分子生药学医学知识培训课件
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分子生药学第一章绪论1945年,提出分子生物学一词1953年,发现DNA双螺旋模型1983年,提出聚合酶链式反应设想1985年,发明了聚合酶链式反应1995年,我国科学家黄璐琦院士首次提出了分子生药学概念1.分子生药学是在分子水平上研究中药的鉴定,质量的形成及活性成分生产的一门学科。
2.分子生药学的主要研究对象是生物来源药材。
3.分子生药学的任务:①从分子水平研究中药的鉴定②在分子水平研究中药的质量形成③中药活性成分的生物合成与生产第二章基本技术原理1变性:在过酸,过碱,加热等理化因素的作用下,DNA分子互补碱基对之间的氢键断裂,DNA双螺旋解链变成两条单链。
2.增色效应:在DNA解链过程中,260nm处的吸光度增加,增加量于解链程度呈一定的比例关系,称为DNA的增色效应3.复性:变性的DNA在适当条件下,两条互补链可以重新恢复天然的双螺旋构象。
4.退火:热变性的DNA在缓慢冷却时发生复性过程。
5.减色效应:在复性的过程中,DNA溶液的OD260值会减少。
6.去除杂质:①蛋白质和RNA的去除: 温浴结束后加入氯仿:异戊醇比为24 :1。
②多糖和淀粉的去除:如果提取物中多糖和淀粉含量高,可以利用其与DNA在不同盐溶液中的溶解性差异,去除多糖类杂质的目的。
③去除酚类物质。
在DNA提取缓冲液中加入防止分类氧化的试剂,如β-巯基乙醇,抗坏血酸,半胱氨酸,二流苏糖醇。
7.DNA质量检测纯的DNA沉淀为白色干后透明。
干后是白色,则说明蛋白质类杂质较多,若呈黄色至棕色,则含有多酚类杂质,若呈胶冻状,则含有多糖类杂质。
DNA质量检测的方法:①有紫外分光光度法(DNA在260nm处有最大吸收峰,蛋白质在280nm处有最大吸收峰)②琼脂糖凝胶电泳法。
8.聚合酶链式反应(PCR)(1)Kary Mullis在1985年提出,并在1993年获得诺贝尔奖。
(2)PCR模拟了DNA复制过程,其特异性主要体现在与靶序列两端互补的寡核苷酸引物上。
分子生药学1. 1995年首次提出分子生药学这一概念。
2. 分子生药学:生药学与分子生物学相互撞击、相互融合。
3. 分子生药学研究的主要任务:(1)中药材品种系统整理与质量标准化研究;(2)珍稀濒危药用动植物保护与资源可持续利用研究;(3)药用植物种质资源、分子标记辅助育种与新)代谢途径基因调控与中药材品质定向调控研究;(5)中药活性成分的品种的培育研究;(4生物生产研究;(6)绿色无公害药用植物培育研究。
4. RNA是基因表达的初级产物,其最核心作用是将DNA编码的信息翻译为蛋白质。
5.碱基互补配对:A与T之间两个氢键,G与C之间三个氢键。
6. DNA复制的步骤:(1)DNA的自我复制,这个过程有很多酶的参与;(2)DNA通过转录将信息传递给mRNA;(3)在真核生物中,mRNA经过修饰(主要是剪切)后,从细胞核进入细胞质;(4)信使mRNA与核糖体结合,核糖体读取mRNA的信息合成蛋白质,这步叫转译。
7. DNA复制时,大多数的原核生物和真核生物都是从固定的起始点开始,以双向等速复制方式进行DNA的复制。
8. DNA复制从起点开始向一个方向复制时,局部的DNA双链必须打开,主要靠解链酶的作用,打开后的单链还需要单链结合蛋白与其结合,在复制叉向前移动时,造成其前方DNA分子所产生的正超螺旋,必须由拓扑异构酶来解决。
9. RNA的功能:转运RNA:tRNA通过反密码子识别mRNA上相应的遗传密码;核糖体RNA:与蛋白质一起构成核糖体;信使RNA:mRNA是蛋白质合成的模板。
10. mRNA 的加工:(1)5ˊ端加帽:5ˊ端都有一个甲基鸟苷的帽子;(2)mRNA多聚腺苷酸化:大多数的真核生物的mRNA都有3ˊ端的多聚腺苷酸(A)尾巴;(3)mRNA前体(hnRNA)的拼接(把一些内含子剪掉)。
11. 蛋白质的紫外吸收:在280nm波长处有特征性吸收峰。
12. 基因是指携带有遗传信息的DNA或RNA序列,是控制性状的基本遗传单位。