14.家兔急性肾功能不全
- 格式:ppt
- 大小:684.50 KB
- 文档页数:14
氯化汞与家兔急性肾功能不全【摘要】目的学习用氯化汞复制急性肾功能不全的动物模型;观察急性肾功能不全时蛋白尿、血肌酐、肾酚红排泄率的变化,并根据实验结果分析和讨论致病因素及导致急性肾功能不全的可能发病机制。
方法本次实验共分为两大组,肾衰组和对照组。
用分光光度计测量吸光度的方法算出血肌酐、尿肌酐和酚红排出量,然后再通过计算公式计算出肌酐清除率和酚红排泄率。
结果肾衰模型组家兔肾脏体积变大,颜色较浅,外表出现颗粒,体重比正常组重得多,血清肌酐41.7mg%,尿肌酐12.25mg%;对照组血清肌酐7.97mg%,尿肌酐2.25mg%,酚红排泄率50%。
结论急性肾功能不全会引肾小管上皮细胞受损,从而导致起肾小管的重吸收功能障碍和分泌功能障碍。
【实验原理】肾脏是一个多功能的器官,具有排泄、调节、内分泌等功能。
引起急性肾功能不全主要原因有肾前性、肾性、肾后性三种。
氯化汞是重金属盐,家兔皮下或肌肉注射10g/L氯化汞,可引起以肾小管坏死为主的急性肾功能不全。
急性肾功能不全临床分为少尿型和非少尿型两种,前者多见。
少尿型一般出现少尿甚至无尿,等渗尿,尿钠浓度高,尿常规可发现血尿,镜检有多种细胞并有管型〔颗粒管型和细胞管型等〕。
血液尿素氮〔BUN〕和血浆肌酐进行性升高,肌酐从尿中排出障碍,尿肌酐/血肌酐<20,与功能性肾衰时>40有明显的区别。
急性肾功能不全评价的病理生理学指标有内生肌酐清除率、尿肌酐/血肌酐比值、肾脏酚红排泄率、钠排泄分数等,本实验主要测定酚红排泄率、内生肌酐清除率、尿肌酐/血肌酐比值及肾形态学的改变。
【关键词】急性肾功能不全酚红排泄率血清肌酐尿肌酐【材料和方法】1、材料:家兔;分光光度计,离心机,恒温水浴箱;氯化汞,氨基甲酸乙酯,酚红,NaOH,醋酸,碱性苦味酸,肌酐标准应用液,生理盐水,葡萄糖。
2、方法2.1本组作为对照组兔则皮下或肌肉注射等量的生理盐水。
麻醉固定将氨基甲酸乙酯以5ml/kg 的体重剂量由兔耳缘静脉内缓慢注入。
家兔急性肾功能不全及其肾功能评价指标检测【实验目的】1、用氯化汞中毒方法复制家兔急性肾功能不全模型。
2、观察急性肾功能不全时肾功能评价指标变化。
肾功能评价指标:(1)测定血肌酐、尿肌酐,计算内生肌酐清除率(2)测定酚红排泄率(3)观察肾脏形态学改变。
【实验材料】器械家兔手术台、常用手术器械一套、止血钳、眼科剪、支架、照明灯、纱布、丝线、1ml、10ml、50ml注射器药品生理盐水、20% 氨基甲酸乙酯、0.6%酚红溶液、20%葡萄糖溶液对象家兔分组:1-4组——模型组(头部黄色标志 5-8组——对照组【实验方法】一、复制急性肾功能不全模型(已完成):实验前24小时,取家兔两组,称重。
模型组——皮下注射1%氯化汞溶液 0.8-1ml/Kg体重;对照组——皮下注射等计量生理盐水二、急性肾功能不全指标检测1、家兔称重、麻醉和固定:取家兔一只,称重:2.16kg;20%氨基甲酸乙酯:5ml/kg体重,耳缘静脉缓慢注射,共注射10.8ml至呼吸深而慢、反射迟钝(角膜反射、夹肢反射)为止。
背位固定。
2、心脏采血—测血肌酐(颈动脉)左侧第3-4肋间,靠近胸骨,心跳最明显处垂直进针穿刺,取血3 ml,推入干燥试管,静置,——备用测血肌酐。
3、膀胱插管术—测尿肌酐、收集尿液1)如何进行膀胱插管,请按实际操作详细描述。
2)先用注射器取尿液2 ml于试管中,——备用测尿肌酐。
3)然后在输尿管下方穿线结扎尿道,再行膀胱切口,插管固定,排空膀胱。
4)准备小烧杯,收集尿液。
4、酚红排泄率测定1)0.6%酚红溶液1 ml/Kg体重,耳缘静脉头皮针注射,总共注射2.16ml。
计时—开始收集尿液。
2)然后20%葡萄糖溶液30 ml/Kg体重,耳缘静脉缓慢推注。
3)从注射酚红溶液起收集15分钟(对照组)、30分钟(模型组)尿液。
5、生化检测——血肌酐、尿肌酐、酚红排泄率1)测酚红排泄率收集注射酚红后的全部尿液-→250 ml量筒内-→然后加入10% NaOH 5 ml-→再加自来水至250 ml混匀-→取适量混合液-→小试管中与标准比色管进行比较即为15分钟、30分钟酚红排泄率。
3 急性中毒性肾功能不全3急性中毒性肾功能不全三、急性中毒性肾功能不全【实验目的】1.复制急性中毒性肾功能不全的动物模型。
2.观测急性肾功能不SIDI动物血气、酸碱、血尿素氮、血清钾及尿的变化,分析其出现机制。
【实验原理】使用肾毒物重金属hgcl2溶液导致家兔急性肾小管发炎,激活急性肾功能不全系列的动物模型,通过观察动物的血气、酸碱、血尿素氮、血清钾及尿的变化,自学急性肾衰时内环境的变化。
【实验动物】家兔,体重1.5~2.5kg。
【实验药品与器材】1%hgcl2溶液,3%戊巴比妥钠溶液或20%氨基甲酸乙酯溶液,1%普鲁卡因溶液,生理盐水,1%肝素生理盐水溶液;兔台,手术器械,1ml和5ml注射器,试管,滴管,圆柱形,液体,试管夹,酒精灯,试管架,颈动脉插管,血气分析仪,生化分析仪,离心机,光电比色计,水浴锅。
【观察指标】全血:血气分析仪测量ph值、paco2、[hco3]、[k]、[na]和[cl];血清:生化分析仪测量bun;尿:尿量、尿蛋白定性和镜检;肾:大体、剖面。
-++-【实验方法与步骤】1.取家兔两只,一只为正常对照,一只为中毒实验兔。
于实验前一天称重后,实验兔皮下或肌肉注射1%hgcl2(按1.5~1.7ml/kg,一次注射),造成急性中毒性肾功能不全模型,对照兔则在相同部位注射同量的生理盐水,作为对照。
将两只兔笼均置于大漏斗上,收集尿液,测量24h尿量。
2.实验已经开始,家兔称量后,20%氨基甲酸乙酯溶液(0.5~1g/kg体重)或3%戊巴比妥钠(30mg/kg体重)耳缘静脉转化成麻醉后,站立紧固于兔台。
下腹部剪毛,在耻骨联手上1.5cm处作长约4cm的正中切口,分离皮下组织,沿腹白线切开腹膜,暴露膀胱,穿刺取出全部尿液,供尿蛋白定性和尿液镜检。
3.颈部正中切口,拆分一侧颈总动脉,颈动脉插管内转化成肝素生理盐水溶液,展开颈动脉插管。
4.抽取0.5ml动脉血作血气分析,取3ml动脉血(滴入肝素数滴后)离心(1500转/分,5~10分钟),取血清供尿素氮测定用。