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地高辛 (Digoxin)使用说明书地高辛 (Digoxin) 使用说明书地高辛是一种常用的心脏疾病治疗药物，主要用于治疗心力衰竭和心律失常。
本说明书将详细介绍地高辛的用法、剂量、注意事项和可能的副作用，帮助患者正确使用地高辛，从而达到最佳疗效。
一、药物名称和成分药物名称：地高辛（Digoxin）成分：每片含地高辛0.25毫克。
二、适应症地高辛适用于下列疾病的治疗：1. 心力衰竭：用于改善心脏收缩力，增加心脏排血量。
2. 心房颤动：用于控制心脏节律，减少心房颤动的发作并减轻症状。
三、用法和剂量1. 使用方法：口服。
最好与饭后服用，以减少不适感。
2. 常用剂量：成人一般剂量为每日0.125-0.25毫克，根据患者具体情况，可在医生指导下微调剂量。
3. 用量调整：用地高辛治疗时，应根据患者的病情和耐受性进行用量调整。
请遵循医生的指导，并定期检查药物浓度和心脏功能。
四、注意事项1. 专科医生指导：地高辛使用需要在专科医生的监护下进行，不得擅自调整剂量或停药。
2. 定期检查：使用地高辛期间，应定期检查心脏功能、药物浓度等指标，以确保疗效和安全性。
3. 过敏反应：如果出现过敏反应，如皮疹、荨麻疹、呼吸困难等症状，请立即就医。
4. 注意相互作用：地高辛有一些药物相互作用可能导致心脏毒性增加，如抗心律失常药物、某些抗生素等，请告知医生所用的所有药物。
5. 年老体弱者：对于年老体弱、肝肾功能减退者，应特别谨慎使用，避免出现中毒症状。
五、可能的副作用地高辛的使用可能会出现以下副作用：1. 胃肠道反应：如恶心、呕吐、腹泻等，特别是在剂量过高的情况下。
2. 心脏毒性：如心律失常、心搏骤停等，请密切关注心脏状况，若出现异常请立即就医。
3. 颜面潮红：部分患者使用地高辛后可能出现颜面潮红的不适感。
4. 视觉障碍：可能出现视觉模糊、视物有影等，若出现此类问题，请及时就医。
六、妊娠和哺乳期使用妊娠和哺乳期妇女慎用地高辛，应在医生的指导下使用。
DIG Random Labeling and Detection KitⅠ（POD）(for color detection withDAB)DNA探针标记和检测试剂盒Ⅰ产品编号：MK1008保存期：一年-20℃冰冻保存。
用途：用于DNA探针的随机引物标记及各种膜上杂交和原位杂交。
工作量：可用于标记0.1—3μg的探针6次及1000张切片的原位杂交或12次10×10cm膜上杂交检测。
原理所谓DNA探针，实质上是一段已知的基因片段，应用这一基因片段即可与待测样品杂交。
如果靶基因和探针的核苷酸序列相同，就可按碱基配对原则进行核酸分子杂交，从而达到检查样品基因的目的。
在随机引物法标记反应液中，有随机合成的六聚体核昔酸(hexanucleotide)作为引物，dATP、dCTP、dGTP、dTTP和D1G-11-dUTP作为合成底物，以单链DNA作为模板，在Klenow 酶的作用下，合成掺入地高辛的DNA链。
以地高辛标记的探针与靶基因DNA链杂交后，再通过免疫反应来进行检测。
一般通过酶标抗地高辛抗体来检测，就可以肯定杂交反应的存在。
免疫检测采用过氧化物酶系统，DAB显色。
敏感性很高。
可用于膜上杂交和原位杂交。
试剂盒内容：1. DIG Random Labeling Mix(高效)，25μl2.Biotin—MouseAnti—Digoxin200μl3. SABC—POD200μl4. DAB Stock Solution5ml5. Blocking Reagent，5g特点：（1）标记属高效标记反应。
以1μg DNA探针为例，1小时反应即可产生0.8μg标记探针，20小时可产生2μg左右的标记探针。
（2）试剂将标记反应所需的引物、核苷酸、DIG-11dUTP和Klenow酶等混合在一起。
一次标记只需吸取一次标记液，使用至为简便。
（3）标记反应适于下述对象：a.DNA从10ng—3μg。
b.不等的DNA长度100bp—10kb。
深圳依诺金生物科技有限公司 - 1 - 产品说明书地高辛杂交检测试剂盒 I目录号: DIGD-110装量: 10次显色检测反应保存期: 12个月.存储条件:NBT/BCIP显色底物–20℃抗DIG-AP酶结合物4℃其它组分室温试剂盒组成:阻断液母液(10x) 50 ml抗DIG-AP 酶结合物20 µl NBT/BCIP显色底物 2 ml检测缓冲液(5×) 50 ml顺丁烯二酸缓冲液母液(2x) 500 ml Tween-20 3 ml 10% SDS 20 ml 20×SSC 100 ml使用前先用DEPC/无RNase水将5×检测缓冲液及2×顺丁烯二酸缓冲液母液稀释成1×工作液.一.预杂交:1. 将膜从包装袋中取出，用干净的剪刀将膜溴酚蓝以下的部分剪去。
放入杂交袋中，在封口机上将杂交袋三面封口。
2. 加入65℃预热的Hyb高效杂交液5mL，排尽气泡，封口。
放65℃水浴振荡杂交1～2小时。
3. 如果使用杂交管杂交，则根据杂交管体积，加入适量的杂交液(5-10ml)。
如果膜的大小适中，也可以用无菌的50ml离心管(BD公司)进行，5ml杂交液已足够。
将杂交仪设定为65℃，8-15转/分钟预杂交1～2小时。
二.杂交:1. 探针的处理：将标记好的探针放100℃煮10分钟，立即放冰浴冷却10分钟。
2. 将杂交袋从水浴中取出，剪去一角并尽可能的排尽袋中的预杂交液，取5mLHyb高效杂交液，加入变性的探针(1-3µl/膜，5－20ng/mL Hyb杂交液)，混匀。
加入到杂交袋中，小心排尽气泡，封口，65℃水浴振荡杂交过夜。
3. 如果使用杂交管杂交，则倒出预杂交液，另取适量的Hyb高效杂交液(5-10ml)，加入变性过的探针(1-3µl/膜，或5－20ng/ml Hyb高效杂交液)，混匀。
加入到杂交管中，杂交仪设定为65℃，8-15转/分钟，杂交过夜。
地高辛染色液说明书一类地高辛染色液是一种常用的染色试剂，常用于组织学研究中的免疫组化染色实验。
下面我将从多个角度全面介绍地高辛染色液的说明书内容。
1. 产品简介：地高辛染色液是一种含有地高辛标记的二抗试剂，用于检测目标蛋白在组织切片中的表达情况。
它可以与免疫组织切片中的靶蛋白发生特异性结合，并通过染色反应显示出目标蛋白的位置和分布。
2. 试剂成分：地高辛染色液主要由以下成分组成：地高辛标记的二抗，这是地高辛染色液的核心成分，通过特异性结合目标蛋白进行染色。
缓冲液，提供适宜的酸碱度和离子强度，维持染色反应的稳定性。
阻断剂，用于阻断非特异性结合，减少背景信号。
保存剂，保护试剂的稳定性和活性。
3. 使用方法：地高辛染色液的使用方法如下：准备组织切片，将待染色的组织切片固定在载玻片上，并进行适当的抗原修复和膜通透处理。
涂抹试剂，将地高辛染色液均匀涂抹在组织切片上，确保完全覆盖。
孵育反应，根据实验要求，在适当的温度和时间条件下孵育反应，使地高辛与目标蛋白发生特异性结合。
洗涤步骤，使用缓冲液或洗涤液进行适当的洗涤步骤，去除非特异性结合的试剂。
显色和显微观察，根据实验需要，使用适当的显色试剂进行染色反应，并在显微镜下观察和记录结果。
4. 注意事项：在使用地高辛染色液时，需要注意以下事项：试剂存储，请按照说明书中的建议存储试剂，避免温度过高或过低，避免阳光直射。
使用前检查，使用前请检查试剂的外观和标记，确保没有异常。
防止污染，使用过程中，请使用干净的工具和试剂盒，避免交叉污染。
实验条件优化，根据不同的样本和实验要求，可能需要优化反应条件，包括孵育温度、时间和洗涤步骤等。
总结：地高辛染色液是一种常用的免疫组织化学染色试剂，通过特异性结合目标蛋白进行染色反应。
在使用时，需要按照说明书中的方法和注意事项进行操作，以获得准确可靠的实验结果。
希望以上内容能够对你有所帮助。
所用试剂盒为Roche公司的DIG High Prime DNA Labeling and Detection Starter Kit I，具体操作过程如下：①向一个反应管中加入1μg 模板DNA（线性或超螺旋）和高压灭菌的双蒸水，终体积达16μL；②沸水浴10min以变性DNA，然后迅速插入冰水混合物中；注意：完全变性对于标记的有效性是十分重要的。
③充分混合DIG-High Prime(1号管)，并取4μL加入到变性DNA中，混合并简单离心；④37℃孵育，过夜；⑤65℃加热10min，终止反应。
2）探针的纯化与回收用PCR产物快速回收试剂盒（上海生工）回收标记好的探针，同时除去随机引物和未掺入的DIG-dUTP。
具体操作步骤如下所示：①在PCR反应液中加入5倍体积的Buffer B3，充分混匀；②8,000×g离心30秒。
倒掉收集管中液体；③加入500μl Wash Solution，9,000 ×g 离心30秒，倒掉收集管中液体；④重复步骤4一次；⑤空柱于9,000 ×g离心1分钟；⑥将吸附柱放入一个干净的 1.5 ml离心管中，在吸附膜中央加入15-40μl Elution Buffe r，室温静置1分钟后，离心1分钟。
保存管中DNA溶液。
⑦电泳检测探针的完整性，紫外分光光度法测定探针浓度，稀释到1 ng/μL 。
注：标记好的探针最好立即使用，最长使用时间一般不宜超过3天。
标记好的探针可以保存在-20℃。
3）检测探针标记的效率直接标记法：将地高辛标记DNA的一系列稀释梯度点到一小块带正电荷的尼龙膜上。
尼龙膜部分区域已经点好一系列稀释梯度的地高辛标记的对照DNA（2号管）作为标准。
具体操作步骤：（注意在全部的步骤中，用足够的缓冲液体积完全覆盖膜）①分别从你标记的探针和标记对照DNA的2-9号管中取出1 μL点在尼龙膜上；②通过120℃烘烤30min的方法将核酸固定在膜上；③将膜转移到一个装有20mL 马来酸缓冲液的塑料容器中，在15-25℃中振荡孵育2min；④在10mL 封阻液中孵育30min；⑤在10mL 抗体溶液中孵育30min；⑥用10mL洗涤缓冲液洗涤两次，每次15min；⑦在10mL检测缓冲液中平衡2-5min；⑧将膜上带有DNA的一面朝上，放在一个折叠夹上（或者杂交袋），向膜上加入2mL的新鲜配制的的底物显色液，均匀的铺平底物，且膜上不能有气泡。
DIG Northern Starter KitDIG Northern标记及杂交检测试剂盒说明书版本：Version 8.0 （2010年8月）利用体外转录法进行地高辛标记的RNA探针合成反应，采用酶联免疫方法及即用型化学发光底物CDP-Star进行杂交分子的检测。
利用本试剂盒可进行10次标记反应，和10次杂交检测反应（10×10cm2杂交膜）。
产品目录号：12 039 672 910试剂盒于-15 ~ -25℃保存1. 概况1.1 说明书内容1. 概况 (2)1.1说明书内容 (2)1.2试剂盒组成 (3)2. 介绍 (5)2.1 产品概述 (5)3. 实验步骤和需要的材料 (7)3.1 实验开始前准备 (7)3.2 实验流程 (7)3.3 DNA模板制备 (7)3.4 DIG-RNA标记 (9)3.5定量标记反应效率 (10)3.6 适用于DIG Northern bolts的凝胶系统 (12)3.7 RNA转膜和固定 (13)3.8 杂交 (14)3.9 免疫检测 (15)3.10探针洗脱和重探 (17)4 附录 (18)4.1 疑难问题解决 (18)4.2参考文献 (19)1.2 试剂盒组成杂交反应所需的仪器和其他反应试剂请根据您的实验操作流程准备杂交反应所需的仪器和其他试剂，参见下表，请注意所有试剂应使用DMPC或DEPC处理的水配置：带*的试剂为罗氏应用科学部提供的试剂。
2.1 产品概述反应原理DIG Northern标记及杂交检测试剂盒采用体外转录法，以地高辛（DIG，一种甾类半抗原）标记的UTP为底物，进行RNA探针的标记合成，所获得的单链RNA探针用于后续的杂交反应，带有地高辛分子的杂交子通过酶联免疫反应和CDP-Star底物进行化学发光检测。
应用尼龙膜上的Northern blots杂交反应样本•线性化质粒，质粒上含相应的RNA聚合酶启动子序列（SP6，T3，T7）注意：质粒上待转录的目标片段长度应在200-1000 bp。
地高辛（Digoxin）使用说明书地高辛（Digoxin）使用说明书一、药品名称地高辛（Digoxin）二、适应症地高辛主要用于心力衰竭和心律失常的治疗。
三、使用方法和剂量1. 成人用法：（1）心力衰竭：初始剂量：每日0.125-0.25毫克口服，分2-3次服用。
维持剂量：每日剂量根据患者的临床情况逐渐调整，但一般不超过0.5毫克。
（2）心律失常：房性心律失常：根据患者临床情况，起始剂量为0.25-0.5毫克每日1次。
随后根据患者反应和心电图监测结果逐渐调整剂量。
室性心律失常：根据患者具体情况，开始推荐剂量为1.0-1.5毫克每日1次。
剂量可根据患者反应和心电图监测结果逐渐调整。
2. 儿童用法：儿童剂量需根据患者的具体情况，结合体重和心功能状况进行调整。
首剂维持剂量通常为0.01-0.03毫克每千克，分剂2-3次口服。
四、禁忌症以下情况患者禁用地高辛：1. 对地高辛或其他洋地黄类药物过敏；2. 严重房室传导阻滞（第二度或二度以上）；3. 窦房结功能低下，除非也内步或外步植入物并同时应用心脏起搏器；4. 快速性心律失常，如心房颤动或心室颤动；5. 严重的左心室功能受损；6. 妊娠期间禁用。
五、不良反应地高辛可能引起以下不良反应：1. 心律不齐：如房性和室性心律失常；2. 消化系统反应：如恶心、呕吐、腹泻和胃肠不适；3. 神经系统反应：如头痛、视觉异常和混乱；4. 毒性反应：如地高辛中毒，表现为恶心、呕吐、心律失常、心绞痛等。
地高辛中毒危险性增加主要是因为剂量过高或过敏，或者临床情况发生改变。
六、注意事项1. 在使用地高辛前，应对患者进行全面评估，包括心功能、肾功能、电解质水平等。
2. 患者需要定期监测心电图、心率和血药浓度，以确保地高辛在治疗范围内。
3. 地高辛具有窄治疗范围，必须严格控制剂量，注意患者年龄、体重、肾功能等因素的影响。
4. 患者必须告知医生正在使用或打算使用的其他药物，以避免与地高辛产生不良相互作用。
仅仅研究于生命科学，不适合在诊断过程使用只能在体外使用地高辛DNA标记和检测试剂盒1和NBT/BCIP一起用于颜色检测通过酶联免疫法采用地高辛-dUTP进行随机引物DNA标记，碱性标记和检测货号：11 745 832 910此试剂盒储存条件-15o C—-25o C此试剂盒可对10ng-3ugDNA进行12次标记反应可检测100cm2面积的杂交膜24张指导手册2009.11版1前言1.1内容表1前言 (2)1.1内容表 (2)1.2试剂盒内容 (3)2简介 (5)2.1产品概述 (5)3步骤和所需材料 (8)3.1开始之前 (8)3.2地高辛DNA标记 (9)3.3 标记效率的测定 (11)3.4 DNA 的转移和固定 (14)3.5杂交 (16)3.6免疫检测 (18)3.7 DNA印记的洗脱和再杂交 (20)4结果 (21)4.1典型的结果 (21)5附录 (23)5.1故障排除 (23)5.2引用 (24)5.3订购信息 (25)1.2 试剂盒内容附加仪器与所需试剂除了上表中列出的试剂外，你必须准备一些溶液。
在下表中，你可以找到不同操作程序需要准备的设备概要。
*标记的产品可以从Roche Applied Science 获得2 介绍2.1 产品概况实验原则此试剂盒采用地高辛（DIG），一种甾类半抗原，去标记DNA探针从而通过酶免疫分析应用地高辛标记DNA探针可以用于：所有类型的滤膜杂交总基因组DNA中单拷贝基因的检测，甚至对于高度复杂的生物也可以进行检测，如人，大麦和小麦。
样品材料至少100bp的DNA片段线性的质粒，cos质粒或者λDNA超螺旋的DNA实验时间此表格列出了每一步实验所需的反应时间检测数量一个试剂盒足够用于：不超过3ug的模板DNA的12个标准的标记反应和100cm2有24个斑点的检测质量控制根据操作步骤中的描述，对未标记的对照品DNA（PBR328）进行标记，0.1pg同源DNA 在点杂交中通过16h的显色来检测（1pg同源DNA可以通过1小时的显色进行检测）。
试剂盒的储存和稳定性未开封的试剂盒在保质期内可以稳定的存放在-15o C到-25o C（保质期印在标签上）。
在干冰中运输一旦开封，请根据下表达选择适宜的储存条件。
灵敏度和特异性采用southern 杂交从1ug消化胎盘DNA中检测到单拷贝人基因注意：灵敏度同时依据在杂交中标记的DNA浓度和颜色反应的时间优点此表描述了这个试剂盒的优点和特征3 实验步骤和所需材料3.1 在你开始前主要的操作要求此表中描述了地高辛标记和检测中主要的提示流程图3.2 地高辛标记DNA介绍随机引物标记的DNA带有地高辛--11--dUTP，这一标记采用的是地高辛高效引物试剂，这是一种含有随机六碳糖，5乘浓度标记的混合物，其中，dNTP混合物包括碱性标记的地高辛--11--dUTP，标记级的Klenow酶和适合的反应缓冲液。
附加设备和所需试剂水浴冰水混合物模板DNA标记从琼脂糖凝胶上分离的DNA如果你想要完成基因组的southern 杂交，你应该利用琼脂糖凝胶电泳将插入载体的模板DNA从载体上分离出来。
从凝胶中分离DNA片段，为获得更好的结果，可以用高效的PCR产物纯化试剂盒或者用琼脂糖凝胶DNA提取试剂盒来从凝胶中分离DNA。
步骤此步骤用于标记10ng-3μg DNA 。
可以通过扩大所有成分和体积标记更大量的DNA（最高达10μg）。
标记反应的产量表1：此表向您展示了在适宜条件下地高辛高效引物标记的产量。
在标准反应中每个实验采用1μg DNA 作为模板。
1小时内，大约有15%的核苷酸参与到了0.8μg新合成的地高辛标记DNA中。
20小时后消耗了大约38%约2μg的核苷酸。
使用地高辛高效引物溶液，增加不同模板DNA的量进行反应，并检测反应1小时和反应20小时的差异。
地高辛标记DNA的产量由放射线示踪器进行测定，并通过斑点杂交进行证实（10个独立标记实验的平均值）。
3.4 标记效率的确定介绍地高辛标记DNA产量的确定对于获得最佳的，具有可重现性的杂交结果十分重要。
在杂交混合物中探针浓度过高容易产生背景，而太低浓度则容易导致信号弱。
实验原则检测标记探针质量的好方法是直接检测法。
所需附加溶液的制备请找出下表中的成分和所需制备的试剂。
下表中的缓冲液也可以在地高辛洗涤和封阻缓冲液，DNA酶和RNA酶系列产品中获得。
请注意：这些溶液也用于3.6中的检测步骤，可大批量准备试剂盒工作溶液的制备下表中列出试剂盒工作溶液的制备方法：稀释系列根据合成核苷酸的预期产量开始下面的的系列稀释，标记的探针和地高辛标记的对照DNA（Vial 2）应该稀释到1ng/μL。
利用第3.2章中图表1可以最好的估计出在你的探针中地高辛标记DNA的预期产量。
产量取决于起始时的模板量和孵育时间。
注意：表1中给出的产量是采用高纯度的DNA模板在最佳条件下生产出的。
操作步骤下面的步骤描述的是直接检测。
注意：在全部的步骤中，用足够的缓冲液体积完全覆盖膜。
结果分析比较对照与你的标记反应产生的点的强度差异，并计算出地高辛标记DNA的量。
如果你的探针稀释后量达0.1pg的点与对照DNA的点均可见，那么说明标记的探针达到了预期的标记效率，能够满足杂交所需的探针浓度。
3.4 DNA的转移和固定转移方法和膜凝胶电泳的标准操作方法，胶的变性和中和均参照参考文献中Sambrook等的文章。
胶中不加入EB会更好，因为EB可能引起背景不均匀的问题。
所有普通类型的DNA转移方法都适用于后续的地高辛杂交实验（4,5）；在实验中，在20×SSC中采用毛细管转移的方法将DNA转移到带有正电荷的尼龙膜上可以获得最好的结果。
注意：碱性转移（如在0.4M NaOH中）不适用于地高辛分子量的标记的转移。
固定操作将DNA固定到膜上可以通过下面的任何一种操作：膜的储存请根据下表选择膜的储存方法。
3.5 杂交需要的附加设备冰水浴震荡水浴或杂交炉耐高温的塑料或者玻璃盒，培养皿，滚筒瓶或者可密封的塑料袋注意：不要用敞口的容器盛放地高辛杂交缓冲液杂交工作溶液的制备分两次小心的将64ml无菌双蒸水加入地高辛杂交颗粒（7号瓶）中，然后，立即在37o C 条件下搅拌5分钟进行溶解。
杂交温度适宜的杂交温度是根据GC含量和探针与靶片段的相似百分数计算获得的，具体的公式如下：Tm =49.82+0.41(%G+C)-(600/I) {I=能够杂交上的片段的长度，以碱基对进行计算}T opt.= Tm -（20～25℃）这一给出数字的方程式是根据杂交溶液中含有50%甲酰胺的标准方程式计算得到的。
用于地高辛杂交液进行杂交的实际杂交温度T opt.要比计算出的Tm低20-25℃。
T opt.可以作为一个严谨的杂交温度，允许探针和靶序列之间有18%的错配。
当你的探针与靶序列的相似度低于80%时，你应该相应的降低T opt（大约每1%的错配要降低1.4℃），同时相应的调整严谨洗涤步骤（即提高SSC浓度和降低洗涤温度）。
操作步骤请参照下表进行实验。
杂交液的储存含有地高辛标记探针的地高辛杂交液可以储存在-15到-25℃，可以反复使用几次，在每次使用前需要68℃新鲜变性10分钟。
注意：不可以将杂交液煮沸。
严谨洗涤对于大部分DNA:DNA应用,用0.5×SSC进行严谨洗涤已经足够。
针对每个探针来说，正确的洗涤条件应该依据经验来确定。
对于人基因组DNA，采用的条件是0.5×SSC，65℃。
探针长度大于150bp且GC含量高时，应在68℃下进行洗涤。
对于长度为100bp或更短的探针，洗涤温度应该降低。
此表描述了怎样完成后面的杂交洗涤。
3.6 免疫检测需要附加的试剂请找出下表中的成分和所需制备的试剂。
下表中的缓冲液也可以在地高辛洗涤和封阻缓冲液，DNA酶和RNA酶系列产品中获得。
试剂盒工作溶液的制备下表中列出试剂盒工作溶液的制备方法：操作步骤此表描述了完成一张100cm2膜的免疫检测方法。
注意：所有的孵育均是在15-25℃下，振荡完成的。
如果膜还需要再次与探针杂交，那么任何时候都不要让膜干。
3.7 DNA印记的洗脱和再次探针杂交主要信息印记中的碱性标记形式的DIG-11-dUTP 能够更容易更有效的被洗脱，以用于再一次的杂交实验。
所需附加的仪器和试剂DMF2×SSC0.2N NaOH, 0.1% SDS操作步骤此操作描述的是膜的洗脱。
注意：如果计划印记需要洗脱和再次杂交，那么膜在任何时候都不能干。
可选择的洗脱方法，用于filter杂交的地高辛应用操作手册中提到的（可以通互联网获得）洗脱后的膜需要的储存条件一旦膜被洗脱，可以将膜放在马来酸缓冲液中或者2×SSC中准备再用。
4 结果5 附录21。
