高效液相色谱法测定邻苯二甲酸酯实验报告记录

高效液相色谱法测定邻苯二甲酸酯实验报告实验目的：1.学习掌握高效液相色谱法（HPLC）的基本原理和操作方法；2.通过测定邻苯二甲酸酯的含量，了解其在环境中的污染状况。

实验原理：高效液相色谱法是一种常用的分析技术，具有高分辨率、高灵敏度和高重复性的特点。

此实验中使用的HPLC仪器由进样系统、流动相系统、色谱柱和检测器组成。

样品进样后，通过流动相在色谱柱中分离，不同组分按照特定的时间顺序通过，再通过检测器检测并计算得到定量结果。

实验步骤：1.仪器和色谱柱的准备：打开和保持HPLC仪器的电源，并预热至工作温度。

选择合适的色谱柱，并平衡至稳定状态。

2.样品的制备和进样：取一定质量的待测样品，加入适量的提取液，并充分混合。

用适当的过滤器进行过滤，将过滤后的样品进样到色谱柱中。

3.进样和流动相参数的设置：根据样品的性质和分析要求，设置进样量和流动相组成。

常用的流动相为二氯甲烷和甲醇的混合物。

4.色谱柱运行：开启HPLC仪器，并调整流动相的流速和温度。

根据不同的物质特性，选择合适的梯度程序进行分离。

在分离过程中，对流动相温度和流速进行实时监测和调整。

5.检测器的设置和数据处理：选择合适的检测器，并设置检测参数。

在检测过程中，记录不同时间点的信号强度，并输入到计算机软件中进行峰面积和浓度的计算。

实验结果：根据上述实验步骤，测定了待测样品中邻苯二甲酸酯的含量。

根据HPLC测定结果，经过数据处理和计算，得到待测样品中邻苯二甲酸酯的浓度为x mg/L。

结论：通过本实验，成功地应用高效液相色谱法测定了待测样品中邻苯二甲酸酯的含量，得到了可信的分析结果。

该方法操作简便、准确可靠，可用于环境监测和化学分析中对邻苯二甲酸酯的定量测定。

水中邻苯二甲酸二（2-乙基己基）酯的测定前言邻苯二甲酸酯化合物（PAEs）是一种环境激素类物质，具有雌激素活性及抗雄激素生物效应，可通过呼吸、饮食和皮肤接触，直接进入人和动物体内，对动物和人类造成很大的危害，已成为目前国际上广泛关注的一类环境激素污染物。

水体中PAEs浓度较低（一般在ng/L数量级）但广泛存在。

邻苯二甲酸二（2-乙基己基）酯（DEHP）是一种典型的酞酸酯类化合物，美国国家环保署将包括DEHP在内的六种酞酸酯列入重点控制的污染物名单中。

本方法使用LabTech Sepaths UP全自动固相萃取系统，参考《EPA Method3535a》方法，对自来水中的邻苯二甲酸二（2-乙基己基）酯进行测定，得到了良好的回收率和平行性。

而且由于使用了LabTech Sepaths UP全自动固相萃取系统，省去了人工繁琐的操作，提高效率，并减小了人工误差。

关键词Sepaths UP全自动固相萃取系统邻苯二甲酸二（2-乙基己基）酯水 EPA Method 3535a1、仪器与试剂固相萃取仪：Sepaths UP 全自动固相萃取系统，LabTech Inc., USA；高效液相色谱仪：LC600 二元高压梯度高效液相色谱，LabTech Co.Ltd. 北京；固相萃取膜：CPI 12HS C18 47mm；氮吹浓缩仪：MultiVap-8 平行浓缩仪，LabTech Co.Ltd. 北京；邻苯二甲酸二（2-乙基己基）酯标准品：1g，购自Sigma-Aldrich；邻苯二甲酸二（2-乙基己基）酯标准工作液：取3mg邻苯二甲酸二（2-乙基己基）酯标准品，定容至10mL ，即该标准工作液的浓度为300μg/mL 。

2、测试过程2.1 加标样品预处理量取1L 自来水，加入5mL 甲醇，并用硫酸调节pH值至6。

加入 20 μL的邻苯二甲酸二（2-乙基己基）酯标准工作液，摇匀待测。

加标浓度相当于6μg/L。

2.2 固相萃取浓缩过程将加标样品置于SepathsUP的样品柜中，按照图1的固相萃取方法进行水中邻苯二甲酸二（2-乙基己基）酯的萃取富集。

液液萃取-气相色谱质谱法测定环境水体中邻苯二甲酸酯摘要：本文研究了一种液液萃取-气相色谱质谱法测定水中邻苯二甲酸酯的方法。

结果表明：11种邻苯二甲酸酯在0.2-10mg/L的浓度范围内具有良好的线性关系。

在水样体积取500ml时，11种邻苯二甲酸酯的检出限在0.15-0.22μg/L，定量限在0.60-0.88μg/L。

关键词：邻苯二甲酸酯；液液萃取；气相色谱质谱。

目前环境水体中PAEs的检测主要采用气相色谱质谱法和液相色谱法进行测定，前处理方法包括液液萃取、固相萃取、固相微萃取、固相膜萃取、液相微萃取、搅拌棒吸附萃取等方式[1]，其中气相色谱质谱由于具有高效的分辨能力，成为测定PAEs的主流方法。

本文研究了一种液液萃取-气相色谱质谱法测定环境水体中PAEs的检测方法。

该方法前处理前处理检定，操作方便，能提高测定水体中PAEs的效率。

1试验部分1.1仪器与试剂仪器：Thermo Fisher Trace1300 ISQ LT气相色谱质谱仪（美国赛默飞世尔公司）；平行浓缩氮吹仪（上海安谱科技有限公司）；旋转蒸发仪（瑞士步琦公司）。

试剂：11种邻苯二甲酸酯标准溶液（1000mg/L，上海安谱科技有限公司）；正己烷(农残级)；无水硫酸钠（优级纯，上海国药有限公司）；氯化钠（优级纯，上海国药有限公司）；固相萃取柱（500mg/6mL，CNW公司）。

1.2样品前处理作者简介：李桂晓，1990.1，男，汉族，硕士研究生，中级工程师，研究方向为环境检测取500ml水样于1000ml分液漏斗中，加入20ml正己烷振荡萃取5min（中间过程要放气），收集有机相于平底烧瓶中。

再重复萃取一次，经无水硫酸钠除水后合并萃取液，将萃取液放置在旋转蒸发仪上浓缩至5ml左右，待净化。

用固相萃取装置将样品进行净化，加入5ml甲醇活化，然后再加入10ml正己烷平衡。

将萃取液转移至固相萃取柱中，用1-2ml正己烷洗涤浓缩管，洗涤液一并上柱，然后用10 ml正己烷溶液，分3次加入到萃取柱上进行洗脱，合并流出液和洗脱液，氮吹定容至1.0mL，待测。

高效液相色谱法测定邻苯二甲酸酯1553607 胡艺蕾实验时间：2017年4月1日实验温度：19.0℃一、实验目的1、了解高效液相色谱仪的组成及其工作原理和基本操作。

2、对邻苯二甲酸酯进行分离和测定。

3、探究不同流动相及不同流动相比例对流速、柱压、保留时间及分离度的影响。

4、了解液相色谱法定量测定的原理。

二、实验原理1、实验采用的反相液固吸附色谱法，其分离机理是：当流动相通过吸附剂时，在吸附剂（固体相）表面发生了溶质分子取代吸附剂上的溶剂分子的吸附作用。

固体相为非极性分子，如十八烷基键合相，流动相为极性分子。

2、组分分子与吸附剂之间作用力的强弱决定它的保留时间。

溶质分子官能团的性质和分子结构的空间效应都会影响其出峰的顺序。

本次实验为邻苯二甲酸酯，其分子官能团都相同，但由于DMP其官能团相邻的烷基较小，导致其保留值最小，因此出峰顺序为：DMP(邻苯二甲酸二甲酯)>DEP(邻苯二甲酸二乙酯)>DBP.(邻苯二甲酸二丁酯)。

3、在吸附色谱中，流动相的洗脱能力与溶剂的极性有关，极性越大，洗脱强度也越大。

本次实验使用的三个流动相的极性大小为：水>乙腈>甲醇。

通常选择二元混合溶剂作为流动相。

4、定量分析中，定量峰与其他峰之间的分离程度称为分离度R:通常用塔板数n来描述色谱的柱效：三、实验仪器与试剂1、仪器Agilent1260高效液相色谱仪：脱气机：真空室内半透膜管路，对流动相进行脱气四元泵：二元泵各控制一种溶剂可设置的流速范围：0.001–10 mL/min 0.001 mL/min步进UV检测器：用于检测通过样品后的紫外光类型：双光束光路设计光源：氘灯波长范围：190 –600 nm手动进样器：进样20μL色谱柱：填料:十八烷（适合中性、弱酸碱）4.6 ×100mm, 3.5µm2、试剂流动相：纯水、甲醇、乙腈样品：DMP、DEP、DBP四、实验步骤1、开启电脑，开启脱气机、泵、检测器等的电源，启动软件。

FHZHJSZ0170 水质邻苯二甲酸酯类化合物的测定固相吸附液相色谱法F-HZ-HJ-SZ-0170水质—邻苯二甲酸酯类化合物的测定—固相吸附液相色谱法1 范围本方法适用于地表水和废水中邻苯二甲酸酯类的测定。

各组分的最低检测量为3～12ng。

当富集水样的体积为1L、进样体积为10µL时，最低检测浓度为1.5～6.0µg/L，见表1。

2 原理水中的邻苯二甲酸酯类化合物，经XAD-2树脂吸附后，用甲醇和乙腈混合溶剂洗脱，洗脱液经K-D浓缩并定容，用醇基柱进行正相色谱分离，紫外检测器（225nm）测定。

表1 方法检测限序号组分名称保留时间（min）最低检出量（ng）最低检出浓度（µg/L）1 邻苯二甲酸二（2-乙基己基）酯 2.532 3.5 1.82 邻苯二甲酸二正辛酯 2.612 3.1 1.53 邻苯二甲酸二丁酯 3.120 9.0 4.54 邻苯二甲酸二丁基苄酯 3.582 11.6 5.85 邻苯二甲酸二乙酯 4.211 3.2 1.66 邻苯二甲酸二甲酯 6.310 12 6.03 试剂3.1 丙酮：分析纯，用前需重新蒸馏。

3.2 二氯甲烷：分析纯，用前需重新蒸馏。

3.3 正己烷：色谱纯。

3.4 甲醇：色谱纯。

3.5 乙腈：色谱纯。

3.6 异丙醇：色谱纯。

3.7 无水硫酸钠：分析纯，于400～700℃烘2h。

3.8 邻苯二甲酸酯标准贮备液：浓度范围，80～200mg/L。

3.9 邻苯二甲酸酯标准使用液：用甲醇溶液将邻苯二甲酸酯标准贮备溶液稀释成浓度的5～20mg/L的标准使用液。

3.10 XAD-2树脂：丙酮浸泡过夜，然后依次用正己烷、二氯甲烷和甲醇在索氏提取器上回流提取8h以上。

处理好的树脂封保存在甲醇中备用。

3.11 XAD-2树脂柱的制备：在层析柱底部填充少许玻璃棉，用湿法装入XAD-2树脂。

依次用10mL甲醇和20mL重蒸水淋洗柱子。

始终保持液面不低于脂床（若树脂中有气泡存在，可用细的不锈钢丝一下搅动赶出气泡，注意不要破坏树脂）备用4 仪器4.1 液相色谱仪：具紫外检测器，醇基正相色谱柱，250mm×4.6(内径)×5.0µm。

高效液相色谱 串联质谱法测定花露水中１０种邻苯二甲酸酯李若绮，魏学冰，武　悦，孙　莺，李　莉，刘婷媛（甘肃省药品检验研究院，甘肃兰州７３００７０）摘要：目的　建立高效液相色谱 串联质谱同时测定花露水中１０种邻苯二甲酸酯的检测方法。

方法　样品采用甲醇提取，以０ １％（体积分数）甲酸水溶液和０ １％（体积分数）甲酸乙腈为流动相，反向Ｃ１８色谱柱梯度洗脱分离，采用电喷雾正离子（ＥＳＩ＋）源多反应监测模式进行检测。

结果　在５、５０、５００、５０００μｇ·Ｌ－１４个浓度下，样品基质效应为１ ０４％～５８ ８４％。

１０种化合物在５～５０００μｇ·Ｌ－１范围内线性关系良好，相关系数ｒ＞０ ９９９。

在５０、５００、５０００μｇ·Ｌ－１３个加标水平下，平均回收率为９４ ３％～１０８ ７％，相对标准偏差（ＲＳＤ）为０ ５％～１０ ６％。

方法检出限为０ ０５１～２５μｇ·Ｌ－１，定量限为０ １７～８２μｇ·Ｌ－１。

利用该方法对２４种不同品名花露水进行检测，ＤＥＰ检出率最高。

结论　该方法简便、快速、灵敏，适用于花露水中１０种邻苯二甲酸酯的测定。

关键词：花露水；高效液相色谱 串联质谱；邻苯二甲酸酯中图分类号：Ｒ９２７　文献标识码：Ａ　文章编号：１００６ ３７６５（２０２１） ０２ ００９０ ０４作者简介：李若绮，女（１９８７ ０７－）。

学历：硕士研究生。

职称：中级工程师。

化妆品、药品、食品和保健食品的检验研究工作。

花露水是深受中国消费者青睐的香水类产品，凭借多种功效主要应用于夏季。

花露水中的薄荷脑、冰片、麝香草酚〔１〕等成分具有祛痱止痒、抑菌消炎的作用；避蚊胺或驱蚊酯使其具有驱蚊效果〔２〕；冰片加入到花露水中还具有提神醒脑的功效〔３〕。

然而，花露水作为一种芳香类产品，成分中可能含有邻苯二甲酸酯类化合物（ＰｈｔｈａｌｉｃＡｃｉｄＥｓｔｅｒｓ，ＰＡＥｓ），迄今尚未有关于这方面的文献报道。

FHZHJSZ0169 水质邻苯二甲酸酯的测定液相色谱法F-HZ-HJ-SZ-0169水质—邻苯二甲酸酯的测定—液相色谱法1 范围本方法适用于水和废水中邻苯二甲酸二甲酯、邻苯二甲酸二丁酯和邻苯二甲酸二辛酯的测定。

方法的检出限分别为邻苯二甲酸二甲酯0.1µg/L、邻苯二甲酯二丁酯0.1µg/L和邻苯二甲酸二辛酯0.2µg/L和邻苯二甲酸二辛酯0.2µg/L。

因为邻苯二甲酸酯广泛用于塑料制品中，所以，在采样及测试过程中一定要避免使用塑料制品。

2 原理水样用正己烷萃取，经无水硫酸钠脱水后，用K-D浓缩器浓缩，在腈基柱或胺基柱上，以正己烷-异丙醇为流动相将邻苯二甲酸酯分离成单个化合物，用紫外检测器测定各化合物的峰高或峰面积，以外标法进行定量。

3 试剂3.1 正己烷，优级纯。

3.2 异丙醇，分析纯。

3.3 丙酮，分析纯。

3.4 无水硫酸钠：用前在马福炉中350℃烘4h。

3.5 盐酸，分析纯：配制成1mol/L。

3.6 氢氧化钠，分析纯：配制成1mol/L。

3.7 甲醇：优级纯。

3.8 邻苯二甲酸二甲酯、邻苯二甲酸二丁酯、邻苯二甲酸二辛酯，优级纯。

3.9 邻苯二甲酸二甲酯、邻苯二甲酸二丁酯、邻苯二甲酸二辛酯，优级纯。

3.10 纯水：二次蒸馏水。

3.11 标准贮备液：1000mg/L，分别称取每种标准物100mg，准确至0.1mg，溶于优级纯甲醇中，在容量瓶中定容至100mL。

也可以购买商品标准贮备液。

3.12 中间标准溶液：100mg/L，分别准确移取三种标样的贮备液各10.00mL于同一100mL容量瓶中，用优级纯甲醇定容到100mL。

3.13 玻璃棉或脱脂棉（过滤用）：在索氏提取器上用石油醚提取4h，晾干后备用。

4 仪器4.1 高效液相色谱仪，具紫外检测器。

4.2 样品瓶：100mL具玻璃磨口塞的细口瓶4.3 分液漏斗：250mL。

4.4 K-D浓缩器：具1mL刻度的浓缩瓶。

实验七高效液相色谱(HPLC)法测定邻苯二甲酸酯一.实验目的1、学习高效液相色谱仪的基本操作方法。

2、了解高效液相色谱仪原理和条件设定方法。

3、了解高效液相色谱法在日常分析中的应用。

二.实验原理高效液相色谱法是以液体作为流动相，借助于高压输液泵获得相对较高流速的液流以提高分离速度、并采用颗粒极细的高效固定相制成的色谱柱进行分离和分析的一种色谱方法。

在高效液相色谱中，若采用非极性固定相，如十八烷基键合相，极性流动相，即构成反相色谱分离系统。

反之，则称为正相色谱分离系统。

反相色谱系统所使用的流动相成本较低，应用也更为广泛。

定量分析时，为便于准确测量，要求定量峰与其他峰或内标峰之间有较好的分离度。

分离度（R）的计算公式为：R＝ 2[t(R2)-t(R1)] /1.7*(W1＋W2)式中 t(R2)为相邻两峰中后一峰的保留时间； t(R1)为相邻两峰中前一峰的保留时间； W1及W2为此相邻两峰的半峰宽。

除另外有规定外，分离度应大于1.5。

本实验对象为邻苯二甲酸酯，又称酞酸酯，缩写PAE，常被用作塑料增塑剂。

它被普遍应用于玩具、食品包装材料、医用血袋和胶管、乙烯地板和壁纸、清洁剂、润滑油、个人护理用品，如指甲油、头发喷雾剂、香皂和洗发液等数百种产品中。

但研究表明，邻苯二甲酸酯在人体和动物体内发挥着类似雌性激素的作用，是一类内分泌干扰物。

待测物性质见表1。

表1色谱柱测试条件如果要检测不同条件对谱图分离的影响，可按表1配制几种物质的混合溶液，在不同条件下进行HPLC分离检测。

三.仪器与试剂1、仪器Agilent 1100高效液相色谱仪，50ul微量注射器。

2、试剂甲醇（色谱专用），高纯水四.实验步骤1、色谱条件色谱柱：辛烷基硅烷键合硅胶（C8）柱温：室温流动相：初始为高纯水：30％，甲醇：70％检测器：DAD检测器;检测波长：220nm；进样体积：100µl定量环，实际注射每次可控制在200µl。

电子电气中邻苯二甲苯酸酯类物质的测定—（高效液相色谱法）1 范围适用于电子电气产品塑料部件中11种邻苯二甲酸酯类物质的高效液相色谱仪的测定2 方法提要试样经冷冻粉碎后用甲醇+三氯甲烷（1+2）混合溶剂经微波萃取，萃取液用氮气吹干后再用甲醇溶解，过滤后，用高效液相色谱仪（HPLC）测定，外标法定量。

3 试剂和材料除另有规定外，所有试剂均为分析纯，水为二级水。

3.1 甲醇：色谱纯3.2 三氯甲烷3.3 萃取液：甲醇+三氯甲烷（1+2）3.4 领苯二甲酸酯类物质：标准品，纯度≥98％.11种领苯二甲酸酯类物质的中文名称、英文名称和化学文摘编号和分子式吉安附录A。

3.5 领苯二甲酸酯类物质标准储备溶液：准确称量适量的领本二甲酸酯类标准品（3.4），精确至0.1mg，分别用甲醇（3.1）溶解并定容。

配置成浓度为500mg/l的标准储备液。

3.6 领苯二甲酸酯类物质混合标准工作溶液的配置：分别移取浓度为500mg/l的领苯二甲酸酯类物质（3.5）标准储备液适量体积，置于同一个容量瓶内，用甲醇（3.1）稀释，配置成所需浓度的混合标准工作溶液4 仪器和设备4.1 高翔液相色谱仪：配有二极管阵列检测器（DAD）4.2 微波萃取仪：配有聚四氟乙烯材质的萃取罐4.3 粉碎机或类似设备4.4 离心管：10ml4.5 移液管：2ml，10ml4.6 氮吹仪4.7 针式过滤头：0.45um5 样品制备将样品粉碎成1cm×1cm的小块，经液氮冷冻后，用粉碎机（4.3）破碎成粒径小于1mm 的颗粒。

6 分析步骤6.1 萃取称取0.2g粉碎后的样品，精确至0.0001g，放入萃取罐中，用移液管准确加入10ml 萃取液（3.3），经萃取罐置于微波萃取仪（4.2）中，并在70℃±2℃萃取2h，取出后冷却到室温。

用移液管准确移取20.1ml萃取液置于10ml离心管（4.4）内，用氮气吹至近干，准确移取2.0ml甲醇（3.1）加入上诉离心管中，混匀，经针式过滤头（4.7）过滤后，供高效液相色谱测定。

超高效液相色谱法测定白酒中邻苯二甲酸酯的浓度
白酒中的邻苯二甲酸酯（Phthalates）是一种著名的有毒化合物，以其分散、降低白酒中的酒精度而受到关注。

随着消费者对白酒中邻苯二甲酸酯的污染程度日益关注，确定白酒中邻苯二甲酸酯浓度的方法变得越来越重要。

【超高效液相色谱法测定白酒中邻苯二甲酸酯的浓度】
超高效液相色谱法是一种用于精确测定物质浓度的常用分析方法，主要原理是穿透性溶剂中溶质由其组分颗粒分离，并利用检测器检测每一成份含量，从而确定各组分浓度，从而得出总浓度。

本文研究了利用超高效液相色谱法测定白酒中邻苯二甲酸酯的浓度。

【实验方法】
1.验样品准备：根据研究目的，选择多种品牌的白酒作为实验样品，收集样品200ml；
2.品前处理：将200ml的样品加入烧杯中，加热至沸，使样品完全溶解；
3.验仪器准备：准备超高效液相色谱仪、液相色谱柱、电气检测器等设备；
4.品分析：根据研究目的，将样品加入超高效液相色谱仪，并在液相色谱柱上分离，最后由电气检测器检测，从而确定白酒中邻苯二甲酸酯的浓度；
5.据处理：利用数据处理软件，对实验数据进行处理，计算出白酒中邻苯二甲酸酯的浓度。

【结果分析】
利用超高效液相色谱法对多种白酒样品进行测定后，结果显示，白酒中邻苯二甲酸酯的浓度存在一定差异，其中最高浓度为
0.25ug/ml，最低浓度为0.05ug/ml，说明不同品牌白酒中邻苯二甲酸酯的浓度具有差异性。

【结论】
利用超高效液相色谱法测定白酒中邻苯二甲酸酯的浓度，可以准确快速地确定样品中邻苯二甲酸酯的浓度，为其他测定方法提供理论支持。

本研究结果表明，不同品牌的白酒中邻苯二甲酸酯的浓度存在一定的差异，需要进一步深入研究其原因。

高效液相色谱法测定纸制食品接触材料中邻苯二甲酸酯的迁移量杨博锋;汤志旭;高昕;牛增元;罗忻;王风美;简慧敏【摘要】The different types of food simulated migration of ten phthalic acid esters in food paper packaging materials were replaced by distilled water, 3% acetic acid, 10% ethanol and 95% etha-nol. The ten phthalic acid esters in four food simulants were enriched and purified by C18 solid phase extraction column, and separated on an Eclipse XDB -C18(4. 6 mm x 150 mm, 5 μm, Agilent)column using acetonitrile and water as mobile phases. The analysis of ten phthalic acid esters was performed by high performance liquid chromatography with a diode array detector. Underthe optimal conditions , all of the ten phthalate acid esters had the same maximum absorbance at 224 nm, The calibration curves were linear in the certain concentration range with correlation coefficients (r2) higher than 0. 999 9. The recoveries at spiked levels of 0. 05, 0. 1, 0. 2 mg · L-1 ranged from 71% to 107% with RSDs of 0. 86% - 8. 0% . The limits of detection were lower than 0. 1 mg/kg. The method was simple, rapid and reliable, and could meet the requirements for relevant limit regulations.%以蒸馏水、3％乙酸、10％乙醇、95％乙醇4种食品替代物模拟纸制食品接触材料中10种邻苯二甲酸酯的迁移.以乙腈和水为流动相,Eclipse XDB-C18(4.6mm×150mm,5μm,Agilent)色谱柱分离4种食品模拟物中的10种邻苯二甲酸酯；以C18固相萃取小柱对其进行富集净化,建立了高效液相色谱/二极管阵列检测器测定这10种邻苯二甲酸酯类化合物的方法.结果表明,该10种化合物均在224 nm处有最大吸收波长,其标准曲线的线性相关系数(r2)均大于0.999 9,加标回收率为71％～ 107％,相对标准偏差为0.86％～8.0％,检出限均不大于0.1 mg/kg.该方法灵敏、准确,满足相关法规的限量要求.【期刊名称】《分析测试学报》【年(卷),期】2012(031)010【总页数】5页(P1272-1276)【关键词】高效液相色谱;食品模拟物;纸制食品接触材料;邻苯二甲酸酯类;固相萃取【作者】杨博锋;汤志旭;高昕;牛增元;罗忻;王风美;简慧敏【作者单位】中国海洋大学食品科学与工程学院,山东青岛266003;山东出入境检验检疫局,山东青岛266002;中国海洋大学食品科学与工程学院,山东青岛266003;山东出入境检验检疫局,山东青岛266002;山东出入境检验检疫局,山东青岛266002;山东出入境检验检疫局,山东青岛266002;山东出入境检验检疫局,山东青岛266002【正文语种】中文【中图分类】O657.72;TQ414.1随着人们对食品安全和环境保护的重视，纸制食品包装材料的需求和优势日益明显。

高效液相色谱测定化妆品中的邻苯二甲酸酯邻苯二甲酸酯是环境内分泌干扰物，是一类具有干扰人类和其他动物内分泌的有毒有机污染物。

化妆品中邻苯二甲酸酯广泛应用于香水、指甲油、洗涤用品等，还作为一些产品的溶剂和芳香的固定液。

过多使用含邻苯二甲酸酯的化妆品，会增加女性患乳腺癌的概率，而且容易引起孕妇流产及胎儿畸形。

检测化妆品中的邻苯二甲酸酯对保护消费者的健康具有重要意义。

一、试验仪器1.高效液相色谱仪2.垂直振荡器：天津市恒奥科技发展有限公司3.超声波清洗器：天津市恒奥科技发展有限公司4.过滤器：天津市恒奥科技发展有限公司二、试验方法1.色谱条件色谱柱：C18 4.6mm×250mm，5μm检测器：二极管阵列检测器检测波长：280nm流量：1.0ml/min柱温：25℃进样体积：5μl2.标准溶液的配制分别准确称取10种邻苯二甲酸酯标准品0.05g，用甲醇溶解，移入50ml容量瓶中，定容至刻度线，摇匀，配成一定质量浓度的标准溶液。

准确移取标准溶液0.00、1.00、2.00、4.00、6.00、8.00、10.00ml于10ml具塞刻度试管中，用流动相稀释至刻度，用垂直振荡器（同时可操作6或10个样品）摇匀，配成一定质量浓度的混合标准溶液。

3.样品前处理和测定准确称取化妆品样品1.0g，置于10ml具塞刻度管中，加入甲醇至刻度，振摇，超声波提取20~30min。

经0.45μm滤膜过滤。

滤液待测。

在设定色谱条件下，取5μl进行HPLC分析。

三、计算根据峰面积，从标准曲线分别得出10种邻苯二甲酸酯组分的质量浓度，样品中邻苯二甲酸酯的最终浓度应在浓度上成稀释倍数。

水质邻苯二甲酸二甲（二丁、二辛）酯的测定液相色谱法1. 适用范围本方法适用于水和废水中邻苯二甲酸二甲酯、邻苯二甲酸二丁酯、邻苯二甲酸二辛酯的测定。

本方法的最低检测限为：邻苯二甲酸二甲酯：0.1µg/L邻苯二甲酸二丁酯：0.1µg/L邻苯二甲酸二辛酯：0.2µg/L2. 试剂和材料本方法所用试剂除另有说明外均为分析纯，所用水和二次蒸馏水，所用玻璃仪器和器皿在使用前用二次蒸馏水、丙酮和正己烷依次冲洗。

本实验杜绝使用塑料器具。

2.1 正己烷：优级纯。

2.2 异丙醇：分析纯。

2.3 丙酮。

2.4 无水硫酸钠：用前在马弗炉中350℃烘4h。

2.5 盐酸：1mol/L。

2.6 氢氧化钠：1mol/L。

2.7 甲醇：优级纯。

2.8邻苯二甲酸二甲酯国家环保总局环境标准样品2.9邻苯二甲酸二丁酯国家环保总局环境标准样品2.10邻苯二甲酸二辛酯国家环保总局环境标准样品2.11 石油醚：分析纯。

2.12 标准储备液：1000mg/L，分别称取每种标准物100mg，准确至0.1mg，溶于（2.7）中，在容量瓶中定容至100ml。

2.13 中间溶液：100mg/L，分别真确移取三种标样的储备液各10.00ml于同一100ml容量瓶中，用优级纯甲醇定容到100ml。

2.14 液相色谱用标准工作溶液：准确移取中间液1.00ml于100ml容量瓶中，用（2.7）定容到100ml，此溶液即为混合标样使用液。

分取七个250ml的分液漏斗，分别放入100ml二次蒸馏水，依次加入混合标样使用液0ml、0.5ml、1.5ml、2.0ml、2.5ml、3.0ml，按照4.3所述试样预处理方法进行预处理。

3. 仪器3.1 样品瓶：100ml带玻璃磨口塞的细口瓶。

3.2 250mL分液漏斗。

3.3 装有无水硫酸钠的漏斗：下面塞上玻璃棉（2.15）上面装2角勺烘过的无水硫酸钠（2.4）。

3.4 K-D浓缩器：具有1ml刻度的浓缩瓶。

方法验证报告项目名称：水质邻苯二甲酸二甲(二丁、二辛）酯的测定方法名称：《HJ/T 72-2001 水质邻苯二甲酸二甲(二丁、二辛）酯的测定高效液相色谱法》报告编写人：参加人员：审核人员：报告日期：1 实验室基本情况1.1人员情况实验室检测人员已通过《HJ/T 72-2001 水质邻苯二甲酸二甲(二丁、二辛）酯的测定高效液相色谱法》的培训，熟知标准内容、检测方法及样品数据采集和处理等，考核合格，得到公司技术负责人授权上岗。

表1-1参加验证的人员情况登记表1.2检测仪器/设备情况表1-2检测仪器/设备情况1.3检测用试剂情况表1-3检测用试剂情况1.4 环境设施和条件情况实验室具有检定合格的温湿度计，环境可以控制在标准要求范围内，满足检测环境条件。

另外实验室配备了洗眼器、喷淋设施、护目镜、灭火器等的安全防护措施，符合实验室安全内务的要求。

2 实验室检测技术能力2.1方法原理及适用范围本方法用正己烷萃取水中邻苯二甲酸二甲(二丁、二辛）酯，萃取液经过无水硫酸钠干燥后，用浓缩器浓缩，以正己烷定容，通过具有紫外检测器的高效液相色谱仪进行测定。

以保留时间定性，外标法定量。

2.2样品的采集和保存2.2.1样品的采集用玻璃采集样品，在灌瓶前用需采集的水将采样瓶冲洗三次。

2.2.2样品的保存采集水样全部置于250ml分液漏斗中，取10ml正己烷，冲洗采集瓶后，倒入分液漏斗中，手工振摇5min，静置30min,先将水相放入一干净的烧杯中，再将有机相通过上面装有烘过的无水硫酸钠漏斗，接至浓缩瓶中。

将水相倒回分液漏斗中，以同样的步骤再萃取一次。

弃去水相，有机相通过原装有无水硫酸钠的漏斗仍接到装有第一次萃取液的浓缩瓶中，再用少量正己烷洗涤分液漏斗和无水硫酸钠，接至原浓缩瓶内，在70-80℃水浴下浓缩至1ml以下，定容至1ml,备色谱分析用。

2.2.3样品的预处理将100mL水样全部置于250mL分液漏斗中，取10mL正己烷，冲洗采样瓶后，倒入分液漏斗中，手工振摇5min（注意放气！）静置30min。