高效液相色谱法测定阿莫西林胶囊含量.ppt

图 !" 对照品溶液 （ "） 和样品溶液 （ #） 的色谱图
6 注： 以上分析结果为实际含量与标示量的比值 ’
收稿日期： !""% )"’ )(’ 作者简介： 张小华， 男， 讲师， 从事分析化学和药物分析教学研究工作， *+& ： （ "$!% ） )))&#(* ， ,)-".& ： #///012 -34’ 5%-’
!" 实验部分
! ! !" 主要仪器与试剂 6 6 岛津高效液相色谱仪 （ 配 有 9:;)(" 8<= 系 统 控 制 器， ;:)(" 8*<= 泵， >:$)(" 8;<= 梯 度 比 例 阀， ?@A)(# 8 在 线 脱 :*7)(" 8*<= 柱温 箱， 9B?)(" 8$<= 紫 外 检 测 器， ’’!$ . 气机， 进 样 器， !" ! ; 定 量 环， :;899)$B $, "! 色 谱 工 作 站 ） 。 ’$) :C* 紫外 ) 可见 分 光 光 度 计 （上海精密科学仪器有限公 司） 。乙 腈 （ 色谱纯） ， 磷 酸、 三乙胺 （ 分析纯） ， 水为重蒸馏 水； 阿莫西林和盐酸环丙 沙 星 对 照 品 （ 中国药品生物制品检 定所） ； 阿莫西林和盐酸环丙沙星可溶性粉 （ 标 示 量 都 是 $D （ 质量分数） ， 江苏畜牧兽医职业技术学院丰达动物药品厂 提供） 。 ! ! #" 实验方法 6 6 （(） 色 谱 条 件 6 90.-)="5E :(* 色 谱 柱 （ ($" -- F ) -- ., G, ，$ ! - ） ； 流 动 相 为 ($ --%& H ; 三 乙 胺 溶 液 （用磷 酸调 =I 至 %, " ） ) 乙 腈 （ 体 积 比 为 *$ - ($ ） ，流 速 (, " -; H -.4 ； 柱温 #" J ； 进样量 !" ! ; ； 检测波长 !!& 4- 。 6 6 （!） 对照品溶液的配制 6 精密称取阿莫西林、 盐酸环丙 沙星各 $" -K ， 置 于 $" -; 容 量 瓶 中。 用 流 动 相 先 超 声 溶 解， 再稀 释 至 刻 度， 摇 匀， 作 为 储 备 液。 从 中 吸 取 !, " -; 置 于 !$ -; 容量瓶中， 再以流动相稀释至刻度， 摇匀。 6 6 （%） 供试品溶液的配制 6 精 密 称 取 阿 莫 西 林、 盐酸环丙 沙星 可 溶 性 粉 适 量 （ 约 相 当 于 阿 莫 西 林、 盐 酸 环 丙 沙 星 $" -K ） ， 置于 $" -; 容 量 瓶 中。 用 流 动 相 先 超 声 溶 解， 再稀释 至 刻度， 摇匀， 过滤， 弃去初滤液， 精密吸取续滤液 !, " -; 置 于 !$ -; 容量瓶中。再以流动相稀释至刻度， 摇匀。 6 6 （#） 测定方 法 6 分 别 取 经 ", #$ ! - 滤 膜 滤 过 的 对 照 品 溶液及供试品溶液 各 !" ! ; 进 样， 测 定 峰 面 积， 按峰面积外 标法定量。其色谱图如图 ( 所示。

高效液相色谱法测定阿司匹林片的含量
一、目的
1.熟悉HPLC法测定的原理及操作。

2.掌握外标法测定阿司匹林片含量。

二、仪器与试药
1.仪器
美国PE型高效液相色谱仪Mettler AL204电子天平
容量瓶规格：50mL、100mL 刻度移液管规格：5mL
漏斗定量滤纸（直径10cm）
超声仪
2.试药
阿司匹林片规格：0.3g 阿司匹林对照品冰醋酸
氢氧化钾色谱甲醇超纯水
三、实验内容
1.色谱条件与系统适用性试验：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-1%冰醋酸（50：50）为流动相；流速为每分钟约1.0mL；检测波长280nm。

理论板数按阿莫西林峰计算应不低于1500。

2.对照溶液配制：取阿莫西林对照品适量，精密称定后，加1%冰醋酸无水甲醇溶液溶解并定量稀释制成每1mL中含50μg的溶液
3.样品测定：精密称取细粉适量（约相当于阿司匹林细粉0.05g），置50mL量瓶中，加1%冰醋酸无水甲醇溶液溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取续滤液3mL,置50 mL量瓶中，加1%冰醋酸无水甲醇溶液溶解并稀释至刻度，摇匀，取续滤液20μL注入液相色谱仪，记录色谱图；另取阿司匹林对照溶液同法测定。

按外标法以峰面积计算出样品中阿司匹林（C9H8O4）的含量。

本品含阿莫西林（C9H8O4）应为标示量的93.0%～107.0%。

四、注意事项：
1.高效液相色谱仪严格按照仪器操作规程操作。

2.小心进样操作，以免进样失败或损坏进样器。

五、思考题
高效液相色谱仪操作的注意事项有哪些？
六、参考文献
《中国药典》2010年版二部，285，化学工业出版社。

论高效液相色谱法测定阿莫西林胶囊的溶出度【摘要】目的：对阿莫西林胶囊的溶出度采用高效液相色谱法进行测定。

方法：采用水、色谱柱、流动相等进行测定。

结果：当浓度范围为0.3034～0.8946 mg／mL-1的时候，阿莫西林的线性较为良好；回收率为99.67%，RSD为1.27%。

结论：该方法操作简单、方便、可靠，所测出的结果精准，值得广泛的推广和使用。

【关键词】高效液相色谱法；阿莫西林胶囊；溶出度测定阿莫西林是临床治疗中青霉素类的最常用的药物。

该药又名为安莫西林，该药是广谱β-内酰胺类抗生素，该药具有较强的杀作用，能有效的穿透细胞壁，是目前临床上使用比较广泛的口服的青霉素之一。

本文笔者主要是对该药的溶出度采用高效液相色谱法进行测定。

1使用的仪器和试药主要是采用的Agilent 1200高效液相色谱仪器[1]。

采用的试药主要有：色谱纯：乙腈，分析纯试剂：氢氧化钾和磷酸二氢钾。

2测定方法和测定结果2.1色谱的条件所使用的色谱柱主要为200 mm×4.60 mm，5μm的Diamonsil TMC18；其流动相主要是：磷酸盐缓冲液（制备方法：在容量瓶内称取磷酸二氢钾6.8g，再在瓶内加入1000ml的水，混合的摇匀，使用氢氧化钾溶液来调节pH值为5.0±0.05）-乙腈（95∶5）；其流速控制在1.0ml／min-1；其进样量为50ul；检测波长为254nm，色谱柱温度控制在35℃左右；其理论搭板数是根据阿莫西林计算为5500[2]。

2.2制备对照品溶液在50ml的容量瓶内装入30mg的阿莫西林对照品，在瓶子内加入清水，稀释片刻之后混合摇匀。

2.3干扰性的实验各取出规格为250mg的阿莫西林胶囊样品一颗、不含有阿莫西林的空胶囊一颗、阿莫西林的空胶囊一颗，将它们分别装入溶出杯子内，根据本文中溶出度的测定方法，将溶液取出并滤过之后，各取出50ul的续滤液和对照品溶液分别进样，同时，还要做好色谱图。

欢迎共阅实验四HPLC法测定阿莫西林胶囊的含量
实验目的： 1. 熟练掌握安捷伦1100液相色谱仪的操作
2. 对液相色谱仪出现的一些故障和维护会进行简单维护
3. 通过外标一点法计算药物浓度
3.实验方法及结果
参照2010年中国药典二部收载阿莫西林胶囊剂的含量测定采用HPLC法（页码
401-404），阿莫西林峰与杂质峰的分离度需大于1.5。

3.1流动相的配制称取6.8 g磷酸二氢钾固体粉末，用1 L纯水溶解；量筒精密量取975 mL磷酸二氢钾水溶液于试剂瓶中，精密量取25 mL乙腈溶液，两相混合，超声10 min后用于流动相；
3.2 对照品溶液的制备精密称取阿莫西林对照品适量, 置50 mL量瓶中，用流动相溶解并稀释至刻度，摇匀，配制成0.5 mg/mL的标准溶液, 备用。

3.3 样品溶液的制备取阿莫西林胶囊5粒，准确称量后取出内容物，研匀。

精密称
）
4.5 所有进样结束后，需对管路进行用色谱甲醇或乙腈进行冲洗，色谱柱也用色谱甲醇或色谱乙腈进行冲洗至少10 min后，保存色谱柱待下次使用。

5. 实验解答题
5.1 采用HPLC－UV法进行含量测定对化合物结构的要求？如何确定紫外最大吸收波长？
5.2 简答采用HPLC法对某一药物进行含量测定的基本思路。