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错配修复蛋白和p53蛋白表达与结直肠癌的临床病理关系及其相关性赵喜连;郗彦凤;白文启;吴月琴;步鹏【摘要】目的探讨错配修复蛋白(mismatch repair protein,MMRP)及p53蛋白在结直肠癌(colorectal cancer,CRC)中的表达,进而分析微卫星不稳定(microsatellite instability,MSI)、p53与CRC临床病理特征的关系及其相关性.方法采用组织芯片及免疫组化法对980例CRC中4种MMRP及p53进行检测,将4种MMMP中的1种及以上表达缺失定为MSI组,全部阳性表达定为微卫星稳定(microsatellite stable,MSS)组.结果 (1)MMRP表达缺失率为11％,MLH1 、PMS2、MSH2及MSH6的表达缺失率分别为7.3％、7.1％、2.0％及1.9％;其中共同缺失表达类型为MLH1-PMS2、MSH2-MSH6者分别为52例、14例,统计分析结果显示二者均呈正相关(ra=0.712),4种蛋白均缺失者3例.(2) p53阳性率为59.1％.(3)MSI与患者年龄、肿瘤部位、大小、组织学类型、淋巴结转移、临床分期及Ki-67有关(P＜0.05).(4)p53与组织学类型、大体分型、浸润深度、远处转移及Ki-67有关(P＜0.05).(5)MSI与p53呈负相关(rs=-0.118).结论 MLH1、PMS2缺失表达较MSH2和MSH6多见.MLH1与PMS2、MSH2与MSH6常常协同表达或缺失.MSI及p53与CRC临床病理特征关系密切,对预测CRC的风险、恶性程度的评估等具有指导意义.MSI与p53表达呈负相关,提示二者可能参与CRC的不同发生、发展过程.【期刊名称】《临床与实验病理学杂志》【年(卷),期】2016(032)004【总页数】6页(P370-374,379)【关键词】结直肠肿瘤;错配修复基因;p53;MSI【作者】赵喜连;郗彦凤;白文启;吴月琴;步鹏【作者单位】山西医科大学研究生学院,太原030001;山西医科大学附属山西省肿瘤医院病理科,太原030013;山西医科大学附属山西省肿瘤医院病理科,太原030013;山西医科大学附属山西省肿瘤医院病理科,太原030013;山西医科大学附属山西省肿瘤医院病理科,太原030013【正文语种】中文【中图分类】R735.3结直肠癌(colorectal cancer, CRC)是全球范围内最常见的恶性肿瘤之一，位居第3位[1]。
P53和PCNA 蛋白在大肠癌中的表达及意义【关键词】大肠肿瘤；免疫组织化学；P53蛋白；PCNA蛋白大肠癌是我国死亡率较高的恶性肿瘤之一，大肠癌患者主要死亡原因是术后转移。
临床上尚无可靠的方法预测预后，因此探讨大肠癌转移的分子机制，寻找与大肠癌转移相关的生物标记是大肠癌基因研究和临床研究的重要课题之一。
作者应用免疫组化技术对P53、PCNA 蛋白进行检测，探讨它们在大肠癌中的临床病理意义及其对大肠癌的预后判断的临床价值。
1材料与方法1.1标本来源全部病例选自2005—2008年我院大肠癌根治术切除标本共51例，其中男性26例，女性25例，年龄22～80岁，平均年龄（58±17.68）岁。
分化程度和转移情况为：高分化19例，中分化19例，低分化13例；伴淋巴结转移19例，伴肝脏转移2例。
所有材料按照全国大肠癌协作组制定的标准，由两名病理医生复查确定。
1.2试剂免疫组化试剂盒：鼠抗人PCNA蛋白抗体（即用型），鼠抗人P53蛋白抗体（即用型），均购自福州迈新生物技术开发公司。
1.3方法采用免疫组化（SP法）检测P53及PCNA蛋白，阳性对照由试剂盒提供，阴性对照由PBS代替一抗，实验步骤按说明书操作。
按全国大肠癌协作组1986年标准进行组织学分类［1］：高分化(管状腺癌Ⅰ级及乳头状腺癌)，中分化(管状腺癌Ⅱ级及粘液腺癌)，低分化(管状腺癌Ⅲ级及印戒细胞癌及未分化癌)。
以细胞核内出现棕黄色颗粒为P53、PCNA阳性细胞，对染色阳性细胞,高倍镜下选择10个视野计数，每个视野计数100个肿瘤细胞，PCNA阳性细胞数占肿瘤细胞数10%～25%为(+)，26%～50%为(++)，51%～75%为(+++)，>75%为(++++)；P53阳性细胞数占肿瘤细胞数＜10%为(-)，10%～25%为(+)，26%～50%为(++)，51%～75%为(+++)，＞75%为(++++)；间质纤维组织增生(有或无)和淋巴细胞浸润(-、+、++、+++)。
P53、PCNA、ki-67在大肠癌中的表达与临床意义黄志伟;蔡雪彦【摘要】目的检测P53、PCNA、ki-67在大肠癌中的表达及其与大肠癌及临床病理因素的关系,为大肠癌临床的诊疗提供一定的依据.方法应用免疫组化法(SP法)检测53例大肠癌中P53(突变型)、PCNA、ki-67蛋白的表达.结果 P53蛋白、PCNA蛋白、Ki-67蛋白在大肠癌组织中的表达分别为67.92%、100%、86.79%,与在相对应的正常大肠粘膜组织中的表达(分别为0%、7.14%、10.71%)相比,差异有显著统计学意义(P＜0.01).ki-67蛋白的表达和患者性别有相关性.此外,PCNA 蛋白和ki-67蛋白表达呈正相关.在大肠癌中P53蛋白与PCNA蛋白、ki-67蛋白之间表达无相关性.结论 1.P53、PCNA和ki-67蛋白在大肠癌中的过表达可能与大肠癌的发生发展密切相关.2.在大肠癌组织中,PCNA、ki-67和P53之间的表达均无明显相关,提示大肠癌发生过程中肿瘤细胞的增殖与抑癌基因突变是相对独立的致病机制.3.PCNA表达与ki-67表达呈显著正相关,而PCNA表达与大肠癌患者性别无关,ki-67表达则与大肠癌患者性别有关,提示ki-67在大肠癌不同性别患者间表达差异受ki-67不同于PCNA的细胞周期影响.【期刊名称】《中国组织化学与细胞化学杂志》【年(卷),期】2013(022)006【总页数】5页(P508-512)【关键词】P53;PCNA;ki-67;免疫组化;大肠癌【作者】黄志伟;蔡雪彦【作者单位】广东省中山市人民医院病理科,528403;广东省中山市人民医院病理科,528403【正文语种】中文【中图分类】R735.3大肠癌是常见的恶性肿瘤之一，是多种致癌因素作用下发生的恶性病变。
我国大肠癌发病率近些年以较快的速度增加，尤以城市为甚，我国年轻人直肠癌发病率有增高趋势，且预后较差。
本研究应用免疫组织化学法检测P53（突变型）、PCNA、ki－67在53例大肠癌中的表达，研究其与大肠癌及临床病理因素的关系，旨在为大肠癌临床的诊疗提供一定的依据。
YB-1和P53蛋白在结直肠肿瘤中的表达及意义刘露露;房新志;郭云泉;王晓璐;杨丽丽【期刊名称】《世界华人消化杂志》【年(卷),期】2012(20)8【摘要】目的:探讨YB-1和P53蛋白在结直肠肿瘤不同发展阶段表达水平的差异及其与结直肠癌临床病理特征的关系.方法:采用免疫组织化学方法检测结直肠20例正常组织、30例低级别上皮内瘤变组织、30例高级别上皮内瘤变组织和50例癌组织中YB-1和P53蛋白的表达.结果:YB-1蛋白在结直肠正常组织(NCM)、低级别上皮内瘤变组织(LGIN)、高级别上皮内瘤变组织(HGIN)和癌组织(CRC)中的强阳性率分别为0%、76.7%、80.0%、80.0%,低级别、高级别上皮内瘤变组织和癌组织中的强阳性表达率均与正常组织比较差异有统计学意义(P<0.05),且在癌组织中其强阳性表达与淋巴结转移和TNM分期有关(P<0.05);P53蛋白在结直肠正常组织、低级别上皮内瘤变组织、高级别上皮内瘤变组织、癌组织中表达分别为0%、6.7%、40.0%、60.0%,高级别上皮内瘤变组织和癌组织中其表达率均与正常组织和低级别上皮内瘤变组织比较差异有统计学意义(P<0.05),其在癌组织中的表达与分化程度、淋巴结转移和TNM分期有关(P<0.05).在癌组织中YB-1和P53的表达呈正相关性(r=0.306,P<0.05).结论:YB-1和P53蛋白在结直肠癌的发生发展、转移中起重要作用,YB-1和P53蛋白的联合检测可能为判断结直肠癌恶性程度和转移提供重要参考.【总页数】5页(P703-707)【关键词】结直肠肿瘤;YB-1;P53;免疫组织化学【作者】刘露露;房新志;郭云泉;王晓璐;杨丽丽【作者单位】新疆医科大学附属肿瘤医院病理科【正文语种】中文【中图分类】R739.6【相关文献】1.survivin、p53蛋白在结直肠肿瘤中的表达及其临床意义 [J], 陈渭;智发朝2.乳腺癌中Ki-67、P53、YB-1蛋白的表达及临床意义 [J], 谢文秀;李自健;游俊浩;张帆;杨俊兰3.c-erbB-2 、bcl-2和p53在结直肠肿瘤中的表达及其临床意义 [J], 薄挽澜;胡凤丽;翟博;姜爱民4.原代培养过程中壳聚糖衍生物对CTCF/YB-1/C-myc和p53蛋白表达的影响 [J], Mohammad Syaiful Bahari Abdull Rasad;Ahmad Sukari Halim;Kamaruddin Hashim;Ahmad Hazri Abdul Rashid;Lim Chin Keong;Shaharum Shamsuddin5.Maspin、P53、Skp2蛋白在结直肠肿瘤中的表达及其意义 [J], 倪江涛;易永芬;石海鹏因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
p53蛋白表达在直肠肿瘤中病理意义目的研究p53蛋白在结直肠肿瘤中的表达及病理意义。
方法采用免疫组织化学法检测p53在33例结直肠绒毛状腺癌、32例绒毛状腺瘤、15例非肿瘤黏膜组织中的表达。
结果p53在结直肠绒毛状腺癌、绒毛状腺瘤、非肿瘤黏膜的阳性表达率分别为：75.7%（25/33）、59.4%（19/32）、13.3%（2/15）。
p53蛋白表达强度：结直肠绒毛状腺癌＞绒毛状腺瘤＞非肿瘤黏膜（■从大至小），其中结直肠绒毛状腺癌和绒毛状腺瘤的95%可信限下界均高于非肿瘤的上界，差异有统计学意义。
结论p53基因突变及其产物p53蛋白的检测，用于早期发现结直肠腺癌具有重要的病理诊断意义。
[Abstract] Objective To study the pathological significance of p53 protein expression in rectal cancer. Methods Immunohistochemical techniques were used to detect the expression of p53 protein in 33 cases of colorectal papillary adenoma, 32 cases of villous adenoma and 15 cases of non-tumor mucosa tissue. Results The ratios of positive expression of p53 protein in colorectal papillary adenoma, villous adenoma and non-tumor mucosa were 75.7% (25/33), 59.4% (19/32) and 13.3% (2/15), respectively. The intensity order of the expression of p53 protein was colorectal papillary adenocarcinoma > villous adenomas > non-tumor mucosa (R from big to small). The lower limits of 95% confidence interval of R values in both colorectal papillary adenoma and villous adenoma were higher than the upper limit in non-tumor mucosa, and there were significant differences. Conclusion The detections of p53 gene mutation and p53 protein contribute to pathological diagnosis of early colorectal adenocarcinoma.[Key words] p53; Colorectal neoplasms; Immunohistochemistry; Protein自20世纪80年代中期以来，抑癌基因的重要作用得到了广泛研究和深入探讨。
·病理分析·2012年7月第19卷第20期自20世纪80年代中期以来，抑癌基因的重要作用得到了广泛研究和深入探讨。
p53是大肠癌发生中最常变化的基因[1]，本文对p53蛋白在直肠肿瘤中的表达情况进行研究，以期进一步揭示p53蛋白在直肠肿瘤发生发展中的作用及意义。
1资料与方法1.1一般资料收集通城县人民医院病理科2006～2011年手术及肠镜活检的部分标本，其中，结直肠绒毛状腺癌33例、结直肠绒毛状腺瘤32例，非肿瘤性黏膜15例，所有患者术前均未作放疗、化疗及免疫治疗。
1.2免疫组化染色及方法1.2.1p53单克隆抗体，S-P免疫组化试剂盒均购自福州迈新公司。
1.2.2组织化学检测：采用S-P(streptavidin-perosidase，链霉菌亲和素-过氧化物酶)免疫组化方法。
步骤：（1）石蜡切片4μm 厚，常规脱蜡水化后，用PBS（即磷酸缓冲液）（pH=7.4）冲洗3次，每次5min；（2）加50μL过氧化酶阻断溶液，室温下孵育10min；（3）PBS（pH=7.4）冲洗3次，每次5min；（4）加50μL 非免疫动物血清，室温下孵育5min，PBS冲洗一次；（5）加50μL第一抗体，室温下孵育60min；（6）PBS（pH=7.4）冲洗3次；（7）加生物素标记的第二抗体，室温下孵育10min；（8）PBS（pH=7.4）冲洗3次，每次5min；（9）加50μL链亲和素-过氧化酶溶液，室温下孵育10min；（10）PBS（pH=7.4）冲洗3次，每次5min；（11）加2滴新鲜配制的DAB溶液显色；（12）自来水冲洗，苏木素复染，中性树胶封固。
用PBS缓冲液代替一抗作为阴性对照。
1.3p53染色结果的判定细胞核内出现棕黄色颗粒为染色阳性，认为p53阳性。
如果非肿瘤细胞或核周围着色，不认为p53阳性。
当少于10%的肿瘤细胞着色时，认为免疫组化结果阴性；当超过10%的肿瘤细胞着色时，认为免疫组化阳性。
1.4统计分析数据处理采用SPSS13.0软件，率的比较采用卡方检验，Ridit分析。
P<0.05为差异有统计学意义。
2结果2.1结直肠绒毛状腺癌和绒毛状腺瘤中p53蛋白表达强度和表达率p53在结直肠绒毛状腺癌、绒毛状腺瘤、非肿瘤黏膜的阳性表达率分别为：75.7%（25/33）、59.4%（19/32）、13.3%（2/15）。
结直肠绒毛状腺癌组织p53阳性表达率明显高于结直肠绒毛状腺瘤和非肿瘤黏膜（P＜0.05），见表1。
p53蛋白表达在直肠肿瘤中病理意义李金淼周桂台湖北省通城县人民医院病理科，湖北通城437400[摘要]目的研究p53蛋白在结直肠肿瘤中的表达及病理意义。
方法采用免疫组织化学法检测p53在33例结直肠绒毛状腺癌、32例绒毛状腺瘤、15例非肿瘤黏膜组织中的表达。
结果p53在结直肠绒毛状腺癌、绒毛状腺瘤、非肿瘤黏膜的阳性表达率分别为：75.7%（25/33）、59.4%（19/32）、13.3%（2/15）。
p53蛋白表达强度：结直肠绒毛状腺癌＞绒毛状腺瘤＞非肿瘤黏膜（R从大至小），其中结直肠绒毛状腺癌和绒毛状腺瘤R的95%可信限下界均高于非肿瘤的上界，差异有统计学意义。
结论p53基因突变及其产物p53蛋白的检测，用于早期发现结直肠腺癌具有重要的病理诊断意义。
[关键词]p53；结直肠肿瘤；免疫组化；蛋白[中图分类号]R735.3+7[文献标识码]B[文章编号]1674-4721（2012）07（b）-0118-02 Pathological significance of p53protein expression in rectal cancerLI Jinmiao ZHOU GuitaiPathology Department of Tongcheng People′s Hospital in Hubei Province,Tongcheng437400,China[Abstract]Objective To study the pathological significance of p53protein expression in rectal cancer.Methods Immuno-histochemical techniques were used to detect the expression of p53protein in33cases of colorectal papillary adenoma,32 cases of villous adenoma and15cases of non-tumor mucosa tissue.Results The ratios of positive expression of p53protein in colorectal papillary adenoma,villous adenoma and non-tumor mucosa were75.7%(25/33),59.4%(19/32)and13.3% (2/15),respectively.The intensity order of the expression of p53protein was colorectal papillary adenocarcinoma>villous adenomas>non-tumor mucosa(R from big to small).The lower limits of95%confidence interval of R values in both col-orectal papillary adenoma and villous adenoma were higher than the upper limit in non-tumor mucosa,and there were sig-nificant differences.Conclusion The detections of p53gene mutation and p53protein contribute to pathological diagnosis of early colorectal adenocarcinoma.[Key words]p53;Colorectal neoplasms;Immunohistochemistry;Protein2012年7月第19卷第20期·病理分析·表1结直肠绒毛状腺癌和绒毛状腺瘤中p53蛋白表达强度和表达率（n）2.2Ridit分析具体见表2。
表2p53表达强度的Ridit分析结果分析：由表中可见，p53蛋白表达强度结直肠绒毛状腺癌＞绒毛状腺瘤＞非肿瘤黏膜（R从大至小），其中结直肠绒毛状腺癌和绒毛状腺瘤R的95%可信限下界均高于非肿瘤的上界，差异有统计学意义。
3讨论p53基因是细胞凋亡的重要调控基因，分为野生型和突变型二型，野生型p53基因是一种抑癌基因，能诱导细胞终末分化，维持基因稳定，触发衰老和诱导细胞凋亡，抑制细胞增殖，因此是细胞生长的负性调控因子；当p53基因突变时，细胞周期失控，一些原癌基因激活（如RAS基因），刺激细胞增殖。
正常细胞内p53基因为野生型，其表达的蛋白在细胞中含量极少，且半衰期短（5～45min），因此一般免疫组化方法不易检出[2]。
但p53基因突变，其表达的p53蛋白构象改变，在细胞核内累积并且半衰期延长，稳定性增加，因此用免疫组织化学方法测得的p53蛋白基本上是突变型p53蛋白[3]。
本研究结果显示正常黏膜中p53表达阳性很少，仅为13.3%，与最近报道的结果相一致[4]。
绒毛状腺瘤p53表达阳性占59.4%，明显高于正常黏膜中p53的表达，提示p53基因可能发生了突变。
已发现p53基因突变具有阶段性，常出现在良性腺瘤向恶性腺癌转变时期，其遗传学改变发生在良性肿瘤恶变阶段。
因此，绒毛状腺瘤出现p53高阳性表达则提示存在腺瘤易于癌变危险。
本研究还发现结直肠绒毛状腺癌变后，其p53表达阳性率进一步提高至75.7%,与文献[5]报道结果一致。
已发现结直肠癌患者抑癌基因p53出现突变，该组织中常可检测到突变的p53蛋白，且结直肠功能减退与突变p53蛋白的异常堆积密切相关[6]。
从病理形态学看，结直肠绒毛状腺瘤与绒毛状腺癌是容易区分的，但重度不典型增生腺瘤与癌有时很难判断。
本研究的结果表明，p53蛋白表达异常与大肠癌的发生密切相关，检测腺瘤p53表达状况有助于预测其癌变倾向。
也就是说，p53蛋白一定程度上可作为预测癌变的一个辅助标志物，若某一腺瘤形态上出现了异型性，而且p53蛋白染色阳性，判断该腺瘤发生癌变可能性增大。
由于一旦p53基因发生突变，则肿瘤就有恶变倾向。
综上所述，从正常结直肠黏膜-结直肠腺瘤-结直肠腺癌变化中，p53的表达相应发生变化，推测其均参与结直肠肿瘤的发生和发展，其蛋白的检测对于早期诊断病理形态学上难以鉴别的大肠腺瘤和腺癌具有重要的辅助诊断作用。
[参考文献][1]Baker SJ，Preisinger AC，Jessup JM，et al.p53gene mutation occurcombination with17p allelic deletions as late event in colorectal tumorigenesis[J].Cancer Res，1990，50（23）：7717-7722.[2]Horiuchi H，Kawamata H，Omotehara F，et al.Negative immunohisto-chemical staining of p53protein does not always reflect wild-type p53 gene in cancer cells[J].J Gastroenterol，2004，39：801-803.[3]Porcelli B,Frosi B,Arezzini L,et al.Expression of p185and p53inbenign and malignant colorectal lesions[J].Histochem J，2001，33：51-57.[4]Sousa WA，Rodrigues LV，Silva RG Jr，et al.Immunohistochemicalevaluation of p53and Ki-67proteins in colorectal adenomas[J].Arq Gastroenterol，2012，49（1）：35-40.[5]赵光明，展瑞，邹国桢，等.Hpa、P53表达与大肠癌浸润转移的关系[J].山东医药，2010，50（10）：54.[6]Zou Yang，Sun Zhen-dong，Di Jian-zhong，et al.The correlation betweenthe expresion of P53protein with the clinical stage and prognosis of colorectal cancer[J].Surg Theory and practice，2003，8（2）：155.（收稿日期：2012-04-09本文编辑：林利利）绒毛状腺癌绒毛状腺瘤非肿瘤黏膜333215813131215274675.759.413.3项目例数p53蛋白表达强度-++++++百分率（%）绒毛状腺癌绒毛状腺瘤非肿瘤黏膜3332150.6286±0.04790.4775±0.04180.2650±0.03580.5347～0.72240.3955～0.55950.1949～0.3351项目例数（n）R±S R（即R95%可信限）。
