UPLC_School_4_实验操作

PLC课程实验指导书前言配合教学的实验指导书已包含在吴明亮主编的《可编程控制器实训教程》教材中。

本实验指导书是专为扩展学生视野而编写的，学生可利用业余时间，通过PLC兴趣小组完成。

目录实验一基本指令的编程练习 (3)实验二四节传送带的模拟 (7)实验三自动配料系统的模拟 (12)实验四十字路口交通灯控制的模拟 (15)实验五装配流水线控制的模拟 (18)实验六水塔水位控制的模拟 (21)实验七天塔之光 (23)实验八机械手动作的模拟 (26)实验九液体混合装置控制的模拟 (29)实验十五相步进电动机控制的模拟 (32)实验十一 LED数码显示控制 (36)实验十二喷泉的模拟控制 (41)实验十三温度PID控制 (43)实验十四三层电梯控制系统的模拟 (47)实验十五四层电梯控制系统的模拟 (52)实验十六五层电梯控制系统的模拟 (58)实验十七轧钢机控制系统模拟 (60)实验十八邮件分拣系统模拟 (62)实验十九运料小车控制模拟 (65)实验二十舞台灯光的模拟 (70)实验二十一加工中心模拟系统控制 (74)实验二十二用IO单元进行plc编程练习 (74)实验二十三使用Modem对PLC进行远程监控 (78)实验二十四使用GMS Modem进行PLC和NT程序的上载下载 (80)实验一基本指令的编程练习在MF21模拟实验挂箱中基本指令的编程练习实验区完成本实验。

基本指令编程练习的实验面板图左图中的接线孔，通过防转座插锁紧线与PLC的主机相应的输入输出插孔相接。

Xi为输入点，Yi为输出点。

上图中下面两排X0～X15为输入按键和开关，模拟开关量的输入。

上边一排Y0～Y11是LED指示灯，接PLC主机输出端，用以模拟输出负载的通与断。

(一) 与或非逻辑功能实验在MF21模拟实验挂箱中基本指令的编程练习实验区完成本实验。

一、实验目的1．熟悉PLC装置2．熟悉PLC及实验系统的操作3．掌握与、或、非逻辑功能的编程方法二、实验原理调用PLC基本指令，可以实现“与”“或”“非”逻辑功能三、输入/输出接线列表四、实验步骤 通过专用电缆连接PC 与PLC 主机。

uplc操作流程和注意事项一、UPLC操作流程。

1. 仪器准备。

- 打开UPLC系统各模块（如二元泵、自动进样器、柱温箱、检测器等）的电源开关，确保各模块正常启动并自检通过。

- 连接好流动相管路，确保流动相瓶中的溶剂足够且无杂质，必要时对流动相进行过滤和脱气处理。

脱气可采用在线脱气装置或者超声脱气等方法。

- 安装色谱柱，注意色谱柱的方向，按照柱上标记的流向正确连接到系统中。

用流动相冲洗色谱柱一段时间，一般新柱需要较长时间的平衡，以确保柱性能稳定。

2. 方法设置。

- 在操作软件中新建或调用已有的分析方法。

设置流动相组成（如二元流动相的比例变化等）、流速（通常在0.1 - 1.0 mL/min之间，但根据具体分析需求而定）、柱温（根据色谱柱和样品性质设定，一般在20 - 60°C）、检测波长（如果是紫外检测器，根据样品的最大吸收波长设定，可通过紫外 - 可见分光光度计预先扫描确定）等参数。

- 设置进样体积，一般在0.1 - 10 μL之间，根据样品浓度和检测灵敏度需求调整。

同时设置进样模式（如部分环进样或满环进样等）。

3. 样品准备。

- 将样品溶解在合适的溶剂中，确保样品完全溶解且溶液澄清。

溶剂的选择要考虑与流动相的兼容性，避免产生沉淀或干扰峰。

- 将样品溶液转移至进样小瓶中，注意不要有气泡，进样小瓶要清洗干净并确保密封良好。

如果样品浓度过高，可能需要进行稀释。

4. 运行分析。

- 将装有样品的进样小瓶放入自动进样器的样品盘中，按照设定的顺序和进样体积开始进样分析。

- 在分析过程中，观察系统压力、基线等参数。

系统压力应在正常范围内，如果压力过高可能是管路堵塞或者色谱柱堵塞等问题；基线应平稳，如果基线波动较大可能是流动相污染、系统中有气泡或者检测器故障等原因。

5. 数据处理。

- 分析完成后，在操作软件中对色谱图进行处理，如积分峰面积、计算峰高、确定保留时间等。

根据标准品的信息可以进行定性（通过保留时间对比）和定量（如外标法、内标法等）分析。

《UPLC法同时测定大鼠血清中GBN和GBO的方法研究》篇一一、引言随着生物医学技术的飞速发展，对药物在生物体内的作用机制和代谢过程的研究愈发重要。

在药物动力学、毒理学以及药物效果评估等研究中，快速、准确地测定生物样品中的药物及其代谢物浓度显得尤为重要。

大鼠作为常用的实验动物，其血清中药物及其代谢物的测定对于药物研发和药效学研究具有重大意义。

本论文旨在研究使用超高效液相色谱法（UPLC）同时测定大鼠血清中GBN和GBO的方法。

二、材料与方法1. 材料（1）试剂与药品：GBN、GBO标准品，大鼠血清，甲醇等。

（2）仪器与设备：UPLC仪器，电子天平，离心机，超声波清洗器等。

2. 方法（1）样品准备：收集大鼠血清样本，进行必要的预处理。

（2）标准曲线制备：制备GBN和GBO的标准溶液，并绘制标准曲线。

（3）UPLC条件设定：设定UPLC仪器的相关参数，如流动相、柱温、进样量等。

（4）样品测定：将处理后的血清样品进行UPLC分析，记录数据。

（5）数据处理：对UPLC数据进行分析处理，计算GBN和GBO的浓度。

三、实验结果1. 标准曲线结果通过UPLC分析，我们得到了GBN和GBO的标准曲线，结果显示在一定的浓度范围内，GBN和GBO的峰面积与浓度呈良好的线性关系。

2. 血清样品测定结果对大鼠血清样品进行UPLC分析，得到了GBN和GBO的峰面积，通过与标准曲线的对比，计算出了血清中GBN和GBO的浓度。

3. 方法学验证我们对该方法进行了精确度、精密度、检测限和定量限等指标的验证，结果显示该方法具有良好的准确性和精密度，适用于大鼠血清中GBN和GBO的测定。

四、讨论1. UPLC法的优势UPLC法具有高分辨率、高灵敏度、高效率等优点，能够快速准确地测定大鼠血清中GBN和GBO的浓度。

与传统的液相色谱法相比，UPLC法具有更高的分离效率和更短的分析时间。

2. 实验结果分析根据实验结果，我们可以得出大鼠血清中GBN和GBO的浓度，为进一步的药物动力学、毒理学以及药物效果评估等研究提供了重要依据。

UPLC使用规范~一，开机及清洗工作1、开稳压器2、开电脑（直到出现本地连接）3、开进样器，开泵4、开软件（用户名：system 密码：manager）5、选择方法组（芥子油苷用：waters uplc）6、灌注密封清洗右键点击此处，至少1min以上，需要手动关闭7、灌注溶剂（同样右键点击，A：水，B：甲醇；A与B分别进行灌注清洗，每种至少2min；如果换流动相需要清洗5min以上（此处相当于HPLC 排气过程）；8、清洗柱塞9、灌注；清洗枕头右键点击此处（这两种清洗设置默认值即可）二、编辑样品板及进样1、编辑样品板，如图所示：编辑---样品板---取消2790布局---选择ANSI-48Vial2mlHolder2、编辑样品：需要编辑的为：样品瓶、进样体积、样品名称、方法组、运行时间。

3、进样顺序：A:方法start-1进10uL甲醇；B:方法start-2进10uL水C:样品方法（如text 4）进10uL水D:正常进样（注意：每隔5个样品之间要进一针水！用于清洗进样针的内壁）E:方法shut-down 进10uL甲醇三、数据处理如图所示：通道---选中待处理数据---右键---处理----选中“处理”---选中“指定的处理方法”中指定一项---确定----在结果栏中----更新并查看相应的结果。

注意：1、在实验之前要确认流动相充足并超声排气2、确认样品是否放在正确的样品瓶中3、试验后请理各自的样品以及内衬管，并放回样品瓶4、超声清洗内衬管以备下回继续使用备注：Start-1时间流量 A B 曲线1 0.1 0 1002 8 0.2 0 100 63 16 0.3 0 100 64 24 0.4 0 100 6运行时间：30min 灯不开启Start-2时间流量 A B 曲线1 0.4 0 1002 10 0.4 100 100 63 15 0.4 100 100 6运行时间：15min 等不开启Text-4时间流量 A B 曲线1 0.4 100 1002 7.6 0.4 40 60 63 8.2 0.4 0 100 64 8.8 0.4 0 100 65 9.6 0.4 100 0 6运行时间：12min 229nmShut-down时间流量 A B 曲线1 0.4 0 1002 5 0.4 0 100 63 15 0.4 0 100 64 25 0.2 0 100 65 30 0 0 100 11。

uplc操作流程UPLC是一种高效液相色谱分析技术，具有分离效率高、检测灵敏度高等优点，已经成为现代分析化学中极为重要的分析手段。

UPLC操作流程如下：1. 样品制备首先需要准备待测样品。

样品的制备需要按照分析要求，例如需要用几何稀释法调制标准曲线系列，或者对于特定分析目的可能需要样品预处理等等。

2. 仪器检查和准备UPLC分析需要使用专业的UPLC仪器进行。

在操作之前，需要先检查仪器是否正常工作，如保证进样器，并检查管理系统、泵、检测器等。

3. 设置UPLC参数及方法根据样品的属性和用途，需要调整UPLC参数及其方法以适应所需的分析要求。

其中一些重要的参数包括：流速、梯度洗脱的方式、柱温和检测器设置等等。

4. 进样将设置好的样品加于自动进样器中，需要将样品进行洗脱以去除干扰物质并提供足够的灵敏度。

在进样期间，需要确保管路和进样器的清洁和洁净度，以避免干扰分析。

5. 分离和检测样品在柱子中被分离，并通过检测器检测其化学特性。

在此期间，需要确保系统稳定和无干扰，并按照设定好的方法进行数据收集、分析和记录。

6. 数据分析经过检测和数据收集，需要对数据进行分析，为下一步的进一步处理做好准备。

7. 数据处理和报告数据处理可以根据实验目的进行，涉及数学处理、校准曲线优化等等，数据报告是整个实验流程中必不可少的一部分，将结果总结、解释和说明所得数据，以及为理解数据、辅助学习和掌握实验原理提供帮助。

总结：UPLC操作流程多为实验和数据处理的有机组合体，依次进行样品制备、仪器检查和准备、UPLC参数和方法设置、进样、分离和检测、数据分析、数据处理和报告，所有这些步骤都相互有机联系，缺一不可。

无论是实验人员还是学生，都应该掌握UPLC操作流程以及相应的处理技术，为实验过程更好的进行予以保障。

UPLC/MS/MS操作流程一、开机1)分别打开液相色谱、质谱和电脑电源，此时质谱内置的CPU会通过网线与电脑主机建立通讯联系，这个时间大约需要2min；2)双击桌面上的“MassLynxV4.1”图标进入质谱软件。

此时，如果进入软件时出现提示“The embeded system is not responding. The system will run in standalone mode”, 则说明质谱内置的CPU与电脑主机的通讯联系还未建立，请稍等后再进入软件；3)点击主界面左侧的“MS Tune”图标，进入质谱调谐窗口，在“Options”下拉菜单里点击“Pump”此时机械泵将开始工作，同时分子涡轮泵会开始抽真空；4)点击真空状态图标，检查真空规的状态，确认真空达到要求（左面真空规的示数显示1.00e-4）；5)确认氮气气源已打开，输出压力为90-200psi之间；经常使用的情况下，质谱处于开机状态，使用之前只需要打开氮气总阀和增压阀，调节输出压力即可。

二、创建项目Project为了便于进行数据管理，个人可以创建不同的项目（Project），项目的后缀为.pro，每个项目都有对应的子目录进行相应文件的管理：1)从主菜单中选择“File>Project Wizard”，会引导你去创建一个新的项目；2)输入项目名称及描述，点击Next进入下一步；3)选择“Current project as template”,将会把所使用的项目里的方法拷贝到你新建的项目中去，点击Finish；通过“Existing project as template”选择目标模板，“001.pro”中质谱调谐窗口参数为常规参数，可作为第一次建立项目时的模板；4)新的项目会被创建，而且软件会自动切换到新的项目中，每次做实验前，把属于自己的项目名称调出来使用即可。

三、质谱调谐“MS Tune”方法的建立对目标分析物首先需要用标准物质进行质谱调谐参数设定，一般采用蠕动泵进样方式，先通过“MS Scan”方式寻找母离子的最佳调谐参数，再通过“Daughter Scan”方式来寻找子离子及子离子对应的质谱调谐参数：1）蠕动泵进样方式：用三通阀连接质谱进样口，流动相及蠕动泵进样口一端，将Hamiton250μL进样针抽满样品标液（浓度在1ppm左右）并安装在质谱下方的蠕动泵上；2）母离子质谱调谐参数设定与优化：在质谱调谐窗口“MS Tune”选择要使用的离子模式，本仪器有电喷雾电离（ESI）与大气压化学电离（APCI）两种电离模式可供选择，其中每种电离模式都有正、负离子模式之分。

uplc操作流程和注意事项下载温馨提示:该文档是我店铺精心编制而成，希望大家下载以后，能够帮助大家解决实际的问题。

文档下载后可定制随意修改，请根据实际需要进行相应的调整和使用，谢谢!并且，本店铺为大家提供各种各样类型的实用资料，如教育随笔、日记赏析、句子摘抄、古诗大全、经典美文、话题作文、工作总结、词语解析、文案摘录、其他资料等等，如想了解不同资料格式和写法，敬请关注!Download tips: This document is carefully compiled by theeditor. I hope that after you download them,they can help yousolve practical problems. The document can be customized andmodified after downloading,please adjust and use it according toactual needs, thank you!In addition, our shop provides you with various types ofpractical materials,such as educational essays, diaryappreciation,sentence excerpts,ancient poems,classic articles,topic composition,work summary,word parsing,copy excerpts,other materials and so on,want to know different data formats andwriting methods,please pay attention!UPLC（超高效液相色谱）是一种高效、高灵敏度的液相色谱技术，以下是一般的 UPLC 操作流程和注意事项：一、操作流程1. 样品制备根据样品的性质和分析要求，选择合适的样品制备方法，如提取、净化、浓缩等。

UPLC法测定紫杉醇注射液含量宋文文;许健;刘雁【摘要】目的建立超高效液相色谱(UPLC)方法 ,测定紫杉醇注射液中紫杉醇的含量.方法采用Hypersll BDS C18色谱柱(2.1 mm×100.0 mm,3μm),以甲醇-水(55:45,V/V),分析波长230 nm,流速0.4 ml/min,柱温30℃,进样量10μl,等度洗脱.结果紫杉醇在0.5～50μg/ml范围内具有良好的线性关系(R2=0.9992),经过方法学验证,符合要求.结论本实验建立的UPLC方法可以简便、快速地可用于紫杉醇的含量测定.【期刊名称】《中国现代药物应用》【年(卷),期】2017(011)019【总页数】2页(P194-195)【关键词】超高效液相色谱;紫杉醇;含量测定【作者】宋文文;许健;刘雁【作者单位】233000 蚌埠医学院第一附属医院;233000 蚌埠医学院第一附属医院;233000 蚌埠医学院第一附属医院【正文语种】中文紫杉醇( paclitaxel)是新型抗微管药物, 通过促进微管蛋白聚合抑制解聚, 保持微管蛋白稳定, 抑制细胞有丝分裂［1］,主要用于治疗卵巢癌、乳腺癌和非小细胞肺癌等［2］。

为控制药品质量, 保障临床用药安全, 本文尝试建立超高效液相色谱(ultra performance liquid chromatography, UPLC)方法测定药物含量。

现报告如下。

1.1 仪器 Agilent-1290 UPLC仪, GL224i-1SCN型分析天平(德国SARTORIUS), CTH1850台式高速离心机(湖南湘立科学仪器有限公司), DW-86L578J 立式超低温保存箱(青岛海尔电器有限公司), Milli-Q Gradient A10超纯水系统(密理博贸易有限公司)。

1.2 试剂紫杉醇标准品(纯度99.5%, 批号100382-201104,中国食品药品检定研究院), 紫杉醇注射液(批号160912,100mg, 辰欣药业有限公司), 紫杉醇空白辅料(辰欣药业有限公司), 甲醇(色谱纯, 国药集团), 超纯水(Milli-Q超纯水机制备)。

广东药科大学学报Journal of Guangdong Pharmaceutical University Sep,2023,39(5)UPLC法测定硫酸羟氯喹原料药有关物质伍良涌，赵雪梅，李玮玲，董顺玲（广州市药品检验所，广东广州510160）摘要：目的建立UPLC法有效控制硫酸羟氯喹中的有关物质。

方法采用Waters ACQUITY UPLC®BEH C18（2.1mm×150mm，1.7μm）色谱柱，以磷酸盐缓冲液（取庚烷磺酸钠0.25g、KH2PO41.36g，加水900mL溶解，用三乙胺调pH值为7.0，加水稀释至1000mL，摇匀）-甲醇（体积比90∶10）为流动相A、以磷酸盐缓冲液-甲醇（体积比15∶85）为流动相B（梯度洗脱），流速为0.25mL/min，检测波长为254nm，柱温为45℃，进样体积为4μL。

结果硫酸羟氯喹及12个杂质均能有效分离，硫酸羟氯喹在0.05～5μg/mL质量浓度范围内与峰面积呈良好的线性关系，相关系数r为0.9999；检测限和定量限分别为0.18ng和0.60ng；杂质B的回收率在100.7%~104.3%范围内（RSD=1.6%），杂质C的回收率在100.1%~101.8%范围内（RSD=0.7%）。

结论建立的方法能准确测定硫酸羟氯喹原料药的有关物质，专属性强、灵敏度高，为硫酸羟氯喹质量控制及生产企业改进工艺提供参考。

关键词：硫酸羟氯喹原料药；UPLC；有关物质中图分类号：R927.2文献标识码：A文章编号：2096-3653（2023）05-0021-06DOI：10.16809/ki.2096-3653.2023041202Determination of related substances in hydroxychloroquine sulfate active pharmaceutical ingredient by UPLCWU Liangyong*,ZHAO Xuemei,LI Weiling,DONG Shunling（Guangzhou Institute for Drug Control,Guangzhou510160,China）*Corresponding author Email:*****************Abstract:Objective To establish a determination method to effectively control the related substances in hydroxychloroquine sulfate by UPLC.Methods A gradient elution was performed on a Waters ACQUITY UPLC®BEH C18column(2.1mm×150mm,1.7μm)with phosphate buffer solution(take sodium heptane sulfonate0.25g and KH2PO41.36g,dissolve in900mL water,adjust pH value with triethylamine to7.0,and dilute to1000mL with water)-methanol(90∶10)as mobile phase A,and phosphate buffer solution-methanol(15∶85)as mobile phase B at a flow rate of0.25mL/min.The detection wavelength was254nm,the column temperature was45℃and the injection volume was4μL.Results In the selected chromatographic conditions, hydroxychloroquine sulfate and12impurities can be effectively separated.When hydroxychloroquine sulfate was in the concentration range of0.05-5μg/mL,there was a good linear relationship between peak area and concentration,and the correlation coefficient r is0.9999.The limit of detection was0.18ng,and the limit of quantitation was0.60ng.The recovery of impurity B and impurity C was100.7%-104.3%(RSD=1.6%)and 100.1%-101.8%(RSD=0.7%),respectively.Conclusion The established method can determine impurities in hydroxychloroquine sulfate active pharmaceutical ingredient(API)with high specificity and accuracy,which can provide a reference for quality control and process improvement of hydroxychloroquine sulfate.Key words:hydroxychloroquine sulfate API;UPLC;related substances硫酸羟氯喹（hydroxychloroquine sulfate）化学名为2-(｛4-[（7-氯喹啉-4-基）氨基]戊基｝-乙胺基)乙醇硫酸盐，最初用于疟疾治疗，上市后主要用于治疗类风湿性关节炎和红斑狼疮[1-4]。

UPLC法测定血浆中维生素E的含量目的临床上建立一种快速、准确测定儿童血浆中维生素E含量的方法。

方法取儿童血浆200 μl，按v/v为8∶2的比例加入甲醇和异丙醇140 μl，涡旋30 s，加入正己烷1 ml，涡旋1 min，在室温条件下高速离心120 s（12 000×g），取离心后上清液700 μl，吹干，用100 μl甲醇复溶。

色谱条件：采用Waters公司BEH C18色谱柱（50 mm×2.1 mm，1.7 μm）；取处理好的溶液5 μl进样，以0.3 ml/min的流速测定；甲醇-水（96∶4）为流动相；柱温为30℃；检测波长：291 nm。

结果血浆中维生素E色谱峰分离良好，无干扰线性回归方程为：y=118296x+11644，r2= 0.9997，回收率在90%～120%。

结论本方法操作简便，适用于儿童血浆中维生素E含量的快速监测。

[Abstract]Objective To establish a rapid and accurate method in the determination of the content of Vitamin E in children′s pla sma clinically.Methods 200 μl children′s plasma was collected.140 μl methanol and isopropanol were added with the proportion of v/v，8：2，which were vortexed for 30 s.1 ml n-hexane was added and vortexed for 1 min.They were centrifuged at a high speed at room temperature for 120 s （12 000×g）.700 μl supernatant was collected after centrifuge，blown dry and redissolved by 100 μl methanol.Chromatographic condition：BEH C18 chromatographic column from Waters company was applied （50 mm×2.1 mm，1.7 μm）.The prepared so lution of 5 μl was taken as a sample，and determined with the flow rate of 0.3 mL/min.Methanol-water （96：4）was the mobile phase.The column temperature was 30℃.Under the condition，the determination wavelength was 291 nm.Results The chromatographic peak of vitamin E in plasma was separated favorably，and non-interference linear regression equation was y=118296x+11644，r2 = 0.9997.The recovery rate was 90%-120%.Conclusion The method is simple to operate，which is suitable for the rapid determination of Vitamin E content in children′s plasma.[Key words]Vitamin E；Ultra high liquid chromatography；Children；Plasma維生素在儿童的正常生长发育中必不可少，合理均衡地摄入维生素是儿童体格、智力正常发展的保证。