2.1微生物培养技术

【优化设计】2018—2019学年高中生物专题2 课题1 微生物的实验室培养课后习题（含解析）新人教版选修1课时演练·促提升1。

含C、H、O、N的大分子有机化合物可以作为( ）A。

异养微生物的氮源、能源B.异养微生物的碳源、能源C.自养微生物的碳源、氮源、能源D。

异养微生物的碳源、氮源、能源解析：含C、H、O、N的大分子有机化合物一般是蛋白质，因此可给异养微生物提供碳源、氮源、能源。

答案:D2。

培养基、培养皿、接种环、实验操作者的双手、空气、牛奶所采用的灭菌、消毒方法依次是（）①化学消毒②灼烧灭菌③干热灭菌④紫外线消毒⑤高压蒸汽灭菌⑥巴氏消毒法A.⑤③②①④⑥B.①②③④⑤⑥C.⑥②③④①⑤D.③④②①⑥⑤解析：培养基用高压蒸汽灭菌;培养皿能耐高温，用干热灭菌;接种环可通过灼烧灭菌达到迅速、彻底的灭菌效果；实验操作者的双手可用化学药剂进行消毒,如用酒精擦拭双手;空气可用紫外线消毒;牛奶可采用巴氏消毒法,使营养成分不被破坏.答案：A3.下列说法正确的是( ）A。

为微生物的生长繁殖提供营养基质的是固体培养基B。

培养基只有两类：液体培养基和固体培养基C。

固体培养基中加入少量水即可制成液体培养基D.微生物在固体培养基上生长时,可以形成肉眼可见的菌落解析:培养基是微生物生长繁殖的营养基质，根据培养基的物理性质不同，可将培养基分成固体培养基、液体培养基和半固体培养基；液体培养基不加凝固剂。

答案：D4。

三个培养皿中分别加入10 mL不同的培养基,然后接种相同的大肠杆菌样液。

培养36 h后，计算菌落数，结果如表所示。

下列选项错误的是（)培养皿培养基成分菌落数Ⅰ琼脂、葡萄糖35Ⅱ琼脂、葡萄糖、生长因子250Ⅲ琼脂、生长因子0A。

该实验采用的是固体培养基B.该实验可采用稀释涂布平板法接种C。

Ⅰ和Ⅲ对照,说明大肠杆菌的生长不需要生长因子D。

Ⅱ和Ⅲ对照，说明大肠杆菌的生长需要糖类解析:培养基中均加入了琼脂,故为固体培养基;微生物接种的方法很多，最常用的是平板划线法或稀释涂布平板法;Ⅰ组和Ⅲ组存在两个变量，不能说明大肠杆菌的生长是否需要生长因子；Ⅱ组和Ⅲ组对照,自变量是葡萄糖的有无，说明大肠杆菌的生长需要糖类。

1、制备牛肉膏蛋白胨固体培养基
计算：根据配方比例，计算100mL培养基各成分用量。 称量：准确称取各成分。称取牛肉膏和蛋白胨时动
作要迅速，目的是防止牛肉膏吸收空气中水分。 溶化：①加水加热熔化牛肉膏；②加入蛋白胨和氯
化钠继续加热；③加入琼脂；④用蒸馏水定容到100mL。 整个过程不断用玻棒搅拌，目的是防止琼脂糊底而导致 烧杯破裂。
培养乳酸杆菌时需要添加 维生素 ， 培养霉菌时需要将培养基pH调节为 酸性 ， 培养细菌时需要将pH调节为 中性或微碱性 。
（2）获得纯净培养物的关键是什么？ （3）避免杂菌污染的方法主要包括哪四个方面 （4）什么是消毒、灭菌，常用方法有哪些？
无菌技术包括： （1）对实验操作空间、操作者的衣着 和手进行 清洁和消毒 ； （2）将培养器皿、接种用具和培养基 等器具进行 灭菌 ； （3）为避免周围微生物污染，实验操 作应在 酒精灯火焰附近 旁进行； （4）避免已灭菌处理的材料用具与 周围物品 相接触。
答：可以用手触摸盛有培养基的锥形 瓶，感觉锥形瓶的温度下降到刚刚不烫手 时，就可以进行倒平板了。
2、为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰？
答：通过灼烧灭菌，防止瓶口的微 生物污染培养基。
3、平板冷凝后，为什么要将平板倒置？
答：平板冷凝后，皿盖上会凝结水珠，凝固 后的培养基表面的湿度也比较高，将平板倒置， 既可以使培养基表面的水分更好地挥发，又可以 防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染。
灭菌的方法：
1、灼烧灭菌 2、干热灭菌：160-170 ℃ 下加热1-2h。 3、高压蒸汽灭菌：100kPa、 121 ℃下维持15-30min.
6、制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的方法步骤 7、如何倒平板？
三、实验操作

1．连一连
2．判一判 (1)培养基中碳源物质不可能同时是氮源。( × ) 解析：有些碳源可同时是氮源。
(2)培养基中只要有碳源、氮源、无机盐和水就能满足微生物的 生长需要。( × )
解析：培养基中一般含有碳源、氮源、无机盐和水，但对于某 些微生物来说，还需要特殊营养物质才能满足其生长需要。
(3)液体培养基含有水，而固体培养基不含水。( × ) 解析：液体培养基与固体培养基都含有水，它们的区别为是 否添加凝固剂。
(3) 平 板 划 线 法 ： 通 过 _接__种__环___ 在 琼 脂 固 体 培 养 基 表 面 连 续 ___划__线___的操作，将聚集的菌种逐步__稀__释____分散到培养基的表 面。其具体操作是：
①将__接__种__环__放在火焰上灼烧，直到接种环烧红。 ②在火焰旁冷却__接__种__环__，并打开棉塞。 ③将试管口通过_酒__精 ___灯__火__焰__。 ④将已冷却的接种环伸入菌液中，沾取一环菌液。 ⑤将试管口通过火焰，并塞上棉塞。 ⑥左手将皿盖打开一条缝隙，右手将蘸有菌种的接种环迅速伸 入平板内，划三至五条__平__行____线，盖上皿盖。注意不要划破培养 基。
质配成)
工业生产 分类、鉴定
用途
选择培养基 鉴别培养基
培养基中加入 某种化学物 质，以抑制不 需要的微生物 的生长，促进 所需要的微生 物的生长
培养、分离出特定微生 物(如培养酵母菌和霉 菌，可在培养基中加入 青霉素；培养金黄色葡 萄球菌，可在培养基中
加入高浓度食盐)
根据微生物的 代谢特点，在 培养基中加入 某种指示剂或
3．消毒和灭菌
消毒
灭菌
概念
使 用 较 为 __温__和____ 的 物 理 或 化 学 方 法 杀 死 物 体 _表__面_____ 或内部的部分微生物(不包括 __芽__孢__和__孢__子__)

专题2 微生物的培养与应用
课题1 微生物的实验室培养
1
（一）培养基
1、定义：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制 出供其生长繁殖的营养基质。 2、培养基成分:碳源、氮源、水和无机盐等4类 ★另外还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质,以及 氧气、二氧化碳、渗透压等的要求。如:培养乳酸菌时需 添加维生素、霉菌PH调成酸性、细菌PH调成中性或微碱 性、厌氧微生物提供无菌条件。 ★ 4类成分齐全的培养基叫基本培养基，例如牛肉膏蛋白 胨培养基
根据微生物的代谢特点，在培养基中加入某种指
示剂或化学药品配制而成，用以鉴别不同种类的
微生物。
3
液体培养基：
表面生长
均匀混浊生长
沉淀生长
4
固体培养基：菌落
单个或少数细菌在固体培养基上大量繁殖 时，就会形成一个肉眼可见的，具有一定 形态结构的子细胞群体，叫做菌落。
菌落特征是鉴定菌种的重要依据。
5
于计算平均值，因为它不接近真实值，应重新实验
并注意：将菌液摇匀后再接种 P22
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㈤.微生物的培养与观察
培养不同微生物往往需要不同培养温度。 细菌：30～37℃培养1～2d 放线菌：25～28℃培养5～7d 霉菌：25～28℃的温度下培养3～4d。
在菌落计数时，每隔24h统计一次菌落数目。 选取菌落数目稳定时的记录作为结果，以防止 因培养时间不足而导致遗漏菌落的数目。
半固体培养基：
无动力
有动力(弥散)
(是否运动) 6
选择培养基:从微生物群中选择具有特定表型的细胞. 使之进行繁殖所用的培养基,称为选择培养基.
加入青霉素的培养基: 分离酵母菌、霉菌等真菌
加入高浓度食盐的培养基: 分离金黄色葡萄球菌