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并20整20/12/合12 到受体细胞染色体的DNA上
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三、目的基因导入受体细胞
1.目的基因导入植物细胞
农杆菌转化法的导入过程: 构建基因表达载体转入 农杆菌
导入
稳定维持和表达 植物细胞
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三、目的基因导入受体细胞
２.目的基因导入动物细胞
常用的方法:
显微注射技术
操作程序：
a.先提纯含目的基因的表达载体
用Ca2+处理细胞→ 感受态细胞
重组表达载体DNA分子与感受态细胞混合
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感受态细胞吸收DΒιβλιοθήκη A分子7四、目的基因的检测与鉴定
1、导入目的基因后需要检测哪些方面？ 各采取什么方法？
2、什么是DNA分子探针？检测时的DNA探 针通过什么原理来检测目的基因和相 应的mRNA？
3、利用抗体－抗原杂交检测的原理是什 么？
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四、目的基因的检测与鉴定
目的基因的检测内容和方法
1.目的基因是否插入受体细胞染色体的 DNA上 检测方法: DNA分子杂交技术
DNA探针： 用放射性同位素等作标记的含有 目的基因的DNA片段。
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四、目的基因的检测与鉴定
目的基因的检测内容和方法
2.目的基因是否转录出mRNA 检测方法: 分子杂交技术
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三、目的基因导入受体细胞
转化
目的基因进入受体细胞内，并且在受 体细胞内维持稳定和表达的过程。
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三、目的基因导入受体细胞
1.目的基因导入植物细胞
常用的方法:
农杆菌转化法、基因枪法、花粉
管通道法 农杆菌的特点:
a.易感染双子叶植物和祼子植物。
b.具有趋化性。
c.Ti质粒上的T-DNA可转移到受体细胞，
b.从动物体内取出卵(受精卵）
c.显微注射仪进行显微注射
d.将含目的基因的受精卵移植到输卵
管2020/1或2/12 子宫中发育成新个体
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三、目的基因导入受体细胞
3.目的基因导入微生物细胞
原核生物的特点: 繁殖快，多为单细胞，遗传物质相对较 少。 大肠杆菌的转化过程: 增加细胞壁的透性，
与细胞膜无关
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三、目的基因导入受体细胞
1、什么是转化？ 2、目的基因导入植物细胞常用的方法 是什么？具体过程是怎样的？ 3、目的基因导入动物细胞常用的方法 是什么？基本操作程序是怎样的？ 4、目的基因导入大肠杆菌的方法是怎 样的？钙离子有什么作用？
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用DNA探针与mRNA杂交。
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四、目的基因的检测与鉴定
目的基因的检测内容和方法
3.目的基因是否翻译出蛋白质 检测方法: 抗原—抗体杂交
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四、目的基因的检测与鉴定
4、个体生物学水平的鉴定
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思考与探究
β—珠蛋白是动物血红蛋白的重要组成 成分，当它的成分异常时，动物可能患 某种疾病，如镰刀型细胞贫血症，假如 让你用基因工程的方法使大肠杆菌生产 出鼠的β—珠蛋白，想一想，应该如何 设计？
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PPT教学课件
谢谢观看
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