1 路南区疾控中心
积极开展辖区目标人群乙肝抗体水平检测工作
为加强乙肝疫苗水平检测控制，根据《乙肝疫苗纳入儿童计划免疫管理规程》和《疫苗流通及预防接种管理条例》的重点工作部署，我中心于2013年9月开展2周岁-18周岁人群乙肝抗体水平检测工作。
9月5日在区政府小礼堂召开辖区由18家医院、24所小学、20所幼儿园、3所中学、一所高中院校参加的乙肝抗体水平检测工作培训会。会议目的是观察辖区内幼儿园、小学、初中及高中学生乙肝疫苗接种后的接种免疫效果，对不同年龄段人群和不同生活环境人群乙肝疫苗接种后乙肝表面抗体检测结果进行比较，为今后乙肝疫苗接种工作的科学管理和计划接种，更有效预防控制HBV感染提供科学管理依据。对符合检测条件的不同人群以接种卡为据，采集血样，应用胶体金法检测HB-sAg、抗-HBs。调查的不同年龄段人群乙肝疫苗接种后乙肝表面抗体阳性率不同，抗体持续时间和强度也不同。这与接种者年龄及免疫状态、免疫条件免疫系统发育具有相关性，同时抗-HBs滴度定期检测、复种等因素均影响抗体水平。接种疫苗是预防乙肝传染的一种有效方式，针对不同年龄段人群和不同生活环境人群的接种条件免疫状态进行不同方式乙肝疫苗接种管理、监测和复种管理。这次乙肝抗体水平检测对预防和控制HBV感染合理利用卫生资源具有重要的现实意义。截止到9月10日，共计 2 检测目标人群3600名。
2013年9月11日
双抗体夹心ELISA法检测CEA
一、实验目的
1. 阐述酶联免疫吸附测定(ELISA)的原理，列举ELISA类型
2. 完成ELISA的基本操作
3. 学会分析实验结果
4. 能根据需要设计相应的ELISA实验流程
二、实验原理
酶联免疫吸附测定(Enzyme-linked immunosorbent assay 简称ELISA)是以免疫学反应为基础，将抗原、抗体的特异性反应与酶对底物的高效催化作用相结合起来的一种敏感性很高的实验技术。
ELISA 类型：直接法（一步法）；间接法（间接ELISA、双抗体/原夹心法，竞争性ELISA、BAS-ELISA）。
1. 已知的抗原或抗体结合到特定的固相载体表面（聚苯乙烯微量反应板，利用蛋白和聚苯乙烯表面间的疏水性部分相互吸附），并保持其免疫学活性。
将抗原或抗体固定在固相载体表面的过程称为包被(coating)。蛋白质与聚苯乙烯固相载体是通过物理吸附结合的，靠的是蛋白质分子结构上的疏水基团与固相载体表面的疏水基团间的作用。这种物理吸附是非特异性的，受蛋白质的分子量、等电点、浓度等的影响。大分子蛋白质较小分子蛋白质通常含有更多的疏水基团，故更易吸附到固相载体表面。
包被用抗原分为——天然抗原、重组抗原和合成多肽抗原三大类。
合成多肽抗原是抗原决定簇的氨基酸序列人工合成的多肽片段。一般只含有一个抗原决定簇，纯度高，特异性也高，但由于分子量太小，往往难于直接吸附于固相上。借助于偶联物与固相载体的吸附，间接地结合到固相载体表面。
2. 抗原抗体的特异性结合：可用于以已知抗原检测未知抗体或以已知抗体检测未知抗原。本实验采用以已知抗体检测未知抗原。
3. 抗原或抗体可通过共价键与酶连接形成酶结合物，而此种酶结合物仍能保持其免疫学和酶学活性。结合在固相载体上的酶量与标本中待测抗原或抗体的量成正比。
（制备结合物时所用纯度较高的IgG，以免在与酶联结时其他杂蛋白的干扰。最好用层析纯化的抗体，这样全部酶结合物均具有特异的免疫活性，可以在高稀释度进行反应，实验结果本底浅淡。抗原必须是高纯度的。）
揖临床研究铱
TRFIA与ELISA检测乙肝五项的比较
罗永新
(江西省新余市人民医院检验科,江西摇新余摇338000)
揖摘要铱摇目的:对乙肝五项的定量测定(TRFIA)和定性酶标测定(ELISA)结果进行比较。方法:收集204例乙肝患者的临床资料,分
别采用TRFIA与ELISA进行测定。结果:两种方法对HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBcAb的阳性检出率差异不明显,无统计学意义(P>0.05);TR鄄FIA法的HBeAb的阳性率差异高于ELISA法,有统计学意义(P<0.05);两种方法测定135、13模式的结果相同,但其他的模式的结果差异明
显,有统计学意义(P<0.05)。结论:在乙肝五项检测中,TRFIA法较ELISA法检测的灵敏度更高,特异性更强,且稳定性更佳。
揖关键词铱摇乙肝五项;TRFIA;ELISA
doi:摇10.3969/j.issn.1672-0369.2014.22.021
中图分类号:摇R446.112摇摇摇摇文献标识码:摇B摇摇摇摇文章编号:摇摇1672-0369(2014)22-0042-02
摇摇乙肝五项检查主要是为了判断乙肝感染的初步
检查。临床中最常用的检测方法为酶联免疫吸附试
验(ELISA),但该检测方法在乙肝五项的测定中,
只可作为定性测定,而无法有效判断乙肝五项的含
量,从而无法实现对乙肝感染的动力学观察[1]。随
着时间分辨荧光免疫分析法(TRFIA)在乙肝五项
定量测定中的应用,在乙肝诊断中发挥了较好效果。
为了比较ELISA和TRFIA二种不同检测法的差异
性效果,我们对204例乙肝患者的临床资料展开分
析,现报道如下。
1摇资料与方法
1.1摇一般资料摇收集2012年4月-2013年4月收
治204例乙肝患者的临床资料,男性130例,女性74
例,年龄18~43岁,平均(30.6依2.8)岁。
1.2摇试剂与仪器摇定性检测采用酶联免疫分析法
(ELISA法)进行,试剂为上海科华生物工程股份有
实验五ELISA法检查乙肝表面抗原
ELISA（酶联免疫吸附试验）是一种常用的生物化学实验方法，用于检测特定物质的存在与否以及其浓度。ELISA检测乙肝表面抗原（HBsAg）是一种常见的方法，用于筛查乙肝病毒感染。
乙肝表面抗原（HBsAg）是乙肝病毒感染的标志物之一，其检测对于早期诊断和治疗乙肝病毒感染至关重要。以下将介绍使用ELISA方法检查HBsAg的实验步骤和原理。
实验材料：
1.96孔酶标板
2.吸附HBsAg的孔板
3.检测抗体底物
4.洗涤缓冲液
5.底物和反应停止溶液
6.标本（血清或血浆）
7.磷酸缓冲液
8.特异性酶联免疫试剂盒
9.十二烷基硫酸钠（SDS）
10.甲醛
11.磷酸盐缓冲液
12.高效酶联免疫发色底物-HRP 实验步骤：
1.将96孔酶标板加入具有HBsAg的孔板，并在4°C下孵育过夜，使HBsAg吸附在酶标板上。
2.从孔板中去除液体并适当洗涤孔板，以去除非特异性结合。
3.加入样本，对齐标准品，并加入特异性酶联免疫试剂盒的试剂盒，使其与酶标板上的HBsAg结合。
4.孵育孔板以使HBsAg与特异性酶联抗体结合。
5.从孔板中去除液体，并适当洗涤孔板，以去除未结合的抗体和试剂。
6.加入底物和反应停止溶液，并孵育孔板，使其形成可观察的颜色。
7.使用酶标仪测量孔板中形成的颜色的吸光度。
8.根据标准曲线绘制HBsAg的浓度。
ELISA原理：
ELISA是一种基于抗原抗体相互作用的检测方法，其中抗原是要检测的物质（如HBsAg），而抗体是通过免疫反应产生的具有特异性的蛋白质。
ELISA方法通常包括多个步骤：涂层、结合、洗涤、检测和测量。
-涂层：在测试板上涂覆特异性抗体，以将HBsAg固定在板上。
-结合：向涂有HBsAg的板上加入待测样品，使其中的HBsAg与固定的抗体形成复合物。
-洗涤：洗涤孔板，去除未结合的物质，避免非特异性信号的产生。 -检测：加入与HBsAg互作的酶标记的抗体，使其与孔板中的HBsAg结合。
