淋巴细胞表面抗原检测-20141113硕士班
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人B淋巴细胞表面抗原酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。
检测范围: 96T5 pg/ml - 125pg/ml使用目的:本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中B淋巴细胞表面抗原含量。
实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人B淋巴细胞表面抗原水平。
用纯化的人B淋巴细胞表面抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入B淋巴细胞表面抗原,再与HRP标记的B淋巴细胞表面抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的B淋巴细胞表面抗原呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人B淋巴细胞表面抗原浓度。
标本要求1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。
若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
操作步骤1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。
在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。
加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7.温育:操作同3。
8.洗涤:操作同5。
9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
淋巴细胞检测体检表格:淋巴细胞检测检测项目:1. 淋巴细胞计数:检测淋巴细胞在血液中的数量。
2. 淋巴细胞亚群分析:检测淋巴细胞的不同亚群比例。
3. 淋巴细胞功能测定:评估淋巴细胞的功能状态。
检测目的:通过淋巴细胞检测,评估患者的免疫功能、炎症反应和潜在疾病风险,帮助诊断、干预和监测疾病的进展。
患者信息:1. 姓名:_________________2. 性别:_________________3. 年龄:_________________4. 就诊日期:_________________5. 临床诊断:_________________(填写具体病症或疾病)检测结果:1. 淋巴细胞计数(单位:10^9/L):_________________(正常参考范围:1.0-3.5)注释:根据淋巴细胞的数量,评估免疫功能状态。
数量偏低可能表示免疫功能低下,数量偏高可能表示潜在感染或免疫系统异常。
2. 淋巴细胞亚群分析(单位:%):- CD3+淋巴细胞:_________________(正常参考范围:55-85)- CD4+淋巴细胞:_________________(正常参考范围:30-60)- CD8+淋巴细胞:_________________(正常参考范围:20-40)- CD4+/CD8+比值:_________________(正常参考范围:0.6-2.5)注释:根据淋巴细胞的亚群比例,评估免疫功能的特定方面。
亚群比例异常可能与自身免疫性疾病、感染性疾病或肿瘤相关。
3. 淋巴细胞功能测定:- 淋巴细胞转化试验(单位:SI或cpm):_________________(正常参考范围:>1000)- 淋巴细胞制造干扰素γ试验(单位:pg/mL):_________________(正常参考范围:>100)注释:通过淋巴细胞的功能测定,评估免疫反应和细胞介导的免疫应答。
功能异常可能与感染、癌症或免疫系统疾病有关。
淋巴细胞亚群各项指标解读淋巴细胞,也称为白细胞,是人体内一种非常重要的细胞。
它们可以提供免疫防御,识别病原体,消灭病毒和来源的易感性,并帮助保持人体较佳的健康状态。
因此,对淋巴细胞的检测成为了医学界对人体健康状况研究的重要一环。
淋巴细胞亚群各项指标是检测淋巴细胞形态学和功能的重要指标,它可以反映出人体免疫力的水平。
淋巴细胞亚群是指在人体血液循环中的淋巴细胞的不同种类。
它们的名字来源于它们具有的形态特征,包括淋巴细胞B,淋巴细胞T,单核细胞,嗜中性粒细胞和嗜酸性粒细胞等。
它们的特征可以通过血液分析手段来进行检测,这些特征也是淋巴细胞亚群检测的主要内容。
淋巴细胞亚群中各种细胞数量的检测可以反映人体免疫力以及疾病的状况,其中最主要的有淋巴细胞B、淋巴细胞T和单核细胞三种指标。
淋巴细胞B,是一种由前体淋巴细胞分化出的细胞,它们在人体的免疫反应中起着核心作用,其数量正常值为5%-20%;淋巴细胞T,是由淋巴细胞分化出的一种细胞,它们可以分解病原体及其具有毒性的物质,正常值为20%-50%;单核细胞,是一种具有对抗病原体能力的淋巴细胞,正常值为2%-8%。
这三种指标以外,还有嗜中性粒细胞和嗜酸性粒细胞两种指标。
嗜中性粒细胞是一种具有溶酶体的细胞,它们主要将病原体的外壳破坏,其数量正常值为48%-86%;嗜酸性粒细胞是对病原体的一种抗性,其数量正常值为1%-7%。
此外,淋巴细胞亚群的检测还可以检测出淋巴细胞的功能活性,它们包括趋化因子,趋化受体,转录因子,抗原受体,免疫球蛋白,慢性炎症因子和抗病毒因子等。
这些指标可以反映出人体对病原体的免疫活性,及时发现疾病,提高治疗效果。
淋巴细胞亚群各项指标是检测淋巴细胞形态学和功能的重要指标,它们可以反映出人体免疫力水平和抗菌病毒能力,为提高治疗效果提供参考。
因此,建议在诊断时应定期检测淋巴细胞亚群各项指标,及时发现疾病症状,提高治疗效果。
为了提高检测准确度,针对淋巴细胞亚群各项指标检测要实施一定的控制措施,并掌握正确的操作实践。
淋巴细胞免疫表型检测及其统计学分析崔巍;朱陵群;赵明镜;王硕仁【期刊名称】《中国免疫学杂志》【年(卷),期】2001(017)010【摘要】目的:以标准化质控及正确的统计学分析方法确定淋巴细胞免疫表型参考值.方法:用SimultestTM IMK-Lymphocyte Kit荧光抗体对93例健康中国成人血液进行双标染色,以FACS Calibur流式细胞仪进行分析,SimulSET获取数据并分析结果.符合质控标准的数据汇总后进行统计学分析.结果:CD+3、CD+3CD+4、CD+3CD+8细胞呈正态分布,CD-3CD+19、CD-3CD+16和/或CD+56细胞及CD+3CD+4/CD+3CD+8比值呈偏态分布.CD+3、CD+3CD+4、CD+3CD+8细胞以正态分布法确定95%可信区间参考值,分别为:49.28%~80.52%、25.29%~48.11%、11.93%~44.77%;CD-3CD+19、CD-3CD+16和/或CD+56细胞及CD+3CD+4/CD+3CD+8比值以百分位数法确定95%可信区间参考值,分别为:4.74%~19.84%、10.63%~42.86%、0.65~3.05.结论:建立正常参考值应综合考虑使用正态分布法与百分位数法.建议以标准化质控及正确的统计学分析方法确定参考值,使得同种族、不同地区的实验室应用相同试剂、相同仪器所获取的参考值具有良好的一致性.【总页数】3页(P538-540)【作者】崔巍;朱陵群;赵明镜;王硕仁【作者单位】北京中医药大学东直门医院中医临床重点学科实验室,北京100700;北京中医药大学东直门医院中医临床重点学科实【正文语种】中文【中图分类】R392-33【相关文献】1.恶性肿瘤患者外周血淋巴细胞免疫表型检测的临床意义 [J], 章梁君;钟锦莎;钟辉秀;刘伟平;殷明刚;杨新春2.不明复发性流产封闭抗体及淋巴细胞免疫表型检测对淋巴细胞主动免疫治疗效果的评估价值 [J], 伍萍芝;蒙瞻瞻;严提珍3.流式细胞仪检测缺铁性贫血患者淋巴细胞免疫表型的探讨 [J], 杨红;孟岩;王超4.外周血淋巴细胞免疫表型检验评价恶性肿瘤患者细胞免疫功能的价值分析 [J], 孙翔;拓红晓5.头颈部原发性淋巴结外非霍奇金氏淋巴瘤临床和细胞免疫学表型分析 [J], 徐志文;蒋一强;谭颂华因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
皮肤淋巴检验报告引言皮肤淋巴检验是一种常见的检查方法,用于评估皮肤淋巴系统的功能和状况。
它通过观察皮肤上的淋巴结、淋巴管和淋巴细胞,可以提供关于淋巴系统是否正常工作的重要信息。
本报告旨在介绍皮肤淋巴检验的基本原理、检测方法以及结果的解读。
方法皮肤淋巴检验通常使用光学显微镜进行观察和分析。
以下是具体的检验步骤:1.准备样本:首先需要准备一个皮肤淋巴的标本。
这可以通过切除皮肤组织或者采集淋巴液样本来获得。
2.固定和染色:标本被固定在玻璃片上,并且被染色。
染色的目的是为了增强细胞和组织的对比度,便于观察。
3.显微镜观察:将标本放入显微镜下,使用不同倍数的镜头进行观察。
通过观察细胞数量、形态和排列方式等特征,评估淋巴系统的状态。
4.数据分析:根据观察到的细胞和组织情况,进行数据分析。
比较不同细胞类型的比例和数量,判断淋巴系统是否正常。
结果解读根据皮肤淋巴检验的结果,可以得出以下几个方面的评估:1.淋巴结状态:淋巴结是淋巴系统的重要组成部分,它们承担着过滤淋巴液中的有害物质和保护机体的功能。
通过观察淋巴结的大小、形态和细胞排列方式等特征,可以评估淋巴结的功能是否正常。
2.淋巴细胞分布:淋巴细胞是淋巴系统中的主要细胞类型,它们具有免疫功能。
通过观察淋巴细胞在皮肤中的分布情况,可以评估免疫功能是否正常。
正常情况下,淋巴细胞应该均匀分布在皮肤中。
3.淋巴细胞数量和比例:不同类型的淋巴细胞在皮肤中的数量和比例也是评估淋巴系统功能的重要指标。
比如,淋巴细胞的数量过多可能意味着免疫系统处于亢奋状态,而淋巴细胞比例的改变则可能暗示某些疾病的存在。
结论皮肤淋巴检验是一种无创、简单而有效的检查方法,可以提供关于淋巴系统功能和状况的重要信息。
通过观察淋巴结、淋巴细胞的形态和排列方式,以及分析淋巴细胞的数量和比例,可以评估免疫系统是否正常工作。
然而,需要注意的是,本检验只是一种辅助手段,结果应结合其他检查结果和临床症状来综合评估。
B淋巴细胞表面膜免疫球蛋白测定【基本信息】[简要描述]·B淋巴细胞表面膜免疫球蛋白(surface membrane immunoglobulin, SmIg)是B淋巴细胞的特征性表面标志,其类别随B淋巴细胞发育阶段不同而变化。
·SmIg测定主要用于检测外周血B淋巴细胞的百分率,有助于免疫缺陷病、淋巴细胞增生性疾病的病因诊断及疗效观察,还可判断B淋巴细胞的发育程度。
[其他名称]B细胞抗原受体、BCR、SmIg【测定方法及参考值范围】免疫荧光法(以携带该标志的细胞百分数表示):参考值范围见下表分类参考值范围SmIg☆+☆细胞总数均值21%(16%-28%)SmIgG☆+☆细胞均值7.1%(4%-13%)SmIgM☆+☆细胞均值8.9%(7%-13%)SmIgA☆+☆细胞均值2.2%(1%-4%)SmIgD☆+☆细胞均值6.2%(5%-8%)SmIgE☆+☆细胞均值0.9%(0-1.5%)【结果及临床意义】[增高]◇疾病因素·慢性淋巴细胞性白血病·多毛细胞白血病·巨球蛋白血症注释:以SmIgM+细胞增高明显。
[减低]◇疾病因素·性联丙球蛋白血症·严重联合免疫缺陷病·恶性肿瘤【样本准备与采集】[样本类型]血液[容器]绿帽真空管、浅绿帽真空管[准备与采集]肝素抗凝静脉血2ml,或绿帽或浅绿帽真空管静脉采血。
【注意事项】·B淋巴细胞简称B细胞,由骨髓中淋巴样前体细胞分化而来,是体内唯一能产生抗体的细胞。
B淋巴细胞表面有表面抗原与表面受体两大类。
表面抗原包括CD19、CD20、CD21、CD22和CD40等;表面受体包括B细胞抗原受体(BCR)、细胞因子受体(CKR)、补体受体(CR)与Fc受体等。
·将荧光标记的抗不同类型Ig的单克隆抗体进行检测,可将B淋巴细胞分为SmIgG、SmIgM、SmIgA、SmIgD、SmIgE五种类型,若B淋巴细胞膜表面仅表达IgM则为未成熟的B细胞,而同时表达IgM和IgD则为成熟B淋巴细胞。
细胞表面抗原的定量测定方法
周春喜
【期刊名称】《标记免疫分析与临床》
【年(卷),期】2002(009)004
【摘要】介绍了用流式细胞仪定量测定细胞表面抗原的方法, 测定了淋巴细胞表面CD4分子的数量. 该法操作简单, 结果可靠.
【总页数】2页(P217-218)
【作者】周春喜
【作者单位】解放军总医院医学实验测试中心,北京,100853
【正文语种】中文
【中图分类】R318.6
【相关文献】
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刘玲君;陈亮;翟红梅;白素琴
5.解淀粉芽孢杆菌实时荧光定量PCR测定方法的建立及其在豆粕发酵中的应用 [J], 杨湘黔;崔京春;曾诗娴;成丽;张珂彬;胡晓红;鲍雅静
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血细胞凝集法测定细胞表面抗原
Kokki.,D;缪西
【期刊名称】《国外医学:临床生物化学与检验学分册》
【年(卷),期】1991(012)002
【摘要】单克隆抗体技术问世以来,应用免疫学技术测定细胞表面蛋白的方法就显得更加重要了。
本文介绍一种新型、简易、准确,并能快速地对细胞表面标记物进
行半定量的间接血细胞凝集法。
并可进行淋巴细胞亚群签别和筛选杂交瘤的细胞株。
方法:一、制备被检测的细胞。
T 淋巴细胞系Molt 3和Jurkat 在含2mML-谷氨酰胺,10%小牛血清(FCS)50/μg/ml 庆大霉素的RPMI 1640培养基中在37℃,湿压为95%,含5% CO_2的情况下悬浮培养。
【总页数】2页(P73-74)
【作者】Kokki.,D;缪西
【作者单位】不详;不详
【正文语种】中文
【中图分类】R446.62
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1.淋巴结结核患者外周血细胞表面抗原的测定及其亚群研究 [J], 朱慧芬;洪淑云
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荧光素标记检测乙型肝炎病毒表面抗原特异性杀伤性T淋巴细胞方法的探讨吴婷;陈敏;欧山海;何水珍;程通;张军;夏宁邵【期刊名称】《病毒学报》【年(卷),期】2005(21)2【摘要】用绿色荧光前体化合物CalceinAM标记靶细胞,经过与杀伤性T淋巴细胞(CTL)效应细胞数小时的孵育,通过分析培养上清中的荧光强度检测CTL效应。
通过对一系列标记条件的研究:不同浓度CalceinAM标记靶细胞、不同洗涤缓冲液、不同标记细胞浓度、不同洗涤次数、不同裂解液配方,确定CalceinAM荧光素标记法的最佳条件。
用该方法检测乙型肝炎病毒表面抗原的DNA疫苗免疫Balb/c小鼠对P815S细胞的CTL效应,E/T比为10时,杀伤效率接近饱和,达到65%。
通过荧光显微镜直接观察杀伤后的P815S细胞,细胞破裂程度与计算出的杀伤效率有一定相关性。
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正常人及肺癌患者淋巴结细胞六种标志抗原测定谈立松;王雄彪;高奇蓉;吴直江【期刊名称】《第二军医大学学报》【年(卷),期】1995(16)6【摘要】正常人及肺癌患者淋巴结细胞六种标志抗原测定谈立松,王雄彪,高奇蓉,吴直江关键词肺肿瘤;淋巴细胞;抗原测定;患者中国图书资料分类法分类号R734.203参与细胞免疫的淋巴细胞是由不同抗原标志、行使不同免疫功能的多种亚群组成。
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