奥林巴斯倒置生物显微镜CKX5+国产荧光

起 草：李敏惠 日期：2007.10.24 审 核：邹强 日 期：2007.11.07 批 准：王伦安 日期：2007.11.15生效日期：2007.12.01签 字：修订号生效日期制定（变更）原因及目的：01 2007.12.01 开始按SOP 管理 02 03 分子生物学 [ ]份 组织病理学 [ ]份 细胞培养室 [ 1 ]份 天然产物 [ ]份 抄送SPF 级动物 [ ]份精密仪器室 [ ]份准 备 室 [ ]份技术档案室 [ 1 ]份OLYMPUS IX71倒置荧光显微镜使用与维护SOP1 适用范围¾ 本SOP 适用于OLYMPUS IX71倒置荧光显微镜的使用及维护保养。

2职责¾ 操作人员：认真执行本SOP 的内容，并作好相关记录。

¾ 设备管理员：培训、指导操作人员正确执行本SOP ，同时需按本SOP 对设备进行定期维护保养并作好相应记录。

3主要性能参数 物镜转换器 六孔，带有简易防水装置聚焦行程9mm （从载物台表面起，向上7mm ，向下2mm ），同轴粗/微调节钮（微调精度1μm ，微调每圈行程100μm ），上限位锁定机构，粗调扭力矩调节器初始图像光口 上光口，更换内置1×/1.6×变倍器显微镜镜体前置操作光路选择钮，透射光强调节钮和灯开关，TTL 脉冲控制钮。

100W 透射光照明柱IX2-ILL100 照明支柱倾斜装置（30度倾角，带有减震装置）；聚光镜架（行程50mm ，带有摆动装置）；可调视场光阑，4个滤色片架（直径45毫米，厚度=6mm 或更小）透射光照明器外接电源装置 TH4-200 200V ，TH4-HS 手动控制器，重量2.2kg观察筒双目观察筒 U-BI90 瞳间距调焦范围：50～76mm ，带有屈光度调节功能，视场数22 载物台右手控制旋钮载物台IX2-SFR行程：50mm （X ）×50mm （Y ），载物台插入板可更换（直径110mm ）聚光镜 长工作距离聚光镜IX2-LWUCD5孔转盘（其中3孔直径30mm ，2孔直径38mm ），孔径光阑可调，N.A.0.55，W.D.27mm目镜 WHN10×-H 高眼点，带屈光度调节功能，视场数22 荧光照明器 IX2-RFA 直型设计，带有视场光阑模块，有滤色片滑板（2个位置，直径32mm ，厚度或更小） 反射光荧光装置荧光滤色镜转盘 IX2-RFAC 转盘上有6个位置，内置光闸光源 100W汞灯室和变压器4 主要应用范围¾透射光明场、透射光相差、反射光荧光显微观察5 启动5.1 5.2 5.36.16.2 6.36.46.5 6.6 6.76.8将光强调节钮调节到最小；打开显微镜电源，将主开关拨到“I”（开）；荧光观察时，开荧光汞灯光源，将主开关拨到“I”（开）；¾汞灯是高压激发，其内是高压，切忌频繁开关，可能的话，需观察的样本请集中在一个时间段观察，在开灯10~15分钟后开始观察效果较好。

olympus全自动显微镜的工作原理
Olympus全自动显微镜是一种高端的显微镜设备，它采用了先进的光学技术和自动化控制系统，能够实现高清晰度的图像采集和分析。

其工作原理主要包括以下几个方面：
1. 光学系统
Olympus全自动显微镜的光学系统采用了高质量的物镜、目镜和滤光片等光学元件，能够提供高分辨率、高对比度的图像。

同时，它还配备了多种不同的光源，如白光、荧光和偏光等，可以满足不同的实验需求。

2. 自动对焦系统
Olympus全自动显微镜的自动对焦系统采用了先进的图像处理算法，能够实现快速、准确的对焦。

它可以根据样品的形态和位置自动调整焦距，确保图像始终清晰可见。

3. 自动扫描系统
Olympus全自动显微镜的自动扫描系统可以根据用户的设定自动扫描样品，获取高质量的图像。

它可以实现多种扫描模式，如点扫描、线扫描和区域扫描等，可以满足不同的实验需求。

4. 自动分析系统
Olympus全自动显微镜的自动分析系统可以对采集的图像进行自动分析和处理。

它可以实现多种分析功能，如图像拼接、三维重建和粒子分析等，可以帮助用户更好地理解样品的结构和性质。

Olympus全自动显微镜是一种高端的显微镜设备，它采用了先进的光学技术和自动化控制系统，能够实现高清晰度的图像采集和分析。

它的工作原理主要包括光学系统、自动对焦系统、自动扫描系统和自动分析系统等方面。

它的出现为科学研究和工业生产带来了很大的便利，也为人们更好地认识和探索世界提供了有力的工具。

大型仪器设备购置论证报告仪器设备名称倒置荧光显微镜项目名称重点高校新型功能材料项目负责人朱伟东填表日期2017.3.7实验室管理处制填表说明1．单价10万元及以上仪器设备的申购均需填写此表，并与申购计划一起上报有关部门。

2．所在学院（部门）组织3—7人单数技术专家进行论证，并通知项目经费管理、设备管理等部门参加论证。

申请单一来源采购的需3人以上单数非本校专家参加论证；未列入全省统一论证进口产品范围的进口产品需5人以上单数非本校专家参加论证。

3．论证会由专家组组长主持，主要程序为：申购人报告、现场考察、专家质询与讨论、专家组形成论证意见并签名。

4．专家论证同意，经学院（部门）、项目经费管理部门签字并盖章后，报本科教学部（实验室管理处）网上公示一周无异议后实施。

5．此表一式1份（如设备为进口设备，请提交2份）。

1．工作条件1.1适于在气温为摄氏-40℃～＋50℃的环境条件下运输和贮存，在电源220V（10%）/50H z、气温摄氏-5℃～40℃和相对湿度85%的环境条件下运行。

1.2配置符合中国有关标准要求的插头，或提供适当的转换插座。

2．主要技术指标2.1研究级倒置显微镜2.1.1显微镜镜体，U型光路2.1.2物镜转换器：带编码6孔物镜转盘2.1.3聚焦机构：备有聚焦机构同轴粗、微调旋钮（最小微调刻度单位：1μm），行程≥10m m，粗调旋钮扭矩可调，备有上限调节2.1.4光学系统：无限远校正光学系统，齐焦距离必须为国际标准45m m2.2透射光照明装置：100W卤素灯透射光照明装置，视场可变光阑可调2.3观察镜筒：双目镜筒：瞳距可在50-76m m范围内进行调节，视场直径为22*2.4精确定位功能手动载物台，具备X Y锁定和复位功能；控制手柄扭力可调；尺寸：240m m(D)x444.5m m(W)；移动范围Y≥75m m，X≥114m m；*2.5聚光镜：5孔聚光镜；N A≥0.55；W D≥27m m。

倒置荧光显微镜X71仪器名称：奥林巴斯IX71倒置荧光显微镜型号：IX71 1、说明书（多的话单独附件）IX71 产品规格光学系统UIS2光学系统。

观察法荧光（U激励）（B，G激发）荧光荧光（U激励）微分⼲涉相位差简易偏光明场对⽐照明系统透射照明100W卤素灯照明⽩光LED照明EPI照明100W汞灯75W氙⽓灯光源，光导镜筒双⽬宽视场22数场倾⾓30°宽视⾓CT*1摇摆双⽬宽视场22数场倾⾓30°常设三⽬宽视场22场35?85°的倾斜⾓度荧光光源130⽡的卤素灯光导照明100⽡汞脂蛋⽩灯外壳和变压器100⽡汞灯和变压器75 W氙灯外壳和变压器物镜转换器电动六孔物镜转换器（DIC滑块），防⽔结构编码六孔物镜转换器（DIC滑块），防⽔结构荧光照明复眼透镜L形荧光照明L形的设计与可交换FS模块L形的荧光照明器L形的交换FS和AS模块设计荧光照明直板造型设计与视场光阑研究级倒置显微镜1.1 物镜转换器：6孔式物镜转换器，带有简易防⽔装置*1.2 聚焦机构：备有聚焦机构同轴粗、微调旋钮（最⼩微调刻度单位：1µm），⾏程9mm（向上7mm、向下2mm），粗调旋钮扭矩可调，备有上限位装置*1.3 原象光⼝：双层光路设计，共6条射⼊/射出光路，最多可同时接4 路采集原像的图像获取系统，左侧光⼝的原像到机架的距离102mm*1.4 具有中间2级放⼤率转换器：1×/1.6×1.5 透射光照明装置：100W卤素灯透射光照明装置，视场可变光阑可调；外置电源供应器1.6 观察镜筒：双⽬镜筒：瞳距可在50-76mm范围内进⾏调节，视场直径为22*1.7 ⾼精度载物台：⾏程为50 × 50mm；载物台插⼊圆板（外径110mm、内径25mm）* 1.8 万能平场半复消⾊差相差物镜，视场数≥26.54X（N.A.0.13 W.D.17 mm）；10X（N.A.0.3 W.D.10 mm）20X（N.A.0.45 W.D.6.6-7.8 mm）；40X（N.A.0.6 W.D.3.0-4.2 mm）1.9 ⽬镜：⾼眼点⽬镜，10×，视场直径：221.110 反射荧光系统1.10.1 荧光照明装置：备有视场可变光阑，滤光⽚插板*1.10.2 荧光滤⾊镜盒：备有可装⼊6个滤⾊镜⽴体镜套的转盘式滤⾊镜盒，内装光闸*1.10.3 荧光激发块：蓝⾊（B）、绿⾊（G）、紫外（U）1.10.4 荧光光源：100W超⾼压汞灯2 超⾼分辨率制冷彩⾊CCD*2.1 像素：≥1700万像素（最⾼分辨率≥4800 X 3600）*2.2 制冷系统：低于环境温度10度*2.3 测光⽅式：30%、1%平均测光，可达0.1%点测光*2.4 ⽆压缩图像采集速度：≥15 幅/秒（1600 X 1200）2.5 提供2x2、4x4的像素混合模式（binning）2.6 图像传输速度：4秒（最⾼分辨率）2.7 芯⽚规格：1/1.8英⼨彩⾊CCD2.8 ⽩平衡：⾃动/ ⼿动/ 点触式2.9 感光度：可达ISO1600*2.10 具有3CCD模式，更佳的⾊彩还原性3 图像控制分析软件3.1 采集图像：⽀持奥林巴斯多种型号专业CCD，⽀持TWAIN接⼝，界⾯直观，操作容易，使⽤户更加容易的集中精⼒关注⽣物试验过程；3.2 对图像中的直线显⽰线上灰度强度变化，从⽽反映图像中的变化特性；3.3 在图像上添加注释、箭头等功能，可以⽅便的表⽰图像中的重点关注部位；3.4 调节亮度、对⽐度、伽玛值以及灰度显⽰范围，并可以单独调节RGB各通道的亮度，⽅便地对图像添加伪彩⾊、改变⾊彩模式以及⾊阶位数等功能，可以改变图像分辨率、旋转图像等各种操作，⽀持反转、低通、⾼通、锐化等滤镜，使图像关注点和各荧光通道获得最佳的显⽰效果；3.5 对单荧光通道图⽚做⾊彩合成，⽅便显⽰多染标本的图像；*3.6 合成透射光和荧光通道图像，显⽰荧光在细胞上的定位图像；3.7 ⽅便的输⼊硬件信息即可实现添加标尺功能，从⽽显⽰图像的放⼤⽐例关系；3.8 可以做离线⽩平衡、市场平整度以及背景校正等处理，便于后期图像处理；3.9 可以对多幅视野相邻的图像做⼤图拼接，轻松获取⾼分辨率⼤视野图像；*3.10 可以实时对多幅视野相邻的图像做⼤图拼接，实时获取⾼分辨率⼤视野图像；*3.11 可以测量直线长度、曲线长度、矩形⾯积、圆⾯积、周长、⾓度等多个参数，并把测量结果输出到EXCEL，并于后期分析处理。

奥林巴斯IX73倒置荧光显微镜使用说明本内容主要分为以下几个章节:一、明场方式的使用说明二、相差方式的使用说明三、微分干涉（DIC）方式的使用说明四、荧光方式的使用说明五、软件的相关使用说明六、图片组合的使用说明七、图像拼接的使用说明八、景深扩展的使用说明九、时间序列的使用说明十、维护与保养注：荧光开关是桔黄色荧光笔标注。

拷贝数据请用新的光盘。

一、明场方式的使用说明1．打开明场光源A；2．摁下显微镜机身前B按钮，并调节光强旋钮以获得合适的光强；3．选择适当的物镜，并将聚光镜上的调节环D转至5号位即BF；4．将荧光滤光块F转至5号位即BF；5．根据需要将光路切换杆调至100%目镜或50%相机和50%目镜的位置；6．调节调焦旋钮，获得清晰的明场图像。

1．打开明场光源A；2．摁下显微镜机身前B按钮，并调节光强旋钮以获得合适的光强；3．根据需要,选择4X，10X，20X，40X中的一个物镜，并将聚光镜上的调节环D 转至相应的号位（4X物镜用PHL；10X和20X物镜用PH1；40X物镜用PH2）；4．将荧光滤光块F转至5号位即BF；5．根据需要将光路切换杆调至100%目镜或50%相机和50%目镜的位置；6．调节调焦旋钮，获得清晰的相差图像。

三、微分干涉（DIC）方式的使用说明1．打开明场光源A；2．摁下显微镜机身前B按钮，并调节光强旋钮以获得合适的光强；3．将起偏镜移动手把即C推至右侧；4．选择60X的物镜，并将聚光镜上的调节环D转至4号位；5．将DIC滑座即E向里推入至卡住；6．将荧光滤色块F转至4号位即DIC；7．根据需要将光路切换杆调至100%目镜或50%相机和50%目镜的位置；8．调节调焦旋钮，获得清晰的微分干涉图像。

1．在明场观察方式下获得清晰的图像后,调节光强旋钮至最弱,并关闭显微镜机身前B按钮(如果不再使用明场方式观察,请将明场光源A 关闭)；2．接下来请查看荧光开关,即桔黄色荧光笔标注；3．打开荧光光源A，接着打开SHUTTER开关B；4．根据需要,将荧光滤色块F转至1、2、3、6中的一个号位；5．按压一次外接控制器圆按键C打开荧光（再按压一次即会关闭），并旋转圆按键C调节荧光光强；6．根据需要将光路切换杆调至100%目镜或50%相机和50%目镜的位置；7．调节调焦旋钮，获得清晰的荧光图像。

奥林巴斯荧光显微镜发出荧光，然后在显微镜下观察物体的形状及其所在位置。

荧光显微镜用于研究细胞内物质的吸收、运输、化学物质的分布及定位等。

细胞中有些物质，如叶绿素等，受紫外线照射后可发荧光；另有一些物质本身虽不能发荧光，但如果用荧光染料或荧光抗体染色后，经紫外线照射亦可发荧光，荧光显微镜就是对这类物质进行定性和定量研究的工具之一。

奥林巴斯荧光显微镜产品参数：奥林巴斯荧光显微镜：奥林巴斯荧光显微镜_微分干涉显微镜_台式显微镜_IX73随着活体荧光蛋白和新型荧光探针在生命科学中的广泛应用，以各种荧光方法为代表的活细胞复杂实验已经成为生命科学研究者的首选。

奥林巴斯顺应这一潮流，满足广大研究者对倒置显微镜扩展性，高效性，准确性和操作简单的要求，集中一批创造性的研发人员历时2年多集合最新的机光电技术，全新设计和开发了最新一代研究级倒置显微镜IX73。

新型IX3系列做为能提供活细胞成像的高度可扩展的光学平台，其建立在雄厚的技术基础之上，拥有灵活的结构，容易利用的光路，提供高分辨，高反差的宽场图像。

一切设计基于用户的心声，科学家的工作流程需要，广泛应用在细胞生物学，神经生物学，发育生物学，分子生物学，光生物学等领域，将成为科研工作者进行更高水平的活细胞研究的最有力武器。

层式光路结构IX73根据用户需要可根据应用灵活配置单层光路和双层光路，加上其它显微镜部件，能够实现多种成像技术。

从长时间的序列成像和其它所需的前沿技术到临时的文件记录。

适用的模块包括：荧光滤色片转盘、侧端口、物镜倍率变换器等。

模块安装方便，使用户能够构建一个简单的独特灵活系统。

高NA物镜高NA相差复消色差物镜（UPLSAPO100×OPH，PLAPON60×OPH）能够实现高精确度观察，即使是在同时进行的相差观察和荧光观察过程中，也不必再更换物镜。

高NA硅油物镜（UPLSAPO30×S和UPLSAPO60×S）使用硅油作为中间介质，其折射率（ne ≈1.40），接近于活细胞组织的折射率（ne≈1.38），更有利于活细胞时间序列成像的正常观察。

OLYMPUS IX71倒置显微镜操作规程编写人：於锋时间一、目的正确使用倒置显微镜对细胞标本的形态特征进行观察，为生命科学的研究提供更多可靠的实验数据。

二、原理倒置显微镜系统（IX71系列）是在透镜成像原理基础上发展起来的显微观察系统，利用卤素灯为光源，光线经过聚光镜汇聚后透过标本，通过物镜对标本进行聚焦放大成像，最后通过目镜把物镜所成的像再次放大，从而使实验者能够清晰的分辨体外培养的细胞的形态以及内部结构，主要用于体外活细胞培养形态观察，根据实验需求配置了明场、暗场、相差、荧光等技术模块。

三、主要操作规程相差观察：1.打开主开关2.转动光路选择盘到“眼睛”位置。

3.装上观察样本。

使用10X物镜，将聚光镜转盘转到“BF”位置。

4.瞳距调节5.屈光度调节：通过螺旋目镜屈光度调节环。

6. 通过粗微调对样本准确调焦。

选择所用物镜，10X，20X，40X。

相差观察时转动聚光镜转盘到“PH”位置。

相差只能用10X，20X物镜观察和摄影。

7. 调节光线强度：明场观察时，调节孔径光栏。

相差观察时，打开孔径光栏8. 观察。

荧光观察步骤：打开荧光供电装置开关，关掉显微镜主开关。

等大约10分钟后电弧稳定。

连接UV防护板把光路选择转盘和选择杆转到“眼睛”位置。

使相应的荧光激发滤色镜进入光路根据标本不同，选择U，B，G激发。

打开激发光光闸使光通过把所用物镜推入光路10X，20X，40X。

把标本放在载物台上，对标本进行调焦，如果荧光衰退快，请将激发光光闸推入光路使用1小时后关掉电源开关。

普通明场观察：打开明场电源开关（“︱”为开，“○”为关）将样品置于载物台上将光路选择旋钮调至观察位置4.从低倍镜开始观察，相差环拨到明场（BF）位置，荧光滤色块转盘拨到“1”的位置5.调节透射光光强，调焦，找到预观察视野6.依次换到高倍镜，观察样品7.拍照时将光路选择旋钮调至相机位置关机：1. 关闭汞灯电源（注意：汞灯需使用半小时以上方可关闭，关闭半小时以后方可再次开启）2. 将透射光强调到最小，透射光选择按钮按出3. 关闭明场电源开关4. 将镜头转到低倍镜，取出样品，若使用过油镜用干净的擦镜纸擦拭镜头5. 确认数据已经保存，关闭软件6. 使用光盘拷贝数据（禁止使用移动储存设备拷贝数据）7. 关闭电脑，登记使用时间、荧光数字等使用情况倒置IX71显微镜透射光明场观察步骤观察相差时，要使用与相差物镜放大倍数相匹配的相差环板。

1、该显微镜管理人：汪安泰。

使用者事先请与管理人联系，由管理人安排使用。

初次使用者事先要经过培训，擅自开机造成设备损坏的，将严肃处理。

2、该显微镜有2套拍照系统；传统胶卷拍照和数码拍照。

根据需要可更换相应的附件。

3、该镜可作为明视场显微镜使用，也可作为荧光显微镜使用，根据需要，做相应的附件连接，开启相应的电源。

禁止乱调设置，以免影响他人正常使用。

4、作为明视场显微镜使用；A、接通电源后，打开显微镜底座前的电源开关，按光亮需要调节底座右侧的滑竿。

B、根据需要，调节底座光栅和聚光器光栅及其高度，可获得最佳的图象效果。

C、需要图片，要把镜体上的相应拉杆拉到绿线位子。

按下相应附件上的照相按扭。

5、作为荧光显微镜使用；A、先关闭荧光通道，再打开荧光激发器电源，等待15分钟。

B、等待期间，打开显微镜光源，找到需要观察的样品，选用合适的物镜，调整焦距。

C、关闭显微镜光源，打开荧光通道。

D、需要图片，要把镜体上的相应拉杆拉到绿线位子。

按下相应附件上的照相按扭。

注意事项：1、不要污染物镜镜头。

一旦污染，先用擦镜纸擦除一遍，再用显微镜专用擦洗液擦洗，最后用镜纸再擦一遍。

用油镜镜头后，以同样方法擦洗。

2、关闭显微镜电源前，先把光源调到最低。

3、用过荧光镜的，注意清洁载物台，防止有害有毒致癌物污染。

4、结束工作，关闭所有电源，清洁工作台和房间。

5、发现漏电和其他故障，及时报告汪安泰老师，不要自行处理。

荧光显微镜：是利用一定波长的光使样受到激发，产生了不同颜色的荧光，以用来观察和分辨标本中某些物质及其性质。

一种显微镜他是利用人眼不可见的短波——紫外线，因而就大大提高了物镜的分辨率，图像与背静的反差亦甚为明显。

一准备工作高压卤灯的对中。

1. 打开开关。

2. 指示灯亮后，按下启动按钮2-3秒后点燃卤灯注意：一般灯两2-3分钟后，即能进行显微镜观察工作，但卤灯光源至完全稳定约需15分钟。

3. 除下物镜转换器上的一个物镜，并在这位置上装上对中工具，使对中工具进入光路。

奥林巴斯荧光显微镜操作注意事项显微镜如何操作操作注意事项：1.开始操作前，确保显微镜的电源已经连接，并且已经打开。

检查显微镜是否正常工作，所有按钮和旋钮是否灵活可操作。

2.在操作前，确保实验区域干净整洁，并使用灭菌消毒剂清洁工作台、镜头和显微镜的工作表面，以防止污染样品。

3.在操作前，确保要观察的样品已经准备好。

样品应当被放置在玻璃片上，并使用适当的显微镜载玻片固定，以避免样品移动和镜头的振动。

4.在放置样品前，注意在样品上方关闭显微镜的遮光门，以减小外部环境光的影响。

5.在操作过程中，应避免触摸镜头或玻璃片，以免污染样品或损坏镜头。

6.使用镜头时，应注意调节放大倍率、焦距和光源亮度。

调整这些参数，可以获得清晰、锐利的图像。

7.在调节光源亮度时，应避免将亮度调得太高。

过高的亮度可能会烧毁样品，并对观察者的视力产生损害。

8.在更换荧光滤光片时，应注意使用手套，并小心不要触摸滤光片的表面，以免留下指纹或污染滤光片。

9.操作结束后，切记关闭显微镜的电源，并清洁显微镜的工作表面，确保下次使用前的干净。

显微镜操作步骤：1.开始操作前，确保显微镜的电源已连接并打开。

检查所有按钮和旋钮是否灵活可操作。

2.将样品放置在载玻片上，并用固定剂固定样品。

3.将载有样品的载玻片放置在显微镜的样品台上，并均匀地调整玻璃片的位置，使其垂直于镜头。

4.通过旋转调节镜头的焦距和放大倍率，使图像清晰明确。

5.改变荧光显微镜的滤光片以选择适当的荧光激发和发射波长。

确保滤光片紧密安装，以避免松动和泄漏。

6.调节荧光显微镜的光源亮度，以保证光线足够强度，但不过亮。

7.观察样品时，可以通过调整镜头的焦距和移动样品台来获得清晰的图像。

如果需要调整样品的位置，可以使用显微镜的移动台或样品移动装置。

8.使用标尺或比例尺等工具，对样品进行测量和尺寸估算。

9.在操作结束后，关闭显微镜的电源，并清洁显微镜的工作表面。

以上就是关于奥林巴斯荧光显微镜操作注意事项和如何操作的详细步骤。