实验方法
- 格式:doc
- 大小:119.00 KB
- 文档页数:10
实验方法有哪几种
实验方法有哪几种:
化学实验的基本方法为以下四种:观察法、实验法、分类法和比较法。
化学实验操作,具体指实验室中药品的取用、存放、仪器的连接组装及洗涤等内容,主要介绍了操作时须遵守的原则和步骤,在具体实验时应当严格遵照这些步骤进行实验,以防止发生事故或导致实验发生错误。
实验的三种基本方法:单组实验法,等组实验法,循环实验法。
物理的实验方法有:控制变量法、等效替代法、累积法、留迹法、外推法、近似法、放大法等。
物理实验是初高中阶段物理课程中包含的相关实验,包括电学实验、力学实验、热学实验、光学实验等等,常用于验证物理学科的定理定律。
科学实验方法有:
观察法、控制变量法、类比法、放大法、比较法、平衡法、转换法、理想实验法等。
科学实验方法有哪些
1.观察法:通过眼睛观察物体的形态、颜色、状态等来获得信息。
2.实验法:对同一物体或一组物体进行实验,比较实验前后的差异,得出结论。
3.统计法:通过收集和分析数据,从而得出结论。
4.模拟法:通过模拟实际环境和情况,来获得某些信息或结论。
5.科学推理法:基于已有的科学理论和原则,进行推理和进行逻辑分析,得出结论。
6.假设法:通过对一些未知事物进行假设,进行考察和验证而得出结论。
7.比较法:将不同事物进行比较,得出它们之间的差异或相似性,从而得出结论。
8.控制变量法:在实验过程中,控制变量的影响,使实验结果更为准确和可靠。
常用实验设计方法实验设计方法是科学研究的重要组成部分,用于规划和进行实验,收集数据,并通过分析数据来得出结论。
常用的实验设计方法包括随机实验设计、单因素实验设计、因素水平实验设计、响应面实验设计和组合实验设计等。
1.随机实验设计:随机实验设计是最常用的实验设计方法之一、它具有随机分配实验对象的特点,以减少实验误差并控制外部干扰因素的影响。
随机实验设计可以通过将实验对象随机分配到不同的实验组以及对照组,来比较不同处理条件下的实验结果。
随机实验设计通常具有高度的可重复性和可靠性。
2.单因素实验设计:单因素实验设计是在研究过程中只改变一个因素的水平,以研究该因素对结果的影响。
它的优点是简单易操作,可以有效地研究一些因素对实验结果的影响。
单因素实验设计常用于初步筛选影响因素、确定最佳工艺条件等。
3.因素水平实验设计:因素水平实验设计是在研究过程中,对多个因素的水平进行考察,以确定不同因素水平对实验结果的影响。
因素水平实验设计可以通过正交实验设计、Taguchi方法等来进行。
它的优点在于可以同时考察多个因素,从而更准确地了解各因素的影响。
4.响应面实验设计:响应面实验设计是在因素水平实验设计的基础上,通过响应面分析方法来建立因素与响应变量之间的数学模型,进而优化实验过程。
响应面实验设计可以通过调整实验参数来查找最佳的实验条件,以达到最佳的实验结果。
响应面实验设计通常具有较高的预测能力和优化效果。
5.组合实验设计:组合实验设计是将多个因素按照不同的水平组合起来进行实验,以研究不同因素水平组合对结果的影响。
组合实验设计可以通过正交实验设计、Taguchi方法等进行设计。
组合实验设计的优点在于可以同时考察不同因素的相互作用,从而得到更准确的实验结果。
除了上述常用的实验设计方法,还有很多其他的特殊实验设计方法,如因素嵌套实验设计、重复测量实验设计、区组实验设计等,这些方法可以根据具体情况选择使用。
在实际应用中,实验设计方法的选择应根据研究目的、易操作性、资源限制、样本大小、预期效应大小等因素进行综合考虑。
实验方法怎么写实验方法是科研实验的重要组成部分,它的设计合理与否直接关系到实验结果的准确性和可靠性。
因此,如何编写一份科学严谨的实验方法显得尤为重要。
下面将从实验方法的结构、内容和注意事项三个方面进行详细介绍。
一、实验方法的结构。
实验方法通常包括实验目的、实验原理、实验材料与仪器、实验步骤和数据处理等几个部分。
在写实验方法时,首先要明确这几个部分的顺序和内容,然后按照一定的逻辑顺序进行编写,确保实验方法的结构清晰、条理分明。
二、实验方法的内容。
1. 实验目的,实验目的是实验的出发点和归宿,它直接指导着实验的设计和实施。
在写实验目的时,要明确具体的实验目标,避免笼统、模糊的表述,确保实验目的明确、具体。
2. 实验原理,实验原理是实验方法的理论依据,它说明了实验所基于的科学原理和理论基础。
在写实验原理时,要简明扼要地介绍实验所涉及的理论知识,避免过多的公式推导和理论分析,确保实验原理通俗易懂。
3. 实验材料与仪器,实验材料与仪器是实验所需的实验器材和实验仪器设备,它们的选择和使用直接关系到实验的顺利进行。
在写实验材料与仪器时,要列举清楚所需的材料和仪器,说明其规格型号和数量要求,确保实验材料与仪器的准确齐全。
4. 实验步骤,实验步骤是实验的具体操作过程,它包括实验的准备工作、实验的操作步骤和实验的注意事项等内容。
在写实验步骤时,要按照时间先后或空间顺序进行描述,确保实验步骤清晰明了。
5. 数据处理,数据处理是实验结果的分析和整理,它直接关系到实验结果的可靠性和科学性。
在写数据处理时,要说明数据的采集方法和处理步骤,给出数据的处理结果和分析结论,确保数据处理的严谨科学。
三、实验方法的注意事项。
1. 实验设计要合理,确保实验的可重复性和可比性。
2. 实验操作要规范,确保实验的安全性和准确性。
3. 实验数据要真实,确保实验的可信度和科学性。
4. 实验结果要客观,确保实验的公正性和客观性。
5. 实验报告要完整,确保实验的记录和总结。
实验设计方法有哪些
实验设计方法有很多,以下是一些常用的方法:
1. 随机化实验设计:通过随机分配实验对象到不同的处理组,以减少实验结果中的偏倚。
2. 匹配实验设计:根据实验对象的特征进行配对,然后将配对对象分配到不同的处理组,以减少人口组成对实验结果的影响。
3. 阻截实验设计:在实验开始之前,在实验对象中收集基线数据,然后对实验对象进行处理,并在处理后收集数据,以便比较处理前后的变化。
4. 交叉设计:实验对象在不同的处理条件下多次观察和测量,以减少实验结果中的个体差异。
5. 因子ial设计:将多个因子的不同水平组合起来,进行实验观察,以了解各因子以及其交互作用对实验结果的影响。
6. 重复测量设计:在实验过程中对同一实验对象进行多次观察和测量,以减少实验结果中的个体差异。
这些实验设计方法可以根据研究目的和实验要求的不同进行选择和组合。
常用化学实验操作方法有
以下是常用的化学实验操作方法:
1. 称量:使用天平或称量器具精确地测量药品或溶液的质量。
2. 滴定:通过加入滴定剂和指示剂,逐渐调整反应物的量,使其达到等量反应。
用于测定酸碱度、氧化还原等指标。
3. 冷却:通过放置于低温环境或加入冰块等方式,使反应体系降温,控制反应速度或固定某一状态。
4. 离心:通过离心机使反应液或混合物中的组分分离,方便收集或分离所需物质。
5. 过滤:使用滤纸或滤膜,将混合物中的固体或液体分离出来。
6. 蒸发:通过制定的条件,将溶液或混合物中的部分或全部溶液蒸发,从而得到所需物质。
7. 取样:取用所需物质的一部分作为实验的试验样品。
8. 加热:使用加热器或火焰将试管、烧杯、反应瓶等中的物质加热至特定温度,
促进化学反应的进展。
9. 搅拌:使用磁力搅拌器或机械搅拌器使试管、烧杯等容器中的药品或溶液充分混合。
10. 精密调节:使用特殊的器具,如分液漏斗、调节阀等调节物质的流量、温度等参数,完成精密的操作。
技术实验的常用方法
1. 观察法:通过直接观察实验现象及其特点,以发现实验规律、探索实验原理和测试实验假设等。
2. 比较法:采用对比分析的方法,比较不同实验条件下的实验结果,从而寻找实验规律和探索原因。
3. 分析法:根据理论知识和实验结果,分析实验中所涉及的各种因素之间的关系,以揭示实验现象的本质和规律。
4. 仿真法:利用计算机等设备,通过数学模型来模拟实验现象,以研究实验规律和探讨实验结果。
5. 设计法:通过设计实验方案来探索实验规律和测试实验假设,掌握实验技能和方法。
6. 典型法:选取具有代表性的实验例子,进行分析、比较、观察和论证等,用以揭示实验本性和规律。
7. 统计法:通过收集、记录和分析实验数据,以统计方法探索实验规律和揭示实验结果的含义。
实验方法是什么实验方法是科学研究中非常重要的一部分,它是科学家们进行科学研究和验证假设的重要手段。
实验方法的正确性和科学性对于科学研究的结果具有至关重要的影响。
那么,实验方法究竟是什么呢?首先,实验方法是科学研究中用来验证假设的一种科学手段。
通过实验方法,科学家们可以观察、测量和验证他们的假设,以确定其是否符合事实。
实验方法可以帮助科学家们收集数据,并通过数据来验证他们的假设,从而得出科学结论。
其次,实验方法需要经过严格的设计和执行。
一个科学合理的实验方法需要经过仔细的设计和计划,以确保实验结果的可靠性和有效性。
科学家们需要考虑到实验的可控性、重复性和可比性,以及实验结果的客观性和准确性。
另外,实验方法需要遵循科学原理和方法。
科学实验需要遵循科学原理和方法,以确保实验结果的科学性和可靠性。
科学家们需要遵循科学规范和伦理,不得伪造实验数据或结果,以及不得进行不符合科学道德和法律的实验。
此外,实验方法需要进行数据分析和结果解释。
科学实验得到的数据需要进行科学分析和统计,以得出科学结论。
科学家们需要对实验结果进行客观和科学的解释,以便其他科学家和研究者能够理解和接受实验结果。
最后,实验方法需要进行结果验证和复制。
科学实验得到的结果需要经过其他科学家的验证和复制,以确保实验结果的可靠性和科学性。
只有经过多次验证和复制的实验结果,才能被科学界广泛接受和认可。
总之,实验方法是科学研究中非常重要的一部分,它是科学家们进行科学研究和验证假设的重要手段。
科学家们需要严格遵循科学原理和方法,设计和执行科学合理的实验方法,进行数据分析和结果解释,以及进行结果验证和复制,以确保实验结果的可靠性和科学性。
希望本文能够帮助大家更好地理解实验方法的重要性和科学性。
四种常用的实验设计方法
1、实验研究设计:实验研究设计是研究者以不同处理条件设计的以测量比较研究方法,运用此方法研究者可以比较实验组数据和对照组以证明实验结果及其差异。
2、对照组设计:对照组设计也称为实验对照设计,是指研究者将受试者分为两组,实验组受实验处理,对照组不受处理,以比较受处理组和未受处理组的状况,考察处理的效果。
3、时间序列设计:时间序列设计是研究者在同一个研究对象上,设计不同时间的多次观察,比较各次观察结果,从而发现被研究对象的变化趋势,分析出处理的影响结果。
4、复合设计:复合设计也称为混合设计,是指实验研究中将某几种实验组合,以形成新的实验设计,如实验组复合对照组、实验组复合时间序列等,前者是在实验组和对照组相结合的基础上又将实验组内部分为几个小组,以比较小组间的差异;而后者则是在实验组和时间序列设计相结合的基础上,又加入了对照组来观察实验组和对照组的差异。
- 1 -。
物理实验有哪些方法
物理实验有以下几种方法:
1. 观测法:通过观察实验现象或测量物理量的变化来进行实验,例如用放大镜观察显微镜中的细胞结构。
2. 记录法:通过记录实验现象或测量物理量的数值来进行实验,例如用电子秤记录物体的质量。
3. 比较法:通过比较不同条件下的实验结果来进行实验,例如比较在不同温度下的金属的导电性能。
4. 对比法:通过对比相同物理量在不同物体之间的差异来进行实验,例如比较不同材质的物体的热传导率。
5. 推论法:通过推论或假设来进行实验,例如假设光的传播是直线传播并进行相应的实验验证。
6. 模型法:通过建立物理模型来进行实验,例如建立不同宇宙物体之间的力学模型来模拟宇宙的演化过程。
一、动物组织RNA的提取实验目的:掌握由动物组织中提取总RNA的方法实验原理:Trizol试剂是一个包含酚、异硫氰酸胍和SDS的单相酸性溶液,其在裂解细胞的同时抑制RNase的活性,随后加入氯仿,酚会大量的溶解在氯仿中。
由于DNA和RNA在酸性酚中的溶解性不同,造成DNA分布在下层的氯仿酚溶液中,RNA则分布在上层的水相中,最后用异丙醇沉淀水相中的RNA,并用70%乙醇洗涤沉淀,这样就可以得到比较纯净的总RNA.实验步骤:①先在研钵中加入液氮,再将组织剪成小块在液氮中磨成粉末,用液氮预冷的药匙取50~100mg组织粉末加入已盛有1ml的Trizol液的EP管中(注意组织粉末总体积不能超过所用Trizol体积的10%),充分混合均匀。
②室温放置5min,然后加入200ul的氯仿,盖紧EP管并剧烈摇荡15秒钟。
③ 12000rpm离心10min,取上层水相于一新的EP管中(千万不要将中间的沉淀层和下层液混入,否则重新离心分离),加入500ul异丙醇,温和颠倒混匀。
室温放置10min,12000rpm离心10min。
④小心地弃去上清液,加入1ml的75%乙醇,涡旋混匀,4℃下7500rpm离心5min。
重复操作一次。
⑤弃去上清液(尽量将残余液体除去),室温或真空干燥5~10min(注意不要干燥过分,否则会降低RNA 的溶解度)。
用40ul DEPC处理过的水将RNA溶解,必要时可55℃~60℃水浴10min。
RNA可进行mRNA 分离,或贮存于70%乙醇并保存于-70℃。
二、RNA 提取策略及RT-PCR技术第一部分RNA 提取策略1、RNA降解的原因内源性RNAase是造成RNA降解的最重要原因,因为人体细胞自身就是几十分钟(20min?)mRNA被降解一轮,所以不管是组织还是细胞还是液体状样本在离开其中细胞的最佳生活状态后都应该尽快的被妥善的方法保存起来。
外源性RNA酶也是一个需要注意的因素,最常见的就是毛发尤其头发,灰尘,唾液,塑料手套这四个兄弟。
针对它们我们应该戴帽子,口罩,橡胶无菌手套,在清洁灰尘少的地方提取RNA。
我上面说了内源性RNAase污染才是关键,所以有些同志没有注意这些对外源性RNAase的防护RNA也提取的很出色。
但是如果你运气不太好的话外源性RNAase污染影响很大的。
2、样品的取材我们抽提RNA往往都是需要其mRNA,而mRNA的表达量和细胞或者组织的生长状态息息相关,我们取组织块应该避免取到坏死组织,而细胞我们应该在其处于生长旺盛的时期收集(贴壁细胞消化要迅速,离心要稍为快些,甚至可以不消化下来直接进入裂解步骤;此外还可以采取先震荡敲击培养瓶的方法使细胞和培养瓶的结合下降,然后用吸管吹打培养基地方法把细胞吹打下来,这样细胞的代谢不会明显的受到抑制。
注意在平时传代的时候就要注意观察细胞除了用胰酶消化下来以外是否还有其他比较简单的方法)(此外还可以把培养液倒掉后迅速的加入裂解试剂开始抽提RNA)。
3、待提取样品保存方法这些保存方法温度从4度到零下196度不等,选择哪一种保存方法关键是要对这些保存方法的优缺点有清醒的认识。
根据你需要的RNA种类可以做简单的分类。
包括RNA病毒RNA ,mRNA (各种),rRNA等其中最容易降解或者破坏的就是mRNA,最不容易损失的就是RNA病毒RNA(因为有蛋白壳保护)。
超低温保存:特指液氮保存不管组织还是细胞如果需要其中的mRNA必须在液氮中保存,-70度等方法都是错误的方法,在很短的时间内或许可以,但是长期是不可能的。
-20~~~-70摄氏度保存:RNA 病毒的RNA可以在这个温度段安全的保存。
但是其产生的mRNA还是必须超低温保存。
4度保存:有特殊的保护试剂存在地情况下组织的保存:应该是离体后在1min内就放入液氮或者保护试剂中。
由于提取RNA对组织块有一定量的要求,大约100mg居多(脂肪细胞需要的量多的多,因为细胞是大大膨胀的),所以在取材前就需要明确到底你需要的组织大概多大是100mg,令少勿多。
如果是取临床的标本,就应该带上液氮罐子,DEPC处理的器械,锡箔纸,线等在手术室外等候,标本一切下就尽快进行切割(大概100mg一块),包装(锡箔纸内),捆扎(方便在液氮罐子中寻找),迅速丢入液氮罐子中,最好是1min内完成(所以大家取材前一定要好好联系一下,不要到时候手忙脚乱的^_^)细胞的保存:比较麻烦些,所以大多都是直接提取RNA再保存。
建议离心收集后用特殊保护试剂重悬后保存。
4、RNA提取提取RNA可以分为总RNA,mRNA,Virus RNA(RNA病毒)几类Trizol即异硫氰酸胍-苯酚法,这种方法的原理是:首先用强变性剂异硫氰酸胍裂解细胞,同时使核蛋白复合体中的蛋白变性,释放出核酸。
释放出来的DNA和RNA由于在特定pH时溶解度不同,分别位于整个体系中的中间相和水相,从而使DNA和RNA分离开来。
进一步通过有机溶剂来抽提沉淀RNA,就可以得到纯净的RNA;Trizol最早是MRC实验室的科学家发明的方法,后来把专利卖给了invitrogen/Gibco,invitrogen/Gibco 将此方法推广到世界。
他的trizol曾经由其他公司OEM制作,现在已经自己生产。
本来Trizol是一个专利的品牌,但是国内也有不少仿制的品牌,基本的原理是一样,配方稍有不同。
RNeasy kit:Qiagen的王牌产品,号称适用于各种RNA抽提,其实在特殊的组织比如大脑,肌肉,脂肪组织还是选择特殊抽提试剂为佳。
此外细菌RNA抽提也最好使用专用抽提试剂盒。
这些产品Qiagen都提供。
注意凡是Qiagen的试剂盒抽提应该是没有5S带的,因为它将5S破坏掉了。
其他的比如roche,promega等都很好的是的。
尤其promega性价比最高!注意各种方法对于组织都需要先碾磨,应该用陶瓷碾磨器,同时一定要在碾磨同时不断的加入液氮。
(少数牛人号称从来不加液氮也提取的很好,我只能说他运气实在不错)。
特殊的RNA抽提试剂盒---mRNA抽提试剂盒:单纯的抽提mRNA的试剂盒很少见到有人在使用,但是其具有一般RNA抽提试剂盒没有的优点,在一些实验中有出奇致胜的效果,推荐promega的总RNA提取KIT,效果与Qiagen差不多,价格便宜多了,性价比最高的好东东!试剂盒提取的其优点有以下几点:1、提取得mRNA纯度高,因为对于很多实验rRNA其实也是一种污染,我们只想RT我们需要的mRNA,但是如果用特异性引物或者随机引物就会连rRNA 一起RT,造成大量的我们不需要的cDNA出现。
2、鉴定时观察是否有严重的DNA污染时非常方便。
mRNA抽提后电泳只是看到淡淡的一条短拖影带,此时如果有DNA污染可以很容易发现,因为背景很浅。
3、RNA的鉴定RNA抽提出来之后,首先做的工作是分装保存,然后取其中一管用于鉴定。
鉴定方法如下:对RNA的鉴定包括几个方面,第一是数量的鉴定,第二是质量的鉴定,重点是质量的鉴定。
一般的琼脂糖凝胶电泳,注意不要用甲醛变性电泳(又不是做northern,实在没有必要)。
电泳槽注意一定不要用DEPC处理,一定要保证电泳体系中有少量的RNAase存在。
分别在加样孔中加入1,2,3μlRNA 抽提溶液。
在旁边加入DNA marker。
1%琼脂糖凝胶,10V/cm的电压,电泳10min成像一次,看电泳情况,如果28s和18s还没拉开,继续电泳10min成像,如果任没有拉开再次电泳5min。
如果还没有分开多半28s已经遭到破坏,不可能看到典型的3条带了。
好的RNA的特征:A、RNA应该呈现出3条rRNA带。
分别是5,18,28SrRNA的带。
5s最好是要可见,除非抽提步骤中故意将其破坏B、28s亮度是18s亮度的一倍,其他比例关系均提示RNA有一定程度的破坏。
C、不能有多的带出现。
出现多的带有两个可能,一是DNA污染带,二是rRNA破坏断裂带。
D、rRNA 之间可以看到很淡的,雾蒙蒙的mRNA拖带。
E、琼脂糖凝胶被RNAase处理后电泳带基本消失,没有明显的,边缘清晰的带残留(不用说这些就是明显的DAN污染,而且是很大量的DNA污染)如何用RNAase处理凝胶呢,为何要处理?? DNA是不会被RNAase破坏的,所以我们发现凝胶有可疑的带需要鉴定其到底是RNA还是DNA,如果是DNA就有比较大的问题了,如果是RNA到不用过份担心,因为只是提示有rRNA断裂而已。
我们可以在RNA电泳完成后,把胶用薄膜手套包好(RNase的良好来源),放置5-10h后再次成像。
如果前面起初的带减弱并模糊了说明是RNA被降解,如果出现某个带或者拖影一直不见模糊,那么DNA污染的可能性就大了(由于RNA被降解,有时胶放置一阵后反而更清晰了。
)注意RNA电泳加DNA marker是很有必要的(虽然很多白痴说不需要,那是因为没有意识到具体DNA marker的作用)。
DNA marker加进去后,一来可以指示RNA电泳中可疑带的位置,方便和在胶被放置后成像的结果进行比较。
注意比如28S在某个位置,有时候,胶被放置后28S降解带会前后移动,不一定就在最初的位置形成一团降解后图象。
其次DNA marker有显示琼脂糖凝胶的功能状态的作用。
EB等染色剂会挥发造成成像没有结果,DNA在胶中也会轻微弥散,此时如果胶放置后发现上面空空的,没有带出现,不要太高兴,不一定就是RNA在胶上降解完全了。
事实上有可能是EB挥发引起胶不显色的结果,尤其有些人把胶一直泡在buffer 中的情况。
此外发现带型开始模糊也不一定就是RNA降解的结果,也可能是核酸都在弥散开。
所以DNA marker 是非常重要的。
第二部分RT-PCR一、一步法RT-PCR试剂盒子选择指南RT-PCR试剂盒最好的有Qiagen,Invitrogen,Stratagene三个品牌。
但是价格都比较昂贵,不是首选。
其中Promega是国内的首选,质量很好,价格合理,性价比最高的,投入和产出比最让人放心的产品。
Promega Access RT PCR试剂盒介绍:使用的是1.AMV Reverse Transcriptase(成功的RT必须考虑消除RNA中的多数次级结构。
为次,合成cDNA的第1条链最好在较高的温度下进行。
MmlV反转录酶能采用的最高温度是42摄氏度左右,AMV的活力在Access RT-PCR系统中可以达到48摄氏度(但是实际上大多都是45摄氏度完成RT)。
因此,使用AMV反转录酶,可以消除RNA次级结构的负面影响)2.Tfl DNA Polymerase 这个是promega比较出名的Taq酶,性价比虽然不如takara,但是也不失为一种PCR利器。
3.mRNA模板的量在1-100ng的范围内注意是mRNA的量哟。