兰花组培苗的培养与管理
- 格式:doc
- 大小:38.50 KB
- 文档页数:7
春兰组织培养春兰是地生兰常见的原种,多产于温带,主要分布在中国,是中国的特产。
以江苏、浙江所产春兰为贵,福建、广东、四川、云南、安徽、江西、甘肃、台湾等地亦有出产。
兰花是中国的名花之一,有悠久的栽培历史,多进行盆栽,作为室内观赏用,开花时有特别幽雅的香气,花期2到4月,为室内布置的佳品,其根、叶、花均可入药。
1植物名称春兰(大富贵)2材料带1-2个叶原基的茎原锥(中间部位侧芽成活率也高),茎尖适用于复轴生长类型的兰花3培养条件(1)茎原锥诱导培养基:1/2MS+6-BA 3.0mg/L+NAA0.5mg/L(2)丛生芽诱导及增殖培养基:MS+NAA 0.2mg/L +6-BA2.0 +椰汁100g/L,(3)壮苗培养基:1/2MS培养基+6-BA 0.5+NAA0.05+活性炭2g/L+椰汁100g/L(4)生根培养基:3g/l花宝3号+IBA0.5g/L+2g/l活性炭以上培养基,蔗糖浓度(1),(2),(3)为2.0%,(4)为5.0%,琼脂7.0g/L,PH 5.3,培养温度(26±2)℃,连续光照12h/d,光照度为2000lx。
4生长与分化情况4.1 原球茎诱导培养将大约3cm长且生长健壮的幼芽从母株上采下,自来水冲洗1h,去掉外部叶片,先用75%酒精消毒30s,再用零点0.1%升汞溶液,消毒10min,无菌水冲洗6到8次。
用消毒滤纸吸干表面水分,接种到培养基(1)中。
4.2 丛生芽诱导培养与增殖培养:将获得的原球茎转接入新鲜培养基(2)中培养,20d时由原球茎上长出绿色丛生芽,将从生芽转入新鲜培养基(2)中继续培养,30d为一个继代增殖周期。
4.3 幼苗的生长与生根将丛生芽接到新鲜培养基(3)中,丛生芽逐渐长大成苗,将其切割成单个苗接入培养基(4)中进行生根培养。
最佳切割方式为掰开。
4.4 炼苗与移栽移栽时特别注意要提前将瓶盖打开。
让组培苗适应一下外界的环境,两天后再将小苗取出,洗净根部琼脂,载入湿润,但拧不出水的水苔中,不需盖膜保湿,保持环境温度20到25摄氏度即可成活率达90%,待新根长出后再浇水。
兰花组培技术兰花作为一种高档花卉,一直备受人们的喜爱。
然而,由于其繁殖难度较大,使得兰花的价格相对较高。
为了解决这一问题,科学家们研究出了一种新型的兰花繁殖技术——兰花组培技术。
一、什么是兰花组培技术?兰花组培技术是指将兰花的幼芽、叶片、茎段等组织在无菌条件下培养,通过细胞分裂和分化,使其快速繁殖,最终得到大量的兰花幼苗。
二、兰花组培技术的步骤1.材料准备首先,需要准备好所需的材料,包括无菌试管、无菌培养基、兰花的幼芽、叶片、茎段等。
2.无菌操作将试管、培养基、器械等在高温高压下进行无菌处理,确保无菌条件。
3.组织培养将兰花的幼芽、叶片、茎段等组织放入无菌试管中,加入适量的培养基,放入恒温培养箱中进行培养。
4.增殖与分化在培养基中加入适量的激素,促进组织分裂和分化,使其快速增殖。
经过一段时间的培养,可以得到大量的兰花幼苗。
5.移栽与成苗将兰花幼苗移栽到适当的培养基中,进行进一步的培育,最终得到成苗。
三、兰花组培技术的优点1.快速繁殖兰花组培技术可以使兰花快速繁殖,缩短繁殖周期,大大提高了繁殖效率。
2.无季节限制兰花组培技术可以在任何时间进行,不受季节限制,可以随时进行繁殖。
3.无污染兰花组培技术在无菌条件下进行,可以避免病菌和病毒的污染,保证兰花的健康生长。
四、兰花组培技术的应用兰花组培技术可以广泛应用于兰花的繁殖、育种、基因工程等领域。
通过组培技术,可以得到大量的兰花幼苗,可以满足市场需求,降低兰花的价格。
同时,组培技术还可以用于兰花的育种和基因工程,为兰花的发展提供了新的途径。
五、结语兰花组培技术是一种新型的兰花繁殖技术,具有快速繁殖、无季节限制、无污染等优点。
通过组培技术,可以得到大量的兰花幼苗,为兰花的繁殖和发展提供了新的途径。
蝴蝶兰组培工厂化生产流程及注意事项蝴蝶兰原产于亚热带雨林地区,是附生性兰花,其气生根发达,生长过程中吸收空气中的养分,并促进光合作用,蝴蝶兰在种植过程中,需要通过人工授粉才能结出果实,所以人工授粉工作量大,不易于大量生产。
从而利用植物组培快繁技术,进行蝴蝶兰的组培苗生产,下面让我们来看下蝴蝶兰组培快繁流程及注意事项。
一、培养基的研究和配制1.在蝴蝶兰的组织培养中,培养基的种类与成分是决定组培成功与否的关键因素之一。
蝴蝶兰不同品种、不同培养材料或不同的生长阶段对培养基的要求都不同,因此,培养基的研究和选择是一个非常关键的基础性工作,也是蝴蝶兰组培生产中的关键环节之一。
2.在培养基的配制过程中,要保证所使用的各种试剂或原材料的稳定性(如不使用过期的试剂,不使用变质的椰子汁、香蕉等原材料)。
3.在培养基的配制过程中,要保证各种称量的准确性。
二、外植体的取材与消毒处理1.外植体的取材选择除培养基成分外,决定蝴蝶兰组培成败的另一个重要因素就是外植体的来源。
虽然从理论上讲,植物细胞都具有全能性,能够再生新植株,因此任何器官、任何组织,都可以作为外植体。
但实际上,蝴蝶兰的不同器官之间的分化能力有巨大差别,因此选择合适的外植体就显得尤为重要。
①蝴蝶兰的组培外植体主要有叶片、花梗腋芽、花梗节间、茎尖、根尖等,其中花梗腋芽是蝴蝶兰组培的最佳外植体,也是目前利用最广泛的。
②在选择外植体时,应先选择生长健壮、无病虫害、不变异的母株。
③在采取外植体前,对母株进行采前预处理(在采前5-7天,用杀菌剂喷洒母株),可有效预防和降低内源性污染,提高诱导的成功率。
④外植体的最佳成熟度:叶片:叶龄3-5天花梗腋芽:第一朵花现蕾时茎尖或根尖:无菌苗或株龄40天内的植株2.外植体的消毒无菌的外植体材料是蝴蝶兰组培成功的重要前提和根本保证,而消毒是获得无菌外植体的有效方法,它通过一些表面消毒剂来杀死外植体表面的微生物,又尽可能保持外植体的生命力。
蝴蝶兰的组织培养快速繁殖技术蝴蝶兰属兰科蝶兰属, 蝴蝶兰以花姿似蝴蝶翩翩飞舞而得名, 属于单茎类的兰花, 但茎极短, 被大片的椭圆形叶所遮盖, 几乎无法明显的看出来。
花茎的长短因品种之不同而差异甚大, 可有10~100cm 不等, 而花朵的大小也因品种不同有所差异。
有花的直径大于15cm 的大花种, 也有小于2cm 的小花种。
而花色则有越来越多的趋势, 计有纯白、粉红、紫红、黄、绿、黄色带赤斑纹、白色红唇、白底红条纹等,不胜枚举。
常规繁殖较慢, 常通过组织培养加快繁殖, 现对其组织培养技术介绍如下。
1 原球茎的诱导培养1.1 茎尖的培养将除去叶的茎用流水冲洗干净, 再用10%的漂白粉溶液表面消毒15min, 除去叶原基后, 用5%的漂白粉溶液灭菌10min, 用无菌水冲洗干净。
在无菌条件下将茎尖及叶基部腋芽切成大小约2~3mm 的方块, 进行接种。
1.2 蝴蝶兰的诱导培养基为VW、KC、MS、BK 古川仁郎用培养基附加15%的椰乳进行液体和固体培养。
液体培养时, 至于以160 转/min 速度震荡培养, 10d 左右更换新的培养液。
培养温度为25 ℃, 光强2 000LX , 每天光照16~24h, 1 个月左右诱导出原球茎, 这时可转移到固体培养基上继续培养。
也可取试管苗植株的直径约为0.30mm 的茎尖, 不需消毒接种在MS+6- BA3mg/l 的培养基上, 培养温度为23~27 ℃, 光强1 500LX, 14d 后茎尖膨大, 颜色转绿, 3 个月后, 原球茎直径生长达6mm。
1.3 叶片培养取试管实生苗叶片为外殖体, 实生苗年龄以3~4 个月为最好, 其诱导率及每个外殖体上的原球茎增殖的个数最高。
田中道男1975 年报道, 对于120d 的小苗,可将整叶切下直接插入培养基中, 效果比将叶切断好。
并且取自第1 叶的外殖体, 原球茎形成率较老叶好; 将幼叶片切断进行培养时, 中间部分原球茎形成率比顶部和基部好; 成年植株用叶片基部好; 切断大小与诱导率直接相关, 切断太小成活率低, 以0.50cm左右为最好。
兰花组培操作方法
兰花组培操作方法如下:
1. 材料准备:准备所需的兰花组培培养基、器具、组织培养植物材料等。
2. 植物材料处理:取自健康、无病虫害的兰花植株,将茎段或叶片进行消毒处理,去除表层细胞,以减少污染物的导入。
3. 组培培养基配制:按照配方将组培培养基溶解,然后倒入培养瓶中,再在高温高压下灭菌消毒。
4. 接种和培养:将经过处理的植物材料小段放入培养基中,利用无菌操作台进行接种操作。
然后将接种好的组织培养瓶放入培养箱中,进行培养。
5. 培养条件:设置适宜的温度、光照、湿度和适宜的培养周期。
不同的兰花品种可能需要不同的培养条件。
6. 菌株筛选:在培养过程中,可以通过观察和筛选方式,筛选出生长良好、无病虫害的菌株。
7. 培养的转接和移栽:待细胞或组织在培养基上生长发育一段时间后,可以选择转接到新的培养基上,或者移栽到土壤中进行继续生长。
8. 监测和管理:在培养过程中,需不断监测细胞生长情况,调整培养条件和管理措施,确保组培培养的成功完成。
兰花组培苗的培养与管理在养植兰花组培苗前,首先要了解什么是组培苗,组培苗是运用现代植物学的科学技术,利用植物的种子、芽或植物的其他组织,在特定的条件进行植物的复制,复制出的苗称为组织培养苗,一般称为组培苗、克隆苗,因组培苗通常在试管内繁殖所以又称试管苗。
组培苗在某个植物的大量繁殖、选种、脱毒等方面具有很大的优势,在农业、花卉等领域有着广泛的运用。
兰花的组培苗最早70年代在日本得以应用,兰科中应用最为广泛的是洋兰和大花蕙兰,在春兰、寒兰、墨兰、建兰中也有较多的应用,以春兰占多,蕙兰虽也进行了组培的尝试,但由于技术问题未大量组培,我所见到的只几个实验品种,且移栽成活率很低;兰花的组培主要是通过二个途径:一是利用兰花的种子进行繁殖,即利用兰花成熟朔果内的种子繁殖;二是实验室切取兰花的芽点进行繁殖。
现今世界上进行兰花组培的主要是在韩国、中国的台湾及大陆的几个兰花组培单位,大家比较熟悉的是四川的同心公司,各兰花组培单位组培兰花的品种都各有侧重。
一、为了消除部分兰友对组培苗的误解和与杂交苗的混淆,下面我先谈谈组培苗与其他种类苗的关系。
1、兰花组培苗与自然繁殖苗的关系。
从植物的特性上说应是同样性质的兰花,自然界的兰花繁殖既有种子在兰花生长地特定环境下发芽生长成龙根体,再在龙根体上长出实生苗,又有实生苗分孽出芽长成苗,这是兰花在自然界的二种繁殖方法--有性繁殖和无性繁殖;组培苗也是通过对兰花种子和芽点发芽,生成龙根体,让龙根长出实生苗的过程,只是通过实验室处理过的兰花种子发芽率远远高于自然界,然而,采用种子亲本繁殖的苗其出芽后的苗品种特性稳定性低于切芽组培,在种子繁殖时生成的苗变化较大,这也是通过种子繁殖选种的一个方法,既会有优于原品种的兰花,也会有不及原品种的兰花,要经过品种的筛选,因此要有与原品种一样的组培苗时多数采用芽点的组培,芽点组培原理与我们的分苗没什么区别,但相对芽点的组培难度非常高,组培出的实生苗既兰花的幼苗,通过移栽成和自然繁殖的兰花苗一样特性的兰花,组培的幼苗较自然状态下繁殖的苗要难养些,原因在下面会提及,但养成成苗后与自然养殖的苗并无区别2、兰花组培苗与返销苗的关系。
这二者的关系包含和被包含的关系,即组培苗是返销苗的一部分,单独一段作介绍是想说明返销苗一事,返销苗是指中国的兰花品种渡过洋出过国,培养后又从国外和台湾地区返销到中国大陆的兰花,这些返销的兰花中既有早年组培苗养成的商品苗,也有原始种自然环境下养殖和采用科学管理快速繁殖的苗,这些兰花的品种特性也没变,最早返销进来的商品苗的品级都很高,所以也比较好养,几个经典的老种如绿云、西神等,由于受追捧,所以组培的较多,返销到大陆种养几年后是分不清哪是返销苗哪是原生种,返销苗就兰花的特性来说与未出过国的原生种是一样的,因此,兰友们也不要迷信原生种,有些销售者所谓的原生种多数只是早年的返销苗,其中很大一部分就是组培兰花,只是你没看到她小时组培的情形,兰商称卖的是"原生种",只是想利用兰友对原生种的情结多卖几个钱而已,兰友在进苗时主要看苗的状况和先期的培养方式即可。
因此兰花的组培苗是兰花返销苗的一部分,返销苗又是兰友现在手中养殖的传统品种的一部分,这中间不用加以区分,也分不清。
3、兰花组培苗与杂交苗的关系。
二者的相同点都是通过组培而来,不同的是杂交苗现在只能以种子繁殖的方法组培,可说是组培苗的一部分,另外最主要的区别是前者是同株或至少同品种兰花亲本授粉发育的兰花种子繁殖,杂交苗是父、母本异株,可以是同一系兰花的不同品种,如宋梅与环球荷鼎,也可以是兰科的不同种系之间杂交,如春兰与木兰杂交,所以杂交苗与原来的父本和母本的特性都不用,又相近,因为通过种子繁殖时的品种的多样化,杂交后的种子繁殖的后代所开花也不尽相同,所以兰友们现在可见到的杂交品种有些相近,但品相的变化很多,在第一次杂交后开出的花多少会有父本、母本兰花的影子,但如再加以回交,花型会有很大的区别,甚至认不出该兰花的父本、母本是谁,兰花的杂交对兰花走进千家万户的普及和作为纯观赏性花卉具有积极的作用,既走现在洋兰和大花蕙兰的路子,也是科技进步的表现,但以此来作为个"新"种或冒充下山种会极大地扰乱正常的兰花市场,每个兰友就会产生对杂交种的抵制情绪,使兰花的杂交之路走到尽头,杂交品种的"大唐盛世"便是一例。
二、兰花组培苗幼苗的培养过程与特点1、培养的过程。
因养殖成成苗的组培苗与自然繁殖的苗相差不大,所以我所称的组培苗培养和管理其实是组培苗出瓶后经一段时间硬化的幼苗的培养和管理。
了解兰花组培幼苗的特点,需要了解一下组培兰花是怎样组培出来的,兰花的组培工作需要有一定的环境条件,要有无菌工作台、培养基的配制、培养室、组培兰花的相关技术等,现在组培兰花的启动采用种子和切芽点繁殖,这二种方式开始阶段不同,种子的繁殖是通过对亲本授粉兰花种子的处理,播与培养基上,使种子发芽生成龙根,出实生苗,经过品种筛选,把筛选出的品种根据需要再切分龙根,再在培养基上培养获得更多的龙根,这方法根据实际的需要操作;兰花切取芽点的繁殖是在无菌操作下切取兰花芦头上的芽点,在培养基上使其长出龙根,再切分龙根获取较多的数量,这工作也可多次切分,后龙根上长出实生苗,后来的步骤与种子发芽培养是一样的,就对组培的涵义讲,切芽组培是真正的组培,等龙根长出实生苗后,实生苗会长出根,此时兰花由龙根和根吸收营养共同供给兰花生长,可称龙根苗,与山上带龙根的实生苗性质是一样的,如要确定该品种的特性是否改变,这时可用催花剂使龙根苗顶芽发育成花,类似于我们见到的叶中花,开花确定品种是否变异,这步骤可在切分龙根前使小部分龙根苗上开花确定品种,在切分龙根获得较多的数量,这些阶段都是在无菌状态下的试管内培养室培养的,各个阶段的培养基都不尽相同,等培养到一定的程度,试管内的兰花可以移栽出试管了,就会打开试管的封口,使兰苗与外界有菌世界接触,经过一段时间后,把兰苗从试管内取出,并清理掉沾在兰花根和龙根上的培养基,移栽到干净的硬质植料上进行硬化,就硬化我在这里不一一详述,参阅韩国兰花网清心网有关组培苗硬化的文章,硬化一段时间后兰友们可引种,引种兰花的组培幼苗时硬化期越长越好,当然硬化期越长价格也会越高。
2、兰花组培苗幼苗特点。
通过了解了兰花的组培过程,从中可了解兰花组培幼苗的特点。
第一是兰花的品种纯,除种子繁殖时的品种多样化和绝个别切芽的芽变,组培苗的特性与原株未被改变,这里说一下种子繁殖的品种多样化,有时进来的返销苗中会开出与该品种不同的花,而且性状稳定,这就是种子品种多样化的结果,我见过一直开荷形花和奇花的环球荷鼎,也见过像是西神又不像西神的西神,同样在种子繁殖的其他品种中也有发现。
第二是组培幼苗的幼嫩,组培幼苗在培养室的试管内培养,培养基是软性的,使得兰花幼苗和兰根很娇嫩,一不小心就能损伤兰花,所以在洗培养基、移栽时需要十分小心。
第三是组培幼苗的抗病能力弱,组培兰花在无菌状态下生长,试管内一旦感染细菌,感染的兰花就会销毁,因此刚出试管的组培苗自身的抗病菌能力很弱,很容易受外界的细菌感染而死亡,随着硬化时间的延长,组培苗会慢慢适应有菌的环境,兰花自身产生抗体,所以硬化时间不长的组培苗开始阶段的杀菌工作很重要,但兰花又是根菌共生的植物,靠兰根上的有益菌分解植料中的养分生长,因此又不能过分杀菌。
第四是组培苗对移栽后的环境温度比较敏感,兰花组培在培养室时的温度很适宜兰花的生长,如娇生惯养着的孩子,但一般的兰友移栽后的环境很难做到与培养室相近的环境,极端的低温与高温也容易使组培兰花死亡。
三、韩国带艺兰花组培苗的组培方法众所周知,兰花在养殖过程中会发生芽变,无艺的品种有时芽变成带艺的,我也在本地找到过好几个种在地上的青叶品芽变出艺的兰花,自己老家地头也发现过一个,但有的只昙花一现,也有的艺色跟代且进化越来越好,那么韩国现在的带各种艺的绿云和其他老品种是否也是芽变而来呢?答案是肯定的,是芽变而来,但不是一般的自然芽变,是实验室多种条件下的定向芽变,其方法是切取兰花的芽点,运用化学诱导剂进行诱导,通过化学诱导剂诱导,兰花的芽变概率大大地提高,然后在被诱导的芽中发现芽变出艺的芽,如发现其中一芽出艺,说明定向诱导完成了一半,再对这芽变的兰花龙根进行切分培养,后来的芽也带艺延续,说明选种成功,最后通过看试管内第二代苗的艺稳定情况和催花见花结果,一个品系的定向组培成功,组培时的培养基、诱导剂和诱导方法的不同,所诱导出的艺也不尽相同,虽说是定向诱导,但在最后确定芽变前组培商也不知道最后的结果,以绿云为例,最早的绿云芽变是2000年浙江省兰展的水晶绿云,是个自然芽变的结果,但近年没了这绿云后代水晶延续的消息,据韩国兰花网的介绍,韩国最早定向诱导出的带艺绿云品种是绿云白复轮,现在自然养殖见花的带艺绿云就是这个,取名"绿云太",之后多个组培商诱导出黄复轮绿云(2000年):绿云冠、白复轮绿云(2000年):绿云雪、中透绿云(2002年):绿鼎、甘中透绿云(2006年):绿云锦、散斑中透绿云(2006年):青云锦、散斑绿云(2006年):绿散雪等等一系列带艺绿云,又在对以上的品种养殖中变异出如曙斑艺、曙散斑艺(绿云冠进化:绿皇)绿云,大大丰富了绿云这一经典铭品的内涵。
现在市场上可见到带艺品种除绿云系列外,还有杨氏素复轮(金素荷)、中国四川同心公司的大富贵中透和大富贵爪等的幼苗,正在组培的如翠盖荷中透、宋梅中透等,已自然养殖成苗见花的品种也很多,如绿云太、集圆艺、大富贵爪、余蝴蝶爪、环球荷鼎中透始皇帝等,随着开发,会有更多的带艺老品出现,为多角度欣赏老品种提供了更多的选择。
管理从前一篇的介绍看,兰友们会觉得组培兰花幼苗很难养,其实组培兰花幼苗并不难养,是相对自然培养的兰花而言难养些,只要在了解组培苗幼苗的特性后有针对性的养殖,就会显得与其他兰花差不多,等到硬化期较长后,正常管理下与一般的苗并无二样,尤其在组培苗硬化后逐步适应了自家的植料后,除了在光照和极端温度下注意外就不用专门照顾。
我从2003年开始接触组培兰花,至今已五个年头,第一个是台湾的杂交品种碧玉圆荷,当时是四连体小苗,养至06年开花,这杂交的品种具有杂交优势,所以显得好养,第二次接触组培苗是04年养同心公司的组培珍蝶、新逸品和龙昌素,一是家里没有这些品种,二是当时家里没有绿云,想养绿云的组培苗,作为练手和试验用,一直也养得不错,真正全面接触组培苗是2005年11月我在韩国兰花网注册后,开始养殖绿云系列品种,后又养殖了杨氏素复轮--金素荷、组培环球荷鼎、中透艺寒兰短叶、韩国黄中透兰花、韩国白复轮兰花、同心公司中透大富贵等,从2005年11月至今,已二年有余,这中间既有失败又有成功的一面,下面我就把这过程中的经验得失加以总结,供兰友们参考一、组培兰花幼苗移栽上盆的步骤和要求组培兰花幼苗的邮寄和携带需要对根部用软质无菌物品保湿,一般以高温杀菌的水苔浸水后挤干包裹,最好不要损伤挤断根和龙根,上盆前准备好较小又具有透气性的盆具并洗净,选干净无菌并不易后期滋生细菌的硬质植料,可单一也可混合,最好是使用优质的中小颗粒植金石,用净水淘洗备用,上盆前把兰花全株浸入配制好的杀菌液中20分钟后荫晾微干,把洗净的盆具在此杀菌液中进行杀菌,待兰花根部晾至微干时上盆,上盆时尽量少留盆口的留水位置,以提高兰株在盆内的高度,植料把兰花芦头部位微盖即可,多苗连体的苗位置有高低时把兰株倾斜,使兰花芦头尽量在同一高度,后放置于阳光不直射的位置,如植料是干的,须马上浇透定根水,如是湿的植料,就可在第二天浇定根水。