN (the most probable number-简称MPN)表示（3）耐热大肠菌群的检测意义作为一种卫生指标菌，耐热大肠菌群中很可能含有粪源微生物，因此耐热大肠菌群的存在表明可能受到了粪便污染，可能存在大肠杆菌。
水质的细菌学检查一、目的要求(一)学习水质的细菌学检查法(二)了解水质状况同细菌数量的关系及大肠菌群的数量在饮水中的重要性。
二、基本原理检测水中的细菌数量是评价水质状况的重要指标之一。
饮水是否合乎卫生标准，需要进行水中细菌数量及大肠菌群数量的测定。
大肠菌群是肠道最普遍存在和数量最多的一群细菌，由于大肠菌群是一群能发酵乳糖的革兰氏阴性、无芽孢杆菌，它们在乳糖培养基中经37℃培养24小时即能产酸、产气，所以常将其作为粪便污染的标志。
饮用水一般规定：1毫升自来水中总菌数不得超过100个；1000毫升自来水肠菌群数不得超过3个。
三、实验材料培养基及器皿、牛肉膏蛋白胨培养基、乳糖蛋白胨发酵管（倒置小管）、三倍乳糖蛋白胨发酵管（倒置小管）、伊红美蓝琼脂培养基、无菌空瓶、无菌水、无菌培养皿、移液管、试管。
四、实验客(一)采取水样1、自来水：从学校各生活区取样。
先将自来水龙头用火焰灭菌,再开放水龙头使水流1—2分钟后，用无菌空瓶接取水样。
2、池水、湖水或河水：用无菌空瓶取距水面 10—15厘米深层水样。
水样采取后应立即检验，不得超过4小时。
(二）水中细菌总数测定l、自来水：稀释水样：原水样和10-1 水样，用无菌移液管分别吸取l毫升原水样和10-1水样，分别注入二个无菌培养皿中。
每皿各加13--15毫升已融化并冷却到4 5-- 50℃的牛肉膏蛋白胨培养基，轻轻旋转，使培养基与水样充分混匀，待凝固后，将平板倒置于37℃恒温箱，培养24小时进行菌落计数。
制作培养基方法、消毒灭菌、接种、计数皆参照参微生物学实验指导，具体如下：培养基制作：实验五、培养基的制备培养基配方：附录二、常用培养基之一培养基灭菌：实验六、灭菌与消毒水样接种：实验七、土壤微生物的分离与测数细菌总数测定：实验七、土壤微生物的分离与测数2、池水、湖水或河水等。
稀释水样：稀释倍数视水样污浊程度而定，使水样培养后每个平板中的菌落数在30--300之间的的稀释度最为合适。
水质的细菌学检测一、实验目的学习水中细菌总数及大肠菌群数测定的原理，并掌握其操作方法。
二、实验原理1、细菌总数的测定：水中细菌总数往往同水体受有机物污染的程度呈正相关。
由于重金属及其他有毒物质对细菌有杀灭或抑制作用，因此总细菌数少的水样，并不能排除已被这些物质所污染。
本实验采用标准平皿法对水样中细菌做计数，这是一种测定水中好氧的和兼性厌氧的异养细菌密度。
由此法所得的菌落数实际上要低于水样中实际活菌的数目。
一般规定，1ml饮用水中总菌数不得超过100个。
2、大肠菌群数测定：采用多管发酵法，以最近似数的方法来记载。
此一数字是根据概率公式来计算，有大于实际数字的倾向，在增加每种稀释度的试管重复数后，可减小偏差。
三、实验器材培养基：营养琼脂培养基材料：无菌采样瓶、灭菌移液管、灭菌培养皿、盛有90ml及9ml灭菌蒸馏水的锥形瓶和试管、杜氏小管、革兰氏染液四、实验步骤（一）细菌总数的测定1、样品稀释液的制备采集水样，吸取10ml水样，注入盛有90ml无菌水或生理盐水与三角瓶中，混匀成10-1稀释液，按10倍稀释法将水样稀释成10-2、10-3，每个稀释度分别注入两个培养皿中，每皿1ml。
2、平板接种培养采用混合平板培养法计数，每一稀释度设置2个重复，然后在6个培养皿中分别倒入已融化并冷却至45~50℃的细菌培养基，轻轻转动平板，使菌液与培养基混合均匀，冷凝后倒置，适温培养，至长出菌落即可计数。
3、结果报告与计算计算结果时，每个稀释度使用两个平板，取其平均值，达到规定培养时间，应立即计数，应将平板放置于0~4℃，但不得超过24h，不同稀释度的菌落数应与稀释倍数成反比。
（二）大肠菌群检验1、乳糖发酵试验样品稀释后，选择三个稀释度，每个稀释度接种三管乳糖胆盐发酵管，并留一管作为空白对照，36±1℃培养24±2h，观察是否产气。
2、报告根据观察到的产气管数，即大肠杆菌阳性的管数，查MPN表，报告每100ml （g）大肠菌群的MPN值。
实验二水质的细菌学检测1水中细菌总数的检测H的和原理水屮细菌总数往往同水体受有机物污染的程度呈正相关，它是评价水质污染程度的一个重要指标之一。
山于重金属及某些其它有毒物质对细菌有杀灭或抑制作用，因此总细菌数少的水样，并不能排除已被这些物质所污染。
本试验采用标准平皿法対水样中细菌作计数,这是一•种测定水中好氧的和兼性厌氧的界养细菌密度的方法，由于细菌在水体中能以单独个体、成对、链状，成簇或成团的形式存在, 此外没有单独的一种培养基或某一环境条件能满足一个水样屮所有细菌的生理要求，所以由此法所得的菌落数实际上要低于被测水样屮真正存在的活细菌的数目。
细期总数是指1毫升水样在营养琼脂培养基中，37C、24小吋培养后所生长的菌落数。
一•般规定，1毫升口来水中总菌数不得超过100个。
材料和器皿（1）培养基①营养琼脂培养基②2216E培养基：蛋白腺5.0克酵母膏1.0克FeP04 0. 01 克琼脂1&0克陈海水1000毫升pH 7. 6〜7. 8（2）无菌采样瓶、灭菌移液管、灭菌培养I1IL,盛有90ml及9mL灭菌蒸懈水的锥形瓶和试管。
方法和步骤（1）采集水样。
（2）吸取10ml水样（河水、污水、游泳池水或港湾水等），注入盛有90ml无菌水或无菌海水的三角瓶屮，混匀成10-1稀禅液，在吸水样前，水样应彻底搅动均匀。
（3）按10倍稀释法将水样稀释成10-2. 10-3. 10-4o（4）根据水样的洁净程度，污染严重者选KX 10-2. 10-3. 10-4稀释度；中等的选取10-1、10-2、10-3稀释度，每个稀释液分别注入两个培养皿，每皿lmlo稀释度的选择是本试验精确度的关键，选择适宜者，平皿上菌落总数介于30?/F0NT>300个之间。
（5）注入彻底融化，然后冷却到45°C的营养琼脂培养基（用于河水样）或2216E培养基（用于海水、港湾水样）约1亦1,立即旋摇培养血，充分混匀，水平放置至固化。
