分子生物学-11

食品科学与工程学院生物工程专业《分子生物学》课程“三基”综合考试试题库一、基本概念1-1 基因与基因组 1-2 内含子与外显子1-3 中心法则 1-4 半保留复制1-5 冈崎片段 1-6 寡聚核苷酸1-7 核小体 1-8 复制叉1-9 操纵子 1-10 增强子1-11 插入序列（IS） 1-12 分子克隆1-13 翻译 1-14 聚合酶链式反应（PCR）1-15 基因重组 1-16 C-文库1-17 转基因生物 1-18 限制性物理图谱1-19 密码子 1-20 有意义链与反意义链1-21 断裂基因 1-22 结构基因1-23 RNA剪接 1-24 核酶1-25 逆转录酶 1-26 单顺反子与多顺反子二、基本理论与基本知识2-1 为什么 DNA双螺旋中维持特定的沟很重要?2-2 为什么只有 DNA适合作为遗传物质?2-3 列出最先证实是 DNA(或RNA)而不是蛋白质是遗传物质的一些证据。

2-6 试述Meselson和Stahl关于DNA半保留复制的证明实验。

2-7 描述大肠杆菌DNA聚合酶I在DNA生物合成过程中的作用。

2-8 原核生物与真核生物基因表达（RNA生物合成）的差异。

2-9 简述蛋白质生物合成过程。

2-10 简述核糖体的活性位点有哪些。

2-11 简述基因工程的基本操作步骤及其应用意义。

2-12 列举原核生物同真核生物转录的差异。

2-13 DNA有哪些修复方式？2-14 正调控和负调控的主要不同是什么?2-15 真核生物中，基因的表达受不同水平的调控，请列举其中3种。

2-16 原核生物基因组与真核生物基因组的特点比较。

2-17 简述大肠杆菌的插入序列，并指出它们对自发突变的重要性。

2-18 真核生物mRNA转录后的加工修饰方式主要包括哪些？各有何意义？2-19 什么是转录起始前复合体?三、基本技能。

分子生物学习题库与参考答案一、单选题（共49题，每题1分，共49分）1.可以实现体细胞克隆的技术是:A、基因编辑B、聚合酶链式反应C、诱导多能干细胞D、体细胞核移植正确答案：D2.在PCR反应中,引物与模板的结合温度约为:A、37°CB、55°CC、72°CD、95°C正确答案：B3.大肠杆菌对于基因克隆的主要作用是:A、提供连接酶B、合成引物C、表达目的蛋白D、作为宿主正确答案：D4.将单链DNA合成双链的酶是:A、连接酶B、DNA聚合酶C、裂解酶D、RNA聚合酶正确答案：B5.可以增加靶标DNA拷贝数的技术是:A、PCRB、电泳C、测序D、印迹杂交正确答案：A6.在Southern杂交中起探针作用的是:A、DNAB、RNAC、载体D、引物正确答案：A7.编码氨基酸顺序信息的DNA序列称为:A、启动子B、基因C、外显子D、启动密码子正确答案：B8.可以自我复制的核酸是:A、mRNAB、rRNAC、tRNAD、miRNA正确答案：B9.DNA聚合酶在PCR反应过程中不需要的元素是:A、铜离子B、镁离子C、锰离子D、钾离子正确答案：A10.启动子序列通常位于:A、转录起始点上游B、编码区C、基因内含子D、终止子上游正确答案：A11.可以直接导入植物细胞的方法是:A、阳离子脂质体法B、农杆菌法C、微粒射击法D、电穿孔法正确答案：B12.DNA的组成单位是:A、氨基酸B、核苷酸C、核糖D、脱氧核糖正确答案：B13.农杆菌可以将T-DNA转入植物细胞的原因是:A、具有连接酶B、具有限制性内切酶C、具有转座子D、可以与植物细胞膜融合正确答案：C14.DNA测序中的Sanger方法利用了:A、引物延伸终止B、核酸杂交C、蛋白质切割D、荧光标记正确答案：B15.可以用于克隆目的基因的载体是:A、慢病毒B、质粒C、线性DNA分子D、mRNA正确答案：B16.属于真核生物的模型生物是:A、小鼠B、酵母C、果蝇D、以上所有正确答案：D17.可以将质粒DNA转入宿主细胞的是:A、限制性内切酶B、DNA连接酶C、显微注射器D、电穿孔仪正确答案：C18.可以直接将外源基因导入植物细胞的是:A、电穿孔法B、微注射法C、生物炮法D、农杆菌法正确答案：D19.检测蛋白质的方法不是:A、Western印迹B、质谱C、Northern印迹D、免疫印迹正确答案：C20.对DNA进行切割的酶类包括:A、分裂酶B、连接酶C、制限酶D、聚合酶正确答案：C21.可以直接检测蛋白质的方法是:A、PCRB、Northern blotC、Western blotD、Southern blot正确答案：C22.提供能量驱动翻译反应的化学键是:A、糖苷键B、磷酸酯键C、硫磷键D、氢键正确答案：B23.编码线粒体蛋白质的基因主要位于:A、细胞质DNAB、线粒体DNAC、细胞核DNAD、质粒DNA正确答案：B24.下列DNA酶类能切断磷酸二酯键的是:A、连接酶B、DNA聚合酶C、替代酶D、制限酶正确答案：D25.在制备重组DNA时,使用琼脂糖的目的是:A、提供营养B、连接DNA段C、物理分离片段D、催化连接反应正确答案：C26.是mRNA而不是tRNA或rRNA的特征是:A、可翻译成蛋白质B、可与核糖体结合C、含有多肽链D、富含无义密码子正确答案：A27.对蛋白表达的后翻译调控方式是:A、剪接体B、RNA编辑C、蛋白质水解D、磷酸化正确答案：C28.编码tRNA的基因位于:A、线粒体B、核糖体C、细胞核D、细胞质正确答案：C29.单克隆抗体技术利用的真核细胞是:A、诱导的多能干细胞B、杆状病毒感染的淋巴细胞C、转化的肿瘤细胞D、融合瘤细胞正确答案：D30.原核生物基因组中不含有的序列是:A、终止子B、编码区C、启动子D、外显子正确答案：D31.制备cDNA文库常用的反转录酶来源于:A、大肠杆菌B、反刍动物C、艾滋病毒D、枯草杆菌正确答案：C32.编码氨基酸的三联密码所在的核酸是:A、mRNAB、rRNAC、tRNAD、盖帽RNA正确答案：C33.参与DNA复制的关键酶是:A、RNA聚合酶B、连接酶C、DNA聚合酶D、选择酶正确答案：C34.编码rRNA的基因通常组织成:A、基因簇B、可变剪接体C、假基因D、反义基因正确答案：A35.编码 rRNA 的基因位于:A、线粒体DNAB、质粒DNAC、细胞核DNAD、细胞质DNA正确答案：C36.将DNA上的遗传信息转录为RNA的过程称为:A、翻译B、转录C、复制D、修复正确答案：B37.PCR技术依赖的关键酶是:A、连接酶B、聚合酶C、裂解酶D、制限酶正确答案：B38.编码氨酰tRNA合成酶的RNA是:A、mRNAB、rRNAC、tRNAD、siRNA正确答案：B39.可以实现定点诱变的技术是:A、CRISPR/Cas9B、ZFNsC、TALENsD、以上均可正确答案：D40.利用生物信息学分析推测基因功能的方法是:A、突变分析B、蛋白质互作C、序列比对D、同源建模正确答案：C41.可以改变染色体DNA序列的技术是:A、基因敲除B、基因转染C、基因沉默D、基因编辑正确答案：D42.下列不属于PCR反应体系的组成部分是:A、DNA模板B、聚合酶C、dNTPD、琼脂糖正确答案：D43.检测目的蛋白表达的方法不是:A、Southern blottingB、Western blottingC、Eastern blottingD、Northern blotting正确答案：A44.从cDNA库中可以获得的是:A、所有DNA片段B、编码区序列C、非编码区序列D、全部基因组序列正确答案：B45.可以直接克隆cDNA的是:A、质粒B、YACC、λ噬菌体D、人工染色体正确答案：A46.病毒载体导入宿主细胞的方法是:A、共转化B、显微注射C、电穿孔D、吸附感染正确答案：D47.可以识别启动子序列的转录因子是:A、β因子B、α 因子C、σ 因子D、Rho因子正确答案：C48.可以直接提取基因组DNA的方法是:A、PCRB、Northern blotC、Southern blotD、盐析法正确答案：D49.基因敲除实验中所用对照组应为:A、目的基因缺失组B、野生型组C、质粒载体组D、siRNA处理组正确答案：B二、多选题（共35题，每题1分，共35分）1.PCR反应的原料不包括:A、引物B、载体酶C、聚合酶D、dNTPE、模板DNAF、琼脂糖G、无橡皮管封闭正确答案：BFG2.对DNA序列进行PCR扩增需要以下原料:A、模板DNAB、载体酶C、引物D、连接酶E、脱氧核苷三磷酸F、DNA聚合酶G、以上ACF正确答案：G3.质粒载体应具有下列哪些特征:A、大片段插入区B、可自主复制C、含有筛选位点D、与宿主互作E、含有克隆位点F、编码病毒蛋白G、低拷贝数正确答案：BCE4.在制备cDNA文库时需要用到的关键酶包括:A、连接酶B、PCR酶C、限制性内切酶D、RNA聚合酶E、反转录酶F、RNase HG、链化酶正确答案：EF5.编码氨基酸序列的核酸为:A、rRNAB、mRNAC、tRNAD、mRNA前体E、单链RNAF、双链RNAG、环状RNA正确答案：B6.制备重组质粒的主要步骤是:A、载体线性化B、消化插入片段C、连接反应D、感受态细胞制备E、转化宿主细胞F、克隆鉴定G、所有以上步骤正确答案：G7.对肿瘤基因组的检测可以应用:A、Southern印迹B、Northern印迹C、Western印迹D、Eastern印迹E、基因检测F、测序G、基因芯片正确答案：AEFG8.基因表达调控的机制包括:A、转录水平调控B、RNA水平调控C、翻译水平调控D、蛋白活性调控E、基因增幅F、肽链释放G、以上AD均可正确答案：G9.参与翻译过程的RNA包括:A、mRNAB、rRNAC、tRNAD、siRNAE、snRNAF、反义RNAG、以上ABC均参与正确答案：G10.编码氨基酸序列的核酸为:A、rRNAB、mRNAC、tRNAD、cDNAE、基因F、反义链G、互补链正确答案：B11.PCR反应的原料组成包含:A、模板 DNAB、上游引物C、下游引物D、DNA聚合酶E、脱氧核苷三磷酸F、缓冲液G、以上ABDEF正确答案：G12.基因敲入的方法可以包括:A、siRNAB、基因敲除C、ZFNsD、TALENsE、CRISPR/Cas9F、Cre-Lox重组系统G、反义RNA抑制正确答案：CDEF13.编码脱氧核糖的DNA单链为:A、编码链B、反义链C、互补链D、下游链E、正义链F、上游链G、载体链正确答案：B14.基因编辑技术包括:A、ZFNs技术B、TALENs技术C、CRISPR/Cas技术D、基因敲除E、RNAi技术F、慢病毒介导G、以上所有正确答案：ABC15.制备重组DNA的步骤包括:A、载体选择B、插入DNA获得C、双酶切D、连接反应E、转化F、筛选G、以上全部正确答案：G16.参与制备cDNA文库的关键酶类有:A、连接酶B、限制性内切酶C、聚合酶D、反转录酶E、核酸酶F、RNase HG、以上DE正确答案：G17.制备重组质粒的关键步骤不包括:A、载体的选择B、消化载体及插入片段C、连接反应D、PCR扩增插入片段E、转化感受态细胞F、筛选重组克隆G、测序验证正确答案：D18.启动子序列的特征包括:A、定位于基因转录起始点上游B、通常为AT富集区C、具有内含子D、与编码区互补E、与编码区反向验配F、与编码区部分重叠G、保守性非常低正确答案：AB19.直接参与蛋白质翻译的分子包括:A、DNAB、mRNAC、rRNAD、tRNAE、RNA聚合酶F、释放因子G、所有以上分子正确答案：BCDF20.制备重组质粒需要下列步骤:A、载体选择B、消化载体和插入DNAC、连接反应D、感受态细胞制备E、转化宿主细胞F、克隆筛选G、以上全部正确答案：G21.检测mRNA的方法包括:A、Northern杂交B、Western印迹C、Southern印迹D、荧光in situ杂交E、实时定量PCRF、RNA序列表达谱分析G、以上ABDF正确答案：G22.启动子通常位于:A、翻译起始点上游B、转录终止点下游C、翻译终止点下游D、基因内含子E、编码区F、转录起始点上游G、终止子下游正确答案：F23.编码氨基酸序列信息的核酸为:A、DNAB、RNAC、mRNAD、tRNAE、rRNAF、cDNAG、质粒正确答案：C24.基因敲入的技术可以包括:A、siRNAB、基因敲除C、ZFNsD、TALENsE、CRISPR/Cas9系统F、Cre-Lox重组系统G、反义DNA正确答案：CDEF25.制备重组 DNA 需要以下技术:A、载体准备B、PCR 扩增插入片段C、引物设计D、双酶切连接E、宿主细胞转化F、筛选重组克隆G、以上全部正确答案：G26.编码氨基酸序列的核酸为:A、DNAB、mRNAC、rRNAD、tRNAE、miRNAF、cDNAG、基因正确答案：B27.编码mRNA的DNA单链被称为:A、编码链B、上游链C、下游链D、正义链E、反义链F、互补链G、载体链正确答案：E28.Polymerase Chain Reaction (PCR) 的关键步骤不包括:A、模板变性B、引物与模板杂交C、新链延伸合成D、反向转录E、新链变性F、产物检测G、增幅后转化正确答案：D29.Polymerase Chain Reaction (PCR) 的关键步骤包括:A、模板预变性B、引物与模板退火C、新链延伸合成D、产物检测E、反义链合成F、连接酶反应G、以上全部正确答案：ABCD30.编码氨基酸的三联密码存在于:A、DNA双链上B、mRNA分子上C、tRNA分子上D、rRNA上E、盖帽RNA上F、启动子区域G、终止子区域正确答案：C31.抑制基因在体细胞中的表达方法有:A、siRNAB、基因敲除C、反义RNAD、CRISPR/Cas9E、基因激活F、启动子激活G、剪切反应激活正确答案：ABD32.检测mRNA表达水平的技术是:A、北方印迹B、西方印迹C、南方印迹D、东方印迹E、In situ杂交F、免疫组化G、芯片杂交正确答案：AEG33.编码氨基酸的三联密码存在于:A、DNA双链上B、mRNA分子上C、tRNA分子上D、rRNA 上E、盖帽RNA上F、启动子区域G、终止子区域正确答案：C34.可以提高基因在异源表达载体中的表达水平的方法不包括:A、扩增子克隆B、终止子序列调控C、引入变位信号D、改良启动子序列E、引入选择标记F、优化文库构建方法G、优化编码序列正确答案：F35.可以提取基因组DNA的方法有:A、PCR扩增B、Northern印迹C、Southern印迹D、过滤法E、质谱法F、限制性酶切G、盐析法正确答案：CG三、判断题（共38题，每题1分，共38分）1.基因敲入可以使用双链DNA分子实现。

9. 核蛋白体是蛋白质生物合成的场所10. tRNA是氨基酸的运载工具及蛋白质生物合成的适配器11. 蛋白质生物合成需要酶类、蛋白质因子:重要的酶类:1.氨基酰-tRNA合成酶，催化氨基酸的活化；2.转肽酶，催化核蛋白体P位上的肽酰基转移至A位氨基酰-tRNA的氨基上，使酰基与氨基结合形成肽键;并受释放因子的作用后发生变构，表现出酯酶的水解活性，使P位上的肽链与tRNA分离；3.转位酶,催化核蛋白体向mR NA3’-端移动一个密码子的距离,使下一个密码子定位于A位蛋白质因子:起始因子、延长因子、释放因子12.原核生物的肽链合成过程（一）起始：指mRNA和起始氨基酰-tRNA分别与核蛋白体结合而形成翻译起始复合物的过程。

1. 核蛋白体大小亚基分离；2. mRNA在小亚基定位结合；3. 起始氨基酰-tRNA的结合；4. 核蛋白体大亚基结合。

（二）延长:指在mRNA模板的指导下，氨基酸依次进入核蛋白体并聚合成多肽链的过程。

肽链延长在核蛋白体上连续循环式进行，又称为核蛋白体循环(ribosomal cycle)，包括以下三步：1. 进位(positioning)/注册(registration)是指一个氨基酰-tRNA按照mRNA模板的指令进入并结合到核蛋白体A位的过程。

进位需要延长因子EF-Tu与EF-Ts参与。

2. 成肽(peptide bond formation)是在转肽酶(peptidase)的催化下，核蛋白体P 位上起始氨基酰-tRNA的N-甲酰甲硫氨酰基或肽酰-tRNA的肽酰基转移到A位并与A位上氨基酰-tRNA的α-氨基结合形成肽键的过程。

3. 转位(translocation) 是在转位酶的催化下，核蛋白体向mRNA的3´-端移动一个密码子的距离，使mRNA序列上的下一个密码子进入核蛋白体的A位、而占据A位的肽酰-tRNA移入P位的过程。

转位需要延长因子EF-G参与每轮循环使多肽链增加一个氨基酸残基。

第一章名词解释1.基因gene是贮存遗传信息的核酸DNA或RNA片段,包括编码RNA和蛋白质的结构基因以及转录调控序列两部分;2.结构基因structuralgene指基因中编码RNA和蛋白质的核苷酸序列;它们在原核生物中连续排列,在真核生物中则间断排列;3.断裂基因splitgene真核生物的结构基因中,编码区与非编码区间隔排列;4.外显子exon指在真核生物的断裂基因及其成熟RNA中都存在的核酸序列;5.内含子intron指在真核生物的断裂基因及其初级转录产物中出现,但在成熟RNA中被剪接除去的核酸序列;6.多顺反子RNApolycistronic/multicistronicRNA一个RNA分子上包含几个结构基因的转录产物;原核生物的绝大多数基因和真核生物的个别基因可转录生成多顺反子RNA;7.单顺反子RNAmonocistronicRNA一个RNA分子上只包含一个结构基因的转录产物;真核生物的绝大多数基因和原核生物的个别基因可转录生成单顺反子RNA;8.核不均一RNAheterogeneousnuclearRNA,hnRNA是真核生物细胞核内的转录初始产物,含有外显子和内含子转录的序列,分子量大小不均一,经一系列转录后加工变为成熟mRNA;9.开放阅读框openreadingframe,ORF mRNA分子上从起始密码子到终止密码子之间的核苷酸碱基序列,编码一个特定的多肽链;10.密码子codon mRNA分子的开放读框内从5'到3'方向每3个相邻的核苷酸碱基为一组,编码多肽链中的20种氨基酸残基,或者代表翻译起始以及翻译终止信息;11.反密码子anticodon指tRNA分子反密码环中间3个相邻的核苷酸碱基,它们与mRNA上的三联体密码子互补配对,确保蛋白质合成时氨基酸按照密码子对号入座;13.启动子promoter指结构基因的转录起始位点附近的一段DNA序列,它结合RNA聚合酶真核生物还需要结合其他蛋白质因子后能够开放基因转录;14.增强子enhancer指真核生物的一段DNA序列,不具有方向性,距离结构基因可远可近甚至可以位于内含子;它与某些蛋白质因子结合后,通常能够增强启动子的转录活性,有时也可以抑制转录;15.核酶ribozyme指具有催化活性的RNA,其作用底物是RNA,主要参与RNA的加工成熟;16.核内小分子RNAsmallnuclearRNA,snRNA真核细胞核内富含尿嘧啶的小分子RNA,共有U1~U10十种;常与蛋白质结合形成小分子细胞核内核蛋白颗粒snRNP,参与mRNA的剪接加工;17.信号识别颗粒signalrecognitionparticle,SRP是细胞质内的一种小分子RNA7SLRNA和蛋白质组成的复合体,能够识别并结合信号肽,参与分泌性蛋白的加工;18.上游启动子元件upstreampromoterelement真核生物启动子上游的一些DNA序列,包括CAAT盒、CACA 盒、GC盒等,它们构成启动子的一部分,通过与转录因子结合提高转录效率;19.同义突变samesensemutation遗传密码具有简并性,故某些基因突变不改变编码的氨基酸序列,称为同义突变;20.错义突变missensemutation基因突变使某一密码子编码的氨基酸发生改变,多肽链中的氨基酸序列相应改变;21.无义突变nonsensemutation基因突变使原来编码某种氨基酸的密码子变为终止密码子,导致多肽链合成提前终止;22.移码突变frame-shiftingmutation基因的缺失突变或插入突变引起三联体密码阅读的方式发生改变,编码出具有不同一级结构的多肽链;23.转换transition指嘌呤取代嘌呤、嘧啶取代嘧啶的点突变,有4种转换形式;24.颠换transversion指嘌呤取代嘧啶、嘧啶取代嘌呤的点突变,有8种颠换形式;第二章名词解释1．基因组genome细胞或生物体中,一套完整单倍体的遗传物质的总和;如真核细胞基因组包含细胞核染色体DNA及线粒体DNA,原核细胞基因组包括染色体DNA和质粒DNA;2．质粒plasmid 细菌细胞内的、染色体外的DNA 分子,是共价闭合的环状DNA 分子,能够独立于细胞的染色质DNA 而进行复制;5．断裂基因splitgene 真核生物的结构基因中,编码区与非编码区间隔排列;6．假基因pseudogene 与有功能的基因同源,但不能．．产生有功能的基因产物的基因;9．卫星DNAsatelliteDNA 是基因组中的一种高度重复序列,其重复单位一般由2~10bp 组成,成串排列,具有调节基因的复制和转录等功能;10.单拷贝序列singlecopysequence 在整个基因组只出现一次或很少的几次,绝大多数真核生物蛋白质的编码基因为单拷贝序列;第三章名词解释核酶：具有酶促活性的RNA 称为核酶复制：是指遗传物质的传代,以母链DNA 为模板合成子链DNA 的过程;半保留复制：DNA 生物合成时,母链DNA 解开为两股单链,各自作为模板按碱基配对规律,合成与模板互补的子链;子代细胞的DNA,一股单链从亲代完整地接受过来,另一股单链则完全从新合成;两个子细胞的DNA 都和亲代DNA 碱基序列一致;这种复制方式称为半保留复制;双向复制：原核生物复制时,DNA 从起始点向两个方向解链,形成两个延伸方向相反的复制叉,称为双向复制;引发体：是在DNA 复制起始阶段形成的,含有解螺旋酶、DnaC 蛋白、引物酶和DNA 复制起始区域的复合结构;复制子：独立完成复制的功能单位,是从复制起点到复制终点之间的片段;冈崎片段：DNA 复制时,随从链复制中形成的不连续片段;复制叉：DNA 双链解开分成两段,各自作为模板,子链沿模板延长所形成的Y 字型结构称为复制叉; 半不连续复制：领头链连续复制而随从链不连续复制称为半不连续复制;逆转录：以RNA 为模板在逆转录酶的催化下合成DNA 的过程;端粒：指真核生物染色体线性DNA 分子末端的结构,形态上使染色体末端膨大成粒状;转录起始复合物：原核生物RNA聚合酶全酶、转录出的pppGpN-产物与模板DNA结合形成的复合物;边界序列：真核生物内含子都以GU为5’端起始,AG为3’端;5’-GU…AG-OH3’称为边界序列,也称剪接接口;剪接：将RNA分子中的内含子除掉,使外显子连接在一起的加工过程;启动子：是RNA聚合酶结合的、在转录起始点上游的DNA序列;如不受阻遏,RNA聚合酶与之结合后即可启动转录;中心法则：遗传信息从DNA向RNA再向蛋白质传递的规律;转录空泡：即转录复合物,由RNA聚合酶的核酶以及其模板DNA、转录出的产物构成;沉默子：真核顺式作用元件中的负性调节元件,当其结合特异蛋白因子时,对转录起阻遏作用;断裂基因：真核生物的结构基因,由若干个编码区和非编码区互相间隔开但又连续镶嵌,去除非编码区再连接后,可翻译出连续氨基酸组成的完整蛋白质;这些基因称为断裂基因;第四章名词解释1.碱基类似物baseanalogue是一类与正常碱基结构类似的化合物,在DNA复制时可取代正常碱基掺入并与互补链上碱基配对,从而引起碱基对的置换;2.自由基freeradical指能够独立存在,核外带有未配对电子的原子或分子;3.重组修复recombinationrepairing指依靠重组酶系将另一段未受损伤的DNA移到损伤部位,提供正确的模板,进行修复的过程;4.胸腺嘧啶二聚体thyminedimerTT在紫外线照射下,相邻的两个DNA分子上的胸腺嘧啶之间共价结合而成的;5.DNA交联DNAcross-linking DNA双螺旋上的碱基之间或与蛋白质分子之间共价结合;6.着色性干皮病xerodermapigmentosum DNA损伤修复缺陷而造成的一种遗传性疾病,患者有较高的皮肤癌发病倾向;对该病研究,发现了一些与切除损伤部位有关的蛋白质,称为XP蛋白;7.光复活酶photolyase 可被紫外线激活而结合到嘧啶二聚体部位使之解聚的酶;8.错配修复mismatchrepairing 是碱基切除修复的一种特殊形式,可纠正复制和重组中的碱基配对错误及因碱基损伤所致的碱基配对错误、碱基插入、缺失等损伤;9.活性氧activeoxygenspecies 较O 2的化学性质更为活泼的O 2的代谢产物或由其衍生的含氧物质,包括.O 2-、.OH 、H 2O 2等10.移码突变frame-shiftingmutation 在编码序列中,单个碱基、数个碱基及片段的缺失/插入可以使突变位点之后的三联体密码阅读框发生改变,不能编码原来的蛋白质;11.颠换与转换transversionandtransition DNA 链中一种嘌呤被另一种嘌呤取代,或嘧啶被另一种嘧啶所取代,称为转换;嘌呤被嘧啶取代或反之,称为颠换;第五章名词解释1.基因表达geneexpression 指基因转录及翻译的过程,基因表达的最终产物是蛋白质或者rRNA 、tRNA 等;管家基因是组成性表达,而可调节基因的表达具有时空特异性;2.不对称转录asymmetrictranscription 对于一个基因而言,转录的模板链仅仅是DNA 双螺旋中的一条单链;对于多个基因而言,模板链可以位于DNA 分子的不同单链上,由于模板始终是沿3'至5'方向,故DNA 两股链上的基因转录方向相反;3.翻译translation 由tRNA 运输氨基酸、在核糖体上根据mRNA 的三联体密码顺序合成多肽链的过程;此过程耗能,并且需要多种蛋白质因子参与;4.TATA 盒TATAbox 真核生物转录起始点上游与RNA 聚合酶、基本转录因子相结合的DNA 片段,含有TATA 共有序列,是II 类启动子的重要组成部分,又称为Hogness 盒;5..套索RNAlariatRNA 细胞核中初级转录产物hnRNA 在去除内含子时,剪接体使内含子区段弯曲成套索状,称为套索RNA,由此相邻外显子可相互靠近并发生转酯反应;7.RNA编辑RNAediting指细胞核中初级转录产物hnRNA的序列改变,使C变为U或者A变为G,结果一个基因表达产生不止一种蛋白质,增加了遗传信息容量;8.密码子的简并性degeneracy三联体密码的第1、2位碱基相同而第3位碱基不同时,仍可编码相同氨基酸;通常氨基酸可以有2～6种密码子为之编码例外：Met和Trp只有1种密码子;9.密码子的摆动性wobble mRNA密码子的第3位碱基与tRNA反密码子的第1位碱基不严格遵守碱基配对规律,可使1种tRNA识别mRNA的几种简并性密码子;10.SD序列Shine-Dalgarnosequence即原核生物mRNA的核糖体结合位点,是指起始密码上游富含嘌呤的短序列,能够与30S亚基的16SrRNA3'端富含嘧啶的短序列互补结合,与翻译起始复合物的形成有关;11.多聚核糖体polyribosome1个mRNA分子能够结合多个核糖体,同时进行翻译;原核生物和真核生物都存在这种现象,以提高蛋白质合成效率;12.核糖体循环ribosomecycle狭义含义是指翻译延长阶段,即每加一个氨基酸经过进位、成肽和转位三步骤;广义含义是指翻译起始、延长和终止的全过程,核糖体可以循环使用;13.分子伴侣molecularchaperon帮助新生多肽链折叠成天然空间构象的一类保守蛋白质如热休克蛋白,在原核细胞和真核细胞中广泛存在;14.信号肽signalpeptide是分泌性蛋白N端的特征性氨基酸序列,由碱性氨基酸区、疏水氨基酸区和剪切位点组成,能够与细胞液中的信号肽识别颗粒相结合,使蛋白质进入分泌转运途径;第六章名词解释1.管家基因housekeepinggene在生物体几乎所有的细胞中持续表达的基因,往往编码维持细胞基本结构与功能的蛋白质;2.可调节基因regulatedgene非维持细胞生存所必需,仅在特定条件下特异性表达的基因,表现为基因表达的时间阶段特异性和空间组织特异性;3.顺式作用元件cis-actingelement指调控真核生物结构基因转录的DNA序列,包括启动子、上游启动子元件、增强子、加尾信号和反应元件等;它们通过与反式作用因子相互作用来发挥转录调控作用;4.反式作用因子trans-actingfactors/转录因子transcriptionfactor,TF指真核基因的转录调节蛋白,包含DNA结合结构域和转录激活结构域;它们与顺式作用元件、RNA聚合酶相互作用,以及转录因子之间相互协同或者拮抗,反式调控另一基因的转录;5.基础转录因子basal/generaltranscriptionfactor与RNA聚合酶、启动子直接结合的真核转录调节蛋白,是转录起始复合物的最基本组件,基本不受环境因素影响;6.特异转录因子specialtranscriptionfactor与转录非核心元件、基础转录因子等相结合的真核转录调节蛋白,通过核酸－蛋白质、蛋白质－蛋白质相互作用影响转录效率,发挥转录激活或者转录抑制效应,可以对环境变化迅速作出反应;7.操纵子operon原核生物绝大多数基因按照功能相关性成簇串联排列,与启动子、操纵基因等调控元件共同组成一个转录单位,实现协调表达;8.衰减attenuation是原核生物中由核蛋白体调控转录终止的方式;转录起始后由于翻译偶联,核蛋白体所处的位置影响着转录出的先导mRNA的二级结构,从而控制RNA聚合酶是否继续进行转录;典型的例子是色氨酸操纵子的衰减作用;9.锌指zincfinger结构是真核细胞转录因子的DNA结合结构域的一种结构形式,包含数个相同的指结构,每个指结构含有βα等结构形式,其中4个残基Cys2/His2或者Cys2/Cys2与锌离子形成配位键;锌2指结构的指尖部分能够嵌入DNA双螺旋的大沟;10.亮氨酸拉链leucinezipper结构是真核细胞转录因子的DNA结合结构域的一种结构形式,指周期性地每隔4～7个残基出现1个Leu残基,形成兼性α－螺旋,具有极性氨基酸残基形成的亲水面和Leu残基形成的疏水面;两条具有此结构域的多肽链之间通过Leu的疏水侧链结合成二聚体,形成犬牙交错的拉链状;α－螺旋N端的碱性氨基酸介导该蛋白质与DNA相结合;第十章名词解释2.单基因病monogenicdisease,指由单个基因突变所引起的疾病,而所谓单个基因在这里是指位于一对同源染色体上的单个或一对等位基因;3.多基因病polygenicdisease指由两对或两对以上基因和环境因素共同作用所导致的疾病,也称为复杂性状疾病;多基因病的发病率要较单基因病等其他遗传病高,故常见病和多发病均属此类;4.座位异质性locusheterogeneity由不同基因突变引起相同遗传表型如遗传病的现象,也称遗传异质性;5.早现anticipation即早现遗传,指在世代相传的过程中遗传病的发病年龄越来越早,病情越来越重的现象,是动态突变导致的;6.母系遗传maternalinheritance是一类由位于细胞质中的线粒体基因突变所引起的线粒体遗传病,因其随母亲的卵细胞遗传给下一代,故被称为母系遗传;7.动态突变dynamicmutation指由于DNA中的核苷酸重复序列主要以三核苷酸形式拷贝数发生扩增所引起的突变;8.易感基因susceptibilitygene指那些与复杂性状疾病发生相关的微效基因;9.易患性liability指由遗传和环境因素共同作用所决定的个体发生多基因病的可能性;10.遗传率heritability指遗传因素在多基因遗传病发生中所起作用大小的程度,也称遗传度或遗传力,常用百分率％表示;例如,遗传率为70％－80％,就代表由遗传因素所决定的易患性变异和发病占到整个遗传与环境因素总和的70％－80％;第十一章名词解释1.病毒癌基因virusoncogene,v-onc反转录病毒中一些能在体外转化细胞,在体内使宿主患肿瘤的基因;2.细胞癌基因cellularoncogene,proto-oncogene正常宿主细胞中与病毒癌基因同源的基因,往往编码生长因子或其他信号转导分子,为细胞生长所必需；只有特定条件下被活化后才有致癌性,又称为原癌基因;3.抑癌基因tumorsuppressorgene一类编码产物起抑制细胞增殖信号转导、负性调节细胞周期的作用,从而抑制细胞增殖和抑制肿瘤生成的基因;4.细胞凋亡apoptosis在生理或病理状态下,由细胞内特定基因的程序性表达而介导的细胞死亡;5.显性负突变dominant-negativemutation突变基因编码的异常蛋白质与正常等位基因编码的蛋白质形成杂合寡聚物复合体,从而使整个蛋白复合体的功能失效,这种突变基因的作用方式属于显性负突变;6.DNA错配修复基因DNAmismatchrepairgenes负责修复DNA复制时产生错配的一类抑癌基因;7.点突变pointmutation基因在放射线或化学致癌物的作用下可发生单个碱基的改变;8.染色体易位chromosomaltranslocation不同染色体断裂后重新连接时产生的不正确连接;9.基因扩增geneamplification细胞通过增加基因拷贝数,使表达产物增多的过程;10.血管生成angiogenesis在原有血管基础上以芽生和非芽生方式形成新血管的过程;第十九章名词解释二名词解释1．基因克隆genecloning指把一个生物体中的遗传信息基因片段转入另一个生物体内进行无性繁殖,得到一群完全相同的基因片段,又称为DNA克隆;2．基因组文库genomicDNAlibrary指含有某种生物体全部基因片段的重组DNA克隆群体;即将原核或真核细胞染色体DNA提纯,用机械法或限制性内切酶将染色体DNA切割成大小不等的片段,插入适当的克隆载体中,继而转入受体菌扩增,由此获得含有众多克隆的基因组DNA文库;3．cDNA文库cDNAlibrary指含有某种组织细胞全部mRNA信息的重组DNA克隆群体;以细胞总mRNA 为模板,利用逆转录酶合成与mRNA互补的cDNA第一链,进而形成cDNA双链,与合适载体连接后转入受体菌扩增,由此建立cDNA文库;4．转基因动物transgenicanimal指应用转基因技术培育出的携带外源基因的动物,是通过gainoffunction途径研究基因功能的重要手段;将外源基因导入受精卵细胞或胚胎干细胞核内,使外源基因通过随机重组插入受体细胞的基因组中,并随细胞分裂而将外源基因遗传给后代;5．基因剔除geneknockout指通过基因同源重组定向地从活细胞的基因组中移除特定基因的过程,是通过lossoffunction途径研究基因功能的重要手段;6．RNA干扰RNAinterference,RNAi由短双链RNA诱导同源RNA降解的过程,是一种特异的转录后基因沉默现象,可以认为是生物体在核酸水平的免疫反应;7．Southern印迹Southernblotting是DNA定性及定量分析的方法之一,过程为提取细胞中的总DNA,用限制性内切酶水解后进行电泳,并转移到硝酸纤维素膜上,用DNA探针与结合在膜上的DNA分子退火形成双链,检测靶DNA的含量;8．Northern印迹Northernblotting是RNA定性及定量分析的方法之一,过程为将细胞中的总RNA 分子进行电泳分离,并转移到硝酸纤维素膜上,用DNA探针与结合在膜上的RNA分子退火形成双链,检测靶RNA的含量;9．反转录PCRreverse-transcriptionPCR,RT-PCR提取细胞总RNA作为模板,由逆转录酶催化生成cDNA;再以cDNA为模板,由一对特异性引物引发,在Taq DNA聚合酶作用下,通过变性、复性、延伸三步循环,复制生成大量双链DNA片段的过程;10．核酶ribozyme是具有酶活性的RNA,主要参与RNA的加工与成熟;。

蛋白质磷酸化和信号转导一、蛋白质磷酸化过程和功能1、蛋白质磷酸化p r o t e i n p h o s p h o r y l a t i o n（1）过程：P r o t e i n k i n a s e(蛋白激酶)P r o t e i n p h o s p h o r y l a t e d p r o t e i nA T P A D PP h o s p h a t a s e（磷酸酶）P i（2）主要磷酸化位点（对有-O H的氨基酸进行磷酸化）丝氨酸（S e r）/苏氨酸（T h r）:磷酸化之后电荷发生变化使蛋白质活性改变酪氨酸（T y r）:磷酸化之后通常招募其他蛋白因子，使下游蛋白质活性改变（3）蛋白质磷酸化的功能生物热力学；蛋白质降解；酶活性的调控（激活o r抑制）；蛋白质相互作用2、重要的蛋白激酶（1）C D K s：c y c l i n-d e p e n d e n t k i n a s e周期蛋白依赖性蛋白激酶，属于一组调控细胞周期的S e r/T h r蛋白激酶，和周期蛋白c y c l i n协同作用发挥激酶活性，作用于细胞周期的不同阶段（2）R T K s：R e c e p t o r T y r o s i n K i n a s e受体酪氨酸激酶，是具有酪氨酸激酶活性的受体，如E G F R（表皮生长因子受体）（3）C y t o p l a s m i c P r o t e i n-T y r o s i n e K i n a s e s：非受体酪氨酸激酶，存在于细胞质中，大部分结构中存在S H2、S H3结构域，是磷酸化的结合位点。

如S r c、J A K、F A K等二、信号转导1、信号转导的种类E n d o c r i n e（内分泌）：激素P a r a c r i n e（旁分泌）：神经递质A u t o c r i n e（自分泌）：生长因子2、信号转导的步骤（1）信号分子的合成（2）信号分子释放（3）信号分子传导（4）信号分子与受体结合（5）激活细胞内信号通路（6）细胞内信号传导3、信号转导通路的几个重要的酶蛋白激酶；蛋白磷酸酶；G蛋白偶联受体；离子通道；细胞核受体；转录因子4、信号转导通路的种类及途径（1）细胞内受体介导的信号通路：信号分子一般为激素如孕酮（p r o g e s t e r o n e）、甲状腺素（t h y r o x i n）、维甲酸（r e t i n o i c a c i d）过程：血液中的激素分子从血管中游离出来进入细胞，与细胞质中的受体形成复合物，复合物进入细胞核内对基因的转录表达进行调控。

分子生物学练习题+答案一、单选题（共40题，每题1分，共40分）1、在DNA双链中连接碱基对的力是:A、共价键力B、离子键力C、氢键力D、范德瓦尔斯力正确答案：C2、可以切割磷酸二酯键的酶是:A、连接酶B、聚合酶C、DNA酶D、制限性内切酶正确答案：D3、可以识别特异序列的分子是:A、质粒B、酶C、探针D、引物正确答案：C4、识别到停止密码子后,释放肽链和RNA的复合物的是:A、rRNAB、mRNAC、tRNAD、释放因子正确答案：D5、可以识别启动子序列的转录因子是:A、Rho因子B、α 因子C、σ 因子D、β因子正确答案：C6、编码氨酰tRNA合成酶的RNA是:A、mRNAB、rRNAC、tRNAD、siRNA正确答案：B7、在转录过程中起模板作用的分子是:A、RNAB、rRNAC、tRNAD、DNA正确答案：D8、DNA聚合酶在PCR反应过程中不需要的元素是:A、铜离子B、镁离子C、锰离子D、钾离子正确答案：A9、原核生物基因组中不含有的序列是:A、启动子B、外显子C、终止子D、编码区正确答案：B10、可以直接将外源基因导入植物细胞的是:A、电穿孔法B、生物炮法C、微注射法D、农杆菌法正确答案：D11、识别启动子启动转录的是:A、Rho因子B、RNA聚合酶C、螺旋酶D、拓扑异构酶正确答案：B12、DNA的组成单位是:A、氨基酸B、核苷酸C、核糖D、脱氧核糖正确答案：B13、将单链DNA合成双链的酶是:A、连接酶B、DNA聚合酶C、裂解酶D、RNA聚合酶正确答案：B14、用于筛选重组克隆的抗性基因常来源于:A、乳酸菌B、大肠杆菌C、枯草杆菌D、链霉菌正确答案：D15、在PCR反应中DNA聚合酶的最适反应温度是:A、37°CB、55°CC、72°CD、95°C正确答案：C16、将DNA上的遗传信息转录为RNA的过程称为:A、翻译B、转录C、复制D、修复正确答案：B17、启动子序列具有下列哪个特征:A、富含GCB、富含ATC、具有内含子D、保守性低正确答案：B18、可以直接导入细胞质的方法是:A、生物枪B、显微注射C、化学转染D、电穿孔正确答案：B19、加入对照组的目的是:A、减少实验误差B、增加结果可重复性C、证明结果可靠性D、以上皆是正确答案：D20、编码tRNA的基因位于:A、线粒体B、核糖体C、细胞核D、细胞质正确答案：C21、可以永久存在于宿主细胞中的载体是:A、人工染色体B、黏粒C、病毒向量D、质粒正确答案：A22、可以直接将外源DNA导入细胞的是:A、琼脂糖凝胶电泳B、质粒载体C、PCRD、生物枪技术正确答案：D23、下列不属于RNA聚合酶的职能的是:A、识别启动子B、解离DNA双链C、催化磷酸二酯键形成D、终止转录正确答案：B24、用于初步筛选重组克隆的方法是:A、PCRB、测序C、杂交D、蓝白斑筛选正确答案：D25、下列不属于核酸杂交的技术是:A、Northern印迹B、In situ杂交C、Southern印迹D、Western印迹正确答案：D26、可以实现定点诱变的技术是:A、CRISPR/Cas9B、ZFNsC、TALENsD、以上均可正确答案：D27、在基因编辑技术中,靶向特定位点的核酸酶是:A、ZFNsB、TALENsC、CRISPR/CasD、Restriction enzymes正确答案：C28、大肠杆菌对于基因克隆的主要作用是:A、表达目的蛋白B、合成引物C、作为宿主D、提供连接酶正确答案：C29、可以自我复制的核酸是:A、mRNAB、rRNAC、tRNAD、miRNA正确答案：B30、在制备重组DNA时,使用琼脂糖的目的是:A、提供营养B、连接DNA段C、物理分离片段D、催化连接反应正确答案：C31、用于分离核酸片段的凝胶包括:A、琼脂糖凝胶B、纤维蛋白凝胶C、丙烯酰胺凝胶D、以上所有正确答案：D32、编码 rRNA 的基因位于:A、线粒体DNAB、质粒DNAC、细胞核DNAD、细胞质DNA正确答案：C33、在PCR反应中,引物与模板的结合温度约为:A、37°CB、55°CC、72°CD、95°C正确答案：B34、在Southern杂交中起探针作用的是:A、DNAB、RNAC、载体D、引物正确答案：A35、下列内切酶与其识别位点不正确匹配的是:A、EcoRI - GAATTCB、BamHI - GGATCCC、HindIII - AAGCTTD、PstI - CTGCAG正确答案：B36、基因敲除实验中所用对照组应为:A、目的基因缺失组B、野生型组C、质粒载体组D、siRNA处理组正确答案：B37、下列不属于PCR反应体系的组成部分是:A、DNA模板B、聚合酶C、dNTPD、琼脂糖正确答案：D38、在PCR反应中起引物作用的分子是:A、脱氧核糖B、Taq酶C、dNTPD、引物正确答案：D39、属于真核生物的模型生物是:A、小鼠B、酵母C、果蝇D、以上所有正确答案：D40、在基因芯片技术中,利用荧光探针可以检测:A、蛋白质表达B、DNA突变C、mRNA表达D、蛋白质结构正确答案：C二、多选题（共30题，每题1分，共30分）1、可以直接转入植物细胞的方法有:A、电穿孔B、农杆菌介导C、生物炮D、微注射E、病毒感染F、质粒转化G、以上ABC均可正确答案：G2、可以改变DNA序列的技术不包括:A、CRISPR/Cas9基因编辑B、ZFNs技术C、TALENs技术D、单链RNA技术E、慢病毒感染转导F、同源重组G、随机诱变正确答案：D3、用于快速扩增特定 DNA 序列的技术是:A、聚合酶链式反应B、印迹杂交C、克隆技术D、基因编辑E、免疫沉淀F、连接酶链式反应G、线性DNA合成正确答案：A4、编码氨基酸的三联密码存在于:A、DNA双链上B、mRNA分子上C、tRNA分子上D、rRNA上E、盖帽RNA上F、启动子区域G、终止子区域正确答案：C5、编码氨基酸序列信息的核酸为:A、DNAB、RNAC、mRNAD、tRNAE、rRNAF、cDNAG、质粒正确答案：C6、下列关于mRNA加工的说法正确的是:A、在细胞核中加帽B、在细胞质中加多聚A尾C、在细胞核中增加内含子D、在细胞质中切除内含子E、在细胞质中加帽F、在细胞核中加尾巴G、在细胞质中进行剪接正确答案：AB7、制备重组DNA的关键步骤包括:A、获取载体质粒B、载体和插入DNA消化C、两DNA段连接D、构建感受态细胞E、转化宿主细胞F、蓝白斑筛选G、所有以上步骤正确答案：G8、可以使细胞产生瘤变的 DNA 片段有:A、激活型原癌基因B、失活型抑癌基因C、缺失型原癌基因D、增强子区域激活E、缺失型抑癌基因F、重复型基因座G、重复型端粒DNA正确答案：ABE9、DNA测序中的Sanger方法基于:A、引物延伸终止B、引物延伸解离C、二代测序D、三代测序技术E、荧光定量PCRF、比较法G、质谱分析正确答案：AB10、参与制备cDNA文库的关键酶类有:A、连接酶B、限制性内切酶C、聚合酶D、反转录酶E、核酸酶F、RNase HG、以上DE正确答案：G11、可以提取基因组DNA的方法有:A、PCR扩增B、Northern印迹C、Southern印迹D、过滤法E、质谱法F、限制性酶切G、盐析法正确答案：CG12、基因表达调控的机制包括:A、转录水平调控B、RNA水平调控C、翻译水平调控D、蛋白活性调控E、基因增幅F、肽链释放G、以上AD均可正确答案：G13、制备重组质粒需要下列步骤:A、载体选择B、消化载体和插入DNAC、连接反应D、感受态细胞制备E、转化宿主细胞F、克隆筛选G、以上全部正确答案：G14、用于快速扩增特定DNA序列的技术是:A、聚合酶链式反应B、基因芯片C、印迹杂交D、连接酶反应E、线性引物延伸F、链置换扩增G、同源重组正确答案：A15、编码mRNA的DNA单链被称为:A、编码链B、上游链C、下游链D、正义链E、反义链F、互补链G、载体链正确答案：E16、启动子通常位于:A、编码区B、翻译终止点下游C、转录终止点下游D、翻译起始点上游E、终止子下游F、转录起始点上游G、基因内含子正确答案：F17、对肿瘤基因组的检测可以应用:A、Southern印迹B、Northern印迹C、Western印迹D、Eastern印迹E、基因检测F、测序G、芯片技术正确答案：AEFG18、制备重组DNA的步骤包括:A、载体选择B、插入DNA获得C、双酶切D、连接反应E、转化F、筛选G、以上全部正确答案：G19、编码氨基酸序列的核酸为:A、rRNAB、mRNAD、mRNA前体E、单链RNAF、双链RNAG、环状RNA正确答案：B20、可以提高基因在异源表达载体中的表达水平的方法不包括:A、引入选择标记B、改良启动子序列C、优化编码序列D、扩增子克隆E、引入变位信号F、优化文库构建方法G、终止子序列调控正确答案：F21、质粒载体应具有下列哪些特征:A、含有克隆位点B、编码病毒蛋白C、大片段插入区D、与宿主互作E、可自主复制F、含有筛选位点G、低拷贝数正确答案：AEF22、制备 cDNA 文库需要哪些关键技术:A、模板 RNA 提取B、反转录C、PCR 扩增D、连接酶反应E、内切酶反应F、克隆载体G、上述 AB正确答案：G23、编码蛋白质的核酸为:B、mRNAC、rRNAD、tRNAE、siRNAF、miRNAG、反转录病毒RNA正确答案：B24、检测mRNA的方法包括:A、Northern杂交B、Western印迹C、Southern印迹D、荧光in situ杂交E、实时定量PCRF、RNA序列表达谱分析G、以上ABDF正确答案：G25、模式生物的研究应用包括:A、遗传学研究B、药物筛选平台C、人类疾病模型D、功能基因组学E、发育生物学F、进化生物学G、所有以上正确答案：G26、基因编辑技术包括:A、ZFNs技术B、TALENs技术C、CRISPR/Cas技术D、基因敲除E、RNAi技术F、慢病毒介导G、以上所有正确答案：ABC27、下列关于DNA的描述错误的是:A、由脱氧核糖组成B、含有腺嘌呤和胞嘧啶C、双链螺旋结构D、含有关键遗传信息E、可以自主复制F、可以直接进行蛋白质转译G、可以经过转录形成RNA正确答案：F28、可以作为核酸探针的分子有:A、单链DNAB、双链DNAC、RNAD、寡核苷酸E、蛋白质F、生物素G、以上除E均可正确答案：ACDF29、基因敲入的技术可以包括:A、siRNAB、基因敲除C、ZFNsD、TALENsE、CRISPR/Cas9F、Cre-Lox重组系统G、反义DNA正确答案：CDEF30、制备重组质粒的主要步骤是:A、载体线性化B、消化插入片段C、连接反应D、感受态细胞制备E、转化宿主细胞F、克隆鉴定G、所有以上步骤正确答案：G三、判断题（共30题，每题1分，共30分）1、启动子与编码区距离越远,转录效率越高。

名词解释1．内含子2．promotor3核小体4．增强子， SNP5．复制子（replicon）6．Polymerase chain reaction(PCR)7．操纵子8．密码子9 后随链冈崎片段10．启动子11．负调控12．基因治疗13．Stop codon14．cDNA文库15．半保留复制填空题1．Oligo(dT)-纤维素可以用来分离纯化真核生物的。

2．大肠杆菌DNA聚合酶Ⅲ的主要活性为方向聚合酶活性和核酸外切酶活性。

3.Avery的肺炎链球菌的转化实验证实转化源为。

4．DNA的复制过程中连续合成的是，不连续合成的是。

3．在核糖体上合成多肽，移位时所需要能量的供给者是。

4．The two DNA chains are held together by hydrogen bonds between pairs of bases; adenine (A)always pairs with and guanine(G)always pairs with 。

5．大肠杆菌RNA聚合酶中提供催化部位的是和。

6．DNA端粒的复制是由酶催化进行的。

7.写出下列简称的中文全称single strand DNA-binding protein（SSB），promotor ，intron 。

8．染色体上的蛋白质包括和。

9．mRNA 3’端通常含有多聚腺苷酸，可以通过用来分离纯化。

10．DNA的复制过程中连续合成的是，不连续合成的是。

11．原核生物的启动子主要包括和。

22．真核生物mRNA的5’端具有结构，3’端具有结构。

13．在蛋白质的合成过程中，分子上的识别mRNA分子上的密码子并与之配对。

9．乳糖操纵子和色氨酸操纵子是两个调控的例子。

cAMP-CAP蛋白通过控制起作用。

7．在真核细胞中，都有一种特别的起始tRNA 识别起始密码子，它携带一种氨基酸，即，作为蛋白质合成的起始氨基酸。

8．蛋白质的生物合成是以_______为模板，以________为原料直接供体，以_______为合成杨所。

核酸一、填空题1. 碱基互变异构是指碱基的酮式与烯醇式或氨基式与亚氨基式异构体发生互变的现象，如果这种现象在DNA 复制的时候发生，则可以导致碱基错配。

然而，在生理pH 下，碱基主要以酮式或氨基式形式存在。

2．DNA 双螺旋中只存在 2 种不同碱基对。

A 总是与_T___配对，G 总是与 C 配对，此规则称为Chargaff 法则。

但在RNA 双螺旋中，还含有第三种碱基配对，它是GU 。

3．X 线衍射证明，核苷中碱基与核糖环平面相互垂直。

4．一个双链RNA 分子与一个双链DNA 分子的差别有分别含U 与T 、核糖与脱氧核糖和A 型与 B 型双螺旋。

5．核酸在260 nm 附近有强吸收，这是由于碱基环上的共轭双键。

6．给动物食用3H 标记的胸苷，可使DNA 带有放射性，而RNA 不带放射性。

如果要让RNA 带有放射性，应该给动物食用3H 标记的尿苷。

7．Tm 是指DNA 热变性时候的熔链温度，双链DNA 中若GC 含量多，则其Tm 值高。

DNA 样品的均一性愈高，其熔解过程的温度范围愈窄。

DNA 所处溶液的离子强度越低，其熔解过程的温度范围越宽，熔解温度越低，所以DNA 应保存在较高浓度的盐溶液中。

8．双链DNA 热变性曲线通常呈S 形，这种曲线说明DNA 的变性具有协同效应；在DNA 发生热变性后，在pH 2以下，或pH 12 以上时，其A260 增加，同样条件下，单链DNA 的A260 不变。

9．核酸分子中的糖苷键均为β-N-糖苷键型，但假尿苷中的糖苷键为β-C-糖苷键。

核苷酸之间通过3,5-磷酸二酯键连接形成多聚物。

10. 细胞内总含有T 的RNA 是tRNA ，它是通过U 的后加工形成的。

11. DNA 双螺旋的构型可以有三种，它们分别为 B 型，A 型，Z 型。

B-DNA 的螺距为3.4 nm，每圈螺旋的碱基对数为10 ，细胞里的B-DNA 每圈螺旋的实际碱基对数为10.4 。

Z-DNA 是左手螺旋，每圈螺旋的碱基对数为12 。

第十一章分子生物学常用技术及其应用一、名词解释1．DNA重组 2．基因工程3．限制性核酸内切酶 4．基因组DNA文库5．cDNA文库 6．聚合酶链反应（PCR）7．载体 8．转化9．感染 10．核酸分子杂交11．Southern印迹杂交 12．Northern印迹杂交13．斑点印迹 14．原位杂交15．DNA芯片 16．基因诊断17．基因治疗二、选择题A型题：1.限制性核酸内切酶作用特点不包括：A．在对称序列处切开DNA B．DNA两链的切点常不在同一位点C．酶切后产生的DNA片段多半具有粘性互补末端 D．DNA两链的切点常在同一位点E．酶辨认的碱基一般为4～6个2．限制性核酸内切酶：A．可将单链DNA任意切断 B．可将双链DNA序列特异切开C．可将两个DNA分子连接起来 D．不受DNA甲基化影响E．由噬菌体提取而得3．cDNA文库包括该种生物的：A．某些蛋白质的结构基因 B．所有基因组C．结构基因与不表达的调控区 D．内含子和调节区E．内含子和外显子4．下列关于建立cDNA文库的叙述哪项是错误的：A．从特定组织或细胞中提取mRNAB．将特定细胞的DNA用限制性核酸内切酶切割后，克隆到噬菌体或质粒中C．用逆转录酶合成mRNA的对应单股DNAD．用DNA聚合酶，以单股DNA为模板合成双链DNAE．加S-腺苷甲硫氨酸（SAM），以使新生的DNA双链甲基化5．限制性核酸内切酶的通常识别序列是：A．粘性末端 B．RNA聚合酶附着点C．回文对称序列 D．聚腺苷酸E．甲基化“帽”结构6．pUC系列是指：A．经人工改造的大肠杆菌质粒 B．天然的大肠杆菌质粒C．天然的酵母质粒 D．经人工改造的大肠杆菌噬菌体E．经人工改造的酵母质粒7．用于转染哺乳类细胞的常用载体是：A．质粒 B．噬菌体C．逆转录病毒RNA D．结构基因E．乳糖操纵子8．转化常指：A．噬菌体感染 B．基因的转位C．摄取外来DNA，引起细胞生物学类型的改变 D．产生点突变E．产生移码突变9．基因工程的操作程序可简单地概括为：A．载体和目的基因的分离、提纯与鉴定 B．分、切、接、转、筛C．将重组体导入宿主细胞，筛选出含目的基因的菌株 D．将载体和目的基因接合成重组体E．限制性核酸内切酶的应用10．用于基因治疗较为理想的载体是：A．质粒 B．噬菌体C．经改造的逆转录病毒 D．人类DNAE．酵母质粒11．常用质粒有以下特性：A．是线形双链DNA B．插入片段的容量比λ噬菌体DNA大C．含有抗生素抗性基因 D．含有同一限制性核酸内切酶的多个切口E．不随细菌繁殖而进行自我复制12．在重组体中切出插入片段最常用的方法是：A．以重组时所用限制性核酸内切酶将其切出 B．用其它限制性酶将其切出C．用S1核酸酶将其切出 D．用DNA酶将切出E．用多种限制性内切酶将其切出13．利用PCR扩增特异DNA序列主要原理之一是：A．反应体系内存在特异DNA片段 B．反应体系内存在特异RNA片段C．反应体系内存在特异DNA引物 D．反应体系内存在特异RNA引物E．反应体系内存在的TaqDNA聚合酶具有识别特异DNA序列的作用14．表达人类蛋白质的最理想的细胞体系是：A．大肠杆菌表达体系 B．原核表达体系C．酵母表达体系 D．昆虫表达体系E．哺乳类细胞表达体系15．限制性核酸内切酶切割DNA后产生：A．3′-磷酸基末端和5′-羟基末端 B．5′-磷酸基末端和3′-羟基末端C．3′-磷酸基末端和5′-磷酸基末端 D．5′-羟基末端和3′-羟基末端E．3′-羟基末端和5′-羟基末端及磷酸16．下列描述最能确切表达质粒DNA作为克隆载体特性的是：A．小型环状双链DNA分子 B．携带有某些抗生素抗性基因C．在细胞分裂时恒定地传给子代细胞 D．具有自我复制功能E．获得目的基因17．在分子生物学领域分子克隆主要是指：A．DNA的大量复制 B．DNA的大量转录C．DNA的大量剪切 D．RNA的大量剪切E．RNA的大量反转录18．在分子生物学领域重组DNA技术又称：A．酶工程 B．蛋白质工程C．细胞工程 D．发酵工程E．分子克隆技术19．在重组DNA技术中不涉及的酶是：A．限制性核酸内切酶 B．DNA聚合酶C．DNA连接酶 D．反转录酶E．DNA解链酶20．多数限制性核酸内切酶切割后的DNA末端为：A．平端末端 B．3′突出末端C．5′突出末端 D．粘性末端E．缺口末端21．可识别DNA的特异序列，并在识别位点或其周围切割双链DNA的一类酶为：A．限制性核酸外切酶 B．限制性核酸内切酶C．非限制性核酸外切酶 D．非限制性核酸内切酶E．DNA内切酶22．cDNA是指：A．在体外经反转录合成的与RNA互补的DNA B．在体外经反转录合成的与DNA 互补的DNAC．在体外经转录合成的与DNA互补的RNA D．在体外经反转录合成的与RNA 互补的RNAE．在体外经反转录合成的与DNA互补的RNA23．基因组代表一个细胞或生物体的：A．部分遗传信息 B．整套遗传信息C．可转录基因 D．非转录基因E．可表达基因24．在基因工程中通常所用的质粒存在于：A．细菌染色体 B．酵母染色体C．细菌染色体外 D．酵母染色体外E．病毒DNA外25．就分子结构而论质粒是：A．环状双链DNA分子 B．环状单链DNA分子C．环状双链RNA分子 D．线状双链DNA分子E．线状单链DNA分子26．聚合酶链式反应可表示为：A．PEC B．PERC．PDR D．BCRE．PCR27．在已知序列信息的情况下，获取目的基因的最方便方法是：A．化学合成法 B．基因组文库法C．cDNA文库法 D．PCRE．差异显示法28．重组DNA的基本构建过程是将：A．任意两段DNA接在一起 B．外源DNA接入人体DNA C．外源基因插入宿主基因 D．目的基因接入适当载体E．目的基因接入哺乳类DNA29．EcoRⅠ切割DNA双链产生：A．平端 B．5′突出粘端C．3′突出粘端 D．钝性末端E．配伍末端30．催化PCR的酶是：A．DNA连接酶 B．反转录酶C．末端转移酶 D．碱性磷酸酶E．TaqDNA聚合酶31．将PstⅠ内切酶切割后的目的基因与用相同内切酶切割后的载体DNA连接属：A．同聚物加尾连接 B．人工接头连接C．平端连接 D．粘性末端连接E．非粘性末端连接32．重组DNA技术中实现目的基因与载体DNA拼接的酶是：A．DNA聚合酶 B．RNA聚合酶C．DNA连接酶 D．RNA连接酶E．限制性核酸内切酶33．以质粒为载体，将外源基因导入受体菌的过程称：A．转化 B．转染C．感染 D．转导E．转位34．最常用的筛选转化细菌是否含重组质粒的方法是：A．营养互补筛选 B．抗药性筛选C．免疫化学筛选 D．PCR筛选E．分子杂交筛选35．α互补筛选法属于：A．抗药性标志筛选 B．酶联免疫筛选C．标志补救筛选 D．原位杂交筛选E．免疫化学筛选36．下列常用于原核表达体系的是：A．酵母细胞 B．昆虫细胞C．哺乳类细胞 D．真菌E．大肠杆菌37．在对目的基因和载体DNA进行同聚物加尾时，需采用：A．反转录酶 B．多聚核苷酸激酶C．引物酶 D．RNA聚合酶E．末端转移酶38．在分子生物学领域分子克隆专指：A．细胞克隆 B．RNA克隆C．DNA克隆 D．抗体克隆E．mRNA克隆39．用于重组DNA 的限制性核酸内切酶，识别核苷酸序列的：A．正超螺旋结构 B．负超螺旋结构C．α螺旋结构 D．回文结构E．锌指结构40．在基因工程中通常所用的质粒是：A．细菌染色体DNA B．细菌染色体以外的DNA C．病毒染色体DNA D．病毒染色体以外DNAE．噬菌体DNA41．构建基因组DNA文库时，首先需要分离细胞的：A．染色体DNA B．线粒体DNAC．总mRNA D．tRNAE．rRNA42．DNA连接酶是从T4 噬菌体感染大肠杆菌中分离的，这种连接酶：A．只能催化平末端连接，而不能催化粘性末端连接B．即能催化单链DNA连接又能催化粘性末端双链DNA连接C．双链DNA中不需一条完整的单链D．单链中的切口位点可缺少几个核苷酸E．切口存在相邻的5′-磷酸和3′-羟基末端，使其以磷酸二酯键连接43．末端转移酶是合成酶类：A．作用时不需模板 B．是从小牛胸腺中分离C．能催化单链核苷酸转移到5′-磷酸上 D．需要带有5′-端磷酸的末端的ssDNA E．需要有延伸5′-端磷酸的末端dsDNA44．在基因工程中可用碱性磷酸酶：A．防止DNA的自身环化 B．同多核苷酸激酶一起进行DNA3′-羟基末端标记C．制备突出的3′-末端 D．特异切除DNA或RNA的3′-末端羟基E．水解特异的核苷酸片段45．以下哪种酶作用时需要引物：A．限制性核酸内切酶 B．末端转移酶C．反转录酶 D．DNA连接酶E．碱性磷酸酶46．S1核酸酶的功能是：A．切割双链的DNA B．切割单链的RNA C．切割发夹环 D．切割单链DNA E．以上有两项是正确的47．在cDNA技术中所形成的发夹环可用：A．限制性核酸内切酶切除 B．用3′外切酶切除C．用S1核酸酶切除 D．用5′外切酶切除E．碱性磷酸酶切除48．下面有关限制性内切酶的叙述正确的是：A．限制酶是外切酶而不是内切酶B．限制酶在特异序列（识别位点）对DNA进行切割C．同一种限制酶切割DNA时留下的末端序列总是相同的D．一些限制酶在识别位点稍有不同的点切割双链DNA，产生粘性末端E．一些限制酶在识别位点相同的位置切割双链DNA，产生平末端49．限制性核酸内切酶可以特异识别：A．双链DNA的特定碱基对 B．双链DNA的特定碱基序列C．特定的三联码 D．双链RNA的特定碱基序列E．双链RNA的特定碱基对50．DNA聚合酶的主要用途：A．利用它的3′→5′聚合活性，合成ds-DNA第二条链B．对DNA的5′-端进行填补或末端标记C．大肠杆菌DNA聚合酶Ⅲ用于缺口平移，制作DNA标志探针D．DNA聚合酶Ⅱ可用于DNA测序E．TaqDNA聚合酶用于PCR51．反转录酶：A．是依赖于DNA的RNA聚合酶 B．用于真核DNA反转录生成mRNA C．用于RNA探针的制备 D．用于RNA序列测定E．是依赖于RNA的DNA聚合酶52．基因工程中作为载体应具备以下特点：A．能在宿主细胞中复制繁殖 B．容易进入宿主细胞C．具有多克隆位点 D．容易从宿主细胞中分离出来E．以上均是53．下列哪种克隆载体对外源DNA的容载量最大：A．质粒 B．粘粒C．酵母人工染色体 D．λ噬菌体E．cDNA表达载体54．pUC是一种改造型质粒，含有：A．乳糖操纵子调节基因、启动子 B．多克隆位点C．lacZ′基因 D．氨苄青霉素抗性基因E．以上均有55．质粒具有以下特点：A．是位于细菌染色体外的RNA B．不能自主复制C．为单链环形DNA D．大小在2～300kb之间E．以上都不对56．粘粒是一种人工建造的载体不具有以下特点：A．可借cos位点将多个粘粒串联成大环 B．本身约4～6kb之间C．进入受体细胞后可进行复制 D．可克隆DNA大片段E．以上都不是57．下面关于多克隆位点的描述不正确的是：A．仅位于质粒载体中 B．具有多种限制性内切酶识别的位点C．不同酶的识别序列可以重叠 D．一般是人工合成后添加到载体中E．可位于不同载体中58．下列筛选重组体的方法中不属于遗传学方法的是：A．限制性内切酶图谱法 B．PCRC．Northern印迹法 D．Southern印迹法E．抗药性标记基因59．利用基因工程可以进行：A．建立染色体基因文库 B．分析基因的结构与功能C．疾病的发生、发展及治疗的分子机制 D．疾病的诊断和基因治疗E．以上均可以60．Southern印迹的DNA探针杂交：A．只与序列完全相同的RNA片段 B．可与任何含有相同序列的DNA片段C．可与任何含有互补序列的DNA片段 D．可与用某些限制性核酸内切酶切成的DNA片段E．只与含有互补序列的RNA片段61．下列哪个不是Southern印迹法的步骤：A．用限制性核酸内切酶消化DNA B．DNA与载体连接C．用凝胶电泳分离DNA片段 D．DNA片段转移至硝酸纤维素膜上E．用一个标记的探针与膜杂交62．下列哪个不是Northern印迹法的步骤：A．从细胞和组织中提取RNA B．用凝胶电泳分离RNAC．将RNA转移到支持物上 D．与核酸探针进行杂交E．将RNA反转录合成DNA63．原位杂交具有以下特点：A．不需从组织或细胞中提取核酸 B．对靶序列有很高的灵敏度C．可完整保护组织与细胞的形态 D．准确反映出组织细胞的相互关系及功能状态E．以上均是64．下列哪项不是探针的特点：A．要加以标记 B．应是双链DNAC．只与靶核酸序列杂交 D．探针长度可以是十几个碱基到几千个碱基不等E．高灵敏度65．探针的种类包括：A．基因组DNA探针 B．cDNA探针C．寡核苷酸探针 D．RNA探针E．以上均是66．下面哪一步不是获得基因组DNA探针的步骤：A．从基因组文库筛选得到特定基因 B．克隆、扩增C．纯化 D．连入表达载体E．切取插入片段67．RNA探针具有以下特点，但除外：A.采用反转录方法可以得到 B．单链、杂交效率高C．杂交体系稳定 D．不存在高度重复序列E．特异性高68．下面哪一步不是cDNA探针的步骤：A．从相应组织细胞直接中分离特异的cDNA B．从相应组织细胞中分离特异的mRNA C．反转录合成cDNA D．与载体连接E．切割cDNA，分离纯化69．常用的标记物有，但除外：A．放射性核素 B．生物素C．荧光素 D．地高辛E．NTP70．用于标记核酸探针的放射性核素主要有，但除外：A．32P B．35SC．3H D．125IE．14C71．放射性核素标记物具有，但除外：A．检测时间短 B．灵敏度和特异性高C．可检出样品少于1000个分子的核酸量 D．半衰期短，稳定性差E．污染环境72．非放射性核素标记物包括，但除外：A．生物素 B．地高辛C．荧光素 D．酶E．核酸73．非放射性核素标记物具有，但除外：A．灵敏度高于放射性核素 B．稳定C．经济 D．实验周期短E．安全、无污染74．PCR反应体系包括，但除外：A．基因组DNA（模板） B．引物C．dNTP D．TaqDNA聚合酶E．T4DNA连接酶75．PCR技术主要应用于：A．目的基因的克隆 B．基因表达与调控C．DNA微量分析 D．遗传病与传染性疾病的诊断E．以上均可以76．以DNA为模板的PCR反应，具备以下条件：A．反应体系一般选用50-100μl B．引物、TaqDNA聚合酶C．4种dNTP、模板DNA D．缓冲液E．以上均是77．以mRNA为模板的PCR反应，具备以下条件：A．需将mRNA反转录生成cDNA B．反应体系一般选用20μl体积、4种dNTP、引物C．需要RNA酶抑制剂、反转录酶 D．TaqDNA聚合酶E．以上均是78．关于PCR停滞的原因，取决于很多因素，但除外：A．样品模板的拷贝数 B．PCR扩增效率C．DNA酶种类及活性 D．dNTP的大量消耗E．非特异性的竞争因素79．用于核酸分子杂交的探针可以是放射性核素标记的：A．核糖体 B．RNAC．抗体 D．抗原E．以上都不是80．Southern印迹是用DNA探针检测DNA片段，而Northern印迹则是：A．用RNA探针检测DNA片段 B．用RNA探针检测RNA片段C．用DNA探针检测RNA片段 D．用RNA探针检测蛋白片段E．用DNA探针检测蛋白片段81．用免疫化学筛选重组体的原理是：A．根据外源基因的表达 B．根据载体基因的表达C．根据mRNA与DNA的杂交 D．根据DNA与DNA的杂交E．根据RNA与RNA的杂交82．原位杂交包括：A．转膜杂交 B．斑点杂交C．菌落杂交或噬菌斑杂交 D．直接对染色体或组织的杂交E．以上均有83．外源性DNA进入菌体的方式是：A．转化 B．转录C．翻译 D．半保留复制E．以上都不是84．要将无粘性末端的两种平端DNA片段结合在一起，可在：A．两种片段上都接上聚（dT）尾部 B．一种片段接聚（dT）尾部，另一种接聚（dA）尾部C．两种片段都接上聚（dA）尾部 D．反应液中加以T4DNA连接酶E．有两项是对的85．用原核生物表达真核生物的基因存在的问题是：A．大肠细菌只能表达克隆的cDNA B．细菌不能切除原始转录物中相当于内含子的核苷酸序列C．缺乏翻译后加工机制 D．表达的蛋白质常形成不溶性包涵体E．以上都正确86．常用载体有：A．质粒 B．噬菌体C．病毒DNA D．大肠杆菌基因组DNAE．有3项是正确的87．构建cDNA文库时，首先需分离细胞的：A．染色体DNA B．线粒体DNAC．总mRNA D．tRNAE．rRNA88．构建DNA文库时，首先需分离细胞的：A．染色体DNA B．线粒体DNAC．总mRNA D．tRNAE．rRNA89．设计PCR的引物时，应考虑引物与模板的：A．5ˊ端特定序列互补 B．5ˊ端任意序列互补C．3ˊ端特定序列互补 D．3ˊ端任意序列互补E．中间序列互补90．用于鉴定转化子细胞是否含重组DNA的最常用方法是：A．抗药性选择 B．分子杂交选择C．RNA反转录 D．免疫学方法E．体外翻译91．下列哪一步是DNA芯片技术的最关键的环节：A．样品的准备与标记 B．芯片的制备C．信号的检测 D．数据分析处理E．杂交92．基因诊断常用的技术方法有：A．核酸分子杂交 B．单链构象多态性分析C．DNA序列测定 D．DNA芯片技术E．以上均是B型题：A．基因从原来位置转到基因组的另一位置 B．噬菌体或病毒DNA进入细胞中繁殖C．外来DNA引起细胞生物学特性的改变 D．移码突变 E．非移码突变1．感染是指：2．转化是指：3．转位是指：4．结构基因中3个核苷酸的插入或丢失是指：5．结构基因中1个核苷酸的插入或丢失是指：A．抗药性选择 B．分子杂交选择 C．RNA转录 D．免疫学方法 E．体外翻译6．用于鉴定是否有质粒转入受体菌的一般方法是：7．用于鉴定转化子细胞是否含目的基因的常用方法：8．利用目的基因表达产物的特异抗体来筛选含目的基因的转化子细胞的方法是：A．限制性核酸内切酶 B．DNA连接酶 C．反转录酶 D．TaqDNA聚合酶 E．碱性磷酸酶9．识别DNA回文结构并对其双链进行切割的是：10．用于聚合酶链式反应的是：11．将目的基因与载体DNA进行连接的酶是：12．特异切除DNA或RNA5ˊ端磷酸的酶是：13．mRNA转录合成cDNA的酶是：A．支原体 B．衣原体 C．噬菌体 D．细菌 E．酵母14．常用作原核表达体系的是：15．常用作真核表达体系的是：A．基因组文库 B．cDNA文库 C．mRNA文库 D．tRNA文库 E．rRNA 文库16．分离细胞染色体可制备：17．分离细胞总mRNA可制备：A．抗药性选择 B．RNA反转录 C．免疫化学方法 D．体外翻译E．PCR18．对重组体内基因进行直接选择的方法是：19．通过鉴定基因表达产物筛选重组体的方法是：A．RNA聚合酶 B．末端转移酶 C．碱性磷酸酶 D．反转录酶 E．核苷酸酶20．切除DNA末端磷酸基需要用：21．在DNA3′羟基末端进行同聚物加尾需要用：22．合成cDNA需要用：A．同聚物加尾连接 B．人工接头 C．粘性末端连接 D．缺口末端连接 E．平端连接23．外源基因和载体DNA经限制性酶切后的连接属于：24．在外源基因和载体DNA末端添加同聚物序列后再进行连接属于：25．在外源基因和载体DNA末端添加短核苷酸序列，人为制造粘性末端再进行连接属于：26．需用适当的酶将DNA突出末端削平或补齐的连接属于：A．将单链DNA任意切断 B．将双链DNA序列特异切开 C．将两个DNA分子连接起来D．将缺口末端连接 E．切除DNA末端磷酸基团27．限制性内切酶的作用是：28．DNA连接酶作用是：29．碱性磷酸酶作用是：A．某些蛋白质的结构基因 B．所有基因结构 C．不表达的调控区D．内含子和调节区 E．外显子和调节区30．cDNA文库包括：31．DNA文库包括：32．真核mRNA包括：A．DNA聚合酶 B．RNA聚合酶 C．DNA连接酶D．RNA连接酶 E．限制性核酸内切酶33．切除特异DNA片段：34．连接两个DNA片段：35．大量扩增DNA片段：A．反转录酶 B．多聚核苷酸激酶 C．引物酶 D．RNA聚合酶 E．末端转移酶36．催化ATP的磷酸转移到DNA或RNA的5ˊ端羟基上：37．催化单核苷酸转移到DNA的3ˊ端羟基上：38．合成cDNA：C型题：A．将含有目的基因的噬菌体感染细菌 B．将含有目的基因的质粒导入细菌进行表达C．两者都是 D．两者都不是1．转化：2．感染：A．cDNA文库 B．基因组文库 C．两者都是 D．两者都不是3．含内含子：4．含结构基因：A．将含有目的基因的噬菌体感染细菌 B．将含有目的基因的质粒导入细菌进行表达C．两者都是 D．两者都不是5．转化：6．转位：A．cDNA文库 B．基因组文库 C．两者都是 D．两者都不是7．含转录调控区：8．较易表达：A．cDNA文库 B．基因组文库 C．两者都是 D．两者都不是9．制备目的基因可在真核生物体系中表达：10．几乎含有人的全部基因：A．cDNA文库 B．基因组文库 C．两者都是 D．两者都不是11．具有组织特异性：12．可在原核生物体系中表达：A．光介导原位合成 B．压电打印合成 C．两者都是 D．两者都不是13．原位合成芯片：14．DNA微集阵列：A．喷墨打印 B．针式打印 C．两者都是 D．两者都不是15．原位合成芯片：16．DNA微集阵列：A．光介导原位合成 B．喷墨打印 C．两者都是 D．两者都不是17．原位合成芯片：18．DNA微集阵列：A．压电打印合成 B．针式打印 C．两者都是 D．两者都不是19．原位合成芯片：20．DNA微集阵列：A．DNA序列测定 B．突变分析 C．两者都是 D．两者都不是21．DNA芯片技术可用于：22．PCR技术可用于：A．基因表达 B．DNA的微量分析 C．两者都是 D．两者都不是23．DNA芯片技术可用于：24．PCR技术可用于：A．药物研究 B．基因诊断 C．两者都是 D．两者都不是25．PCR技术可用于：26．核酸分子杂交：A．目的基因克隆 B．基因结构研究 C．两者都是 D．两者都不是27．DNA芯片技术可用于：28．PCR技术可用于：A．DNA与DNA的杂交 B．DNA与RNA杂交 C．两者都是 D．两者都不是29．Southern印迹杂交：30．斑点杂交：A．DNA与RNA杂交 B．DNA与DNA的杂交 C．两者都是 D．两者都不是31．原位杂交：32．Northern杂交：A．遗传性疾病的诊断 B．感染性疾病的诊断 C．两者都是 D．两者都不是33．分子杂交技术可用于：34．PCR技术可用于：A．肿瘤 B．个体鉴别 C．两者都是 D．两者都不是35．PCR技术可用于：36．DNA芯片技术可用于：三、问答题1．简述基因工程的主要过程。